用于提供缓冲剂溶液的方法和系统与流程

本申请要求2016年8月2日提交的美国临时专利申请序列no.62/370,041的优先权权益，其通过引用出于全部目的以其整体并于本文。发明领域本公开涉及用于处理生物反应器中培养的细胞的产物的溶液，例如，缓冲剂。发明背景生物反应器用于生产大量的期望生物产物。在生物反应器中生长细胞以生产生物产物之后，进行后续步骤以分离和浓缩生物产物。这些处理步骤可能需要大量的昂贵处理溶液来维持无菌性并确保生物产物保持其活性。存在对生产用于处理生物产物的溶液的更划算的方式的需求。发明概述本公开的方面涉及用于递送处理溶液的系统，所述系统包括含有浓缩处理溶液(concentratedprocessingsolution)的生物过程容器，所述浓缩处理溶液在第一地点处生产；处理区域，其具有第二地点处的至少一个处理单元，所述第二地点与第一地点不同；以及将生物过程容器连接到至少一个处理单元的管，所述管具有阀以允许浓缩处理溶液从生物过程容器流动到至少一个处理单元，以将浓缩处理溶液与至少一个处理单元中生产的含有生物聚合物的溶液组合，其中处理溶液是缓冲剂和培养基中的至少一种。在一些实施方案中，系统还包含控制器，所述控制器连接到至少一个处理单元，其中基于由控制器确定需要处理溶液，当该确定从第二地点通信到第一地点时提供浓缩处理溶液。在一些实施方案中，系统配置为在与含有生物聚合物的溶液组合之前稀释浓缩处理溶液。在一些实施方案中，处理溶液是tris、tris碱、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺、乙酰氨基甘氨酸、乙酸、柠檬酸、甘氨酸、甘氨酸甘氨酸盐、磷酸钠盐、乙醇、盐酸、氢氧化钠、氯化胍、盐酸胍、氯化钠，和/或这些中任意的组合。在一些实施方案中，生物过程容器包含用于接触处理溶液的内层和配置为支持内层的外层。在一些实施方案中，内层是聚乙烯(polyethylene)，并且外层是聚乙烯、evoh、尼龙，以及pvdc的混合物。在一些实施方案中，系统包含控制器，所述控制器配置为确定处理溶液的生物负荷。在一些实施方案中，系统包含稀释液体供给，其中将来自生物过程容器的浓缩处理溶液与来自稀释液体供给的水和/或缓冲剂添加到在线处理溶液稀释系统的入口以获得稀释处理溶液。在一些实施方案中，至少一个处理单元还包含多个生物反应器。在一些实施方案中，系统包含多个生物过程容器。在一些实施方案中，处理溶液是缓冲剂。本公开的另一方面涉及递送处理溶液的方法，所述方法包括在生物过程容器中提供浓缩处理溶液，所述浓缩处理溶液在第一地点处生产；以及将浓缩处理溶液与在第二地点处的生物反应器中生产的含有生物聚合物的溶液组合，所述第二地点与第一地点不同，其中处理溶液是缓冲剂和培养基中的至少一种。在一些实施方案中，基于确定需要浓缩处理溶液且将该确定从第二地点通信到第一地点而提供浓缩处理溶液。在一些实施方案中，方法包含在与含有生物聚合物的溶液组合之前稀释浓缩处理溶液。在一些实施方案中，处理溶液是tris、tris碱、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺、乙酰氨基甘氨酸、乙酸、柠檬酸、甘氨酸、甘氨酸甘氨酸盐、磷酸钠盐、乙醇、盐酸、氢氧化钠、氯化胍、盐酸胍、氯化钠，和/或这些中任意的组合。在一些实施方案中，生物过程容器包括用于产物接触的内层和配置为支持内层的外层。在一些实施方案中，内层是聚乙烯，并且外层是聚乙烯、evoh、尼龙，以及pvdc的混合物。在一些实施方案中，方法包含确定处理溶液的生物负荷。在一些实施方案中，在快速检测测定法中确定生物负荷。在一些实施方案中，方法包含将来自生物过程容器的浓缩处理溶液与来自稀释液体供给的水和/或缓冲剂添加到在线处理溶液稀释系统的入口以得到稀释处理溶液。在一些实施方案中，方法包含将含有处理溶液的生物过程容器从第一地点运输到第二地点。在一些实施方案中，方法包含通过生物过程容器中的出口补料生物过程溶液，以便于生物聚合物的纯化。本公开的另一方面涉及药物生产设施，所述药物生产设施包括缓冲剂储存区域，所述缓冲剂储存区域能够接收至少一个生物过程容器，所述至少一个生物过程容器配置为含有浓缩处理溶液；处理区域，所述处理区域具有至少一个处理单元；壁，所述壁将缓冲剂储存区域与处理区域分开；以及至少一个管，所述至少一个管具有缓冲剂储存区域中的第一端和处理区域中的第二端，所述第一端配置为连接到至少一个生物过程容器的至少一个生物过程容器，并且所述第二端配置为连接到至少一个处理单元的至少一个处理单元。在一些实施方案中，至少一个管具有阀。在一些实施方案中，至少一个生物过程容器包含用于接触处理溶液的内层和配置为支持内层的外层。在一些实施方案中，要求保护的药物生产设施还包含缓冲剂储存区域中的平台，所述平台配置为支持至少一个生物过程容器，所述至少一个生物过程容器包含多个生物过程容器，所述平台具有配置为支持多个生物过程容器的至少一个生物过程容器的第一级(firstlevel)和配置为支持多个生物过程容器的至少一个生物过程容器的第二级(secondlevel)，其中平台配置为允许用户使用铲车(forklift)将多个生物过程容器的生物过程容器放置到平台上，并且所述平台配置为允许用户使用铲车将相应的生物过程容器从平台移除。在一些实施方案中，药物生产设施还包含沿着平台间隔开的多个入口，每个入口连接到至少一个管，并且每个入口配置为连接到多个生物过程容器中的生物过程容器的出口。在一些实施方案中，处理区域配置为洁净室(cleanroom)环境。在一方面中，本发明提供方法，例如，递送生物反应器处理溶液的方法或形成含有生物聚合物的溶液的方法。方法包含提供(例如，接收)浓缩处理溶液；将浓缩处理溶液与在生物反应器中生产的含有生物聚合物的溶液组合，例如，以形成含有生物聚合物的溶液。在实施方案中，浓缩处理溶液以至少20升的、约20至2000升的单位提供，例如，75、100、125、250、500、1000、1250、1500、1750、1825、1900，或2000升。在实施方案中，含有生物聚合物的溶液包括来自以下标题为“治疗产品和示例性产品，例如，双特异性分子”的表格的生物聚合物。在实施方案中，生物聚合物由中国仓鼠卵巢(cho)细胞制成。在一个实施方案中，细胞是cho-k1细胞、cho-k1sv细胞、dg44cho细胞、duxb11cho细胞、chos、chogs敲除细胞、chofut8gs敲除细胞、chozn，或cho衍生的细胞。chogs敲除细胞(例如，gsko细胞)是例如cho-k1svgs。在实施方案中，在一个或多个生物过程容器中提供处理溶液。在实施方案中，在一个或多个生物过程容器中提供处理溶液且用于单个稀释。在实施方案中，方法包括提供参数的值，并且可选地，将该值与参考比较。在实施方案中，在第一地点处进行评价，并且生物反应器位于第二地点。在实施方案中，在生物反应器的地点处进行评价。在实施方案中，方法包括在与含有生物聚合物的溶液组合之前稀释浓缩处理溶液。在实施方案中，在第一地点处运送或生产处理溶液，并且生物反应器位于第二地点。在实施方案中，处理溶液包括缓冲剂，例如，tris、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺和乙酰氨基甘氨酸或乙酸或类似物。在实施方案中，生物过程容器包括用于产物接触的内层和外层。在实施方案中，内层是聚乙烯。在实施方案中，外层聚乙烯、evoh、尼龙，和/或pvdc的混合物。在一些实施方案中，方法包含确定处理溶液的生物负荷。在实施方案中，方法包括将来自处理溶液供给的浓缩生物过程溶液(浓缩处理溶液)和来自水/缓冲剂供给的水或缓冲剂添加到在线生物过程溶液稀释系统的入口以获得稀释生物过程溶液。在实施方案中，方法包括通过生物过程容器中的出口补料生物过程溶液，以便于生物聚合物的纯化。本发明还提供用于递送生物过程溶液的系统。系统包含提供在第一地点处生产的浓缩处理溶液，以及将浓缩的含有生物聚合物的溶液与在第二地点处的生物反应器中生产的含有生物聚合物的溶液组合。在实施方案中，基于确定需要浓缩生物过程溶液且该确定从第二地点通信到第一地点而提供浓缩生物过程溶液。本发明的优点有将下游处理溶液的生产与生物反应器中生物制品的制造解耦(decouple)。这与储存在生物过程容器(“bpc”，即缓冲剂袋(bufferbag)，或提袋(tote))中的缓冲剂浓缩物的使用组合，允许在远离生物制品生产的位置处准备过程中间体(processintermediate)的生产。这降低了制造成本。延长的稳定性时间允许gmp文书的审查和发布。因此，可以拒绝受gmp错误影响的过程中中间体或失败的质量测试，因此消除生物制品生产的风险。附图简述图1是生物反应器准备区域的现有技术布置的示意图；图2是根据本公开的缓冲剂制备布置的实施方案的示意图；图3是根据本公开的方法的实施方案的框图；图4a示出了生物过程容器的外层的实施方案的透视图；图4b示出了其侧视图；图4c示出了其后视图；图4d示出了其侧视图；图4e示出了其正视图；图4f示出了其俯视图；图5示出了生物过程容器的外层的另一实施方案的侧视图；图6a示出了平台的实施方案的正视图；图6b示出了其侧视图；图7a示出了药物生产设施中的缓冲剂储存区域的实施方案的侧视图；图7b示出了其正视图；并且图7c示出了其俯视图。发明详述本发明提供了用于浓缩和纯化大规模表达容器(包含生物反应器)的生物制品产物的划算的处理溶液。生物制品制造典型地包含两个主要制造阶段。第一个是生物制品产物生产阶段，其中生产生物制品，典型地是生物聚合物，诸如多肽或蛋白质。生物聚合物典型地使用微生物发酵、生物转化或哺乳动物细胞培养来合成。例如，u.s.2011-0312087a1中公开了生物反应器表达系统。第二步骤包含纯化生物制品产物，其中将产物与杂质(例如细胞碎片、不期望的生物聚合物、dna培养基成分和代谢产物)分离。第二步骤可能需要大体积的生物相容溶液，其在可能的程度上保存生物制品的期望的活性，并以其他方式与生物制品生物相容，以便选择性地移除进行许多下游处理阶段(单元操作)的杂质。在这些单元操作期间，使用多种技术，包含尺寸排阻过滤、层析法、ph灭活、重折叠、切向流过滤等。为促进这些单元操作，使用许多不同水相溶液(缓冲剂)，其改变靶分子的理化环境(例如ph、电导率)。图1中示出了生物反应器准备区域10的现有技术布置。具有缓冲剂制备容器12的缓冲剂准备区域在物理上极其接近具有缓冲剂贮罐(bufferholdtank)14和便携提袋(portabletote)16的缓冲剂储存区域。缓冲剂准备区域的缓冲剂制备容器12也物理上极其接近具有诸如层析柱18的下游处理单元的下游处理区域。管20将缓冲剂制备容器12连接到缓冲剂贮罐14和便携提袋16。另一管22将缓冲剂贮罐14连接到下游处理区域中的下游处理单元18。又另一管24将便携提袋16连接到下游处理区域中的下游处理单元18。此布置可能是昂贵且耗时的，这导致在完成长前导测试和/或审查并发布gmp记录(批次记录)前使用的过程中材料。贮存缓冲剂占据大量的gmp处理空间。相比之下，图2示出了根据本公开的用于递送处理溶液的系统100的实施方案。如所示，系统100包含第一地点104处的缓冲剂准备区域102，其与第二地点108处的下游处理区域106不同。在一些实施方案中，第一地点104是园区或建筑物，并且第二地点108是与第一地点104的园区或建筑物不同的园区或建筑物。尽管缓冲剂准备区域102和下游处理区域106可能在一个较大的区域(例如，工厂或生产地点)内，但是只要浓缩溶液可以在不会不利地影响溶液的稳定性或活性的情况下递送到下游处理区域，就不需要相邻性。可以进行溶液的调度(scheduling)、配制，以及递送，以在意图使用时间时或恰在意图使用时间之前制备溶液。此外，根据本公开的布置允许下游处理溶液在低价值位置进行，这相对于在包含生物反应器的高价值位置制备它们可以是优选的。布置还减少生物反应器的地点处的储存空间。在图2中，缓冲剂准备区域102包含至少两个缓冲剂制备容器，各自在110处指示。缓冲剂制备容器110由至少一个管(或至少一个歧管)112连接到缓冲剂储存区域116中的若干储罐(或提袋)(各自在114处指示)。缓冲剂储存区域116还包含至少一个提袋114，所述至少一个提袋114已经被填充并与歧管断开，从而其准备好运输到第二地点108。缓冲剂制备容器110可用于生产处理溶液。在一些实施方案中，处理溶液是缓冲剂，诸如tris、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺和乙酰氨基甘氨酸或乙酸，或如表6-9所示的缓冲剂。每个提袋114包含用于接触浓缩处理溶液的内层或衬垫(liner)118和支持内层的外层或主体120。在一些实施方案中，内层118由聚乙烯制成。在一些实施方案中，外层120是聚乙烯、乙烯-乙烯醇(ethylenevinylalcohol，evoh)、尼龙，以及聚偏氯乙烯(polyvinylidenechloride，pvdc)的混合物。在一些实施方案中，每个提袋114由塑料制成。在一些实施方案中，每个提袋114能够由伽马辐照灭菌。在一些实施方案中，每个提袋114配置为确保提袋内含有的处理溶液的货架期达一个月。在一些实施方案中，每个提袋114配置为确保提袋内含有的处理溶液的货架期达三个月。在一些实施方案中，每个提袋114配置为确保提袋内含有的处理溶液的货架期达六个月。在一些实施方案中，每个提袋114配置为确保提袋内含有的处理溶液的货架期达一年。在一些实施方案中，每个提袋114具有1,000升(l)的容积。在一些实施方案中，每个提袋114具有刚性的外层120，其能够保持限定的形状，而不需提袋114的侧壁上的外部支持。在缓冲剂储存区域116处，用户将一个或多个提袋114放置在运送结构上，诸如货板(pallet)。在一个实施方案中，在货板上支持的包装的提袋形成运送单元122，是4英尺×4英尺×4英尺立方体。用户将一个或多个运送单元122放置到交通工具124中，诸如卡车。用户驾驶交通工具124从第一设施(第一地点)104处的缓冲剂储存区域116沿着箭头a到容纳下游处理区域106的第二设施(第二地点)108。在第二设施108处，用户从交通工具124沿着箭头b卸载(多个)运送单元122。然后，用户将(多个)提袋114放置在第二地点108中的第二缓冲剂储存区域126中。第二设施108包含位于下游处理区域130中的至少一个生物反应器128。在一些实施方案中，下游处理区域130是洁净室。在所示的实施方案中，两个管(各自在132处指示)将位于第二缓冲剂储存区域126中的提袋(生物过程容器)114连接到位于下游处理区域130中的生物反应器128。如所示，每个管132包含阀134，所述阀134位于下游处理区域130的壁136内或附近，所述壁136将第二缓冲剂储存区域126与下游处理区域130分开。壁136中或附近的管132和阀134允许浓缩处理溶液从生物过程容器114流动到生物反应器128，以将浓缩处理溶液与在生物反应器128中生产的含有生物聚合物的溶液组合。如上所述，壁136将形成为洁净室的下游处理区域130与不一定是洁净室的第二储存区域126分开。阀134允许将一个或多个提袋114到阀的符合洁净室连接，以最小化污染生物反应器128的风险。在一些实施方案中，每个阀134依靠于第二地点108处的天花板(ceiling)。当下游处理区域106中需要处理溶液时，处理溶液从提袋114通过管132泵送或以其他方式移动到下游处理区域106中的下游处理单元128。在一些实施方案中，第二地点108包含可连接到一个或多个提袋114的多个生物反应器128(或其他下游处理单元)。在一些实施方案中，仅使用一个提袋114。在一些实施方案中，第二地点108包含当前连接到一个或多个生物反应器128的至少一个提袋114以及尚未连接到一个或多个生物反应器128的至少一个提袋114。这确保了第二地点104的用户具有提袋114中含有的处理溶液的后备供给。生物反应器128连接到控制器140。在一些实施方案中，控制器140配置为确定第二地点108处的一个或多个生物反应器128需要一个或多个提袋114中含有的处理溶液。然后，控制器140将此确定通信到第一地点104中的控制器142。确定的此通信防止在第二地点108处的处理溶液短缺。在一些实施方案中，控制器140配置为确定处理溶液的生物负荷。例如，可以在快速检测测定法中确定生物负荷。在一些实施方案中，在拉曼光谱学(ramanspectroscopy)快速检测测定法中确定生物负荷。系统100配置为在与含有生物聚合物的溶液组合之前稀释浓缩处理溶液。这允许系统100调整参数，诸如提供到生物反应器128的溶液的ph。系统100包含提袋114形式的处理溶液供给。系统100还包含稀释液体供给144。在一些实施方案中，稀释液可以是水和/或缓冲剂。来自提袋114的浓缩处理溶液与来自稀释液体供给144的水或缓冲剂沿着管132添加到在线处理溶液稀释系统146的入口，以得到在生物反应器128的入口处提供的稀释处理溶液。图2仅示出了一个生物反应器128。在不背离本公开的范围的情况下，第二地点108处可以包含多个生物反应器。在一些实施方案中，第二地点108中的(多个)生物反应器128可用于纯化。在一些实施方案中，第二地点108中的(多个)生物反应器128包含至少一个层析柱。现参考图3，本公开提供对系统递送处理溶液的方法300。在图3中，递送处理溶液的方法300的示例性实施方案包含在302处在第一地点处生产浓缩处理溶液。在一些实施方案中，处理溶液是缓冲剂。在一些实施方案中，缓冲剂是tris、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺和乙酰氨基甘氨酸或乙酸或如表6-9中所示的缓冲剂。在一些实施方案中，在304处，方法300确定处理溶液的生物负荷。步骤304可以完全或部分由控制器(诸如图2中的控制器140)进行。在步骤304处，方法300确定处理溶液符合质量标准。这允许用户降低会污染来自生物反应器(或其他下游处理单元)的产品的风险。可以实施任意生物负荷测试方法。在一些实施方案中，可以在快速检测测定法中确定生物负荷。在一些实施方案中，在拉曼光谱学快速检测测定法中确定生物负荷。在一些实施方案中，生物负荷测试可以在处理溶液生产地点或要使用处理溶液的第二地点进行。在306处，方法300确定在第二地点处需要浓缩处理溶液。在308处，方法将此确定从第二地点通信到第一地点。在步骤306处的此确定可以由连接到第二地点处的生物反应器的控制器(诸如图2中所示的控制器140)进行。然后基于确定将浓缩处理溶液提供到第二地点108。在310处，方法300在生物过程容器中提供浓缩处理溶液，浓缩处理溶液在第一地点处生产。在一些实施方案中，步骤310包含将含有处理溶液的一个或多个生物过程容器从第一地点运输到第二地点。在一些实施方案中，生物过程容器包含用于接触处理溶液的内层和外层。在一些实施方案中，内层是聚乙烯。在一些实施方案中，外层是聚乙烯、evoh、尼龙，以及pvdc的混合物。在312处，方法300包含在与含有生物聚合物的溶液组合之前稀释浓缩处理溶液。例如，在一些实施方案中，方法300的步骤312包含将来自处理溶液供给的浓缩处理溶液与来自水/缓冲剂供给的水或缓冲剂添加到在线处理溶液稀释系统的入口以得到稀释处理溶液。在314处，方法300将浓缩处理溶液与在第二地点处的生物反应器中生产的含有生物聚合物的溶液组合，所述第二地点与第一地点不同。本公开的组合物、系统，以及方法提供扩展的稳定性数据，并且允许过程中间体的长期储存。这允许操作者将生物制品产物的生产与用于处理生物制品产物的中间体的生产解耦。本公开的其他优点是，其允许在远离生物制品生产的地点的地点处生产浓缩缓冲剂溶液。浓缩缓冲剂可以在低价值生产设施中生产，并且从而解放了被生物反应器占据的高价值生产设施中的空间。除降低制造成本之外，扩展的稳定性时间允许gmp文书的审查和发布。可以拒绝受gmp错误或失败的质量测试等影响的过程中间体，从而去除对生物制品生产的风险。从遥远的准备区域在bpc中供给的浓缩缓冲剂、在线稀释以及缓冲剂溶液的长到期时间(expirytimes)的组合使用产生更廉价且较低风险的装载(laden)缓冲剂供给策略。本公开系统和方法可以使用各种生物过程容器。图4a-4f示出了生物过程容器的实施方案的一般在400处指示的外层。外层400可以用来支持内层(诸如袋)，以在内层内包含缓冲剂。生物过程容器的外层400的下端包含可以被铲车抬起的部分。图4a示出了生物过程容器的透视图。在图4b中，生物过程容器具有1264毫米的总体高度c。图4c示出了生物过程容器的另一侧，其在将盖固定到生物过程容器的外层400时具有1287毫米的高度d。生物过程容器的下端可以由铲车相接，并且包含基部部分402、404、406，其限定凹部(recesses)408、410。凹部408、410中的每一者具有135毫米的高度e。第一凹部408具有310毫米的宽度f。第二凹部410具有310毫米的宽度h。第一基部部分402具有160毫米的宽度g。第二基部部分404具有180毫米的宽度i。在图4f中，生物过程容器的外层400的俯视图具有1140毫米的长度j和1140毫米的宽度k。生物过程容器的外层400的内容积由内长度l和内宽度m限定。内长度l是1056毫米且内宽度m是1038毫米。端口(port)412限定在生物过程容器的外层400中，以从生物过程容器分配处理溶液。端口412具有97毫米的直径r。端口412与生物过程容器的外层400的第一内表面414偏移尺寸q，所述尺寸q为171毫米。端口412与生物过程容器的外层400的第二内表面416偏移尺寸s，所述尺寸s为181毫米。端口412与第一外表面418偏移尺寸p，所述尺寸p为222毫米。端口412与第二外表面420偏移尺寸o，所述尺寸o为222毫米。在一些实施方案中，生物过程容器的内层(袋)包含出口管路，其旋过外层400的端口412。图5示出了生物过程容器的一般在500处指示的外层的另一实施方案。在图5中，生物处理单元的外层500具有593毫米的高度u和1140毫米的宽度v。生物处理单元的外层500和固定到外层500的盖的高度t是617毫米。在一些实施方案中，生物过程容器包含追踪系统。例如，在一些实施方案中，生物过程容器包含固定到生物过程容器的外层400的rfid标签422(图4a)，以便于在运送接收期间追踪和管理生物过程容器。通过在多个生物过程容器上包含相应的rfid标签422，用户可以更容易地管理生物过程容器的库存并更容易地监视生物过程容器中含有的处理溶液的量。图6a示出了一般在600处指示的用于支持生物过程容器602以组织缓冲剂储存区域604的平台的实施方案的正视图。平台600配置为支持至少一个生物过程容器602。此平台600在缓冲剂储存区域的其他实施方案(诸如图2的缓冲剂储存区域126)中可以用来支持生物过程容器。平台600具有配置为支持至少一个生物过程容器602的第一级606和配置为支持至少一个生物过程容器602的第二级608。平台600配置为允许用户使用铲车将生物过程容器602放置到平台600上，并且平台600配置为允许用户使用铲车从平台600移除相应的生物过程容器602。第一级606与地面偏移高度aa，所述高度aa为2英尺。平台由各自在610处指示的脚支持，所述脚具有2英寸的高度ab。各自在612处指示的柱从脚610朝上延伸，并且支持第一级606和第二级608。在图6a中，生物过程容器602的下部分包含三个基部部分614、616、618，其限定两个凹部620、622。凹部620、622允许用户操作铲车以通过从平台600前方接入相应的生物过程容器602来抬起每个生物过程容器602。凹部620、622具有5又5/16英寸的高度ac。第一基部部分614具有7又1/8英寸的宽度ad。第二基部部分616与生物过程容器602的侧面偏移一英尺7又5/16英寸的距离ae。第二基部部分616具有6又1/4英寸的宽度af。第三基部部分618与生物过程容器602的侧面偏移3英尺1又3/4英寸的距离ag。第三基部部分618具有7又1/8英寸的宽度ah。每个生物过程容器602具有4英尺3英寸的高度ai和3英尺8又7/8英寸的宽度aj。平台600的第二级608上的生物过程容器602与缓冲剂储存区域604的天花板之间的间隙ak是6.5英寸。平台600的第二级608上的生物过程容器602的上边缘626的总体高度al与地面628相距11英尺五英寸。天花板624为地面628之上11英尺11.5英寸的高度am。第一级606上的生物过程容器602定位在柱612之间，因此在生物过程容器602与柱612中的至少一个之间存在3英寸的间隙an。在第二级608的下表面630与定位在第一级606上的生物过程容器602的上表面632之间存在6又3/8英寸的间隙ao。图6b示出了图6a的平台600的侧视图。图6b示出了生物过程容器具有3英尺87/8英寸的深度ap。本公开的方面涉及药物生产设施，所述药物生产设施具有能够接收配置为包含浓缩处理溶液的至少一个生物过程容器的缓冲剂储存区域，能够接收至少一个处理单元的处理区域，以及将缓冲剂储存区域与处理区域分开的壁。设施还包含至少一个管，所述至少一个管具有在缓冲剂储存区域中的第一端和在处理区域中的第二端。第一端配置为连接到至少一个生物过程容器，并且第二端配置为连接到至少一个处理单元。在一些实施方案中，处理区域配置为洁净室环境。图7a示出了一般在700处指示的缓冲剂储存区域，其可以包含在药物生产设施中。缓冲剂储存区域700包含平台702，以支持多个生物过程容器704。每个生物过程容器704包含用于接触处理溶液的内层并且配置为支持内层的外层。每个生物过程容器704可以是本文中所示和所描述的任意实施方案的生物过程容器。图7a示出了用户706可以如何从靠近平台的用户走道708访问生物过程容器704。药物设施包含至少一个管，所述至少一个管具有缓冲剂储存区域700中的第一端和处理区域(诸如如本文中关于各种实施方案描述的处理区域)中的第二端。每个管的第一端配置为连接到至少一个生物过程容器704，并且第二端配置为连接到处理区域中的至少一个处理单元。如关于图2所描述，每个管可以包含阀。图7b示出了缓冲剂储存区域700包含沿着平台702的长度间隔开的各自在710处指示的多个入口。每个入口710连接到(多个)管。每个入口710配置为连接到生物过程容器的出口。入口710和(多个)管允许缓冲剂从(多个)生物过程容器704中的一个或多个流动到处理区域中的处理单元。另外，回到参考图7a，平台702支持缓冲剂储存区域700的地面716与天花板718之间的平台702的第一级712上的和平台的第二级714上的生物过程容器704。平台702允许用户706以如下的方式组织生物过程容器704，所述方式高效使用缓冲剂储存区域700的空间，并且允许用户使用铲车将生物过程容器704放置在平台702上和从平台702移除生物过程容器704。在生物过程容器704包含追踪系统(诸如贴于每个生物过程容器704的条形码或rfid标签)的实施方案中，用户走道708允许用户容易访问生物处理单元，以清点生物过程容器704的库存或收集诸如生物过程容器704的年限(age)的信息。用户走道708还允许用户706将生物过程容器704之一上的端口连接到入口710，从而来自该生物过程容器704的过程溶液可以从生物过程容器704通过入口710和管流动到处理区域中的一个或多个处理单元。图7c的俯视图示出了走道708具有3英尺的宽度ba。走道708连接到两个阶梯(stairway)720、722。走道708和第一阶梯720各自具有3英尺的宽度ba。第二阶梯722具有2.5英尺的宽度bb。走道708定位在与后壁724相距6英寸的距离bc1，并且与每个平台702相距6英寸的距离bc2。走道708定位在与侧壁726相距1英尺9英寸的距离bd。平台702包含脚，其各自在728处指示。以最接近于侧壁726的脚728为中心，与侧壁726相距2英尺1.25英寸的距离be。入口710间隔开，且第一入口710与侧壁726相距10.75英尺的距离bf，第二入口710与第一入口710相距10.5英尺的距离bg，第三入口与第二入口710相距9英尺五英寸的距离bh，第四入口710与第三入口710相距10英尺的距离bi，并且第五入口710与第四入口710相距10英尺2英寸的距离bj。在缓冲剂储存区域700中包含两个平台702。每个平台702包含框架构件730，所述框架构件730具有3英寸宽和2英寸高的截面。平台702间隔开6英尺5/8英寸的距离bk。建筑物支持柱732、734、736在地面716与天花板718之间延伸。第一支持柱732与第二支持柱734之间的距离bl是27英尺2.5英寸。第二支持柱734与第三支持柱736之间的距离bm是27英尺2.5英寸。第二支持柱734的宽度bn是3英尺10英寸。第二支持柱的面738与平台702的前边缘相距6英尺7英寸的距离bo。关于图4a-7c所讨论的尺寸是示例性的，并且可以改变以适应特定的设施。定义除非另有定义，本文所使用的全部技术和科学术语具有本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。尽管与本文中所描述的方法和材料相似或等同的任意方法和材料可以在本公开实践和/或测试中采用，但是本文中描述了优选的材料和方法。在描述和要求保护本公开中，在提供了定义的情况下，以下术语将根据其定义的方式使用。还应理解本文中所使用的术语仅出于描述特定实施方案的目的，并且不意图限制。本文中使用了冠词“一种”和“一个”来指示一个/种或多于一个/种(即，至少一个/种)冠词的语法宾语。作为示例，“细胞”可以指一个/种细胞或多于一个/种细胞。如本文所用，“处理溶液”是指生物制品制造过程中所使用的缓冲剂或培养基，包含上游和下游过程中使用的溶液。如本文所用，下游处理剂(dpa)是用于对靶分子进行的下游处理操作的生物相容溶液，其含有作用于生物反应器的产物或相关组分(例如，生物反应器中培养的细胞)的一种或多种成分。适当dpa的示例包含例如缓冲盐水溶液，诸如hbss、pbs、tris、乙酸或相似物。因此，如本文所用dpa与培养基不同，所述培养基确实支持细胞的生长和分裂。本公开的dpa提供生理学等同的理化环境，而不支持细胞生长和/或分裂。dpa通常在生物制品制造的下游处理中使用，并且迄今为止以与生产批次(productionbatch)临时紧密相关的gmp方式生产。除了增加时间和成本之外，这导致过程中材料在完成长前导测试和/或审查以及发布gmp记录(批次记录)之前被使用，因为此类过程中材料被“有风险”使用。使用未发布的(unreleased)材料冒着如下可能性的风险，即可以在使用将向产品质量引入风险的过程中间体之后揭开gmp错误，这些可能包含仪器校准错误等。由于缓冲剂可具有由天数日期指定的用途并且囤积缓冲剂占据大量的gmp处理空间，使用此方法。如本文所用，术语“生物负荷”是指组成(例如，固体或液体)中和/或(多个)物件的表面(例如，外部和/或内部表面)上存在的自我复制生物污染物的水平。例如，生物负荷可以指含有染色质(chromat)的组成中存在的自我复制生物污染物，术语“生物负荷”是本领域已知的，并且指组成(例如，固体或液体)中和/或(多个)物件的表面(例如，外部和/或内部表面)上存在的自我复制生物污染物的水平。在其他示例中，生物负荷可以指层析柱的内表面上和/或层析柱内的层析树脂内的自我复制生物污染物(例如，层析柱的内表面上的生物污染物，以及层析柱内的填充层析树脂中的生物污染物)。生物负荷还可以指液体(例如，本文中描述的任意方法或过程中使用的缓冲剂)内存在的自我复制生物污染物。自我复制生物污染物的非限制性示例可以是细菌(例如，革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌，或细菌孢子)、分支杆菌(mycobacteria)、病毒(例如，囊病毒(vesivirus)、卡什谷病毒(cachevalleyvirus)、细小病毒(parvovirus)、疱疹病毒(herpesvirus)以及布尼亚病毒(bunyavirus))、寄生物、真菌、酵母，以及原生动物(protozoa)。如本文所用，术语“内源”是指来自生物体、细胞、组织或系统或在生物体、细胞、组织或系统内部天然产生的任何材料。如本文所用，术语“外源”是指导入生物体、细胞、组织或系统或在生物体、细胞、组织或系统外部产生的任何材料。因此，“外源核酸”是指导入生物体、细胞、组织或系统或在生物体、细胞、组织或系统外部产生的核酸。在一个实施方案中，外源核酸的序列不是在导入有外源核酸的生物体、细胞、组织或系统内部天然产生的，或者不能在导入有外源核酸的生物体、细胞、组织或系统内部天然找到的。在一个实施方案中，外源核酸的序列是非天然存在的序列，或编码非天然存在的产物。如本文所用，术语“异源”是指当导入来自不同物种的生物体、细胞、组织或系统时来自一种物种的任何物质。如本文所用，术语“核酸”、“多核苷酸”或“核酸分子”可互换使用，并且指单链或双链形式的脱氧核糖核酸(dna)或核糖核酸(rna)、或其dna或rna的组合、和其聚合物。术语“核酸”包括但不限于基因、cdna或mrna。在一个实施方案中，核酸分子是合成的(例如，化学合成的或人工的)或重组的。除非特别限定，否则该术语包括含有具有与参考核酸相似的结合特性并且以与天然或非天然存在的核苷酸相似的方式代谢的天然核苷酸的类似物或衍生物的分子。除非另有指示，否则特定核酸序列还隐含地包括其保守修饰的变体(例如，简并密码子取代)、等位基因、直向同源物、snp和互补序列以及明确指出的序列。具体地，简并密码子取代可以通过产生其中一个或多个选定(或所有)密码子的第三位置被混合碱基和/或脱氧肌苷残基取代的序列来实现(batzer等，nucleicacidres.19：5081(1991)；ohtsuka等，j.biol.chem.260：2605-2608(1985)；和rossolini等，mol.cell.probes8：91-98(1994))。如本文所用，术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”用于指由通过肽键或通过肽键以外的手段共价连接的氨基酸残基构成的化合物。蛋白质或肽必须含有至少两个氨基酸，并且对可以包含蛋白质或肽序列的最大氨基酸数目没有限制。在一个实施方案中，蛋白质可以包含超过一种，例如，两种、三种、四种、五种或更多种多肽，其中每种多肽通过共价或非共价键/相互作用与另一种多肽结合。多肽包括任何肽或蛋白质，其包含两个或多个通过肽键或通过肽键以外的方式彼此连接的氨基酸。如本文所用，该术语是指短链(其在本领域中通常也称为例如肽、寡肽和寡聚体)和较长的链(其通常在本领域中一般称为蛋白质，其中存在有多种类型)两者。“多肽”包括例如生物活性片段、基本上同源的多肽、寡肽、同二聚体、异二聚体、多肽的变体、修饰的多肽，衍生物、类似物，融合蛋白等。如本文所用，“产物”是指由经过修饰或工程化改造以产生产物的细胞产生，例如表达的分子，例如蛋白质、核酸、多肽或其任何杂合物。在一个实施方案中，产物是天然存在的产物或非天然存在的产物，例如合成产物。在一个实施方案中，产物的一部分是天然存在的，而产物的另一部分是非天然存在的。在一个实施方案中，产物是多肽，例如重组多肽。在一个实施方案中，该产物适用于诊断或临床前使用。在另一个实施方案中，该产物适用于治疗用途，例如用于治疗疾病。在一个实施方案中，产物选自表1或表2。在一个实施方案中，经修饰的或工程化的细胞包含控制表达或编码产物的外源核酸。在其他实施方案中，经修饰或工程化的细胞包含控制细胞中产物的表达或构建的其他分子，例如其不是核酸。在一个实施方案中，细胞的修饰包括导入外源核酸，所述外源核酸包含控制或改变(例如，增加)内源核酸序列(例如内源基因)表达的核酸序列。在此类实施方案中，经修饰的细胞产生由细胞天然或内源表达的内源多肽产物，但是与未修饰的细胞相比，例如与多肽的内源产生或质量相比修饰增加产物的产生和/或产物的质量。在另一个实施方案中，细胞的修饰包括导入编码如本文所述的重组多肽的外源核酸。在此类实施方案中，经修饰的细胞产生可以是天然存在的或非天然存在的重组多肽产物。在此类实施方案中，经修饰的细胞产生重组多肽产物，其也可以由细胞内源表达或不由细胞内源表达。在重组多肽产物也由细胞内源表达的实施方案中，与未修饰的细胞相比，例如，与多肽的内源产生或质量相比，修饰增加产物的产生和/或质量。如本文所用，“重组多肽”或“重组蛋白”是指可以由本文所述的细胞产生的多肽。重组多肽是其中编码多肽的序列的至少一个核苷酸或控制多肽表达的序列的至少一个核苷酸通过(细胞或前体细胞)遗传工程形成的多肽。例如，改变至少一个核苷酸，例如，将其导入细胞中或者它是遗传工程化重排的产物。在一个实施方案中，重组多肽的序列不与多肽或蛋白质的天然存在的同种型不同。在一个实施方案中，重组多肽的氨基酸序列不同于多肽或蛋白质的天然存在的同种型的序列。在一个实施方案中，重组多肽和细胞来自相同物种。在一个实施方案中，重组多肽对细胞是内源的，换言之，细胞来自第一物种，并且重组多肽对于所述第一物种是天然的。在一个实施方案中，重组多肽的氨基酸序列与由细胞的内源基因组编码的多肽相同或基本上相同，或相差不超过1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、或99％。在一个实施方案中，重组多肽和细胞来自不同的物种，例如，重组多肽是人多肽，而细胞是非人细胞，例如啮齿类细胞，例如cho，或昆虫细胞。在一个实施方案中，重组多肽对细胞是外源的，换言之，细胞来自第一物种，而重组多肽来自第二物种。在一个实施方案中，多肽是合成多肽。在一个实施方案中，多肽衍生自非天然存在的来源。在一个实施方案中，重组多肽是人多肽或蛋白质，其在氨基酸序列上不与人多肽或蛋白质的天然存在的同种型不同。在一个实施方案中，重组多肽与人多肽或蛋白质的天然存在的同种型在不超过1、2、3、4、5、10、15或20个氨基酸残基处不同。在一个实施方案中，重组多肽与人多肽的天然存在的同种型相差其氨基酸残基的不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、或15％。“获取”当该术语在本文中使用时指通过“直接获取”或“间接获取”物理实体或值获得物理实体或值(例如，数值)。“直接获取”指进行获得物理实体或值的过程(例如，进行合成或分析方法)。“间接获取”指从另一方或来源(例如，直接获取物理实体或值的第三方实验室)接收物理实体或值。直接获取物理实体包括进行某一过程，所述过程包括在物理物质(例如，初始原料)中的物理变化。示例性变化包括从两种或多种初始原料制备物理实体，剪切或破碎物质，分离或纯化物质，将两种或多种单独的实体组合成混合物，进行包括破坏或形成共价或非共价键的化学反应。直接获取值包括进行某一过程，所述过程包括在样品或另一物质中的物理变化，例如进行分析过程，其包括在物质(例如，样品、分析物或试剂)中的物理变化(在本申请中有时称为“物理分析”)，进行分析方法，例如包括下述中的一种或多种的方法：从另一物质中分离或纯化物质，例如分析物或者其片段或其他衍生物；将分析物或者其片段或其他衍生物与另一物质(例如，缓冲剂、溶剂或反应物)组合；或者改变分析物或者其片段或其他衍生物的结构，例如通过在分析物的第一和第二原子之间破坏或形成共价或非共价键；或者通过改变试剂或者其片段或其他衍生物的结构，例如通过在试剂的第一和第二原子之间破坏或形成共价或非共价键。“获取样品”当该术语在本文中使用时指通过“直接获取”或“间接获取”样品获得样品(例如，组织样品或核酸样品)。“直接获取样品”指进行获得样品的过程(例如，进行物理方法如手术或提取)。“间接获取样品”指从另一方或来源(例如，直接获取样品的第三方实验室)接收样品。直接获取样品包括进行某一过程，所述过程包括在物理物质中的物理变化，例如初始原料，如组织，例如在人患者中的组织或此前已从患者中分离的组织。示例性变化包括从初始原料制备物理实体，解剖或刮取组织；分离或纯化物质(例如，组织样品或核酸样品)；将两种或多种单独的实体组合成混合物；进行包括破坏或形成共价或非共价键的化学反应。直接获取样品包括进行某一过程，所述过程包括在样品或另一物质中的物理变化，例如，如上文所述的。本文引用的每篇专利、专利申请和出版物的公开内容均通过引用整体并入本文。虽然已经参考具体方面公开了本发明，但是显而易见的是，在不脱离本发明的真实精神和范围的情况下，本领域技术人员可以设计出本发明的其他方面和变化。所附权利要求书意图解释为包括所有这些方面和等同变化。层析和光谱法技术处理溶液可以与层析和/或光谱方法一起使用，以进一步纯化，或评价溶液的纯度。适于在本文中所描述的方法中使用的1维(1d)层析方法对本领域技术人员已知，并且包含例如亲和层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、反相层析、疏水相互作用层析。在一些实施方案中，一维层析方法是hplc反相层析。层析可以包含高效液体层析(hplc)、气体层析(gc)、毛细管电泳、离子迁移率。还见于例如processscalepurificationofantibodies，uwegottschalk2011johnwiley&sonsisbn：1118210743；antibodies第1卷productionandpurification，g.subramanian2013springerscience&businessmedia；basicmethodsinantibodyproductionandcharacterization，garyc.howard2000crcpress。附加的示例性层析方法包含但不限于强阴离子交换层析(sax)、液体层析(lc)、高效液体层析(hplc)、超高效液体层析(uplc)、薄层层析(tlc)、酰胺柱层析，以及其组合。示例性质谱法(ms)包含但不限于串联ms、lc-ms、lc-ms/ms、基质辅助激光解吸电离质谱法(maldi-ms)、傅里叶变换质谱法(ftms)、离子迁移率分离与质谱法(ims-ms)、电子迁移解离(etd-ms)，以及其组合。示例性电泳方法包含但不限于毛细管电泳(ce)、ce-ms、凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、丙烯酰胺凝胶电泳、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)，然后是使用识别特定聚糖结构的抗体的western印迹法(westernblotting)，以及其组合。示例性核磁共振(nmr)包含但不限于一维nmr(1d-nmr)、二维nmr(2d-nmr)、关联光谱法磁角旋转nmr(cosy-nmr)、总关联光谱法nmr(tocsy-nmr)、异核单量子相干nmr(hsqc-nmr)、异核多量子相干(hmqc-nmr)、旋转核奥弗豪斯(overhauser)效应光谱法nmr(roesy-nmr)、核奥弗豪斯(overhauser)效应光谱法(noesy-nmr)，以及其组合。适当的光谱技术包含例如拉曼光谱法。拉曼光谱法是在法医科学的不同科目之中逐渐流行的技术。其当今的用途的一些示例涉及以下各项的鉴定：药物(hodges等，"theuseoffouriertransformramanspectroscopyinforensicidentificationofillicitdrugsandexplosives,"molecularspectroscopy46：303-307(1990))、唇膏(rodger等，"thein-situanalysisoflipsticksbysurfaceenhancedresonanceramanscattering,"analyst1823-1826(1998))，和纤维(thomas等，"ramanspectroscopyandforensicanalysisofblack/greyandbluecottonfibrespart1：investigationofeffectsofvaryinglaserwavelength,"forensicsci.int.152：189-197(2005))，以及涂料(suzuki等，"insituidentificationandanalysisofautomotivepaintpigmentsusinglinesegmentexcitationramanspectroscopy：i.inorganictopcoatpigments,"j.forensicsci.46：1053-1069(2001))和墨(mazzella等，"ramanspectroscopyofbluegelpeninks,"forensicsci.int.152：241-247(2005))分析。拉曼光谱学背后的理论是基于固体，液体或气体样品对低强度、非破坏性激光的非弹性散射。需要很少的样品准备或不需要样品准备，并且测试材料的需要量可以低至若干皮克(picogram)或飞升(femtoliter)(分别是10-12克或10-15升)。典型的拉曼光谱由若干窄带构成，并且提供材料的独特的振动特性(grasselli等，"chemicalapplicationsoframanspectroscopy,"newyork：johnwiley&sons(1981))。与红外(ir)吸收光谱法不同，另一种类型的振动光谱法，拉曼光谱法展现出来自水的很少的干扰(grasselli等，"chemicalapplicationsoframanspectroscopy,"newyork：johnwiley&sons(1981))，并且那使它成为用于分析体液和它们的痕迹的良好技术。恰当的拉曼光谱测量不损坏样品。渍(stain)或棉签(swab)可以就地测量并仍可用于进一步在实验室中用于dna分析，而那对于法医学应用非常重要。便携式拉曼光谱仪的设计现已实现(yan等，"surface-enhancedramanscatteringdetectionofchemicalandbiologicalagentsusingportableramanintegratedtunablesensor,"sensorsandactuatorsb.6(2007)；eckenrode等，"portableramanspectroscopysystemsforfieldanalysis,"forensicsciencecommunications3：(2001))，其会导致在犯罪现场进行鉴定的能力。适于与本公开结合使用的拉曼光谱法的类型包含但不限于常规拉曼光谱法、拉曼微光谱法、近场拉曼光谱法，包含但不限于针尖增强(tip-enhanced)拉曼光谱法、表面增强拉曼光谱法(sers)和表面增强共振拉曼光谱法(serrs)、相干反斯托克斯(coherentanti-stokesramanspectroscopy)拉曼光谱法(cars)等。可以使用斯托克斯(stokes)和反斯托克斯(anti-stokes)拉曼光谱法两者。在一些实施方案中，使用本文中所描述的层析或光谱方法在一个或多个生物处理中间体上进行快速非侵入式测试。在一些实施方案中，使用拉曼光谱法进行快速测试。质谱法适于在本文中所描述的方法中使用的质谱法方法对本领域技术人员已知，并且包含例如电喷雾电离(electrosprayionization)ms、基质辅助激光解吸/电离(matrix-assistedlaserdesportion/ionization)ms、飞行时间(timeofflight)ms、傅里叶变换离子回旋共振(fourier-transformioncyclotronresonance)ms、四极飞行时间(quadrupoletimeofflight)ms、线性四极(linearquadrupole)、四极离子阱(quadrupoleiontrap)ms、轨道阱(orbitrap)、圆柱离子阱(cylindricaliontrap)、三维离子阱(threedimensionaliontrap)、四极滤质器(quadrupolemassfilter)、串联质谱法。在一些实施方案中，质谱是串联质谱法。还见于例如，proteinmassspectrometry，julianwhitelegge2008，elsevier；proteinsequencingandidentificationusingtandemmassspectrometry，michaelkinter2005，johnwiley&sons；characterizationofproteintherapeuticsusingmassspectrometry，guodongchen2014，springerscience&businessmedia。生产参数本文中所描述的方法包含确定和/或选择生产用于糖蛋白制剂的一种或多种参数，使得可以在生产糖蛋白制剂时获得预选择的聚糖的一个或多个性质。通过使用关于各种生产参数对糖基化的效果的信息，可以在生产糖蛋白制剂之前选择与期望的聚糖性质正关联的生产参数。如本文所用的生产参数是生产工艺中的参数或元素。可以选择的生产参数包含例如用来生产糖蛋白制剂的细胞或细胞系、培养培养基、培养工艺或生物反应器变量(例如，分批、给料分批(fed-batch)，或灌注(perfusion))、纯化工艺以及糖蛋白制剂的配制剂。初级生产参数包含：1)宿主的类型；2)宿主的遗传学；3)培养基类型；4)发酵平台；5)纯化步骤；以及6)配制剂。如本文所用，次级生产参数是在每个初级生产参数内可调整或可变的生产参数。示例包含：基于期望的聚糖性质选择宿主亚克隆；组成性或诱导型的宿主基因水平调节；引入新基因或启动子原件；培养基添加剂(例如表iv上的部分列表)；理化生长性质；生长容器类型(例如生物反应器类型，t烧瓶)；细胞密度；细胞周期；具有期望的聚糖类型的产物的富集(例如通过凝集素或抗体介导的富集(antibody-mediatedenrichment)、离子交换层析、ce，或相似的方法)；或本领域技术人员清楚的相似的次级生产参数。培养基和缓冲剂本文中所描述的方法可以包含确定和/或选择培养基组分和/或培养基组分的浓度，其与期望的聚糖的一个或多个性质具有正相关性。根据培养条件，培养基组分可以在糖蛋白生产中添加，或在糖蛋白生产过程内施用或在有变化的培养基时进行。培养基组分包含直接添加到培养物的组分以及作为细胞培养物的副产物的组分。培养基组分包含例如缓冲剂、氨基酸内容物、维生素内容物、盐内容物、矿物内容物、血清内容物、碳源内容物、脂质内容物、核酸内容物、激素内容物、微量元素内容物、氨内容物、辅因子内容物、指示剂内容物、小分子内容物、水解物内容物以及酶调节剂内容物。以下表1提供了可以选择的各种培养基组分的示例。表1示例性培养基组分示例性缓冲剂包含tris、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐(cacodylate)、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺(glycinamide)、乙酰氨基甘氨酸(acetamidoglycine)。可选地存在的矿物质包含铋、硼、钙、氯、铬、钴、铜、氟、碘、铁、镁、锰、钼、镍、磷、钾、铷、硒、硅、钠、锶、硫、碲、钛、钨、钒和锌。示例性盐和矿物质包含cacl2(无水)、cuso45h2o、fe(no3)9h2o、kcl、kno3、kh2po4、mgso4(无水)、nacl、nah2po4h2o、nahco3、na2se3(无水)、znso47h2o；亚油酸、硫辛酸、d-葡萄糖、次黄嘌呤2na、酚红、腐胺2hcl、丙酮酸钠、胸苷、丙酮酸、琥珀酸钠、琥珀酸、琥珀酸na六水合物、谷胱甘肽(还原)、对氨基苯甲酸(paba)、亚油酸甲酯、细菌用蛋白胨g、腺苷、胞苷、鸟苷、2'-脱氧腺苷hcl、2'-脱氧胞苷hcl、2'-脱氧鸟苷和尿苷。当期望的聚糖特性是降低的岩藻糖基化(fucosylation)时，生产参数可以包含在锰存在下(例如，存在约0.1μm至50μm浓度的锰)培养细胞(例如，cho细胞，例如，dhfr缺陷cho细胞。还可以例如通过在约350至500mosm的重量摩尔渗透压浓度(osmolality)下培养细胞(例如，cho细胞，例如，dhfr缺陷cho细胞)而获得降低的岩藻糖基化。重量摩尔渗透压浓度可以通过向培养基添加盐或当在生产期间发生蒸发时作为副产物产生盐而调节。生产参数还可以包含理化参数。此类条件可以包含温度、ph、重量摩尔渗透压浓度、剪切力或搅拌速度、氧化、spurge率、生长容器、切向流、do、co2、氮气、给料分批、还原氧化(redox)、细胞密度和补料策略。在以下表2中提供可以选择的理化参数的示例。表2示例性理化参数系统可以至少部分基于其与期望的聚糖的一个或多个性质的关联性选择。细胞可以例如作为分批、给料分批、灌注或连续培养而生长。可以选择的生产参数包含例如添加或移除培养基，包含何时(培养时间期间的早、中或晚期)和多久收取培养基；提高或降低搅拌细胞培养物的速度；提高或降低培养细胞的温度；添加或移除培养基，使得调整培养物密度；选择细胞培养开始或停止的时间；以及选择改变细胞培养参数的时间。此类参数可以针对分批、给料分批、灌注和连续培养条件中任一种进行选择。大量的烧瓶、瓶、反应器，以及控制器允许生产和细胞培养系统的规模化。附加的生产参数对本领域技术人员已知，参见例如，antibodyexpressionandproduction(2011)mohamedal-rubeai编；springerpublishing。产物以及其编码核酸本文中提供了用于鉴定、选择或制备能够生产产物的细胞或细胞系的方法。本公开内容包括的产物包括但不限于能在细胞中产生，例如在细胞中表达的分子、核酸、多肽(例如，重组多肽，例如抗体、双特异性抗体、多特异性抗体)或其杂合体。在一些实施方案中，对细胞进行工程化改造或修饰以生产产物。此类修饰包括引入控制或导致产物生产的分子。例如，通过引入编码多肽(例如，重组多肽)的外源性核酸对细胞进行修饰，并且在适于生产(例如，表达和分泌)多肽(例如，重组多肽)的条件下培养细胞。在实施方案中，通过本文所述的方法鉴定、选择或产生的细胞或细胞系产生可用于治疗医疗病况、病症或疾病的产物(例如，重组多肽)。医疗病况、病症或疾病的实例包括但不限于代谢疾病或病症(例如，代谢酶缺乏)、内分泌病症(例如，激素缺乏)、止血、血栓形成、造血病症、肺部病症、胃肠道病症、免疫调节(例如，免疫缺陷)、不育、移植、癌症和感染性疾病。在一些实施方案中，产物是外源性蛋白，例如不由细胞天然表达的蛋白。产物可以是治疗性蛋白或诊断性蛋白，例如用于药物筛选。治疗性或诊断性蛋白可以是抗体分子，例如抗体或抗体片段、融合蛋白、激素、细胞因子、生长因子、酶、糖蛋白、脂蛋白、受体蛋白、治疗性肽或者这些中任意一个的结构和/或功能片段或杂合体。在一个实施方案中，产物(例如，重组多肽)是抗体分子。本文中包含的产物包括诊断性和治疗性抗体分子。诊断性抗体分子包括用于成像技术的抗体(例如，单克隆抗体或其抗体片段)。治疗性抗体分子适于向受试者施用，例如，用于治疗或预防疾病或病症。抗体分子是源自与抗原特异性结合的免疫球蛋白分子的蛋白或多肽序列。在一个实施方案中，抗体分子是全长抗体或抗体片段。抗体和多形式蛋白可以是多克隆或单克隆、多链或单链或者完整的免疫球蛋白，并且可以源自天然来源或重组来源。抗体可以是免疫球蛋白分子的四聚体。在一个实施方案中，抗体是单克隆抗体。抗体可以是人抗体或人源化抗体。在一个实施方案中，抗体是iga、igg、igd或ige抗体。在一个实施方案中，抗体是igg1、igg2、igg3或igg4抗体。“抗体片段”指完整抗体的至少一部分或者其重组变体，以及指抗原结合结构域(例如，完整抗体的抗原决定可变区)，其足以赋予抗体片段对靶物(如抗原)的识别和特异性结合。抗体片段的实例包括但不限于fab、fab'、f(ab')2、fv片段、scfv抗体片段、线性抗体、单域抗体如sdab(vl或vh)、骆驼科(camelid)vhh结构域、由抗体片段形成的多特异性抗体(如包含在铰链区处通过二硫化物桥连接的两个fab片段的二价片段)以及抗体的分离的cdr或其他表位结合片段。还可以将抗原结合片段引入单域抗体、大抗体(maxibodies)、微抗体(minibodies)、纳米抗体(nanobodies)、胞内抗体(intrabodies)、双抗体(diabodies)、三抗体(trabodies)、四抗体(tetrabodies)、v-nar和双-scfv(参见例如hollinger和hudson，naturebiotechnology23：1126-1136，2005)。还可以将抗原结合片段移植入基于多肽如iii型纤连蛋白(fn3)的支架中(参见美国专利号：6,703,199，其描述了纤连蛋白多肽微抗体)。在以下表3和4中提供了使用本文中所述的方法或细胞中生产的示例性产物(例如，多肽，例如重组多肽)。表3在另一个实施方案中，产物是双特异性分子，例如双特异性抗体。如本文所述的，双特异性分子包括能够与两个或多个不同的抗原或靶物结合的分子。在一个实施方案中，双特异性分子包括抗体片段。在一个实施方案中，双特异性分子包括双特异性抗体、双特异性抗体融合蛋白或双特异性抗体缀合物、双特异性t细胞衔接器(engager)(bite)分子、双亲和性再靶向(dart)分子、双作用fab(daf)分子、纳米抗体或者产生具有识别或结合两个不同抗原的能力的分子的抗体片段的其他重排。表4：示例性产物，例如双特异性分子其他示例性治疗或诊断蛋白质包括但不限于leader等,“proteintherapeutics:asummaryandpharmacologicalclassification”,naturereviewsdrugdiscovery,2008,7:21-39(通过引用并入本文)的表1-10中描述的任何蛋白质；或本文所述的重组多肽的任何缀合物、变体、类似物或功能片段。其他重组产物包括非抗体支架或替代蛋白质支架，例如但不限于：darpins、affibodies和adnectins。可以工程化改造此类非抗体支架或替代蛋白质支架以识别或结合一种或两种或更多种，例如1、2、3、4或5种或更多种不同的靶物或抗原。本文还提供了核酸，例如外源核酸，其编码产物，例如多肽，例如本文所述的重组多肽。编码期望的重组多肽的核酸序列可以使用本领域已知的重组方法获得，诸如例如通过从表达期望的核酸序列(例如基因)的细胞中筛选文库，通过从已知包含核酸序列的载体中获得该核酸序列，或通过使用标准技术直接从含有核酸序列的细胞和组织中分离。或者，编码重组多肽的核酸可以合成产生，而不是克隆。重组dna技术和工艺是高度先进的并且在本领域中是完善建立的。因此，具有本文所述的重组多肽的氨基酸序列知识的普通技术人员可以容易地设想或产生编码重组多肽的核酸序列。在一些实施方案中，外源核酸控制由宿主细胞内源表达的产物的表达。在此类实施方案中，外源核酸包含一种或多种增加内源产物表达的核酸序列(在本文中也称为“内源产物反式激活序列”)。例如，增加内源产物表达的核酸序列包含组成型活性启动子或更强的启动子，例如增加期望位点处的转录，例如增加期望内源基因产物的表达。在导入包含内源产物反式激活序列的外源核酸后，将所述外源核酸整合到细胞的染色体基因组中，例如，在编码内源产物的基因组序列附近的预选位置处，使得内源产物反式激活序列增加期望内源产物的反式激活或表达。用于修饰细胞，例如导入外源核酸以增加内源产物的表达的其它方法记载于例如美国专利号5,272,071，其通过引用整体并入本文。本文描述的产物的表达通常通过将编码重组多肽或其部分的核酸可操作地连接到启动子上，并将构建体掺入表达载体中来实现。载体可适用于复制和整合真核生物或原核生物。典型的克隆载体含有其他调节元件，例如转录和翻译终止子、起始序列和可用于调节期望的核酸序列表达的启动子。可以将编码产物(例如重组多肽)或包含可以控制内源产物表达的核酸序列的本文描述的核酸序列克隆到许多类型的载体中。例如，可以将核酸克隆到载体中，所述载体包括但不限于质粒、噬菌粒、噬菌体衍生物、动物病毒和粘粒。特别感兴趣的载体包括表达载体、复制载体、探针生成载体和测序载体。在实施方案中，表达载体可以以病毒载体的形式提供给细胞。病毒载体技术是本领域公知的，并且描述于例如sambrook等，2012，molecularcloning:alaboratorymanual,第1-4卷,coldspringharborpress,ny)，以及其他病毒学和分子生物学手册。可用作载体的病毒包括但不限于逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒、疱疹病毒和慢病毒。通常，合适的载体含有在至少一种生物体中有功能的复制起点、启动子序列、方便的限制性内切核酸酶位点和一种或多种选择标志物(例如，wo01/96584；wo01/29058；和美国专利号6,326,193)。衍生自病毒的载体是实现长期基因转移的合适工具，因为它们允许转基因的长期、稳定整合及其在子细胞中的繁殖。载体还可以包括例如促进分泌的信号序列、多腺苷酸化信号和转录终止子(例如，来自牛生长激素(bgh)基因)，允许在原核生物中游离型复制和复制的元件(例如sv40起源和cole1或本领域已知的其他元件)和/或允许选择的元件，例如选择标志物或报告基因。在一个实施方案中，包含编码多肽(例如重组多肽)的核酸序列的载体还包含启动子序列，其负责募集聚合酶以使得能够转录起始以表达多肽，例如重组多肽。在一个实施方案中，适合于本文所述方法的启动子序列通常与增强子结合，以驱动大量转录并且因此递送大拷贝的靶外源mrna。在一个实施方案中，启动子包含巨细胞病毒(cmv)主要立即早期启动子(chernajovsky,moryetal.1984)，衍生自其同名病毒或自其衍生的启动子。已经成功采用几种其它不太常见的病毒启动子以在表达载体中纳入后驱动转录，包括劳斯肉瘤病毒长末端重复(rsv-ltr)和moloney鼠白血病病毒(momlv)ltr(papadakis,nicklinetal.2004)。在另一个实施方案中，可以利用特定的内源哺乳动物启动子来驱动感兴趣基因的组成性转录(pontiller,grossetal.2008)。cho特异性中国仓鼠延长因子1-α(chef1α)启动子已经提供了基于病毒的序列的高产备选(deer,allison2004)。在启动子外，本文中所述的载体还包含上文描述的增强子区；核心启动子附近的特定核苷酸基序区，其可以募集转录因子以调节转录速率(riethoven2010)。与启动子序列类似，这些区域经常衍生自病毒并且在启动子序列内涵盖，诸如cmv和sv40增强子序列，或者可以包括在内，诸如腺病毒衍生的序列(gaillet,gilbertetal.2007)。在一个实施方案中，本文所述的包含编码产物(例如多肽，例如重组多肽)的核酸序列的载体还包含编码选择标志物的核酸序列。在一个实施方案中，选择标志物包含谷氨酰胺合酶(gs)；二氢叶酸还原酶(dhfr)，例如赋予对甲氨蝶呤(mtx)的抗性的酶；或抗生素标志物，例如赋予抗生素抗性的酶，例如：潮霉素、新霉素(g418)、zeocin、嘌呤霉素或杀稻瘟素。在另一个实施方案中，选择标志物包含selexis选择系统(例如，suretechnologyplatformtm和selexisgeneticelementstm，可从selexissa商购)或catalant选择系统或与之兼容。在一个实施方案中，包含编码本文所述重组产物的核酸序列的载体包含可用于鉴定一种或多种细胞的选择标志物，所述细胞包含编码本文所述重组产物的核酸。在另一个实施方案中，选择标志物可用于鉴定包含编码重组产物的核酸序列整合到基因组中的一种或多种细胞，如本文所述。已整合编码重组蛋白的核酸序列的一种或多种细胞的鉴定可以用于选择和工程化改造稳定表达产物的细胞或细胞系。适合于使用的载体是商品化的，并且包括与gsexpressionsystemtm、gsxceedtmgeneexpressionsystem、或可购自lonzabiologics,inc的chok1sv技术相关的载体，例如fan等,pharm.bioprocess.(2013)；1(5):487-502(其通过引用完整并入本文)中描述的载体。gs表达载体包含gs基因或其功能片段(例如，gs小基因)，和一个或多个，例如1、2或3个或更多个用于表达感兴趣基因的高效转录盒，例如，编码本文所述重组多肽的核酸。gs小基因包含基因组chogs基因的内含子6，例如，由基因组chogs基因的内含子6组成。在一个实施方案中，gs载体包含与sv40l启动子和一个或两个polya信号可操作连接的gs基因。在另一个实施方案中，gs载体包含与sv40e启动子、sv40剪接和多腺苷酸化信号可操作连接的gs基因。在此类实施方案中，例如用于表达感兴趣基因或本文所述重组多肽的转录盒包括hcmv-mie启动子和来自包括第一内含子的hcmv-mie基因的5'非翻译序列。可以基于gs表达载体构建其他载体，例如，其中用其他选择标志物取代本文所述表达载体中的gs基因。适用于本文所述方法的载体包括但不限于其他商品化载体，诸如pcdna3.1/zeo,pcdna3.1/cat,pcdna3.3topo(thermofisher,以前为invitrogen)；ptarget,halotag(promega)；puc57(genscript)；pflag-cmv(sigma-aldrich)；pcmv6(origene)；pee12或pee14(lonzabiologics),或pbk-cmv/pcmv-3tag-7/pcmv-tag2b(stratagene)。细胞和细胞培养在实施方案中，细胞是哺乳动物细胞。在其他实施方案中，细胞是哺乳动物细胞以外的细胞。在一个实施方案中，细胞是小鼠、大鼠、中国仓鼠、叙利亚仓鼠、猴、猿、狗、马、雪貂或猫的。在实施方案中，细胞是哺乳动物细胞，例如人细胞或啮齿类细胞，例如仓鼠细胞、小鼠细胞或大鼠细胞。在另一个实施方案中，细胞来自鸭、鹦鹉、鱼、昆虫、植物、真菌或酵母。在一个实施方案中，细胞是古细菌。在一个实施方案中，细胞是放线菌属(actinobacteria)物种，例如结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis)。在一个实施方案中，细胞是中国仓鼠卵巢(cho)细胞。在一个实施方案中，细胞是cho-k1细胞、cho-k1sv细胞、dg44cho细胞、duxb11cho细胞、chos、chogs敲除细胞、chofut8gs敲除细胞、chozn或cho来源的细胞。chogs敲除细胞(例如，gsko细胞)是例如cho-k1svgs敲除细胞(lonzabiologics，inc.)。chofut8敲除细胞是例如chok1sv(lonzabiologics，inc.)。在一个实施方案中，细胞是中国仓鼠卵巢(cho)细胞。在一个实施方案中，细胞是cho-k1细胞、cho-k1sv细胞、dg44cho细胞、duxb11cho细胞、chos、chogs敲除细胞、chofut8gs敲除细胞、chozn或cho衍生细胞。chogs敲除细胞(例如，gsko细胞)是例如cho-k1svgs敲除细胞(lonzabiologics，inc.)。chofut8敲除细胞是例如chok1sv(lonzabiologics，inc.)。在另一个实施方案中，细胞是heia、hek293、ht1080、h9、hepg2、mcf7、jurkat、nih3t3、pc12、per.c6、bhk(幼仓鼠肾细胞)、vero、sp2/0、ns0、yb2/0、y0、eb66、c127、l细胞、cos，例如cos1和cos7、qc1-3、chok1、chok1sv、potelligentchok1sv、chogs敲除、chok1svgs-ko、chos、chodg44、chodxb11、和chozn，或任何由其衍生的细胞。在一个实施方案中，细胞是干细胞。在一个实施方案中，细胞是本文所述任何细胞的分化形式。在一个实施方案中，细胞是衍生自培养中的任何原代细胞的细胞。在一个实施方案中，细胞是本文所述的任何一种细胞，其包含编码重组多肽的外源核酸，例如，表达重组多肽，例如选自表5或3的重组多肽。在一个实施方案中，细胞培养物作为分批培养、补料分批培养、吸出和填充培养(drawandfillculture)或连续培养进行。在一个实施方案中，细胞培养物是悬浮培养物。在一个实施方案中，将细胞或细胞培养物置于体内以表达重组多肽，例如置于模型生物体或人类受试者中。在一个实施方案中，培养基不含血清。无血清和无蛋白质的培养基是商品化的，例如lonzabiologics。适用于哺乳动物细胞系的培养基和培养方法是本领域公知的，如例如记载于美国专利号5,633,162。用于实验室烧瓶或低密度细胞培养并适应特定细胞类型需要的标准细胞培养基的实例是例如：roswellparkmemorialinstitute(rpmi)1640培养基(morre,g.,thejournaloftheamericanmedicalassociation,199,p.519f.1967)、l-15培养基(leibovitz,a.等,amer.j.ofhygiene,78,1p.173ff,1963)、dulbecco改良eagle培养基(dmem)、eagle最小必需培养基(mem)、hamf12培养基(ham,r.等,proc.natl.acad.sc.53,p288ff.1965)或缺乏清蛋白、转铁蛋白和卵磷脂的iscoves改良dmem(iscoves等,j.exp.med.1,p.923ff.,1978)。例如，ham的f10或f12培养基专门为cho细胞培养而设计。ep-481791中描述了特别适用于cho细胞培养的其他培养基。已知此类培养基可以补充有胎牛血清(fbs，也称为胎牛血清fcs)，后者提供多种激素和生长因子的天然来源。哺乳动物细胞的细胞培养现在是科学教科书和手册中充分描述的常规操作，其在例如r.ianfresney,cultureofanimalcells,手册,第4版,wiley-liss/n.y.,2000中详细覆盖。其他合适的培养方法是熟练技术人员已知的，并且可以取决于重组多肽产物和所用的宿主细胞。确定或优化适于表达和产生待由细胞表达的重组多肽的条件在普通技术人员的技能范围内。在一个方面，细胞或细胞系包含编码产物，例如重组多肽的外源核酸。在一个实施方案中，细胞或细胞系表达产物，例如治疗或诊断产物。用于遗传修饰或工程化改造细胞以表达期望的多肽或蛋白质的方法是本领域公知的，并且包括例如转染、转导(例如病毒转导)或电穿孔。用于将核酸(例如本文所述的外源核酸或载体)导入宿主细胞中的物理方法包括磷酸钙沉淀、脂质转染、颗粒轰击、显微注射、电穿孔等。产生包含载体和/或外源核酸的细胞的方法是本领域公知的。参见例如sambrook等,2012,molecularcloning:alaboratorymanual,第1-4卷,coldspringharborpress,ny)。用于将核酸(例如本文所述的外源核酸或载体)导入宿主细胞的化学方法包括胶体分散系统，如大分子复合物、纳米胶囊、微球、珠和基于脂质的系统，包括水包油乳液、胶束、混合胶束和脂质体。用作体外和体内递送媒介物的示例性胶体系统是脂质体(例如人工膜囊泡)。现有技术的核酸靶向递送的其他方法是可用的，诸如用靶向纳米颗粒或其他合适的亚微米尺寸的递送系统递送多核苷酸。在实施方案中，期望将外源核酸整合到宿主细胞的核酸中，例如宿主细胞的基因组或染色体核酸中。用于确定是否已经发生外源核酸整合到宿主细胞的基因组中的方法可以包括gs/msx选择方法。gs/msx选择方法使用重组gs基因对谷氨酰胺营养缺陷型的互补来选择来自细胞的蛋白质的高水平表达。简而言之，gs/msx选择方法包括在载体上包含编码谷氨酰胺合酶的核酸，所述载体包含编码重组多肽产物的外源核酸。甲硫氨酸硫酰亚胺(msx)的施用选择已经将编码重组多肽和gs两者的外源核酸稳定整合到基因组中的细胞。由于gs可以由一些宿主细胞(例如cho细胞)内源表达，因此可以优化用msx选择的浓度和持续时间以鉴定高产细胞，其中编码重组多肽产物的外源核酸稳定整合到宿主基因组中。gs选择及其系统在fan等,pharm.bioprocess.(2013)；1(5):487-502(其通过引用完整并入本文)中进一步描述。用于鉴定和选择已将外源核酸稳定整合到宿主细胞基因组中的细胞的其他方法可以包括但不限于在外源核酸上包含报告基因和评估细胞中报告基因的存在，以及外源核酸的pcr分析和检测。在一个实施方案中，使用本文描述的方法选择、鉴定或产生的细胞能够产生比仅使用稳定表达的选择方法，例如整合编码重组多肽的外源核酸选择的细胞更高的蛋白质产物产率。在一个实施方案中，与未与蛋白质降解抑制剂接触的细胞或仅选择编码重组多肽的外源核酸的稳定表达(例如整合)的细胞相比，使用本文描述的方法选择、鉴定或产生的细胞产生2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍或更多的产物(例如重组多肽)。用于细胞系和重组多肽生产的方法在哺乳动物和微生物选择系统中的现有技术水平是在dna转录为rna的水平上施加选择压力。将目标基因与选择标志物紧密连锁，使得选择性标志物的高水平表达可能会导致目标基因的高表达。以高水平表达选择性标志物的细胞能够存活和增殖，而没有高水平表达选择性标志物的细胞则不太可能存活和增殖(例如，凋亡和/或死亡)。如此，可以针对表达选择标志物的细胞并且通过以高水平牵涉目标基因富集细胞群体。该方法已被证明能够非常成功用于直接表达蛋白。在实施方案中，本文中所述的方法提供了基本上纯的蛋白产品。如在本文中所使用的，“基本上纯的”指基本上不含热源物质、基本上不含核酸和/或基本上不含来自宿主细胞的内源性细胞蛋白质酶和成分，如聚合酶、核糖体蛋白和伴侣蛋白。基本上纯的蛋白产品含有例如少于25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％的来自宿主细胞的污染性内源性蛋白、核酸或其他大分子。方法和系统可以与在本领域中完善建立的用于回收和纯化产物的方法一起使用。对于回收重组多肽产物，使用物理或化学或者物理-化学方法。物理或化学或者物理-化学方法可以是过滤法、离心法、超速离心法、提取法、冻干法、沉淀法、结晶法、层析法或者上述两种或多种方法的组合。在一个实施方案中，层析法包括大小排阻层析(或凝胶过滤)、离子交换层析(例如，阴离子或阳离子交换层析)、亲和层析、疏水性相互作用层析和/或多形(multimodal)层析中的一种或多种。本文描述的装置、设施和方法适合于培养任何期望的细胞系，包含原核和/或真核细胞系。此外，在实施方案中，装置、设施和方法适合于培养悬浮细胞或贴壁依赖性(贴壁)细胞，并且适合于配置用于生产药物和生物制药产品，如多肽产品、核酸产品(例如dna或rna)、或细胞和/或病毒，如用于细胞和/或病毒治疗的细胞和/或病毒的生产操作。在实施方案中，细胞表达或产生产物，如重组治疗或诊断产物。如下文更详细描述的，由细胞产生的产物的实例包含但不限于抗体分子(例如，单克隆抗体，双特异性抗体)、抗体模拟物(与抗原特异性结合但与抗体在结构上不相关的多肽分子，例如darpins、亲和体(affibodies)、adnectin或ignars)、融合蛋白(例如，fc融合蛋白，嵌合细胞因子)、其他重组蛋白(例如，糖基化蛋白、酶、激素)、病毒治疗剂(例如，抗癌溶瘤性病毒、用于基因疗法的病毒载体和病毒免疫疗法)、细胞疗法(例如多能干细胞、间充质干细胞和成体干细胞)、疫苗或脂质包囊的颗粒(例如，外来体，病毒样颗粒)、rna(例如例如sirna)或dna(例如质粒dna)、抗生素或氨基酸。在实施方案中，装置、设施和方法可以用于生产生物仿制药。如提及，在实施方案中，装置、设施和方法允许产生真核细胞，例如哺乳动物细胞或低等真核细胞，例如酵母细胞或丝状真菌细胞，或原核细胞，例如革兰氏阳性细胞或革兰氏阴性细胞和/或产生真核细胞或原核细胞，例如蛋白质、肽、抗生素、氨基酸、核酸(例如dna或rna)，其由真核细胞以大规模方式合成。除非本文另有说明，否则装置、设施和方法可以包含任何期望的体积或生产能力，包含但不限于实验室规模、中试规模(pilot-scale)和完全生产规模能力。此外，除非本文另有说明，否则装置、设施和方法可以包含任何合适的反应器，包含但不限于搅拌罐、空气升液器(airlift)、纤维、微纤维、中空纤维、陶瓷基质、流化床、固定床和/或喷动床生物反应器。如本文所用，“反应器”可以包含发酵罐或发酵单元，或任何其他反应容器，并且术语“反应器”可与“发酵罐”互换使用。例如，在一些方面，示例性生物反应器单元可以进行以下中的一个或多个或者全部：营养物和/或碳源的进料、合适气体(例如氧气)的注射、发酵或细胞培养基的入口和出口流动、气相和液相的分离、温度的维持、氧气和co2水平的维持、ph水平的维持、搅拌(例如搅动)和/或清洁/消毒。示例性反应器单元如发酵单元可以在单元内包含多个反应器，例如单元可以在每个单元中具有1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90或100或更多个生物反应器和/或设施可以含有设施内具有单个或多个反应器的多个单元。在各个实施方案中，生物反应器可以适合于分批、半补料-分批、补料-分批、灌注和/或连续发酵过程。可以使用任何合适的反应器直径。在实施方案中，生物反应器可以具有约100ml至约50,000l的体积。非限制性实例包含100ml、250ml、500ml、750ml、1升、2升、3升、4升、5升、6升、7升、8升、9升、10升、15升、20升、25升、30升、40升、50升、60升、70升、80升、90升、100升、150升、200升、250升、300升、350升、400升、450升、500升、550升、600升、650升、700升、750升、800升、850升、900升、950升、1000升、1500升、2000升、2500升、3000升、3500升、4000升、4500升、5000升、6000升、7000升、8000升、9000升、10,000升、15,000升、20,000升、和/或50,000升的体积。另外，合适的反应器可以是多次使用、单次使用、一次性或非一次性，并且可以由任何合适的材料形成，所述材料包含金属合金，例如不锈钢(例如316l或任何其它合适的不锈钢)和inconel、塑料和/或玻璃。在实施方案中并且除非本文另有说明，否则本文所述的装置、设施和方法还可以包含未另外提及的任何合适的单元操作和/或设备，如用于分离、纯化和分离此类产品的操作和/或设备。可以使用任何合适的设施和环境，如传统的棒式建筑设施、模块、移动和临时设施、或任何其他合适的结构、设施和/或布局。例如，在一些实施方案中，可以使用模块清洁室。另外并且除非另有说明，否则本文描述的装置、系统和方法可以在单个位置或设施中容纳和/或进行，或者备选地在分开的或多个位置和/或设施处容纳和/或进行。作为非限制性实例而非限制性地，美国公开号2013/0280797；2012/0077429；2009/0305626；和美国专利no.8,298,054；7,629,167；和5,656,491(其通过引用在此完整并入)描述了可能适合的示例性设施、设备和/或系统。在实施方案中，细胞是真核细胞，例如哺乳动物细胞。哺乳动物细胞可以是例如人或啮齿类或牛细胞系或细胞株。此类细胞、细胞系或细胞株的实例是例如小鼠骨髓瘤(nso)细胞系、中国仓鼠卵巢(cho)细胞系、ht1080、h9、hepg2、mcf7、mdbkjurkat、nih3t3、pc12、bhk(幼仓鼠肾细胞)、vero、sp2/0、yb2/0、y0、c127、l细胞、cos(例如cos1和cos7)、qc1-3、hek-293、vero、per.c6、hela、ebl、eb2、eb3、溶瘤或杂交瘤细胞系。优选地，哺乳动物细胞是cho细胞系。在一个实施方案中，细胞是cho细胞。在一个实施方案中，细胞是cho-k1细胞、cho-k1sv细胞、dg44cho细胞、duxb11cho细胞、chos、chogs敲除细胞、chofut8gs敲除细胞、chozn、或cho衍生的细胞。chogs敲除细胞(例如gsko细胞)是例如cho-k1svgs敲除细胞。chofut8敲除细胞是例如chok1sv(lonzabiologics、inc.)。真核细胞也可以是禽细胞、细胞系或细胞株，例如细胞、eb14、eb24、eb26、eb66或ebv13。在一个实施方案中，真核细胞是干细胞。干细胞可以是例如多能干细胞，包含胚胎干细胞(esc)、成体干细胞、诱导多能干细胞(ipsc)、组织特异性干细胞(例如，造血干细胞)和间充质干细胞(msc)。在一个实施方案中，细胞是本文描述的任何细胞的分化形式。在一个实施方案中，细胞是源自培养中的任何原代细胞的细胞。在实施方案中，细胞是肝细胞，如人肝细胞、动物肝细胞或非实质细胞。例如，细胞可以是可铺板的代谢合格的人肝细胞(plateablemetabolismqualifiedhumanhepatocyte)、可铺板的诱导合格的人肝细胞(plateableinductionqualifiedhumanhepatocyte)、可铺板的qualysttransportercertifiedtm人肝细胞、悬浮合格的人肝细胞(包含10个供体和20个供体合并的肝细胞)、人肝库弗细胞、人肝星状细胞、狗肝细胞(包含单一和合并的beagle肝细胞)、小鼠肝细胞(包含cd-1和c57bi/6肝细胞)、大鼠肝细胞(包含sprague-dawley、wistarhan和wistar肝细胞)、猴肝细胞(包含食蟹猴(cynomolgus)或恒河猴(rhesus)肝细胞)、猫肝细胞(包含domesticshorthair肝细胞)和兔肝细胞(包含newzealandwhite肝细胞)。示例性肝细胞可购自triangleresearchlabs,llc,6davisdriveresearchtrianglepark,northcarolina,usa27709。在一个实施方案中，真核细胞是低等真核细胞，诸如例如酵母细胞(例如毕赤酵母(pichia)属(例如巴斯德毕赤酵母(pichiapastoris)、甲醇毕赤酵母(pichiamethanolica)、克鲁维毕赤酵母(pichiakluyveri)和安格斯毕赤酵母(pichiaangusta))、komagataella属(例如komagataellapastoris、komagataellapseudopastoris或komagataellaphaffii)、酵母属(例如酿酒酵母(saccharomycescerevisae)、酿酒酵母(cerevisiae)、克鲁维酵母(saccharomyceskluyveri)、葡萄汁酵母(saccharomycesuvarum))、克鲁维酵母属(kluyveromyces)(例如乳酸克鲁维酵母(kluyveromyceslactis)、马克斯克鲁维酵母(kluyveromycesmarxianus))、假丝酵母属(candida)(例如实用假丝酵母(candidautilis)、candidacacaoi、博伊丁假(丝酵母candidaboidinii))、地丝菌属(geotrichum)(例如发酵地丝菌(geotrichumfermentans))、多形汉逊酵母(hansenulapolymorpha)、解脂耶氏酵母(yarrowialipolytica)或裂殖酵母(schizosaccharomycespombe)。优选巴斯德毕赤酵母。巴斯德毕赤酵母菌株的实例是x33、gs115、km71、km71h；和cbs7435。在一个实施方案中，真核细胞是真菌细胞(例如曲霉属(aspergillus)(例如黑曲霉(a.niger)、烟曲霉(a.fumigates)、米曲霉(a.orzyae)、构巢曲霉(a.nidula))、支顶孢属(acremonium)(例如嗜热支顶孢(a.thermophilum))、黑毛菌属(chaetomium)(例如嗜热黑毛菌(c.thermophilum))、金小孢子属(chrysosporium)(如嗜热金小孢子(c.thermophile))、冬虫夏草(cordyceps)(如北冬虫夏草(c.militaris))、棒囊壳属(corynascus)、栉霉属(ctenomyces)、镰刀菌属(fusarium)(如尖孢镰刀菌(f.oxysporum))、小丛壳属(glomerella)(如禾生小丛壳(g.graminicola))、肉座菌属(hypocrea)(如红褐肉座菌(h.jecorina))、稻瘟病菌(magnaporthe)(如稻瘟病菌(m.orzyae))、毁丝霉属(myceliophthora)(如嗜热毁丝霉(m.thermophile))、丛赤壳属(nectria)(如赤球丛赤壳(n.heamatococca))、链孢霉属(neurospora)(如粗糙链孢霉(n.crassa))、青霉属(penicillium)、侧孢霉属(sporotrichum)(如嗜热侧孢霉(s.thermophile))、梭孢壳属(thielavia)(如陆地梭孢壳(t.terrestris)，t.heterothallica)、木霉属(trichoderma)(如里氏木霉)或轮枝孢属(verticillium)(如大丽轮枝孢(v.dahlia))。在一个实施方案中，真核细胞是昆虫细胞(例如，sf9、mimictmsf9、sf21、highfivetm(bt1-tn-5b1-4)或bt1-ea88细胞)、藻类细胞(例如，双眉藻属(amphora)、硅藻纲(bacillariophyceae)、杜氏藻属(dunaliella)、小球藻属(chlorella)、衣藻属(chlamydomonas)、蓝藻门(cyanophyta)(蓝细菌)、微拟球藻属(nannochloropsis)，螺旋藻属(spirulina)或棕鞭藻属(ochromonas)的细胞)、或植物细胞(如来自单子叶植物细胞(如玉米、稻、小麦或狗尾草(setaria))，或来自双子叶植物(例如，木薯、马铃薯、大豆、番茄、烟草、苜蓿、小立碗藓(physcomitrellapatens)或拟南芥(arabidopsis)的细胞)。在一个实施方案中，细胞是细菌或原核细胞。在实施方案中，原核细胞是革兰氏阳性细胞，例如芽孢杆菌(bacillus)、链霉菌(streptomyces)、链球菌(streptococcus)、葡萄球菌(staphylococcus)或乳杆菌(lactobacillus)。可以使用的芽孢杆菌是例如枯草芽孢杆菌(b.subtilis)、解淀粉芽胞杆菌(b.amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(b.licheniformis)、纳豆芽孢杆菌(b.natto)或巨大芽孢杆菌(b.megaterium)。在实施方案中，细胞是枯草芽孢杆菌，如枯草芽孢杆菌3na和枯草芽孢杆菌168。芽孢杆菌可从例如芽孢杆菌遗传保藏中心(bacillusgeneticstockcenter),biologicalsciences556,484west12thavenue,columbusoh43210-1214获得。在一个实施方案中，原核细胞是革兰氏阴性细胞，例如沙门氏菌属种或大肠杆菌，例如tg1、tg2、w3110、dh1、dhb4、dh5a、hms174、hms174(de3)、nm533、c600、hb101、jm109、mc4100、xl1-blue和origami，以及源自大肠杆菌b-菌株的，诸如例如bl-21或bl21(de3)，所有这些都是商品化的。合适的宿主细胞可购自例如培养物保藏中心，例如dsmz(德国微生物菌种保藏中心(deutschesammlungvonmikroorganismenandzellkulturengmbh),braunschweig,germany)或美国典型培养物保藏中心(atcc)。在实施方案中，培养的细胞用于产生用于治疗用途的蛋白质，例如抗体，例如单克隆抗体和/或重组蛋白质。在实施方案中，培养的细胞产生肽、氨基酸、脂肪酸或其他有用的生物化学中间体或代谢物。例如，在实施方案中，可以制备具有分子量约4000道尔顿至大于约140,000道尔顿的分子。在实施方案中，这些分子可以具有一系列复杂性并且可以包含翻译后修饰，包含糖基化。在实施方案中，蛋白质是例如botox、myobloc、neurobloc、dysport(或其他肉毒杆菌神经毒素血清型)、阿葡糖苷酶α、达托霉素(daptomycin)、yh-16、绒毛膜促性腺激素α、非格司亭(filgrastim)、西曲瑞克(cetrorelix)、白细胞介素-2、阿地白介素(aldesleukin)、替西白介素(teceleulin)、地尼白介素2(denileukindiftitox)、干扰素α-n3(注射)、干扰素α-nl、dl-8234、干扰素、suntory(γ-1a)、干扰素γ、胸腺素α1、他索那敏(tasonermin)、digifab、viperatab、echitab、crofab、奈西立肽(nesiritide)、阿巴他塞(abatacept)，阿来法塞(alefacept)、rebif、依托特明α(eptoterminalfa)、特立帕肽(teriparatide)(骨质疏松)、降钙素注射液(骨病)、降钙素(鼻，骨质疏松)、依那西普，血红蛋白glutamer250(牛)、替加色罗α(drotrecoginalpha)、胶原酶、卡培立肽(carperitide)、重组人表皮生长因子(局部凝胶，伤口愈合)，dwp401，促红血球生成素α(darbepoetinalpha)、依泊汀(epoetin)omega、依泊汀β、依泊汀α、地西卢定(desirudin)、来匹卢定(lepirudin)、比伐卢定(bivalirudin)、诺那凝血素α(nonacogalpha)、mononine、依他凝血素α(eptacogalpha)(激活)、重组因子viii+vwf、recombinate、重组因子viii、因子viii(重组)、alphnmate、辛凝血素α(octocogalpha)、因子viii、帕利夫明(palifermin)、indikinase、替奈普酶(tenecteplase)、阿替普酶(alteplase)、帕米普酶(pamiteplase)、瑞替普酶(reteplase)、那替普酶(nateplase)、孟替普酶(monteplase)、促滤泡素α(follitropinalpha)、rfsh、hpfsh、米卡芬净(micafungin)、培非司亭(pegfilgrastim)、来格司亭(lenograstim)、那托司亭(nartograstim)、舍莫瑞林(sermorelin)、胰高血糖素、依泽那太(exenatide)、普兰林肽(pramlintide)，iniglucerase、半乳糖加硫酶(galsulfase)、leucotropin、莫拉司亭(molgramostirn)、醋酸曲普瑞林(triptorelinacetate)、组氨瑞林(histrelin)(皮下植入物，hydron)、地洛瑞林(deslorelin)、组氨瑞林(histrelin)、那法瑞林(nafarelin)、亮丙瑞林(leuprolide)持续释放储库(atrigel)、亮丙瑞林植入物(duros)、戈舍瑞林(goserelin)、eutropin、kp-102程序、生长激素、美卡舍明(mecasermin)(生长不足(growthfailure))、enlfavirtide、org-33408、甘精胰岛素、谷赖胰岛素、胰岛素(吸入)、赖脯胰岛素(insulinlispro)、地特胰岛素(insulindeternir)、胰岛素(口腔，rapidmist)、美卡舍明林菲培(mecaserminrinfabate)、阿那白滞素(anakinra)、西莫白介素(celmoleukin)、99mtc-apcitide注射液、myelopid、重组干扰素β-1b(betaseron)、醋酸格拉默(glatirameracetate)、gepon、沙格司亭(sargramostim)、奥普瑞白介素(oprelvekin)、人白细胞衍生的α干扰素、bilive、胰岛素(重组)、重组人胰岛素、门冬胰岛素、mecasenin、罗扰素(roferon)-a、干扰素-α2、alfaferone、干扰素alfacon-1、干扰素α、avonex重组人黄体生成素、脱氧核糖核酸酶α(dornasealpha)、曲弗明(trafermin)、齐考诺肽(ziconotide)、他替瑞林(taltirelin)、地波特明α(diboterminalfa)、阿托西班(atosiban)、贝卡普勒明(becaplermin)、依替巴肽(eptifibatide)、zemaira、ctc-111、shanvac-b、hpv疫苗(四价)、奥曲肽(octreotide)、兰瑞肽(lanreotide)、ancestirn、agalsidaseβ、agalsidaseα、拉罗尼酶(laronidase)、醋肽铜(prezatidecopperacetate)(局部凝胶)、拉布立酶(rasburicase)、兰尼单抗(ranibizumab)、干扰素γ-1b(actimmune)、peg-intron、tricomin、重组房尘螨变态反应脱敏注射液、重组人甲状旁腺激素(pth)1-84(sc，骨质疏松)、依泊汀δ、转基因抗凝血酶iii、granditropin、透明质酸酶(vitrase)、重组胰岛素、干扰素-α(口服锭剂)、gem-21s、伐普肽(vapreotide)、艾杜硫酸酯酶(idursulfase)、奥马曲拉(omnapatrilat)、重组血清白蛋白、培戈赛妥珠单抗(certolizumabpegol)、谷卡匹酶(glucarpidase)、人重组c1酯酶抑制剂(血管性水肿)、拉诺替普酶(lanoteplase)、重组人生长激素、恩夫韦肽(enfuvirtide)(无针注射，biojector2000)、vgv-1、干扰素(α)、芦西纳坦(lucinactant)、阿肽地尔(aviptadil)(吸入，肺部疾病)、艾替班特(icatibant)、艾卡拉肽(ecallantide)、奥米加南(omiganan)、aurograb、醋酸培西加南(pexigananacetate)、adi-peg-20、ldi-200、地加瑞克(degarelix)、cintredelinbesudotox、favld、mdx-1379、isatx-247、利拉鲁肽(liraglutide)、特立帕肽(teriparatide)(骨质疏松)、替法可近(tifacogin)、aa4500、t4n5脂质体洗剂、卡妥索单抗(catumaxomab)、dwp413、art-123、chrysalin、去氨普酶(desmoteplase)、安地普酶(amediplase)、绒促卵泡素α(corifollitropinalpha)、th-9507、替度鲁肽(teduglutide)、diamyd、dwp-412、生长激素(持续释放注射)、重组g-csf、胰岛素(吸入，air)、胰岛素(吸入，technosphere)、胰岛素(吸入，aerx)、rgn-303、diapep277、干扰素β(丙型肝炎病毒感染(hcv))、干扰素α-n3(口服)、贝拉西普(belatacept)、透皮胰岛素贴剂、amg-531、mbp-8298、xerecept、奥培巴坎(opebacan)、aidsvax、gv-1001、lymphoscan、豹蛙酶(ranpirnase)、lipoxysan、卢舒普肽(lusupultide)、mp52(β-磷酸三钙载体，骨再生)、黑色素瘤疫苗、sipuleucel-t、ctp-37、insegia、vitespen、人凝血酶(冷冻，手术出血)、凝血酶、transmid、蛇毒纤溶酶(alfimeprase)、puricase、特利加压素(terlipressin)(静脉内，肝肾综合征)、eur-1008m、重组fgf-i(可注射，血管疾病)、bdm-e、rotigaptide、etc-216、p-113、mbi-594an、耐久霉素(duramycin)(吸入，囊性纤维化)、scv-07、opi-45、内皮抑素(endostatin)、血管他丁(angiostatin)、abt-510、bowmanbirk抑制剂浓缩物、xmp-629、99mtc-hynic-膜联蛋白v、kahalalidef、ctce-9908、替维瑞克(teverelix)(延长释放)、ozarelix、罗米地辛(romidepsin)、bay-504798，白细胞介素4、prx-321、pepscan、iboctadekin、rh乳铁蛋白(rhlactoferrin)、tru-015、il-21、atn-161、西仑吉肽(cilengitide)、albuferon、biphasix、irx-2、ω干扰素、pck-3145、cap-232、帕西瑞肽(pasireotide)、hun901-dmi、卵巢癌免疫治疗疫苗、sb-249553、oncovax-cl、oncovax-p、blp-25、cervax-16、多表位肽黑色素瘤疫苗(mart-1、gp100、酪氨酸酶)、奈米非肽(nemifitide)、raat(吸入)、raat(皮肤病学)、cgrp(吸入，哮喘)、培那西普(pegsunercept)、胸腺素β4、plitidepsin、gtp-200、雷莫拉宁(ramoplanin)、graspa、obi-1、ac-100、鲑鱼降钙素(口服，eligen)、降钙素(口服，骨质疏松)、艾沙瑞林(examorelin)、卡普瑞林(capromorelin)、cardeva，velafermin、131i-tm-601、kk-220、t-10、乌拉立肽(ularitide)、depelestat、培尼沙肽(hematide)、chrysalin(局部)、rnapc2、重组因子v111(peg化脂质体)、bfgf、peg化重组葡激酶变体、v-10153、sonolysisprolyse、neurovax、czen-002、胰岛细胞新生疗法、rglp-1、bim-51077、ly-548806、艾塞那肽(exenatide)(受控释放，medisorb)、ave-0010、ga-gcb、阿伏瑞林(avorelin)、acm-9604、醋酸利那洛肽(linaclotideacetate)、ceti-1、hemospan、val(注射用)、速效胰岛素(注射用，viadel)、鼻内胰岛素、胰岛素(吸入)、胰岛素(口服，eligen)、、重组甲硫氨酰人瘦蛋白、pitrakinra皮下注射，湿疹)、pitrakinra(吸入干粉，哮喘)、multikine、rg-1068、mm-093、nbi-6024、at-001、pi-0824、org-39141、cpn10(自身免疫疾病/炎症)、talactoferrin(局部)、rev-131(眼科)、rev-131(呼吸系统疾病)、口服重组人胰岛素(糖尿病)、rpi-78m、奥普瑞白介素(oprelvekin)(口服)、cyt-99007ctla4-ig、dty-001、valategrast、干扰素α-n3(局部)、irx-3、rdp-58、tauferon、胆盐刺激脂肪酶、梅里斯普酶(merispase)、碱性磷酸酶(alalinephosphatase)、ep-2104r、美拉诺坦(melanotan)-ii、布雷默浪丹(bremelanotide)、atl-104、重组人微纤溶酶(microplasmin)、ax-200、semax、acv-1、xen-2174、cjc-1008、强啡肽(dynorphin)a、si-6603、labghrh、aer-002、bgc-728、疟疾疫苗(病毒体，pevipro)、altu-135、细小病毒(parvovirus)b19疫苗、流感疫苗(重组神经氨酸酶)、疟疾/hbv疫苗、炭疽疫苗、vacc-5q、vacc-4x、hiv疫苗(口服)、hpv疫苗、tat类毒素、yspsl、chs-13340、pth(1-34)脂质体乳膏(novasome)、ostabolin-c、pth类似物(局部，银屑病)，mbri-93.02、mtb72f疫苗(结核病)、mva-ag85a疫苗(结核病)、fara04、ba-210、重组瘟疫fiv疫苗、ag-702、oxsodrol、rbetv1、der-p1/der-p2/der-p7变应原靶向疫苗(尘螨变态反应)、pr1肽抗原(白血病)、突变体ras疫苗、hpv-16e7脂肽疫苗、迷路疫苗(labyrinthinvaccine)(腺癌)、cml疫苗、wt1-肽疫苗(癌症)、idd-5、cdx-110、pentrys、norelin、cytofab、p-9808、vt-111、icrocaptide、telbermin(皮肤病，糖尿病足溃疡)、芦平曲韦(rupintrivir)、reticulose、rgrf、ha、α-半乳糖苷酶a、ace-011、altu-140、cgx-1160、血管紧张素治疗性疫苗，d-4f、etc-642、app-018、rhmbl、scv-07(口服，结核病)、drf-7295、abt-828、erbb2特异性免疫毒素(抗癌)、dt3ssil-3、tst-10088、pro-1762、combotox、胆囊收缩素-b/胃泌素受体结合肽、111in-hegf、ae-37、trasnizumab-dm1、拮抗剂g、il-12(重组)、pm-02734、imp-321、rhigf-bp3、blx-883、cuv-1647(局部)、基于l-19的放射免疫治疗剂(癌症)、re-188-p-2045、amg-386、dc/1540/klh疫苗(癌症)、vx-001、ave-9633、ac-9301、ny-eso-1疫苗(肽)、na17.a2肽、黑素瘤疫苗(脉冲抗原治疗剂)、前列腺癌疫苗、cbp-501、重组人乳铁蛋白(干眼)、fx-06、ap-214、wap-8294a(可注射)、acp-hip、sun-11031、肽yy[3-36](肥胖，鼻内)、fgll、阿塞西普(atacicept)、br3-fc、bn-003、ba-058、人甲状旁腺激素1-34(鼻，骨质疏松)、f-18-ccr1、at-1100(乳糜泻/糖尿病)、jpd-003、pth(7-34)脂质体乳膏(novasome)、耐久霉素(眼科，干眼)、cab-2、ctce-0214、糖peg化(glycopegylated)促红细胞生成素、epo-fc、cnto-528、amg-114、jr-013、因子xiii、氨基康定(aminocandin)、pn-951、716155、sun-e7001、th-0318、bay-73-7977、替维瑞克(teverelix)(立即释放)、ep-51216、hgh(受控释放，biosphere)、ogp-i、西夫韦肽(sifuvirtide)、tv4710、alg-889、org-41259、rhcc10、f-991、胸腺喷丁(thymopentin)(肺病)、r(m)crp、肝选择性胰岛素、subalin、l19-il-2融合蛋白、弹力素(elafin)、nmk-150、altu-139、en-122004、rhtpo、血小板生成素受体激动剂(血小板减少病症)、al-108、al-208、神经生长因子作用拮抗剂(疼痛)、slv-317、cgx-1007、inno-105、口服特立帕肽(teriparatide)(eligen)、gem-os1、ac-162352、prx-302、lfn-p24融合疫苗(therapore)、ep-1043、肺炎链球菌(spneumoniae)儿科疫苗、疟疾疫苗、脑膜炎奈瑟球菌(neisseriameningitidis)b组疫苗、新生儿b组链球菌疫苗、炭疽疫苗、hcv疫苗(gpe1+gpe2+mf-59)、中耳炎疗法、hcv疫苗(核心抗原+iscomatrix)、hpth(1-34)(透皮，viaderm)、768974、syn-101、pgn-0052、aviscumnine、bim-23190、结核病疫苗、多表位酪氨酸酶肽、癌症疫苗、卡斯替母(enkastim)、apc-8024、gi-5005、acc-001、tts-cd3、血管靶向tnf(实体瘤)、去氨加压素(口腔受控释放)、奥那西普(onercept)和tp-9201。在一些实施方案中，多肽是阿达木单抗(adalimumab)(humira)、英夫利昔单抗(infliximab)(remicadetm)、利妥昔单抗(rituximab)(rituxantm/mabtheratm)、依那西普(etanercept)(enbreltm)、贝伐单抗(avastintm)、曲妥珠单抗(herceptintm)、pegrilgrastim(neulastatm)，或任何其他合适的多肽，包含生物仿制药和生物增强药(biobetter)。其他合适的多肽是下面和us2016/0097074的表5中列出的那些：表5表5表5表5表5在实施方案中，多肽是激素、凝血/凝固因子、细胞因子/生长因子、抗体分子、融合蛋白、蛋白质疫苗或肽，如表2所示。在实施方案中，蛋白质是多特异性蛋白质，例如，表4中所示的双特异性抗体。实施例通过参考以下实验实施例进一步详细描述了本公开的系统和方法。仅出于说明目的提供这些实施例，并且不意图是限制性的，除非另有指明。因此，本公开绝不应理解为限制为以下实施例，相反地，应理解为包含任意和全部变体，其由于本文中所提供的教导而变得明确。在没有进一步描述的情况下，认为本领域普通技术人员可以使用前述描述和以下说明性实施例来制造和使用本公开的化合物并实践所要求保护的方法。以下工作实施例具体地指出本公开的各方面，并且不应理解为以任何方式限制本公开的其余部分。实施例1.根据本公开的用于处理生物产物的处理溶液组分。表6-9列出了根据本公开的用于在生物反应器中制备的一种生物制品的处理溶液的组分、成分浓度和缓冲剂要求。表7-9中的缓冲剂a-l对应于表6中标示的缓冲剂a-l。生物过程容器可以用来包含以下缓冲剂：tris、tris碱、tricine、hepes、mops、pipes、taps、bicine、bes、tes、二甲胂酸盐、mes、乙酸盐、mkp、ada、aces、甘氨酰胺、乙酰氨基甘氨酸、乙酸、柠檬酸、甘氨酸、甘氨酸甘氨酸盐、磷酸钠盐、乙醇、盐酸、氢氧化钠、氯化胍、盐酸胍、氯化钠，或这些缓冲剂中任意的组合或其他缓冲剂。tris也称为三(羟基甲基)氨基甲烷。hepes也称为4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸。tris-碱也称为2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇(tham，tris碱和三(羟甲基)氨基甲烷，trometamol。mops也称为3-(n-吗啉代)丙磺酸。pipes也称为哌嗪-n,n'-双(2-乙磺酸)。taps也称为[三(羟甲基)甲基氨基]丙磺酸。bes也称为n,n-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸，n,n-双(2-羟乙基)牛磺酸。tes也称为2-[(2-羟基-1,1-双(羟甲基)乙基)氨基]乙磺酸，n-[三(羟甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸和tes游离酸。mes也称为2-(n-吗啉代)乙磺酸。mkp也称为磷酸二氢钾(monopotassiumphosphate)。ada也称为n-(2-乙酰氨基)亚氨基二乙酸，n-(氨基甲酰基甲基)亚氨基二乙酸(n-(carbamoylmethyl)iminodiaceticacid)。aces也称为n-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸(n-(2-acetamido)-2-aminoethanesulfonicacid)。表6表7表8表9本公开将在所附权利要求书中进一步说明。当前第1页12当前第1页12