水稻细胞分裂素氧化/脱氢酶基因OsCKX4的编码序列及其应用的制作方法

文档序号:14357040阅读:706来源:国知局

本发明属于基因工程技术领域,具体涉及在水稻中表达的细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4的编码序列及其应用。具体包括:细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4基因的核苷酸编码序列的克隆,对水稻此基因内源的不同器官、组织的空间表达模式,干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后的表达模式变化进行分析鉴定,以及osckx4tilling突变体的检测以及根长和产量分析。



背景技术:

细胞分裂素(cytokinin,ck)是一类含有腺嘌呤环结构且在n6位置上的h被其他基团取代的植物激素。它可分为两大类:天然的细胞分裂素和人工合成的细胞分裂素。其中,天然的细胞分裂素包括游离态的细胞分裂素(如玉米素、玉米素核苷、二氢玉米素、异戊烯基腺嘌呤等)(kakimoto,2003)和结合态的细胞分裂素(异戊烯基腺苷、甲硫基异戊烯基腺苷、甲硫基玉米素等)(lethametal.,1983)。人工合成的细胞分裂素有激动素、6-苄基腺嘌呤和四氢吡喃苄基腺嘌呤等。有的化学物质的结构虽然不具有腺嘌呤结构,但仍有细胞分裂素的生理作用,如二苯脲(lethamandzhang,1989;lichtenthaler1999)。细胞分裂素主要存在于细胞分裂旺盛的植幼嫩组织中,如根尖茎尖、幼苗、果实及未成熟的种子等。在植物的生长发育过程中,有着十分重要的调节作用。它可促进愈伤组织的细胞增殖和芽的形成等;还可延缓叶片的衰老,促进侧芽的生长,抑制根部细胞延伸,还可以调节其代谢基因以及其它功能基因的表达。

在植物体内的细胞分裂素需要维持在一定的动态平衡,才能保证植株正常的生长发育。细胞分裂素的降解是由细胞分裂素氧化/脱氢酶(cytokininoxidase/dehydrogenase,ckx)催化的。首个ckx基因是在玉米中被克隆的,发现它们与玉米粒早期发育的形成过程有关(massonneauetal.,2004)。拟南芥中有7个ckx基因,35s:atckx1转基因拟南芥株系中的根的分生区活性增强(werneretal.,2003)。在水稻中有11个ckx基因,其中已有功能报道的ckx基因是osckx2osckx4osckx2(gn1a)表达下降时,会导致细胞分裂素累积在花序分生组织中,增加繁殖器官的数目,穗粒数增加,最终可以提高水稻的产量,因此osckx2也称每穗实粒数基因(ashikarietal.,2005)。而当osckx4过表达时,会导致水稻冠根的数目增多,根的长度变长;且通过介导生长素和细胞分裂素的信号通路,调节水稻根的发育(gaoetal.,2014)。

细胞分裂素与生长素在愈伤组织中,与植株的根和芽的分裂和分化之间存在着一定的拮抗作用。它在植株根系的胚后发育过程中扮演着重要的作用,包括叶片衰老、顶端优势、叶绿体的发育、花青素的产生和细胞分化等。有研究发现,细胞分裂素可以促进植物根的近端分生组织的细胞分化,会导致细胞分生组织和根生长减少,细胞分裂素可还以负调控水稻的冠根和侧根的起始,但可促进侧根伸长(ranidebietal.,2005)。osmt2b编码一个金属硫蛋白的基因,它的表达会受到外源细胞分裂素的抑制,参与水稻的不定根发育(yuanetal.,2008)。不定根生长发育关键调控因子oswox11能与erf3互作,通过细胞分裂素信号通路能直接抑制在冠根原基表达的a型细胞分裂素响应因子osrr2的表达,从而促进冠根的发育(zhaoetal.,2015)。在拟南芥中,a型细胞分裂素响应因子arr7arr15的突变,会导致与根发育相关的基因表达异常,如plt1wox5(müllerandsheen,2008)。

根系是一株植物的全部根的总称,它在植物生长发育过程中起着极其重要的作用。根系有吸收水分及养分、固定和支撑植株等功能,是植物激素、有机酸和氨基酸等物质合成与转化的重要场所。水稻属于禾本科单子叶作物,其根系由胚根(种子根)、冠根(不定根)和侧根组成(coudertetal.,2010)。胚根是在发芽时期形成的第一条根,它是由根顶端分生组织分化形成的。冠根是由茎节处的中柱鞘细胞依次经过垂周分裂和平周分裂而成,从下位节向上位节发根。侧根是冠根分生出的次生根,可以分为大侧根和小侧根。通过对水稻根的径向切面观察,发现包括中柱(韧皮部、木质部和中柱鞘)、内皮层和皮质(通气组织、厚壁组织、外皮层和表皮)组成(rebouillatetal.,2009)。它的径向结构反映了水稻根系能在有氧和缺氧条件下的生存的能力。



技术实现要素:

本发明的目的在于提出一种新的水稻基因,还提供该水稻基因的蛋白编码序列,并提供该水稻基因的应用。

本发明提供的水稻中表达的细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4基因编码序列及其应用,具体包括:细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4基因的核苷酸编码序列的克隆,序列的同源比对,对水稻此基因内源的不同器官、组织的空间表达模式,干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后的表达模式变化进行分析鉴定,以及osckx4tilling突变体的检测以及根长和产量分析。

本发明通过克隆水稻细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4,对其时空表达模式及胁迫响应方式进行确定,结果显示osckx4基因在各个器官中组成型表达。其中在茎中的表达最高,而在根中的表达最低,叶片居中。在不同部位叶片中,在次新叶中的表达最高,而在老叶中的表达最低。盐胁迫下,osckx4的表达显著升高,而干旱处理后,osckx4的表达显著降低;在kt、6-ba、iaa、2,4-d和naa处理后,osckx4的表达都出现了而不同程度的升高。cks4tilling突变体在幼苗期与野生型相比根长明显变短,而在成熟期,osckx4tilling突变体的株高显著变矮,千粒重与结实率与野生型相比都显著降低。

本发明首先提供一种从水稻中克隆出的新的细胞分裂素氧化/脱氢酶基因,记为osckx4,为具有特定序列的dna分子,其中开放阅读框为1590bp,其核苷酸序列为seqidno.1所示。

本发明还提供编码这种水稻osckx4基因的蛋白分子,该序列编码529个氨基酸残基,分子量58.43kda,等电点为7.8,氨基酸序列为seqidno.2。

本发明还提供用于调取获得水稻样品中基因osckx4的一对核苷酸引物。该引物根据基因osckx4设计,使用此对引物对水稻样品cdna进行pcr扩增可获得长1590bp的基因片段。具体的引物序列为:

forwardprimer:5'atgcggggagccatgaagccgtcga3'(seqidno.3)

reverseprimer:5'tcacaaggacataggtagtgatgcc3'(seqidno.4)。

本发明还提供检测水稻基因osckx4在不同器官表达模式的方法,即利用所述基因osckx4的核苷酸序列作为设计探针引物的保守区段,调取其序列的引物序列:

forwardprimer:5'tgtcaaccaactggagattgtg3'(seqidno.5)

reverseprimer:5'gaagagatcagagttcacctcgt3'(seqidno.6)。

对水稻cdna样品进行real-timepcr,然后检测该基因在茎、叶、根中的表达;样品为水稻的rna经过逆转录后所得cdna;其步骤如下:

(1)提取水稻器官的总rna(trizol,市售);

(2)利用反转录试剂盒(市售)将总rna反转录成cdna,根据seqidno.5和seqidno.6设计引物,根据seqidno.1,跨越orf区和3`utr的78bp作为pcr产物,进行实时定量pcr检测。

本发明还提供检测水稻基因osckx4在高盐、干旱胁迫以及激素处理下的表达模式变化的方法,即将水稻进行高盐、干旱胁迫以及激素处理后,提取水稻叶片中的rna;利用反转录试剂盒将rna反转录成cdna,利用引物seqidno.5与seqidno.6,进行定量pcr检测。其步骤如下:

(1)将两周大的水稻苗置于150mm氯化钠溶液中,28℃培养高盐胁迫处理0、2、4、8、12以及24h;干旱处理0、2、4、8、12以及24h;置于10µmiaa、10µmkt、10µm2,4-d、10µmnaa、10µm6-ba中,28ºc分别培养0、2、4、8、12以及24h进行激素处理;

(2)提取前述个处理的水稻苗的叶和根中的总rna(trizol,市售);

(3)利用反转录试剂盒(市售)将总rna反转录成cdna,根据seqidno.5和seqidno.6设计引物,根据seqidno.1,跨越orf区和3`utr的78bp作为pcr产物,进行实时定量pcr检测。

本发明还提供检测水稻osckx4tilling突变体与野生型水稻在根长及产量改变的方法,其步骤如下:

(1)突变体株系与野生型的种子浸泡在水中24h,让种子充分吸涨。随后将种子玻璃培养皿内,放在水稻恒温培养箱内37℃催芽至露白,每天换水防止长霉。选取萌发一致的种子,将其转移至种子架上,置于基础营养液中,28℃培养箱培养;

(2)分别提取突变体以及野生型对照组中的总dna,利用引物进行实时荧光定量pcr检测,确定突变位置以及筛选纯合株系。对应的引物序列为:

forwardprimer:5'caaactcgattgatccacagatag3'(seqidno.7)

reverseprimer:5'gaaggtctcaaagtccgagtagag3'(seqidno.8);

(3)观察统计每天实验组与对照组的生长情况,并在一周时,观察并测量突变体株系与野生型株系的根长。

本发明还提供了osckx4tilling突变体水稻与野生型水稻在成熟期株高及产量改变的方法,其步骤如下:

(1)突变体株系与野生型的种子浸泡在水中24h,让种子充分吸涨。随后将种子玻璃培养皿内,放在水稻恒温培养箱内37℃催芽至露白,每天换水防止长霉;

(2)将催芽后的种子均匀地散在苗床上,表面不能积水,种子播撒后,用手抹平,让种子陷入泥中,不应太深;

(3)育苗3-4周后,三叶期,根系发达方可移苗。过早会造成根部损伤,后期发育不良。移苗后1-2周可按每颗苗0.5g尿素少量施肥。浇水一般提前将水放在温室内1天温热后再浇;

(4)成熟期测量突变体与野生型水稻的株高,并统计千粒重与结实率。

本发明中,可选用本领域已经知道的各种载体,如市售的载体以及质粒。

可见,本发明提供的水稻基因osckx4可用于植物品种改良,如用于改善水稻抗高盐、干旱胁迫、激素胁迫的等性能,从而提高水稻产量。

附图说明

图1为水稻osckx4的不同器官表达模式分析。其中,a为水稻根、茎、二叶、三叶、四叶、五叶、六叶的结构图;b为水稻二叶、三叶、四叶、五叶、六叶的代表图;c为各个器官中osckx4的表达量。

图2为水稻osckx4基因在高盐和干旱处理下的表达分析。其中,a是用150mmnacl处理0-24h后水稻的osckx4基因表达量变化;b是在干燥空气中处理0-24h后水稻的osckx4基因表达量变化。

图3为水稻osckx4基因在6-ba和kt处理下的表达分析。其中,a是10μmkt处理0-24h后水稻的osckx4基因表达量变化;b是10μm6-ba处理0-24h后水稻的osckx4基因表达量变化。

图4为水稻osckx4基因在iaa、2,4-d和naa处理下的表达分析。其中,a是10μmiaa处理0-24h后水稻的osckx4基因表达量变化;b是10μm2,4-d处理0-24h后水稻osckx4基因表达量的变化;c是10μmnaa处理0-24h后水稻osckx4基因表达量的变化。

图5为osckx4的两个突变体c2-1c12-1与wt的osckx4dna序列(a,b)与蛋白质序列(c,d)的比对。

图6生长一周osckx4tilling突变体与野生型水稻wt幼苗的根长分析。

图7成熟期osckx4tilling突变体与野生型水稻wt的株高、千粒重与结实率分析。其中,a、b为株高对比照相;c为千粒重统计;d为结实率对比。

具体实施方式

下面结合具体实施实例进一步阐释本发明。应理解,这些实例仅以用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实例中未注明具体的实验方法,均可按照常规方法进行。如sambrook等分子克隆:实验手册(newyork:coldspringharborlaboratorypress,1989)中所述条件,或按照制造生产厂商的使用说明。

实施例1水稻基因osckx4的克隆

1.水稻品种nipponbare(oryzasativajaponica)在培养箱(spx-250-gb,shanghai,china)中培养:生长条件为光周期16h/8h(l/d),28℃;

2.rna提取。取100mg左右新鲜的水稻植物组织材料,液氮充分研磨。加1mltrizol试剂,涡旋15s后室温放置5min。加0.2ml氯仿,去蛋白,12000rpm离心10min后上清转移至新的离心管,加等体积异丙醇,充分混匀,室温放置10min,12krpm离心10min,弃上清,用depc处理过的水配制的75%乙醇1ml洗涤沉淀,重复一次。室温干燥5-10min,溶于20μldepc水中,测od值,电泳检测;

3.基因的克隆。以逆转录的水稻cdna第一链为模板,利用seqidno.3和seqidno.4进行pcr,获得基因全长,具体序列信息参见seqidno.1。

实施例2水稻osckx4基因器官表达模式分析

分别提取水稻茎、幼叶、老叶、根等中的总rna,利用反转录试剂盒将总rna反转录成cdna,利用引物seqidno.5和seqidno.6,进行实时荧光定量pcr检测(图1,a,b,c)。结果显示,osckx4基因在各个器官中组成型表达。其中在茎中的表达最高,而在根中的表达最低,叶片居中。在不同部位叶片中,在次新叶中的表达最高,而在老叶中的表达最低。

实施例3水稻基因osckx4在干旱、高盐胁迫以及植物激素处理下的表达模式分析

对两周大的水稻幼苗分别进行10µmiaa、10µmkt、10µm2,4-d、10µmnaa、10µm6-ba、150μmnacl以及干旱(dryair)处理0、2、4、8、12以及24h,分别提取叶中的总rna,利用反转录试剂盒将总rna反转录成cdna,利用引物seqidno.5和seqidno.6,进行实时荧光定量pcr检测。结果显示,盐胁迫下(图2a),osckx4的表达显著升高;而干旱处理后,osckx4的表达显著降低(图2b)。细胞分裂素为代表的kt、6-ba(图3,a,b)和生长素为代表的iaa、2,4-d和naa(图4,a,b,c)处理后,osckx4的表达都出现了而不同程度的升高。

实施例4osckx4tilling突变体的分子鉴定

分别提取突变体以及野生型对照组中的总dna,利用引物seqidno.7和seqidno.8,进行实时荧光定量pcr检测与测序(图5)。根据osckx4c2-1c12-1两个突变体分别与wt的ckx4的dna序列比对,结果发现:c2-1在761处,g突变成a;c12-1在759处,c突变成t(图5,a,b)。以上均在osckx4的编码区发生了突变,为有义突变。osckx4的两个突变体c2-1c12-1与wt的ckx4蛋白(图5,c,d)比对显示,c2-1中第75处的亮氨酸(l)突变为丝氨酸(s),c12-1中第76处的蛋氨酸(m)突变成缬氨酸(v)。

实施例5osckx4tilling突变体水稻根长的改变

28ºc培养一周大的osckx4tilling突变体与野生型wt对照组进行根长测量(图6)。结果显示,osckx4tilling突变体与野生型wt相比,其根长显著变短。

实施例6osckx4tilling突变体水稻株高、千粒重与结实率的改变

对成熟期osckx4tilling突变体与野生型wt对照组进行株高测量(图7,a)。结果显示,osckx4tilling突变体与野生型wt相比,其株高表型明显变矮(图7,b)。对成熟期osckx4tilling突变体与野生型wt对照组进行千粒重(图7,c)与结实率的统计(图7,d)。结果显示,osckx4tilling突变体与野生型wt相比,千粒重与结实率显著降低。

参考文献

ashikarim,sakakibarah,linsy,etal.cytokininoxidaseregulatesricegrainproduction[j].science,2005,309(741):741-745.

couderty,perinc,courtoisb,etal.geneticcontrolofrootdevelopmentinrice,themodelcereal[j].trendsplantsci,2010,15:219-226.

gaosp,fangj,xuf,etal.cytokinioxidase/dehydrogenase4integratescytokininandauxinsignalingtocontrolricecrownrootformation[j].plantphysiol,2014,165(3):1035-1046.

kakimotot.perceptionandsignaltransductionofcytokinins[j].annurevplantbiol,2003,54:605-627.

lethamds,palnilms,taogq,etal.regulatorsofcelldivisioninplanttissuesxxix.theactivitiesofcytokininglucosidesandalanineconjugatesincytokininbioassays[j].jplantgrowthregul,1983,2:103-115.

lethamds,zhangr.cytokinintranslocationandmetabolisminlupinspeciesiinewnucleotidemetabolitesofcytokinins[j].plantsci,1989,64:161-165.

lichtenthalerhk.the1-deoxy-d-xylulose-5-phosphatepathwayofisoprenoidbiosynthesisinplants[j].annurevplantphysiolplantmolbiol,1999,50:47-65.

massonneaua,houba-herinn,pethec,etal.maizecytokininoxidasegenes:differentialexpressionandcloningoftwonewcdnas[j].jexpbot,2004,55:2549-2557.

müllerb,sheenj.cytokininandauxininteractioninrootstem-cellspecicationduringearlyembryogenesis[j].nature,2008,453:1094-1097.

wernert,motykav,laucouv,etal.cytokinin-deficienttransgenicarabidopsisplantsshowmultipledevelopmentalalterationsindicatingoppositefunctionsofcytokininsintheregulationofshootandrootmeristemactivity[j].plantcell,2003,15(11):2532-2550.

ranidebib,taketas,ichiim.cytokinininhibitslateralrootinitiationbutstimulateslateralrootelongationinrice(oryzasativa)[j].jplantphysiol,2005,162507-515.

rebouillata,dievarta,verdeiljl,etal.geneticofricerootdevelopment[j].rice,2009,2:15-34.

yuanj,chend,renyj,etal.characteristicandexpressionanalysisofametallothioneingene,osmt2b,down-regulatedbycytokininsuggestsfunctionsinrootdevelopmentandseedembryogerminationofrice[j].plantphysiol,2008,146(4):1637-1650.

zhaoy,chengsf,songyl,etal.theinteractionbetweenriceerf3andwox11promotescrownrootdevelopmentbyregulatinggeneexpressioninvolvedincytokininsignaling[j].plantcell,2015,27:2469-2483.。

序列表

<110>复旦大学

<120>水稻细胞分裂素氧化/脱氢酶基因osckx4的编码序列及其应用

<130>001

<160>8

<170>siposequencelisting1.0

<210>1

<211>1590

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>1

atgcggggagccatgaagccgtcgatcgtgcactgcctcaagctgctcatgctgctggcg60

ctcggcggggtcaccatgcacgtccccgacgaggacgacgtggtcgcgtcgctcggggcg120

ctgcgcctcgacggccatttcagcttcgacgacgcccacgccgccgcccgggacttcggc180

aaccggtgcagcctcctgccggcggccgtgctccaccctggctcggtgtccgacgtcgcc240

gccaccgtcaggcgcgtgttccagctgggcaggagctcgccgctcaccgtcgcggcgcgc300

gggcacggccactcgctcctcggccagtcccaggccgccggcgggatcgtcgtcaagatg360

gagtccctcgccgccgccgcagccagggcggtgcgggtgcacggcggcgcgtcgccccac420

gtggacgccccgggcggcgagctctggatcaacgtgctgcatgagacgctcaagcacggg480

ctggcgcccaggtcatggaccgactacctccatctcacagtcggtggcaccttgtcgaat540

gcgggggtcagcgggcaggcgttccggcatggaccgcaggtcagcaatgtcaaccaactg600

gagattgtgacagggaggggagaagttgtcacctgctcgcacgaggtgaactctgatctc660

ttctacgctgctcttggcggcctgggccagtttgggatcatcaccagggctcggattgct720

cttgaacctgctccaaagatggtgcggtggatacgtgttctctactcggactttgagacc780

ttcaccgaggaccaggagaagctgatcgcgtctgagaagaccttcgactacatcgaaggg840

tttgtgatcataaacaggacaggcatcctcaacaactggaggacgtcgttcaagccacag900

gacccagtgcaggcaagccagttccagtcggatggaagagtgctatactgccttgagctg960

acgatgaacttcaaccacgatgaggctgacatcatggaacaggaagttggtgcgctgcta1020

tctcgactcagatacatatcgtccactctattctacaccgatgtcacatacctggagttc1080

ttggacagggtgcacacttctgagctgaagctgagggctcaaggcctctgggaagtccca1140

cacccgtggctgaatcttctgatcccaaggagcacagtccacaaatttgcaaaggaagtc1200

ttcggcaagatcctaaaagatagcaacaatggtcccatactgctttacccagtgaacaga1260

accaagtgggacaacagaacatcagtggtcataccagatgaagaaattttctacctggtt1320

gggttcctatcttcagcaccatcatcctcaggtcatggtagtgtcgaacatgcaatgaac1380

ctgaacaacaaaatagtggacttctgtgaaaagaatggtgttgggatgaaacagtatcta1440

gcaccctacactacacagaagcagtggaaagcccacttcggagcaaggtgggagacattt1500

gaacggaggaaacacacgtacgatcccctagcaatcctagctccagggcagagaatattt1560

ccaaaggcatcactacctatgtccttgtga1590

<210>2

<211>529

<212>prt

<213>oryzasativa

<400>2

metargglyalametlysproserilevalhiscysleulysleuleu

151015

metleuleualaleuglyglyvalthrmethisvalproaspgluasp

202530

aspvalvalalaserleuglyalaleuargleuaspglyhispheser

354045

pheaspaspalahisalaalaalaargasppheglyasnargcysser

505560

leuleuproalaalavalleuhisproglyservalseraspvalala

65707580

alathrvalargargvalpheglnleuglyargserserproleuthr

859095

valalaalaargglyhisglyhisserleuleuglyglnserglnala

100105110

alaglyglyilevalvallysmetgluserleualaalaalaalaala

115120125

argalavalargvalhisglyglyalaserprohisvalaspalapro

130135140

glyglygluleutrpileasnvalleuhisgluthrleulyshisgly

145150155160

leualaproargsertrpthrasptyrleuhisleuthrvalglygly

165170175

thrleuserasnalaglyvalserglyglnalaphearghisglypro

180185190

glnvalserasnvalasnglnleugluilevalthrglyargglyglu

195200205

valvalthrcysserhisgluvalasnseraspleuphetyralaala

210215220

leuglyglyleuglyglnpheglyileilethrargalaargileala

225230235240

leugluproalaprolysmetvalargtrpileargvalleutyrser

245250255

aspphegluthrphethrgluaspglnglulysleuilealaserglu

260265270

lysthrpheasptyrilegluglyphevalileileasnargthrgly

275280285

ileleuasnasntrpargthrserphelysproglnaspprovalgln

290295300

alaserglnpheglnseraspglyargvalleutyrcysleugluleu

305310315320

thrmetasnpheasnhisaspglualaaspilemetgluglngluval

325330335

glyalaleuleuserargleuargtyrileserserthrleuphetyr

340345350

thraspvalthrtyrleuglupheleuaspargvalhisthrserglu

355360365

leulysleuargalaglnglyleutrpgluvalprohisprotrpleu

370375380

asnleuleuileproargserthrvalhislysphealalysgluval

385390395400

pheglylysileleulysaspserasnasnglyproileleuleutyr

405410415

provalasnargthrlystrpaspasnargthrservalvalilepro

420425430

aspglugluilephetyrleuvalglypheleuserseralaproser

435440445

serserglyhisglyservalgluhisalametasnleuasnasnlys

450455460

ilevalaspphecysglulysasnglyvalglymetlysglntyrleu

465470475480

alaprotyrthrthrglnlysglntrplysalahispheglyalaarg

485490495

trpgluthrphegluargarglyshisthrtyraspproleualaile

500505510

leualaproglyglnargilepheprolysalaserleuprometser

515520525

leu

<210>3

<211>25

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>3

atgcggggagccatgaagccgtcga25

<210>4

<211>25

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>4

tcacaaggacataggtagtgatgcc25

<210>5

<211>22

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>5

tgtcaaccaactggagattgtg22

<210>6

<211>23

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>6

gaagagatcagagttcacctcgt23

<210>7

<211>24

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>7

caaactcgattgatccacagatag24

<210>8

<211>24

<212>dna

<213>oryzasativa

<400>8

gaaggtctcaaagtccgagtagag24

当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1