抗分枝杆菌的新型化合物的制作方法

本发明涉及抗菌化合物。特别地，本发明化合物用于抑制细菌的生长，尤其是结核分枝杆菌(mtb)，和/或靶向具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶(phospho-murnac-pentapeptidetranslocase)的细菌。本发明还涉及含有这些化合物的组合物以及这些化合物和组合物的使用方法。

背景技术：

结核病(tb)是由细菌结核分枝杆菌(mtb)感染引起的。根据世界卫生组织的数据，结核病已造成150万人死亡，2014年新发病例数为960万。

目前对tb的治疗为利福平、异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的为期六个月的四联疗法。该疗法为药物敏感性结核病提供了超过95％的特殊治愈率，然而，它对多药耐药(mdr)和广泛耐药(xdr)tb无效。这在全球范围内日益受到关注。长期服用的二线抗生素可有效治疗mdr感染，但实际上还没有可用于xdr感染的治疗方法。

最近，药物贝达喹啉(bedaquiline)和迪拉马尼(delamanid)分别被美国食品药品管理局(fda)和欧洲药品管理局(ema)批准用于耐药结核病(tb)。然而，由于潜在的毒性问题，这些药物仅作为最后的手段使用。

为了对药物敏感型、多药耐药型和广泛耐药型结核病的治疗提供有效、低毒性的选择，迫切需要具有新作用模式的新型结核病药物。

在本说明书中对任何背景技术的引用都并非承认或以任何方式暗示该背景技术在任何其他司法区域构成公知常识，或者可合理地期待本领域技术人员会将该背景技术认定、理解或视为本文相关，和/或结合本领域的其他现有技术。

技术实现要素：

本申请涉及一类化合物，特别是抗菌化合物。这些化合物抑制细菌细胞壁的生物合成和/或细菌生长，并且已经表明对结核分枝杆菌(mtb)特别有效。

一方面，本发明提供式i所示的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中，

为单键或双键；其中当为单键时，该位置的立体化学为r-构型。

r1选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r2选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r3为-c(o)r4或-ch2r4；和

r4选自下组：羟基，或任选取代的：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基；c1-c15烷氧基；c1-c15烷基硫基；c1-c15卤代烷基、c1-c15卤代烷氧基、c1-c15羟基烷基、c1-c15烷基羧基、c1-c15烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

附带条件是：

当为双键时，r3不为-cooh，和

当为单键且r1为氢、甲基、异丁基、苄基、氟或羟基取代的苄基、-c3-c4烷基氨基、-ch(ch3)oh、-ch2cooh、-ch2c(o)c(ch3)3、-ch(oh)ch3或-ch2ch2sch3；和r2为甲基、异丙基、异丁基、-(ch2)4nh2、-ch2ch2sch3、-ch2ch2s(o)ch3、c1-c2芳烷基、氟取代的苄基、-cf3取代的苄基、芳基取代的苄基、萘基或-ch2-环己基时；r3不为-cooh。

另一方面，本发明提供式ii化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中，

为单键或双键；其中，当为单键时，该位置的立体化学为r-构型。

r1选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r2选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r3为-c(o)r4或-ch2r4；和

r4选自下组：羟基，或任选取代的：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基；c1-c15烷氧基；c1-c15烷基硫基；c1-c15卤代烷基、c1-c15卤代烷氧基、c1-c15羟基烷基、c1-c15烷基羧基、c1-c15烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

附带条件：

当为双键时，r3不为-cooh，和

当为单键且r1为氢、甲基、异丁基、苄基、氟或羟基取代的苄基、-c3-c4烷基氨基、-ch(ch3)oh、-ch2cooh、-ch2c(o)c(ch3)3、-ch(oh)ch3或-ch2ch2sch3；和r2为甲基、异丙基、异丁基、-(ch2)4nh2、-ch2ch2sch3、-ch2ch2s(o)ch3、c1-c2芳烷基、氟取代的苄基、-cf3取代的苄基、芳基取代的苄基、萘基或-ch2-环己基时；r3不为-cooh。

另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂。

另一方面，本发明提供一种预防和/或治疗由细菌调节的疾病或病症的方法，包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的式i和/或式ii化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物。

细菌可以是革兰氏阳性或革兰氏阴性。

因此，一方面，本发明提供一种预防和/或治疗由结核分枝杆菌(mtb)调节的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的哺乳动物给予治疗有效量的式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物。

另一方面，本发明提供一种预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调节的疾病或病症的方法，该方法包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的本发明式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物。

一方面，本发明提供一种预防和/或治疗结核病的方法，其包括向有此需要的哺乳动物给予治疗有效量的式i和/或式ii化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂化的组合物。

另一方面，本发明提供式i和/或式ii化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物在制备用于预防或治疗由革兰氏阳性细菌调节的疾病或病症中的用途。

一方面，本发明提供式i和/或式ii化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物在制备用于预防或治疗由结核分枝杆菌(mtb)调节的疾病或病症的药物中的用途。

另一方面，本发明提供式i和/或式ii化合物或包含式i和/或式ii化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物在制备用于预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调节的疾病或病症的药物中的用途。

一方面，本发明提供式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii的化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物在制备用于预防和/或治疗结核病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii的化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物，其用于预防和/或治疗由细菌(如：革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌)调控的疾病。

另一方面，本发明提供式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii的化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物，其用于预防和/或治疗由结核分枝杆菌(mtb)调控的疾病。

另一方面，本发明提供式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii的化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物，其用于预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调控的疾病。

一方面，本发明提供式i和/或式ii的化合物或包含式i和/或式ii的化合物和药学上可接受的赋形剂的组合物，其用于预防和/或治疗结核病。

如本文所用，除非上下文另有要求，术语“包括”和该术语的变体，例如“包含”，“包含”和“被包含”，并不旨在排除其他添加剂，组分，整数或步骤。

本发明的其他方面和前面各段所述方面的进一步实施例将通过下面的描述变得显而易见，这些描述是通过示例和参考附图给出的。

附图说明

图1类似物7对mtbh37rv的抑制作用。

图2类似物8对mtbh37rv的抑制作用。

图3类似物9对mtbh37rv的抑制作用。

图4类似物10对mtbh37rv的抑制作用。

图5类似物11对mtbh37rv的抑制作用。

图6类似物21对mtbh37rv的抑制作用。

图7类似物22对mtbh37rv的抑制作用。

图8类似物23对mtbh37rv的抑制作用。

图9类似物24对mtbh37rv的抑制作用。

图10类似物25对mtbh37rv的抑制作用。

图11类似物26对mtbh37rv的抑制作用。

图12类似物27对mtbh37rv的抑制作用。

图13类似物28对mtbh37rv的抑制作用。

图14类似物30对mtbh37rv的抑制作用。

图15类似物31对mtbh37rv的抑制作用。

图16类似物32对mtbh37rv的抑制作用。

图17类似物33对mtbh37rv的抑制作用。

图18类似物34对mtbh37rv的抑制作用。

图19类似物35对mtbh37rv的抑制作用。

图20类似物36对mtbh37rv的抑制作用。

图21类似物37对mtbh37rv的抑制作用。

图22在thp-1细胞中，类似物25对mtbh37ra的抑制作用。ic50代表2次独立实验的平均值，每个实验重复三次。

图23在thp-1细胞中，类似物36对mtbh37ra的抑制作用。ic50代表2次独立实验的平均值，每个实验重复三次。

图24在thp-1细胞中，类似物37对mtbh37ra的抑制作用。ic50代表2次独立实验的平均值，每个实验重复三次。

图25来自mtbmc²6230膜的tlc测定用于类似物25抑制murx。a：tlc；b：类似物25抑制murx的原始剂量-反应曲线；c：类似物25抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。

图26来自mtbmc²6230膜的tlc测定用于类似物36抑制murx。a:tlc；b：类似物36抑制murx的原始剂量-反应曲线；c：类似物36抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。

图27来自mtbmc²6230膜的tlc测定用于类似物37抑制murx。a:tlc；b：类似物37抑制murx的原始剂量-反应曲线；c：类似物37抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。

图28来自mtbmc²6230膜的tlc测定用于类似的衣霉素抑制murx。a:tlc；b：衣霉素抑制murx的原始剂量-反应曲线；c：衣霉素抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。

图29murx的动力学参数评价。a:米氏方程(michaelis-menten)图；b：原酶动力学数据。数据代表两次独立实验的平均值。

图30来自mtbmc²6230膜的荧光测定用于类似物25抑制murx。a:类似物25抑制murx的原始剂量-反应曲线；b：类似物25抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。提供的数据是两次独立实验的平均值。

图31来自mtbmc²6230膜的荧光测定用于类似物36抑制murx。a:类似物36抑制murx的原始剂量-反应曲线；b：类似物36抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。提供的数据是两次独立实验的平均值。

图32来自mtbmc²6230膜的荧光测定用于类似物37抑制murx。a:类似物37抑制murx的原始剂量-反应曲线；b：类似物37抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。提供的数据是两次独立实验的平均值。

图33来自mtbmc²6230膜的荧光测定用于衣霉素抑制murx(阳性对照)。a:衣霉素抑制murx的原始剂量-反应曲线；b：衣霉素抑制murx的对数转换剂量-反应曲线。提供的数据是两次独立实验的平均值。

图34类似物71对mtbh37rv的抑制作用。

图35类似物79对mtbh37rv的抑制作用。

图36在thp-1细胞中，类似物78对mtbh37rv的抑制作用。

图37在thp-1细胞中，类似物79对mtbh37rv的抑制作用。

具体实施方式

本发明描述了用于预防和/或治疗由细菌调节的疾病或病症的化合物。根据本发明，疾病或病症可以与相关细菌感染相关，由其引起或由其造成。优选地，细菌为革兰氏阳性细菌。甚至更优选地，细菌为结核分枝杆菌(mtb)。

一方面，本文提供的化合物可用于预防和/或治疗由细菌调节的病症。不希望受任何理论束缚，假定这些化合物的活性是通过抑制细菌生长和/或抑制细菌细胞壁生物合成来实现的。该化合物对结核分枝杆菌(mtb)具有特别的选择性，因此可用于治疗诸如结核病的疾病。该化合物还可用于预防和/或治疗由细菌引起的其他病症。

一方面，本发明提供式i所示的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中，

为单键或双键；其中当为单键时，该位置的立体化学为r-构型。

r1选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r2选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r3为-c(o)r4或-ch2r4；和

r4选自下组：羟基，或任选取代的：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基；c1-c15烷氧基；c1-c15烷基硫基；c1-c15卤代烷基、c1-c15卤代烷氧基、c1-c15羟基烷基、c1-c15烷基羧基、c1-c15烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

附带条件：

当为双键时，r3不为-cooh，和

当为单键且r1为氢、甲基、异丁基、苄基、氟或羟基取代的苄基、-c3-c4烷基氨基、-ch(ch3)oh、-ch2cooh、-ch2c(o)c(ch3)3、-ch(oh)ch3或-ch2ch2sch3；和r2为甲基、异丙基、异丁基、-(ch2)4nh2、-ch2ch2sch3、-ch2ch2s(o)ch3、c1-c2芳烷基、氟取代的苄基、-cf3取代的苄基、芳基取代的苄基、萘基或-ch2-环己基时；r3不为-cooh。

一方面，本发明提供式ii化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中，

为单键或双键；其中当为单键时，该位置的立体化学为r-构型。

r1选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r2选自下组：氢、卤素、巯基、羟基、酰基、羧基、硝基、氰基或任选取代的：c1-c6烷基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基；c1-c6烷基硫基；c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c1-c6烷基羧基、c1-c6烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

r3为-c(o)r4或-ch2r4；和

r4选自下组：羟基，或任选取代的：c1-c15烷基、c1-c15烷基氨基；c1-c15烷氧基；c1-c15烷基硫基；c1-c15卤代烷基、c1-c15卤代烷氧基、c1-c15羟基烷基、c1-c15烷基羧基、c1-c15烷基羧酰胺、c3-c7环烷基；(c1-c4烷基)c3-c7环烷基、c3-c7杂环基；(c1-c4烷基)c3-c7杂环基、芳基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、c1-c4芳烷基、c1-c4芳烷氧基、c1-c4芳烷基氨基、杂芳基、(c1-c4烷基)杂芳基、氨基、氨基甲酰基、氨基磺酰基、脲基和芳酰基；

附带条件：

当为双键时，r3不为-cooh，和

当为单键且r1为氢、甲基、异丁基、苄基、氟或羟基取代的苄基、-c3-c4烷基氨基、-ch(ch3)oh、-ch2cooh、-ch2c(o)c(ch3)3、-ch(oh)ch3或-ch2ch2sch3；且r2为甲基、异丙基、异丁基、-(ch2)4nh2、-ch2ch2sch3、-ch2ch2s(o)ch3、c1-c2芳烷基、氟取代的苄基、-cf3取代的苄基、芳基取代的苄基、萘基或-ch2-环己基时；r3不为-cooh。

在一个实施方案中，该化合物是式iii所示的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中r1，r2和r4的定义如式ii所述，

附带条件：

当为双键时，r4不为-oh，和

当为单键且r1为氢、甲基、异丁基、苄基、氟或羟基取代的苄基、-c3-c4烷基氨基、-ch(ch3)oh，-ch2cooh、-ch2c(o)c(ch3)3、-ch(oh)ch3或-ch2ch2sch3；且r2为甲基、异丙基、异丁基、-(ch2)4nh2、-ch2ch2sch3、-ch2ch2s(o)ch3、c1-c2芳烷基、氟取代的苄基、-cf3取代的苄基、芳基取代的苄基、萘基或-ch2-环己基时；r4不为-oh。

在一个实施方案中，化合物为式iv所示的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药；

其中，r1，r2和r4的定义如式ii所述。

下面描述式i，ii，iii和/或iv化合物的优选实施方案。

优选地，为单键。

优选地，r1选自下组：氢，或任选取代的下组：c1-c6烷基、c1-c2芳烷基、任选取代的(c1-c2烷基)杂芳基、c1-c6烷基氨基；c1-c6烷氧基、c1-c6烷基羧基、c1-c6羟基烷基。甚至更优选地，r1选自下组：氢、甲基、羟基取代的苄基、萘基、c2-c4烷基氨基、环己基、-ch2-环己基或-ch(oh)ch3。

优选地，r2选自包含任选取代的下组：c1-c6烷基、(c1-c2)c3-c7环烷基、c1-c4芳烷基和c1-c6烷基硫基。甚至更优选地，r2选自下组：异丙基、-ch2-萘基、-ch2-环己基、-ch2ch2sch3；-ch2ch2s(o)ch3和

优选地，r4选自包含任选取代下组的基团：c1-c15烷氧基、c1-c4芳烷基；c1-c15烷基氨基；c1-c4烷氧基，c1-c4芳烷基氨基和c1-c15烷基氨基。更优选地，r4选自下组：甲氧基、己氧基、十二烷氧基、羟基、-ch2c(ch3)3、-o-苄基、-nh-苄基、-nh-苄基、己基氨基。甚至更优选地，r3选自下组：-ch2c(ch3)3、-o-苄基、-nh-苄基和己氨基。

在一些优选的实施方案中，该化合物选自下组的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药。

在一个实施方案中，式i和/或式ii的化合物选自包含下组的化合物：

或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药。

在一个优选的实施方案中，式i和/或式ii的化合物选自包含下组的化合物：

一方面，本发明提供选自以下的化合物：

优选地，化合物为

定义

如本文所用，术语“烷基”是指饱和或不饱和的直链或支链烃基，其具有1至15个碳原子，或介于其间的任何范围，即其包含1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14或15个碳原子。因此，该术语包括饱和烷基以及烯基和炔基。烷基任选被取代基取代，允许多个取代度。本文所用的“烷基”的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丙烯基、丙炔基正丁基、丁烯基、异丁基、叔丁基、正戊基、戊烯基、异戊基等。饱和烃基可以是单-，双-或多-不饱和的，并且可以含有双键(烯基)或三(炔基)键。

如本文所用，术语“c1-c3烷基”，“c1-c4烷基”，“c1-c6烷基”和“c1-c15烷基”是指如上定义的含有至少1个，分别具有至多3,4,6或15个碳原子的烷基，或其间的任何范围(例如，含有2-5个碳原子的烷基也在c1-c6的范围内)。

如本文所用，术语“卤素”是指氟(f)，氯(cl)，溴(br)或碘(i)，术语“卤代”是指卤素基团氟代(-f)，氯代(-cl)，溴代(-br)和碘代(-i)。优选地，‘卤代'是氟代或氯代。

如本文所用，术语“环烷基”是指非芳族烃环。以类似的方式，术语“c3-c7环烷基”是指具有3-7个碳原子或其间的任何范围的非芳族环烷环。例如，c3-c7环烷基还包括含有4-6个碳原子的环烷基。烷基的定义如上所述，并且可以被取代。可用于本发明的示例性“c3-c7环烷基”包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。这种环可任选地与一个或多个其他任选取代的环烷基，“杂环”，芳环或杂芳环稠合。

如本文所用，术语“杂环”或“杂环基”是指非芳族杂环，其为饱和的或具有一个或多个不饱和度，含有一个或多个杂原子，选自s，s(o)，s(o)2，o或n的取代。术语“c3-c7杂环基”是指具有三至七个碳原子的非芳族环烷环，其含有一个或多个如本文所述的杂原子取代。杂环部分可以被取代，允许多个取代度。术语“c3-c7杂环基”还包括含有c4-c5，c5-c7，c6-c7，c4-c7，c4-c6和c5-c6碳原子的杂环基。优选地，杂环含有4-6个碳原子和一个或两个杂原子。更优选地，杂环含有五个碳原子和一个杂原子，或四个碳原子和两个杂原子，或五个碳原子和一个杂原子。这种环可任选地与一个或多个其他任选取代的“杂环”，环烷基，芳基或杂芳基稠合。杂环基的实例包括但不限于四氢呋喃、吡喃、氧杂环丁烷、1,4-二恶烷、1,3-二恶烷、哌啶、哌嗪、n-甲基哌嗪基、2,4-哌嗪二酮、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、吗啉、硫代吗啉、四氢噻喃、四氢噻吩等。本发明的一个取代的杂环体系为取代的香豆素环，例如6,7-二甲氧基香豆素。

术语“(c1-c2烷基)c3-c7杂环基”包括含有含1或2个碳原子的烷基作为化合物和杂环(即杂环，-ch2-杂环或-ch2ch2-杂环)之间的连接基。这些杂环可以进一步被取代。

取代的环烷基和杂环基可以被如下所述的任何合适的取代基取代。

如本文所用，术语“芳基”是指任选取代的苯环或任选取代的苯环体系与一个或多个任选取代的苯环稠合，以形成例如蒽、菲或萘环体系。“芳基”的实例包括但不限于苯基、2-萘基、1-萘基、联苯基、以及其取代的衍生物。

如本文所用，术语“杂芳基”是指五元，六元或七元单环芳环，或指包含至少一个五元，六元或七元单环芳环的稠合双环或三环芳环体系。这些杂芳环含有一个或多个氮，硫和/或氧杂原子，其中n-氧化物和硫氧化物和二氧化物是允许的杂原子取代，并且可以任选地被最多三个原子取代。本文使用的“杂芳基”基团的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、恶唑基、异恶唑基、恶二唑基、氧代吡啶基、噻二唑基、异噻唑基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基及其取代形式。

如本文所用，术语“烷基硫基”是指如上定义的烷基，其通过一个或多个硫(-s-)原子或硫基团键合，或在烷基链末端内或末端含有一个或多个硫原子或基团。它包括，例如，下列基团：硫醇、硫酯、硫醚、烷基硫化物、烷基磺酰基、烷基亚砜基、烷基砜基、烷基次磺酸、烷基亚磺酸和链烷基磺酸。烷基硫基的一些非限制性实例包括-ch2ch2so2ch3、-ch2s(o)oh、-so2ch2ch3、-ch2s-oh、-ch2sh、-ch3ch2sch3、ch2ch2s(o)ch3、ch2ch2so3h。如下所述，这些基团可以进一步被取代，以提供诸如烷基磺酰氨基的基团。

如本文所用，术语“烷氧基”是指如上定义的烷基，其通过一个或多个氧(-o-)原子键合，或在烷基链内含有一个或多个氧原子。因此，这些基团包括酯、醚、酮和醛。烷氧基的一些非限制性实例包括-ch2ch2och3、-och2ch3、-co2ch2ch3、-ch2oh、-ch3ch2c(o)ch3、-ch2ch2cooch3、-och2ch2och3等。如下所述，这些基团可以进一步被取代。

如本文所用，术语“烷基氨基”是指如上所定义的烷基链，其包括烷基链内的胺基，或在与化合物的其余部分的取代基相邻的链的起始处的胺，或在链的末端。例如，烷基氨基可以是如下基团：-ch2ch2nhch3、-nhch2ch3、-ch2n(ch3)2、-ch2ch2nh2或类似物。取决于取代基结合的位置，例如酰胺(例如，其中取代基在r3处通过胺结合)。如下所述，烷基氨基可以进一步被取代。

如本文所用，术语“卤代烷基”是指与卤素基团键合的如上定义的烷基。卤代烷基的一些实例包括-ch2f、-cf3和-ch2ch2ch2chcl2。在可能的情况下，这些基团可以进一步被取代，如下所述。例如，-ch2c(o)ch2chcl2。

如本文所用，术语“羟基烷基”是指与羟基键合的如上定义的烷基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。

如本文所用，术语“烷基羧基”是指与羧基键合的如上定义的烷基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。

如本文所用，术语“卤代烷氧基”是指与卤素基团键合的如上定义的烷氧基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。

如本文所用，术语“烷基羧酰胺”是指与羧酰胺基团键合的如上定义的烷基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。

如本文所用，术语“芳氧基”，“芳基氨基”或“芳硫基”是指分别通过氧(-o-)原子，氨基或硫基键合的如上定义的芳基。氨基和硫代基团可以进一步被取代，如下所述。

如本文所用，术语“芳烷基”是指通过如上定义的烷基键合的芳基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。当该基团具有特定的碳原子范围时，例如“c1-c4芳烷基”，c1-c4是指该基团的烃基组分中的碳原子数。

如本文所用，术语“芳烷氧基”是指通过如上定义的烷氧基键合的芳基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。当该基团具有特定的碳原子范围时，例如“c1-c4芳烷氧基”，c1-c4是指该基团的烷基组分中的碳原子数。

如本文所用，术语“芳烷基氨基”是指通过如上定义的烷基氨基键合的芳基。如下所述，这些基团可以进一步被取代。当该基团具有特定的碳原子范围时，例如“c1-c4芳烷基氨基”，c1-c4是指该基团的烷基组分中的碳原子数。

如本文所用的“取代基”是指与目标分子内的原子共价键合的分子部分。例如，“环取代基”可以是诸如卤素，烷基或本文所述的其他取代基的部分，其与作为环成员的原子，优选碳或氮原子共价键合。如本文所用，术语“取代的”是指指定原子上的任何一个或多个氢被选自指定的取代基取代，条件是不超过指定的原子的正常价，并且取代产生的化合物是稳定的，即可以分离，表征和进行生物活性测试的化合物。

在整个说明书中，使用的术语“任选取代的”或“可以被取代的”等表示该基团可以与或不与一个或多个非-氢取代基进一步取代或稠合(以形成多环体系)。对于合适的化学上合适的特定官能团的取代基对于本领域技术人员来说是显而易见的。

取代基的实例包括但不限于：

c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6卤代烷氧基、c1-c6羟基烷基、c3-c7杂环基、c3-c7环烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基硫基、c1-c6烷基羧基、烷基酰胺、氧代、羟基、硫代、氨基、酰基、羧基、氨基甲酰基、芳基、芳氧基、杂芳基、氨基磺酰基、芳酰基、芳酰基氨基、杂芳酰基、酰氧基、芳酰氧基、杂芳酰氧基、烷氧基羰基、硝基、氰基、卤素、脲基或c1-c6全氟烷基。

在适当的情况下，任何这些基团可以进一步被任何上述基团取代。例如，烷基氨基，或二烷基氨基，c1-c6烷氧基等。

该化合物的盐优选是药学上可接受的，但应理解，非药学上可接受的盐也属于本发明的范围，因为它们可用作制备药学上可接受的盐的中间体。

术语“药学上可接受的衍生物”可包括任何药学上可接受的盐，水合物或前药或任何其他化合物，或在给予受试者时能够提供(直接或间接)式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物，或其活性代谢物或残基。

合适的药学上可接受的盐包括但不限于药学上可接受的无机酸的盐，例如：盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸，或药学上可接受的有机酸的盐，例如：乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、富马酸、苹果酸、柠檬酸、乳酸、粘液、葡萄糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、单宁酸、抗坏血酸和戊酸。

碱盐包括但不限于与药学上可接受的阳离子形成的那些，例如钠、钾、锂、钙、镁、锌、铵、烷基铵(例如由三乙胺形成的盐)、烷氧基铵(例如与乙醇胺和乙二胺形成的盐)、胆碱或氨基酸(如精氨酸，赖氨酸或组氨酸)形成。关于药学上可接受的盐的类型及其形成的一般信息是本领域技术人员已知的，并且如常见文章中所述，例如p.h.stahl和c.g.wermuth的《药用盐手册》(handbookofpharmaceuticalsalt，第1版，2002，wiley-vch)。

含氮碱基可用试剂进行季铵化，例如：低级烷基卤化物试剂：甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐：二甲基和硫酸二乙酯；和其他试剂。

前药包括：氨基酸残基化合物，或与游离氨基和式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物的酰氨基共价连接的两个或更多个(例如，两个，三个或四个)氨基酸残基的多肽链。氨基酸残基包括通常由三个字母符号表示的20种天然存在的氨基酸，还包括：4-羟基脯氨酸、羟赖氨酸、锁链素、异锁链素、3-甲基组氨酸、戊氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和蛋氨酸砜。前药还包括：碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和烷基酯化合物，其通过羰基碳前药侧链共价键合到式i，式ii，式iii和/或式iv的上述取代基上。

术语“多晶型物”包括式i，式ii，式iii和/或式iv化合物的任何结晶形式，例如无水形式、含水形式、溶剂化物形式和混合溶剂化物形式。

“溶剂化物”指本发明化合物与溶剂的相互作用形成的化合物。

化合物的治疗用途

令人意外的是，本发明人发现式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物对mtb表现出有效的和/或选择性抑制活性。这些化合物破坏了结核分枝杆菌磷酸-n-murnac-五肽转位酶(murx或移位酶i)的活性，其是用于脂质i(分枝杆菌肽聚糖合成的关键中间体)生物合成的完整膜酶。

因此，这些化合物可用于预防和/或治疗由结核分枝杆菌(mtb)和/或具有酶磷酸-n-murnac-五肽转位酶(murx)的细菌调节的疾病或病症。因此，该化合物可用于预防和/或治疗结核病。

该化合物还可用于治疗其他细菌引起的其他疾病或病症，例如：鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、产气肠杆菌、人苍白杆菌、产碱普罗威登斯菌、枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、伊氏利斯特菌、表皮葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌和假结核耶氏菌。

优选地，其他细菌为革兰氏阳性的。优选地，这些细菌为鸟分枝杆菌、麻风分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、牛分枝杆菌、枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、伊氏利斯特菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。甚至更优选地，这些细菌为鸟分枝杆菌，麻风分枝杆菌，脓肿分枝杆菌和牛分枝杆菌。

因此，该化合物可用于治疗hiv/aids和囊性纤维化，麻风病和支气管扩张中的机会性感染以及由这些或类似细菌引起的其他疾病。

因此，一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含式i，式ii，式iii和/或式iv所示的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，和药学上可接受的赋形剂。

另一方面，本发明提供预防和/或治疗由细菌调节的疾病或病症的方法，包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物。

在一个实施方案中，细菌为鲍曼不动杆菌。在另一个实施方案中，细菌为大肠杆菌。在另一个实施方案中，细菌为铜绿假单胞菌。在另一个实施方案中，细菌为金黄色葡萄球菌。在另一个实施方案中，细菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。在另一个实施方案中，细菌为霍乱弧菌。在进一步的实施方案中，细菌为产气肠杆菌。在另一个实施方案中，细菌为人苍白杆菌。在进一步的实施方案中，细菌为产碱普罗威登斯菌。在另一个实施方案中，细菌为枯草芽孢杆菌。在另一个实施方案中，细菌为屎肠球菌。在进一步的实施方案中，细菌为伊氏利斯特菌。在另一个实施方案中，细菌为表皮葡萄球菌。在又一个实施方案中，细菌为鼠伤寒沙门氏菌。在另一个实施方案中，细菌为假结核耶氏菌。

优选地，细菌为革兰氏阳性菌。优选地，细菌为结核分枝杆菌(mtb)、鸟分枝杆菌、麻风分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、牛分枝杆菌、枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、伊氏利斯特菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。甚至更优选地，细菌为结核分枝杆菌(mtb)、鸟分枝杆菌、麻风分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和牛分枝杆菌。最优选地，细菌为结核分枝杆菌(mtb)。

另一方面，本发明提供预防和/或治疗由结核分支杆菌调节的疾病或病症的方法，包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物。

另一方面，本发明提供预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调节的疾病或病症的方法，该方法包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的本发明式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或盐，溶剂化物的组合物，多晶型物或其前药和药学上可接受的赋形剂。

另一方面，本发明提供预防和/或治疗由细菌调节的疾病或病症的方法，包括给予有此需要的哺乳动物治疗有效量的式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于制备预防和/或治疗由革兰氏阳性细菌调节的疾病或病症的药物中的用途。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于制备预防和/或治疗由结核分枝杆菌(mtb)调节的疾病或病症的药物中的用途。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于制备预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调控的疾病的药物中的用途。

在另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药或包含式i，式ii，式iii和/或式iv化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物，制备用于预防和/或治疗结核病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于预防和/或治疗由细菌调节的疾病或病症，优选革兰氏阳性细菌。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于预防和/或治疗由结核分枝杆菌(mtb)调节的疾病或病症。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物，用于预防和/或治疗由具有磷酸-n-murnac-五肽转位酶的细菌调控的疾病或病症。

另一方面，本发明提供式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，或包含式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药和药学上可接受的赋形剂的组合物用于预防和/或治疗结核病。

磷酸-n-murnac-五肽转位酶可以是murx或mray。优选地，磷酸-n-murnac-五肽转位酶为murx。

在本发明的一个实施方案中，在上述方法和用途中，预防或治疗的结核病(tb)为耐多药结核病(mdrtb)。在另一个实施方案中，在上述方法和用途中，预防或治疗的结核病是广泛的耐药结核病(xdrtb)。

在一个实施方案中，所述的tb对利福平、异烟肼、乙胺丁醇和/或吡嗪酰胺的治疗具有抗性。

在一个方面，结核分枝杆菌(mtb)为mtb的h37rv菌株。

给药

药物组合物可以由式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药配制用于任何合适的给药途径，包括例如：局部(例如，透皮或眼部)、口服、口腔、鼻腔、阴道、直肠或肠胃外给药。本文所用的术语肠胃外包括：皮下、皮内、血管内(例如，静脉内)、肌肉内、脊柱、颅内、鞘内、眼内、眼周、眶内、滑膜内和腹膜内注射，以及任何类似的注射或输注技术。在一些实施方案中，优选适于口服或肠胃外给药的组合物。例如，合适的口服形式包括：片剂、含片、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂。对于静脉内、肌肉内、皮下或腹膜内给药，可以将一种或多种化合物与无菌水溶液混合，所述无菌水溶液优选与接受者的血液等渗。该制剂可以通过将固体活性成分溶解在含有生理相容物质(如氯化钠或甘氨酸)的水中，其具有与生理条件相容的缓冲ph以产生水溶液，并使所述溶液无菌来制备。制剂可以单位或多剂量容器形式存在，例如密封的安瓿或小瓶。组分的实例见述于《副药典》(ma室温indale-theextrapharmacopoeia)(英国医药出版社，伦敦1993)和ma室温in(ed.),remington的《药物科学》。

在本说明书的上下文中，术语“给药”和该术语的变体包括“给予”和“给药”，包括通过任何适当的方式接触、施用、递送或提供本发明的化合物或组合物到生物体或表面。

用于抑制mtb和/或mtb磷酸-n-murnac-五肽转位酶(murx)，例如mtb的h37rv菌株，以及用于预防和/或治疗结核病和mtb和其他细菌调节的其他疾病和病症，本发明的生物活性化合物的剂量可以在宽范围内变化，可以根据个体要求进行调整。本发明的活性化合物通常以治疗有效量给药。优选的剂量范围为每天每千克体重约0.1mg至约140mg(例如，一位患者每天约0.5mg至约7g)。日剂量可以单剂量或多剂量给药。可以与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的受试者和特定的给药方式而变化。剂量单位形式通常含有约1mg至约500mg活性成分。

然而，应理解，任何特定受试者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括：所用特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合(即用于治疗受试者的其他药物)，以及接受治疗的特定疾病的严重程度。如果化合物是局部给药而不是全身给药，并且用于预防而不是用于治疗，则剂量通常较低。这些治疗可以根据需要经常来进行，并在治疗医师判断为必要的时间内进行。本领域技术人员将理解，待施用的式i，式ii，式iii和/或式iv化合物的剂量方案或治疗有效量可能需要针对每个个体进行优化。药物组合物含有的活性成分约0.1至2000mg，优选约0.5至500mg，最优选约1至200mg。日剂量为约0.01至100mg/kg体重，优选约0.1至约50mg/kg体重，可能是合适的。每日剂量可以按照每天一至四剂量给药。优选地，每日给药一次。

术语“治疗有效量”或“有效量”是指式i，式ii，式iii和/或式iv的化合物或其盐、溶剂化物、多晶型物或前药，可以改善或修复由革兰氏阳性细菌(的量)调节疾病的症状的量。

术语“治疗”，“治疗”和“治疗”在本文中用于指治愈性治疗，预防性治疗和预防性治疗。因此，在本公开的上下文中，术语“治疗”包括治愈，改善或缓和由革兰氏阳性细菌(如结核病)调节的病症的严重程度。

“预防”或“预防”是指如果在本发明的化合物或药物组合物给药之后，防止由革兰氏阳性细菌(例如结核病)调节的病症的发生，或缓和病症的严重程度。

如上所述，本发明化合物可与药物载体，稀释剂或赋形剂一起给药。

生物测试

使用刃天青测定法，筛选对mtb的h37rv毒株的本发明化合物，然后针对hek293细胞进行反筛选以测量针对一组15种致病性革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌菌株的选择性。

测试的化合物达200μm浓度时，对hek293细胞没有细胞毒性。此外，大多数测试的化合物对mtb具有选择性。

此外，还进行了初步筛选，以评估化合物对mtbmurx抑制活性。这涉及mtbmc²6230膜蛋白制剂的生成，其含有murx以及其他膜蛋白。通过加入200nm浓度的给定化合物以及udp-[¹⁴c]glcnac和udp-murnac五肽(park's核苷酸)来评估针对murx的抑制作用。在酶促反应的猝灭和基于提取的后处理之后，使用薄层色谱(tlc)和磷光成像来测量酶的抑制程度。这些步骤的进一步细节将在下面的实施例部分中讨论。

然后研究了这些化合物对聚异戊二烯基磷酸-n-乙酰葡糖胺-1-磷酸转移酶(weca)的抑制作用。然而，测试的本发明化合物对weca没有抑制作用，表明这些化合物是肽聚糖生物合成中脂质i形成的选择性抑制剂。

使用一系列浓度的几种化合物进行基于tlc的测定，以确定ic50值。结果显示出良好的活性，并且表明针对mtbmurx的ic50与mtbh37rv体外的活性之间具有显著的相关性。

还在利用thp-1巨噬细胞的细胞内测定中评估这些化合物的抗分枝杆菌活性，所述thp-1巨噬细胞用mtb感染，并且在一系列浓度的化合物存在下测量分枝杆菌生长的抑制。测试的化合物维持抗分枝杆菌活性以抵抗细胞内分枝杆菌生长。

最后，测试这些化合物在小鼠和人血浆以及小鼠和人肝微粒体中的稳定性。每种化合物显示出优异的稳定性，对于人和小鼠血浆，降解半衰期>7h，对于人和小鼠肝微粒体，降低半衰期>160分钟。

所测试的化合物显示有效抑制负责脂质i合成的酶murx，这是mtb中肽聚糖的途中的关键中间体。该化合物对mtb具有选择性活性。这种选择性为这些化合物作为tb药物以及murx作为tb药物靶标的潜在用途提供了实践优势。

生物测试的进一步细节可以在实施例部分中看到。

应当理解，在本说明书中，对本发明的公开和限定可扩展到上述提到的或从文本或附图中显而易见的两个或更多个单独特征的所有可选组合。所有这些不同的组合构成了本发明的各种可替代方面。

通过以下说明性和非限制性实施例描述本文所述的方法和化合物。

实施例

1.材料和方法

在商业制备的二氧化硅板(merckkieselgel600.25mmf254)上进行分析型薄层色谱(tlc)。使用230-400目kieselgel60二氧化硅进行快速柱色谱，如所述用蒸馏溶剂洗脱。用于tlc和柱色谱的溶剂的比例以v/v表示。通过254nm的uv光或使用香草醛或钼酸铈染色使化合物可视化。除非另有说明，否则商业材料均按原样使用。从氢化钙中蒸馏出dcm和meoh，从钠/二苯甲酮上蒸馏出thf和乙醚。叔-丁醇在使用前，在活化的分子筛上干燥至少24小时。无水dmf购自sigmaaldrich。

设备信息

除非另外说明，在300.2,400.2,500.2和600.2mhz的频率下，300k下，使用brukeravancedpx300，dpx400，dpx500和dpx600nmr光谱仪，记录¹hnmr光谱。¹hnmr化学位移以百万分之一(ppm)报告，并参考溶剂残留信号：cdcl37.26，meod3.31，δ丙酮δ-d62.05，dmso-δd62.50δ和d2o4.79。δ¹hnmr数据报告为化学位移(δh)，相对积分，多重性(s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，dd＝两个双重峰，ddd＝双峰的双峰的双峰，dt＝两个三重峰，td＝两个三重峰，tt＝三个三重峰，qd＝两个四重峰)，耦合常数(jhz)并且尽可能对峰进行归属。在旋转异构体存在下，当旋转异构体的比例小于1.5：1时，报道了两种旋转异构体的¹h和¹³cnmr数据。对于比率大于或等于1.5的情况，仅报告了主要的旋转异构体。

在finniganlcqdeca离子阱质谱仪(esi)上记录低分辨率质谱。在bruker7t傅立叶变换离子回旋共振质谱仪(fticr)上记录高分辨率质谱。

使用optimelt全自动熔点仪(stanfordresearchsystemsoptimeltautomatedmeltingpointsystem)记录熔点。使用opus6.5软件在具有衰减全反射(atr)能力的brukeralpha光谱仪上记录红外(ir)吸收光谱。使用perkinelmermodel341旋光仪测量旋光度，并且在10^-1degcm²g¹中报道值。-

使用带有沃特斯2996光电二极管阵列检测器或沃特斯490e可编程波长检测器的沃特斯600多溶剂输送系统和沃特斯500泵，使用，在254和280nm下操作，使用sunfireprepc18obd，19x50mm色谱柱进行制备型反相hplc，操作流速为7mlmin¹。化合物用0.1％tfa或甲酸水溶液(溶剂a)和0.1％tfa或甲酸在ch3cn(溶剂b)中洗脱，使用0-50％b的线性梯度，洗脱40分钟或0-50％b超过45分钟，或50-100％b超过40分钟。

lc-ms在shimadzulc-ms2020仪器上进行，该仪器由lc-m20a泵和耦合到以正模式操作的shimadzu2020质谱仪(esi)的spd-20auv/vis检测器组成。在waterssunfire5μm，2.1×150mm柱(c18)上进行分离，以0.2mlmin^-1的流速操作。使用0.1％甲酸水溶液(溶剂a)和0.1％甲酸在ch3cn(溶剂b)中的流动相进行分离，线性梯度为0-50％b，30分钟或50-100％b，30分钟。

合成

尿苷胺18的合成

尿苷胺的合成使用修改的boojamra等人¹先前发表的路线进行。

图s1尿苷胺18的合成。试剂和条件：a)tipsotf，ipr2net，dmf，室温，2.5小时，82％；b)10％pd/c，h2(1atm)，meoh，室温，30分钟，80％；c)(i)tfa：ch2cl2(9：1v/v)，室温，15分钟；(ii)氯甲酸异丁酯，ipr2net，thf，0℃至室温，1.5小时；(iii)nabh4，h2o(滴加)，0℃，1小时，69％；d)甲苯磺酰氯，吡啶，室温，18小时，82％；e)nan3，dmf，75℃，4小时，82％；f)(i)tbaf(1m的thf溶液)，thf，室温，1小时，(ii)dowex8-400，caco3，meoh，室温，1小时，定量；g)1,3-丙二硫醇，et3n，meoh，室温，16小时，68％。

叔-丁基(4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5-二氢呋喃-2-羧酸酯(s2)

向酯s1(3.64g，12.3mmol)和n，n-二异丙基乙胺(2.1ml，12.3mmol)的dmf(37ml)溶液中加入三异丙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(4.9ml，17.6mmol)并进行反应。在室温下，搅拌2.5小时。用饱和na2co3水溶液(40ml)淬灭反应，并在et2o(200ml)和h2o(40ml)之间分配。将有机层用0.2mhcl(50ml)，h2o(5×50ml)，盐水(50ml)洗涤，并经无水na2so4干燥。将有机层真空浓缩，得到粗残余物，将其通过柱色谱纯化(2：1v/v己烷：etoac)得到白色泡沫状的酯s2(4.57g，82％)。

¹hnmr(500mhz，cdcl3)：δ8.70(s，1h，nh)，7.03(d，j＝8.1hz，1h，h-6)，6.27(d，j＝3.2hz，1h，h-3’)，5.96(d，j＝2.6hz，1h，h-1’)，5.77(d，j＝8.1hz，1h，h-5)，5.23(dd，j＝3.3,2.6hz，1h，h-2’)，1.54(s，9h，co2^tbu)，1.12-1.07(m，3h，[ch(ch3)2]3si)，1.06-1.02(m，18h，[ch(ch3)2]3si)。¹³cnmr(126mhz，cdcl3)：δ162.5(c＝o)，158.2,151.3,149.3,140.0,111.2,103.7,95.1,83.5,79.7,28.0,17.8,17.8,12.0。ir(atr)：2944,2868,1725,1698cm^-1。lrms[m+h⁺]453.0。hrms(esim/z)[m+na⁺]c22h36n2o6sina计算值，475.2240；测量值475.2238。

叔-丁基(2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-((三异丙基甲硅烷氧基)四氢呋喃-2-羧酸酯(s3)

向酯s2(568mg，1.25mmol)的meoh(21ml)溶液中加入10％pd/c(86mg)，通过交替高真空与氮气进行3次循环，使反应脱气。将反应混合物在氢气氛下，搅拌30分钟。此时，将反应物通过过滤，并将滤饼用meoh(100ml)彻底洗涤。真空除去溶剂，得到粗残余物，通过柱色谱纯化(1：1v/v己烷：etoac)得到粘性无色油状酯s3(480mg，80％)。

¹hnmr(500mhz，cdcl3)：δ7.18(d，j＝8.1hz，1h，h-6)，5.72-5.68(m，2h，h-1’+h-5)，4.78-4.74(m，2h，h-2’+h-4’)，2.57(ddd，j＝13.2,8.7,6.2hz，1h，h-3’)，2.24(ddd，j＝13.3,5.2,3.8hz，1h，h-3’)，1.49(s，9h，co2^tbu)，1.15-1.05(m，3h，[ch(ch3)2]3si)，1.05-1.01(m，18h，[ch(ch3)2]3si)。¹³cnmr(126mhz，cdcl3)：δ170.0(c＝o)，163.0(c＝o)，149.7(c＝o)，141.4,102.2,97.2,82.2,78.3,75.1,37.8,28.0,17.8,17.8,11.9。ir(atr)：2943,2867,1688cm^-1。lrms[m+h⁺]455.3。hrms(esim/z)[m+na⁺]c22h38n2o6sina计算值，477.2397；测量值477.2400。

1-((2r，3r，5r)-5-(羟甲基)-3-((三异丙基硅基)氧基)四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(s4)

将酯s3(456mg，1.0mmol)溶于9：1v/vtfa：ch2cl2(2.2ml)中，并将反应物在室温下搅拌15分钟。真空除去溶剂，得到残余物，随后将其溶解在thf(13ml)中并冷却至0℃，然后加入氯甲酸异丁酯(390μl，3mmol)和n，n-二异丙基乙胺(260μl，1.5mmol)。将反应混合物加热至室温，并再搅拌1.5小时，然后冷却至0℃。加入硼氢化钠(265mg，7mmol)，然后在20分钟内滴加水(2.3ml)以溶解硼氢化钠。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后真空浓缩。将残余物在etoac(40ml)和水(10ml)之间分配。分离有机相，用1mhcl(10ml)，盐水(10ml)洗涤，用无水mgso4干燥。真空除去溶剂，得到粗残余物，通过柱色谱(4：1v/vetoac：己烷→etoac)得到白色泡沫状醇s4(265mg，69％)。

¹hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.94(s，1h)，7.25(d，j＝8.1hz，1h，h-6)，5.72(d，j＝8.1hz，1h，h-5)，5.69(d，j＝2.1hz，1h，h-1’)，4.73(ddd，j＝5.7,3.5,2.1hz，1h，h-2’)，4.61(app.dq，j＝9.0,4.7hz，1h，h-4’)，3.80-3.72(m，2h，h-5’)，2.60(s，1h，oh)，2.27(ddd，j＝13.9,8.3,5.8hz，1h，h-3’)，1.96(ddd，j＝13.6,5.0,3.4hz，1h，h-3’)，1.20-1.08(m，3h，[ch(ch3)2]3si)，1.06(d，j＝7.0hz，18h，[ch(ch3)2]3si)。¹³cnmr(101mhz，cdcl3)：δ163.2(c＝o)，150.0(c＝o),140.2,102.1,95.3,82.4,76.1,65.1,34.8,17.9,17.8,12.0。ir(atr)：2943,2866,1686cm^-1。lrms[m+na⁺]407.0。hrms(esim/z)[m+na⁺]c18h32n2o5sina计算值，407.1978；测量值407.1973。

((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-((三异丙基硅基)氧基)四氢呋喃-2-基)甲基4-甲基苯磺酸盐(s5)

将醇s4(1.53g，3.97mmol)和对-甲苯磺酰氯(3.70g，19.3mmol)溶解在吡啶(33ml)中，并将反应物在室温下搅拌18小时。此时，将反应物真空浓缩，得到残余物，将其溶于etoac(200ml)中，用水(50ml)，1mhcl(50ml)，盐水(50ml)洗涤并用无水mgso4干燥。真空除去溶剂，得到粗残余物，通过柱色谱纯化(1：1v/v己烷：etoac)得到无色油状甲苯磺酸酯s5(1.73g，82％)。

¹hnmr(500mhz，cdcl3)：δ8.86(s，1h，nh)，7.80(app。d，j＝8.0hz，2h，ar-h)，7.34(d，j＝8.0hz，2h，ar-h)，7.13(d，j＝8.1hz，1h，h-6)，5.70(d，j＝8.1hz，1h，h-5)，5.54(d，j＝2.0hz，1h，h-1’)，4.75-4.67(m，1h，h-4’)，4.65(app.dt，j＝5.1,2.0hz，1h，h-2’)，4.21(dd，j＝10.4，7.0hz，1h，h-5’)，4.12(dd，j＝10.4,4.5hz，1h，h-5’)，2.45(s，3h，ch3)，2.22(ddd，j＝13.7,8.3，5.4hz，1h，h-3’)，1.88(app.dt，j＝13.7,3.6hz，1h，h-3’)，1.15-1.02(m，3h，[ch(ch3))2]3si)，1.00(d，j＝6.7hz，18h，[ch(ch3)2]3si)。¹³cnmr(126mhz，cdcl3)：δ163.0,149.8,145.0,140.0,132.7,129.9,128.0,102.1,95.7,79.0,75.8,71.5,35.2,21.7,17.9,17.8,11.9.ir(atr)：2944,2866,1686cm^-1。lrms[m+na⁺]561.0。hrms(esim/z)[m+na⁺]c25h38n2o7ssina计算值，561.2067；测量值561.2061。

1-((2r，3r，5r)-5-(叠氮基甲基)-3-((三异丙基硅基)氧基)四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(s6)

将甲苯磺酸酯s5(1.65g，3.07mmol)溶于dmf(34ml)中。加入叠氮化钠(2.0g，30.7mmol)，将反应混合物加热至75℃，保持4小时。将反应用etoac(200ml)稀释，用水(5×40ml)，盐水(40ml)洗涤，并经无水mgso4干燥。真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过柱色谱(1：1v/vetoac：己烷),得到无色油状叠氮化物s6(1.09g，87％)。

¹hnmr(400mhz，cdcl3)：δ9.01(s，1h，nh)，7.21(d，j＝8.1hz，1h，h-6)，5.72(d，j＝8.1hz，1h，h-5)，5.66(d，j＝2.1hz，1h，h-1’)，4.75(ddd，j＝5.7,3.6,2.1hz，1h，h-2’)，4.62(tt，j＝7.4,4.7hz，1h，h-4’)，3.60(dd，j＝12.7,7.1hz，1h，h-5’)，3.39(dd，j＝12.7,4.6hz，1h，h-5’)，2.28(ddd，j＝13.5,7.9,5.7hz，1h，h-3’)，1.93(ddd，j＝13.5,4.9,3.5hz，1h，h-3’)，1.19-1.08(m，3h，[ch(ch3)2]3si)，1.06(d，j＝6.7hz，18h，[ch(ch3)2]3si)。¹³cnmr(101mhz，cdcl3)：δ163.2(c＝o)，149.9(c＝o)，140.4,102.1,96.1,80.6,76.1,55.1,36.3,17.9,17.9,12.0。ir(atr)：2944,2867,2102,1686cm^-1。lrms[m+h⁺]410.0。hrms(apcim/z)[m+na⁺]c18h31n5o4sina计算值，432.2043；测量值432.2038。

1-((2r，3r，5r)-5-(叠氮基甲基)-3-羟基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(s7)

将1mtbaf的thf溶液(280μl，0.28mmol，1.15eq.)滴加到叠氮化物s6(0.10g，0.24mmol，1eq.)的thf(1.8ml)溶液中并在室温下，搅拌1小时。然后将反应混合物用meoh(2.8ml)稀释，并与碳酸钙(0.39g)和dowex8-400(1.2g)，在室温下，再搅拌1小时。然后将反应混合物经celite过滤并真空浓缩，得到所需的无色油状叠氮化物s7(53.5mg，88％)，其不经进一步纯化而使用。

[α]d²⁵＝+25.8°(在ch2cl2中c＝0.21)。¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ10.53(br，1h，nh)，7.35(d，j＝7.5hz，1h，h-6)，5.81(m，1h，h-5)，5.72(d，j＝7.5hz，1h，h-1’)，4.77-4.74(m，2h，h-2+h-4’)，3.64(m，1h，h-5’)，3.42(m，1h，h-5’)，2.39(m，1h，h-3’)，1.99(m，1h，h-3’)。ir(atr)：3056,2101,1682,1461cm^-1。lrms[m+h⁺]253.1。这些数据与boojamraet¹等人报道的数据一致。

1-((2r，3r，5r)-5-(氨基甲基)-3-羟基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(18)

向叠氮化物s7(50.0mg，198μmol，1eq.)在meoh(1.0ml)中的溶液中加入1,3-丙二硫醇(200μl，2.0mmol，10eq.)和et3n(210μl，1.5mmol，7.6eq.)。将反应物在室温下搅拌16小时，然后真空除去溶剂。将得到的残余物重新溶解在h2o(45ml)中，并用ch2cl2(10×6ml)洗涤。将水层冻干，得到所需的白色蓬松固体胺18(46.4mg，0.134mmol，68％)，其不经进一步纯化而使用。

¹hnmr(500mhz，cd3od)：δ7.56(d，j＝8.0hz，1h，h-6)，5.75(d，j＝2.2hz，1h，h-1’)，5.69(d，j＝8.0hz，1h，h-5)，4.68-4.48(m，1h，h-4’)，4.42(ddd，j＝6.1,3.6,2.2hz，1h，h-2’)，2.91(dd，j＝13.6,3.7hz，1h，h-5’)，2.83(dd，j＝13.5,5.9hz，1h，h-5’)，2.34(ddd，j＝14.1,8.1,6.2hz，1h，h-3’)，1.81(ddd，j＝13.7,4.8,3.6hz，1h，h-3’)。ir(atr)：3375,1684,1629cm^-1。lrms[m+h⁺]228.0。这些数据与之前由boojamra等人¹报道的数据一致。

s8和20的daba片段的合成

图s2.s8和20的daba片段的合成。试剂和条件：a)i.tfa：ch2cl2(1：1v/v)，室温，30分钟，ii.fmoc-osu，thf：h2o(1.2：1v/v)，nahco3，两步70％；b)纳米颗粒zn，2mhcl，meoh，室温，16小时，78％；c)i.20(1eq.)，10％na2co3,0℃，ii.氯甲酸烯丙酯(1.1eq.)，二恶烷，0℃至室温，1.5小时，83％；d)i.2-氯三苯甲基氯树脂，ipr2net，室温，16h；ii.20vol.％哌啶的dmf溶液，室温，2×4分钟。

(2s，3s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基-3-((苄氧基)(甲基)氨基)丁酸(s10)

将酸s9(根据先前由boojamra等人¹报道的步骤合成)(4.42g，13mmol)在tfa和ch2cl2(1：1v/v，30ml)的混合物中合成，在室温下搅拌30分钟。真空除去溶剂，得到残余物，将其溶于thf(70ml)中。加入饱和nahco3水溶液(70ml)以及固体nahco3(约10g)(直到反应混合物呈碱性)，然后加入fmoc-琥珀酰亚胺(4.62g，14mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。此时，加入h2o(100ml)并将反应混合物用乙醚(3×50ml)洗涤。用1mhcl将水层酸化至ph2并用etoac(3×250ml)萃取。合并的有机层用无水mgso4干燥，真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过柱色谱纯化(3：1v/v己烷：etoac→1：1v/v己烷：etoac)得到无色油状fmoc-保护的酸s10(4.19g，70％)。

¹hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.96-7.69(m,2h,ar-h),7.59(dd,j＝7.7,3.4hz,2h,ar-h),7.41-7.27(m,9h,ar-h),5.60(d,j＝8.3hz,1h,nh),4.75(s,2h,ch2ph),4.43(m,3h,α-ch+fmoc-ch2),4.23(app.t,j＝7.2hz,1h,fmoc-ch),3.30-3.05(m,1h,β-ch),2.68(s,3h,nch3),1.22(d,j＝6.9hz,3h,γ-ch3).¹³cnmr(126mhz,cdcl3):δ173.5,156.8,143.8,141.5,136.0,129.0,128.8,128.6,127.3,127.2,125.3,120.1,74.7,67.4,64.2,55.3,47.3,41.2,10.1.ir(atr):2955,1720cm^-1.lrms[m+h⁺]461.4.hrms(esim/z)[m+na⁺]c27h28n2o5na计算值，483.1896；测量值，483.1890。

(2s，3s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(甲基氨基)丁酸(s8)

将纳米颗粒锌(2.15g，33mmol)加入到剧烈搅拌的酸s10(3.04g，6.6mmol)的meoh(34ml)溶液中。逐滴加入2mhcl(34ml)溶液，并将反应物在室温下搅拌2小时。然后加入另一部分纳米颗粒锌(0.31g，4.8mmol)和2mhcl(11ml)，并将反应物在室温下搅拌16小时。将反应物真空浓缩至其体积的一半，随后用h2o(400ml)稀释，并用ch2cl2(80ml)洗涤。将水层用etoac(5×150ml)和etoac/meoh混合物(9：1v/vetoac：meoh，2×150ml)萃取。将合并的有机层用无水mgso4干燥，真空除去溶剂，得到白色固体酸s8(1.82g，78％)，其不经进一步纯化而使用。

熔点133-135℃(分解)。¹hnmr(500mhz,cd3od):δ7.86-7.76(m,2h,ar-h),7.70(app.t,j＝7.4hz,2h,ar-h),7.40(dd,j＝8.1,6.7hz,2h,ar-h),7.32(ddd,j＝7.7,6.8,1.6hz,2h,ar-h),4.72-4.67(m,1h,daba-α-ch),4.55(dd,j＝10.5,6.7hz,1h,fmoc-ch2),4.41-4.32(m,1h,fmoc-ch2),4.27(app.t,j＝6.7hz,1h,fmoc-ch),3.77-3.70(m,1h,daba-β-ch),2.75(s,3h,nch3),1.26(d,j＝6.5hz,3h,daba-γ-ch3).¹³cnmr(100mhz,cdcl3):δ174.2(c＝o),156.7(c＝o),144.0,141.4,136.2,129.0,128.6,128.4,127.8,127.2,125.2,120.0,74.5,67.3,64.1,55.7,47.2,41.4,14.3.ir(atr):3335,3049,1704cm^-1.lrms[m+h⁺]355.1.hrms(esim/z)[m+na⁺]c27h28n2o5na计算值，483.1896；测量值，483.1890。

(2s，3s)-2-(((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(((烯丙氧基)羰基)氨基)丁酸(20)

将酸s8(0.60g，1.7mmol，1eq.)溶解在10％碳酸钠水溶液(14.3ml)中并冷却至0℃。将氯甲酸烯丙酯(196ul，1.9mmol，1.1eq.)的1,4-二恶烷(6.2ml)溶液滴加到上述反应混合物中，并将反应混合物加热至室温并搅拌1.5小时。随后用h2o(120ml)稀释反应，用乙醚(2×40ml)洗涤并用1mhcl酸化至ph2。然后用etoac(3×200ml)萃取水层，有机相经mgso4干燥，合并并真空浓缩成黄色油状物，其含有所需的白色泡沫状酸20(0.61g，83％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.75(d,j＝7.5hz,2h,ar-h),7.61-7.55(m,2h,ar-h),7.39(app.t,j＝7.5hz,2h,ar-h),7.30(app.t,j＝7.5hz,2h,ar-h),5.97-5.81(m,2h,nh+alloc-β-ch),5.33-5.14(m,2h,alloc-γ-ch2),4.73-4.32(m,6h,alloc-α-ch2+fmoc-ch2+daba-α-ch+daba-β-ch),4.20(t,j＝6.8hz,1h,fmoc-ch),2.85(s,3h,nch3),1.25(d,j＝6.7hz,3h,daba-γ-ch3).¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ173.0(c＝o),156.1(c＝o),143.8,143.6,141.3,132.5,127.7,127.1,125.0,120.0,117.6,67.2,66.6,57.1,53.4,47.2,29.5,14.1.ir(atr):3312,2984,1688,1683,1528cm^-1.lrms[m+h⁺]439.3.hrms(esim/z)[m+na⁺]c24h26n2o6na计算值，461.1688；测量值，461.1683。

(2s，3s)-3-((烯丙氧基)羰基)氨基)-2-氨基丁酸在2-氯三苯甲基氯树脂上(s11)

在室温下16小时，将氨基酸20(515mg，1.1mmol)加载到ch2cl2(6.5ml)中的2-氯三苯甲基氯树脂(745mg，1.05mmol)上。按照通用步骤2，用n，n-二异丙基乙胺(550μl，3.1mmol)，和fmoc-脱保护，得到树脂结合的s11(在λ＝301nm下光谱测量富烯-哌啶加合物测定的负载量65％)。

色氨酸4-硝基苯基氨基甲酸酯s12的合成

图s3.色氨酸4-硝基苯基氨基甲酸酯s12的合成。试剂和条件：a)mecn中20vol.％的哌啶，室温，30分钟，75％；b)4-硝基苯基氯甲酸酯，ch2cl2，室温，18小时，80％。

叔丁基(s)-3-(3-(叔丁氧羰基)-2-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)-3-氧代丙基)-1h-吲哚-1-羧酸酯(s12)

将叔-丁基酯s13(2.76g，4.74mmol)用20vol.％的哌啶的乙腈(20ml)溶液处理，并将反应物在室温下，搅拌20分钟。真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过柱色谱纯化(3：1v/v己烷：etoac，0.1vol.％et2nh)，得到脱保护的色氨酸黄色油状s14(1.28g，75％)。向s14(1.28g，3.56mmol)和n，n-二异丙基乙胺(620μl，3.56mmol)的ch2cl2(26ml)溶液中加入对氯苯基氯甲酸酯(860mg，4.27mmol)，将反应物在室温下搅拌19小时。真空除去溶剂，得到粗残余物，通过柱色谱纯化(7：1v/v己烷：etoac→5：1v/v己烷：etoac)得到白色泡沫状氨基甲酸酯s12(1.49g，80％)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(d,j＝9.1hz,2h,h-3+h-5),7.57(app.dt,j＝7.9,1.0hz,1h,ar-h),7.46(s,1h,ar-h),7.34(ddd,j＝8.4,7.2,1.3hz,1h,ar-h),7.29-7.21(m,3h,ar-h),5.74(d,j＝7.8hz,1h,nh),4.70-4.58(m,1h,α-ch),3.35(dd,j＝14.8,5.8hz,1h,β-ch2),3.25(dd,j＝14.9,5.5hz,1h,β-ch2),1.66(s,9h,3×ch3),1.46(s,9h,3×ch3).¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ170.0(c＝o),155.7(c＝o),152.5(c＝o),144.9,130.7,125.5,125.1,124.7,124.2,122.7,122.0,121.6,118.9,115.4,114.8,83.8,83.1,54.9,28.2,28.0,27.5.ir(atr):2988,2973,1724cm^-1.lrms[m(-no2ph+me)+na⁺]441.0.hrms(esim/z)[m(-no2ph+me)+na]⁺计算值c22h30n2o6na441.2002；测量值，441.1995。

图s4fmoc-尿苷胺的合成87。

1-((3ar，4r，6r，6ar)-6-(羟甲基)-2-甲氧基四氢呋喃[3,4d][1,3]二氧杂环戊烯4-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(84)

向尿苷(5.0g，21mmol，26eq.)的原甲酸三甲酯(13ml)溶液中加入对甲苯磺酸(0.14g，1.6mmol，1eq.)，并在室温下搅拌16小时。随后将反应冷却至0℃，然后加入28％w/vnaome的meoh溶液(0.15ml)，接着加入甲苯(5ml)，并在0℃下，再搅拌1小时。然后将反应混合物过滤并用甲苯洗涤，得到非对映异构纯的白色沉淀84(5.5g，19mmol，94％)。

¹hnmr(400mhz,(cd3)2so)δ11.38(s,1h,nh),7.77(d,j＝8.0hz,1h,h-6),6.09(s,1h,ch),5.80(d,j＝2.7hz,1h,h-1’),5.63(d,j＝8.0hz,1h,h-5),5.09(t,j＝5.4hz,1h,oh),5.00(dd,j＝6.5,2.6hz,1h,h-2’),4.85(dd,j＝6.4,3.8hz,1h,h-3’),4.06(dt,j＝4.5hz,1h,h-4’),3.59(dd,j＝11.9,5.3hz,2h,ch2),3.21(s,3h,ch3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so)δ163.7,150.8,142.6,117.3,102.2,91.5,86.2,83.2,80.5,61.6,50.7；lrms[m+h]⁺287.0。这些数据与yasuda等人^[1]报道的数据一致。

1-((2r，3r)-5-((二苯甲基氨基)甲基)-3-羟基-2,3-二氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(85)

向84(0.29g，1mmol，1eq.)的dmf(6.3ml)溶液中加入dmso(0.43ml，6mmol，6eq.)，edc·hcl(0.58g，3mmol，3eq.)，接着加入在dmf(1.9ml)中，预混tfa(40μl，2mmol，2eq.)和吡啶(80μl，1mmol，1eq.)的预混合物。将反应搅拌2小时，然后加入et3n(0.56ml，4mmol，4eq.)并再搅拌30分钟。然后加入草酸(0.25g，0.5mmol，0.5eq.)，然后真空将得到的残余物，再溶解于ch2cl2中的10％v/vmeoh中，并通过二氧化硅塞过滤。真空除去溶剂，得到黄色油状物，随后将其再溶于meoh(2.8ml)中。向其中加入二苯甲基胺(0.19ml，1.1mmol，1.1eq.)，nacnbh3(94mg，1.5mmol，1.5eq.)，然后加入acoh(40μl，0.7mmol，0.7eq.)并搅拌15小时。真空除去溶剂，将得到的残余物再溶解于ch2cl2中，用饱和nahco3水溶液，盐水洗涤，干燥(mgso4)。将有机相真空浓缩，并通过柱色谱法纯化残余物，用1：4v/v己烷：etoac洗脱，然后用纯etoac洗脱，得到黄色泡沫85(0.12g，0.29mmol，29％，2步)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.42-7.39(m,4h,ar-h),7.33-7.30(m,4h,ar-h),7.25-7.21(m,2h,ar-h),7.19(d,j＝8.1hz,1h,h-6),6.27(d,j＝1.45hz,1h,h-1’)5.64(d,j＝8.1hz,1h,h-5),5.21(d,j＝2.3hz,1h,h-3’),4.92(s,2h,ch+h-2’),3.40(s,2h,ch2)；¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ163.4,161.2,150.6,143.0,138.9,128.7,128.6,127.4,127.3,127.2,127.1,103.0,100.7,93.3,79.7,66.4,44.1；hrms计算值c22h21n3o4：mna⁺,414.14243。测量值：mna⁺,414.14247。

1-((2r，3r)-5-((二苯甲基氨基)甲基)-3-((三异丙基硅基)氧基)-2,3-二氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1h，3h)-二酮(86)

向85(0.12g，0.29mmol，1eq.)和ipr2etn(56μl，0.32mmol，1.1eq.)的dmf(0.8ml)溶液中滴加tips-otf(0.12ml，0.44mmol，1.5eq.)，并搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，将得到的残余物再溶解于ch2cl2中。将有机相用饱和nahco3水溶液，h2o，然后用盐水洗涤，na2so4干燥，并真空浓缩。所得残余物通过柱色谱纯化，用2：1v/v己烷：etoac洗脱，得到白色泡沫86(0.13g，0.24mmol，84％)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.43-7.41(m,4h,ar-h),7.35-7.31(m,4h,ar-h),7.27-7.23(m,2h,ar-h),7.14(d,j＝8.2hz,1h,h-6),6.35(d,j＝2.1hz,1h,h-1’),5.72(d,j＝8.1hz,1h,h-5),5.15(d,j＝2.3hz,1h,h-3’),5.05(t,j＝2.2hz,1h,h-2’),4.93(s,1h,ch),3.41(s,2h,ch2),1.10-1.08(m,21h,[ch(ch3)2]3)；¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ162.9,161.0,149.7,143.2,143.1,139.5,128.6,127.3,103.4,101.4,93.3,80.4,66.1,44.2,17.9,12.1；hrms计算值c31h42n3o4si：mna⁺,570.27585。测量值：mna⁺,570.27586。

(9h-芴-9-基)甲基(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酸酯(87)

向86(0.13g，0.24mmol，1eq.)的meoh(12ml)溶液中加入10％pd/c(51mg，0.05mmol，0.2eq.)和acoh(69μl，1.2mmol，5eq.)。将溶剂脱气10分钟，然后将烧瓶抽空并用n2(g)回填三次。然后使反应在h2(g)气氛下搅拌3.5小时。通过lcms测定反应完成后，除去h2(g)并将反应混合物经过滤并真空浓缩。将所得残余物再溶解于4mhcl的95％etoh(6ml)溶液中并搅拌3小时，然后真空浓缩，然后将所得残余物重新溶解在h2o中，用etoac(x3)洗涤并冻干。将残余物再溶于1：1v/vthf：饱和nahco3(aq)中(1.3ml)。向该溶液中加入fmoc-osu(48mg，0.14mmol，1.1eq.)并搅拌16小时。然后将反应混合物用etoac稀释，用h2o，盐水洗涤，干燥(mgso4)并真空浓缩。随后通过柱色谱法纯化得到的粗残余物，用ch2cl2洗脱，然后用含有10％meoh的ch2cl2洗脱，得到白色泡沫状的87(41mg，0.090mmol，3步，47％)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76-7.74(m,2h,ar-h),7.60-7.58(m,2h,ar-h),7.40-7.36(m,2h,ar-h),7.31-7.27(m,3h,2xar-h+1xh-6),5.77(m,2h,1xnh+1xh-1’),5.69(d,j＝7.9hz,1h,h-5),5.06(brs,1h,oh),4.53-4.50(m,2h,1xh-2’+1xh-4’),4.42-4.37(m,2h,fmoc-ch2),4.21(t,j＝6.8hz,1h,fmoc-ch),3.52-3.39(m,2h,h-5’),2.23-2.20(m,1h,h-3’),1.95-1.91(m,1h,h-3’)；¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ163.9,156.7,151.3,143.9,143.8,141.3,139.1,127.7,127.1,125.1,120.0,102.3,94.2,80.9,66.8,50.7,47.2,45.4,33.7,29.7；lrms[m+h]⁺450.0。这些数据与tran^[2]报道的数据一致。

图s5连接子88的合成。

连接子88的合成通过在torres-garcia等的公开中的方法合成^[3]

4-((3,4-二氢-2h-吡喃-2-基)甲氧基)苯甲酸(88)

在thf(22ml)中，将4-羟基苯甲酸甲酯(2.0g，13mmol，1eq.)和pph3(3.8g，14mmol，1.2eq.)的溶液，搅拌30分钟。然后在0℃下，加入diad(2.8ml，14mmol，1.2eq.)。将反应加热至室温并搅拌16小时。真空除去溶剂，再溶于2：1v/vh2o：meoh中。加入lioh(1.4g，59mmol，4.5eq.)，将混合物在120℃下回流16小时。将反应混合物冷却至室温，然后用ch2cl2(x3)洗涤。使用1mhcl(水溶液)将水相酸化至ph2，过滤所得白色沉淀物并真空干燥，得到白色粉末88(3.7g，16mmol，定量)。

¹hnmr(400mhz,(cd3)2so)δ12.61(s,1h,cooh),7.91-7.87(m,2h,ar-h),7.05-7.01(m,2h,ar-h),6.40(m,1h,och＝ch),4.72-4.69(m,1h,och＝ch),4.13-4.12(m,3h,1xch+2xoch2),2.10-2.03(m,1h,h-3),1.98-1.95(m,2h,1xh-3+1xh-4),1.74-1.64(m,1h,h-4)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so)δ167.0,162.0,143.2,131.4,123.2,114.3,100.5,72.8,69.9,23.6,18.7.lrms[m+h]⁺235.0。这些数据与torresgarcia等人^[3]报道的数据一致。

图s6尿苷肽类抗生素(sansanmycin)类似物的固相合成。

通用步骤1：异肽的合成

向boc-保护的氨基酸(1eq.)的dmf(4-8ml/mmol)溶液中加入hatu(1eq.)，并在室温下，首先搅拌10分钟，然后将溶液冷却至0℃。加入s8(1eq.)，然后加入nmm或n，n-二异丙基乙胺(3eq.)，将反应混合物加热至室温并搅拌3-6h。完成后，将反应混合物用etoac(60-100ml)稀释，并依次用0.2mhcl(15-20ml)，水(5×15ml)和盐水(15ml)洗涤。真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过柱色谱或反相hplc纯化，得到异肽s15-s16。

(2s，3s)-2-((((9h芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(3-((叔-丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-n-甲基丙酰胺基)丁酸(s15)

按照通用步骤1，在hatu(433mg，1.14mmol)和nmm(376μl，3.42mmol)的dmf(8.9ml)溶液存在下，boc-l-m-tyr(o^tbu)-oh(384mg，1.14mmol)与s8(406mg，1.14mmol)反应6小时，柱色谱(1：1v/vetoac：己烷→etoac)分离后，获得白色无定形固体异肽s15(384mg，50％)。

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.81-7.68(m,2h,ar-h),7.64-7.53(m,2h,ar-h),7.43-7.34(m,2h,ar-h),7.33-7.27(m,2h,ar-h),7.08(d,j＝7.8hz,2h,ar-h,h-2+h-6),6.94-6.83(m,2h,ar-h,h-3+h-5),5.91(s,1h,nh),5.58(d,j＝8.6hz,1h,nh),4.92-4.83(m,1h,tyr2-α-ch),4.80-4.67(m,1h,daba1-β-ch),4.40-4.29(m,3h,fmoc-ch2+daba1-α-ch),4.20(app.t,j＝6.7hz,1h,fmoc-ch),3.05-2.87(m,4h,nch3+tyr2-β-ch2),2.81-2.68(m,1h,tyr2-β-ch2),1.56-1.00(m,21h,boc+^tbu+daba1-γ-ch3).ir(atr):3335,3045,1704cm^-1.lrms[m+h⁺]673.3.hrms(esim/z)[m+na⁺]c38h47n3o8na计算值，696.3261；测量值，696.3266。

(2s，3s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-((s-2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基-3-苯基丙酰胺基)丁酸(s16)

按照通用步骤1，在hatu(106mg，0.28mmol)和nmm(9.2μl，0.84mmol)的dmf(1.1ml)溶液存在下，使boc-l-phe-oh(70mg，0.26mmol)与s8(100mg，0.28mmol)反应4小时，柱色谱(95：5v/vch2cl2：meoh)后，得到白色泡沫异肽s16(73mg，46％)。

¹hnmr(300mhz,cdcl3,主要旋转异构体)δ7.82(d,j＝7.5hz,2h,2xar-h),7.69(m,2h,2xar-h),7.39-7.34(m,2h,2xar-h),7.30-6.96(m,7h,4xar-h+h-2+h-3+h-5),5.93(d,j＝8.4hz,1h,n-h),5.78(d,j＝8.2hz,1h,n-h),5.03(m,1h,phe2-α-ch),4.68(m,1h,daba1-β-ch),4.53(m,1h,daba1-α-ch),4.40-4.27(m,3h,fmoc-ch2+fmoc-ch),3.00-2.77(m,4h,nch3+phe2-β-ch2),2.74(m,1h,phe2-β-ch2),1.34-1.05(m,12h,boc+daba1-γ-ch3).ir(atr):3316,2979,2919,1712,1640cm^-1.lrms[m⁺h⁺]602.4.hrms(esim/z)[m+na⁺]c34h39n3o7na计算值，624.2685；测量值，624.2683。

缩酚酸肽s24-s43，s45-s52的合成

通用步骤2：将氨基酸加载到2-氯三苯甲基氯树脂上

条件a：

使具有1％dvb(1.22-1.42mmol/g，50-730μmol，1eq.)的2-氯三苯甲基氯树脂(100-200目)在无水ch2cl2(3-8ml)中溶胀30分钟。将异肽s15-s16(100-320μmol，2eq.)或氨基酸20(1.1-2.5mmol，1.2eq.)溶于无水ch2cl2(对于异肽s15-s16为2-2.6ml/100μmol，对于氨基酸20为0.6ml/100μmol)。加入n，n-二异丙基乙胺(对于异肽s15-s16为200-2920μmol，2-8eq.，对于氨基酸20为2.4-3eq.)，并将树脂在室温下振荡16小时。随后用dmf(5×.5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。用17：2：1v/v/vch2cl2：甲醇：ipr2net(3-6ml)处理40分钟，使树脂封盖。然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。

条件b：

将rink酰胺树脂用20％v/v哌啶的dmf(x3)溶液处理，振荡3分钟，然后用dmf(x5)，ch2cl2(x5)和dmf(x5)洗涤。通过在λ＝301nm(ε＝7800cm^-1)下的富烯哌啶加合物的光谱测量来确定树脂的负载量。将连接子88(0.062-0.21mmol，4eq.)，pybop(0.062-0.21mmol，4eq.)和nmm(0.062-0.21mmol，4eq.)的dmf(0.10m)溶液加入到树脂中并振荡1小时。随后用dmf(x5)，ch2cl2(x5)和dmf(x5)洗涤树脂，然后用10％v/v乙酸酐的吡啶溶液处理3分钟，同时摇动，然后用dmf(x5)和ch2cl2(x10)洗涤。然后将树脂在80℃下，在1,2-二氯乙烷(0.1m)中与87(0.038-0.13mmol，2.5eq.)和ppts(0.012-0.058mmol，1.1eq.)一起回流16小时。用ch2cl2(x5)和dmf(x5)洗涤树脂，然后如上所述用20％哌啶的dmf溶液处理，测定其负载效率。

通用步骤3：fmoc-策略固相肽合成

fmoc去保护：向树脂中加入10vol％哌啶/dmf(5ml)溶液并振荡4分钟(×2)。随后用dmf(5×3ml)，ch2cl2(5×3ml)和dmf(5×3ml)洗涤树脂。通过在λ＝301nm处的富烯哌啶加合物的光谱测量来确定先前氨基酸偶联的效率。

氨基酸偶联：

条件a：将保护的氨基酸(200-640μmol，4eq.)，pybop(200-640μmol，4eq.)和nmm(0.4-1.28mmol，8eq.)的dmf(0.1m)溶液加入到树脂(1eq.)中，并在室温下，振荡1小时。然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。

条件b：将fmoc保护的氨基酸(72-96μmol，1.2eq.)，hoat(72-96μmol，1.2eq.)和dic(72-96μmol，1.2eq.)的dmf(0.1m)溶液加入到树脂(1eq.)中，并在室温下振荡16小时。然后用dmf(5×3ml)，ch2cl2(5×3ml)和dmf(5×3ml)洗涤树脂。

封盖：向树脂中加入10vol％乙酸酐/吡啶(5ml)溶液，并振荡3分钟。随后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。

通用步骤4：固相脲合成

将氨基甲酸酯s12(90-320μmol，2eq.)和n，n-二异丙基乙胺(180-640μmol，4eq.)的dmf(17μl/μmol)溶液加入到树脂(45-160μmol，1eq.)中。将树脂在室温下振荡6小时。随后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。

通用步骤5：烯丙基氨基甲酸酯的固相脱保护

将四(三苯基膦)钯(0)(20μmol，0.2eq.)和苯基硅烷(2mmol，20eq.)的ch2cl2(80mm)溶液加入到树脂(1eq.)中，并在室温下摇动15分钟。随后从树脂中除去溶剂，并用ch2cl2(5×5ml)，dmf(5×5ml)和ch2cl2(5×5ml)洗涤树脂。然后重复处理一次。

通用步骤6：固相偶联到n-甲基化氨基酸残基

氨基酸偶联：boc保护的氨基酸(80-580μmol，2eq.)，hatu(80-580μmol，2eq.)和dipea(120-870μmol，2-3eq.)的dmf(0.1m)溶液加入树脂(1eq.)中，并在室温下振荡2小时。然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。

封盖：向树脂中加入10vol％乙酸酐的吡啶(5ml)溶液并振荡3分钟。然后用dmf(5×3ml)，ch2cl2(5×3ml)和dmf(5×3ml)洗涤树脂。

通用步骤7：从2-氯三苯甲基氯树脂中裂解并进行后处理

将30vol％六氟异丙醇(hfip)的ch2cl2(5-10ml)溶液加入到树脂中，并在室温下振荡30分钟。随后用ch2cl2(6×10ml)洗涤树脂，并合并裂解液和洗涤液，真空浓缩。将所得残余物溶于9：1v/vmecn：h2o中，并通过反相hplc纯化。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基-3-苯基丙酰胺基)乙基)-5-异丁基-12,12-二甲基-4-,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s24)

根据通用步骤2，使用n，n-二异丙基乙胺(61μl，350μmol)和fmoc-脱保护将异肽s16(105mg，175μmol)负载到溶解在ch2cl2(2ml)中的2-氯三苯甲基氯树脂(62mg，88μmol)上。随后将fmoc-l-leu-oh(124mg，350μmol)与pybop(182mg，350μmol)和nmm(77μl，700μmol)在dmf(1ml)中偶联(通用步骤3)。随后根据通用步骤4与氨基甲酸酯s12(92mg，175μmol)偶联。随后从树脂上裂解(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体缩酚酸肽(depsipeptide)s24(12.4mg，39％)。

ir(atr):3340,2976,2931,1730,1635cm^-1.¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.12(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.83(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.69(1h,d,j＝4.4hz,ar-h),7.52(1h,s,ar-h),7.34-7.15(7h,m,7xar-h),6.24-6.14(1h,m,n-h),6.07-5.87(1h,m,n-h),5.05(1h,m,daba1-β-ch),4.80-4.66(3h,m,daba1-α-ch+phe2-α-ch+trp4-α-ch),4.43-4.38(1h,m,leu3-α-ch),3.20-3.06(5h,m,trp4-β-ch2+nch3),2.82–2.76(2h,m,phe2-β-ch2),1.77-1.48(12h,m,3xch3+leu3-β-ch2+leu3-γ-ch),1.40-1.28(18h,m,6xch3),1.23-1.18(3h,m,daba1-γ-ch3),0.93–0.89(6h,m,2xleu3-δ-ch3).lrms[m⁺h⁺]879.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c46h66n6o11计算值901.4687，测量值为901.4687。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-5-异丁基-12,12-二甲基-2-((s)-1-(甲基氨基)乙基)-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s25)

使用标准fmoc-spps步骤，pybop(1.64g，3.16mmol)和nmm(650μl，6.3mmol)的dmf(7.9ml)溶液，将fmoc-l-leu-oh(1.12g，3.16mmol)与树脂结合的s11(0.79mmol)偶联(通用步骤3，条件a)。fmoc脱保护，随后根据通用步骤4，使用n，n-二异丙基乙胺(550μl，3.16mmol)偶联氨基甲酸酯s12(840mg，1.58mmol)。随后根据通用步骤5使用四(三苯基膦)钯(0)(2×194mg，2×158μmol)和苯基硅烷(2×1.9ml，2×15.8mmol)除去烯丙基氨基甲酸酯，得到与树脂结合的s25。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基-3-(吡啶-3-基)丙酰氨基)乙基)-5-异丁基-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s26)

根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用hatu(45mg，120μmol)和n，n-二异丙基乙胺(33μl，180μmol)将树脂结合的s25(60μmol)与boc-3-pal-oh(32mg，120μmol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(20-100％mecn，40分钟；20％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体中间体s26(33mg，63％)。

ir(atr):3361,2977,1730,1639cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.54-8.46(1h,m),8.46-8.33(1h,m,ar-h),8.15-8.07(1h,m,ar-h),7.81(1h,app.d,j＝8.9hz),7.73-7.62(2h,m,ar-h),7.49(1h,s),7.36-7.15(3h,m,ar-h),6.23(1h,d,j＝8.0hz),6.12(1h,s),6.03(1h,d,j＝8.6hz),4.81(1h,app.t,j＝7.8hz,daba1-α-ch),4.73-4.62(2h,m,pal3-α-ch+trp4-α-ch),4.46-4.36(2h,m,daba1-β-ch+leu3-α-ch),3.22-2.97(6h,m,nch3+pal3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.82-2.74(1h,m,pal3-β-ch2),1.78-1.69(1h,m,leu3-γ-ch),1.65(9h,s,3×ch3),1.62-1.56(1h,m,leu3-β-ch2),1.50(1h,m,leu3-β-ch2),1.36(9h,s,3×ch3),1.28(9h,s,3×ch3),1.24-1.14(3h,m,daba1-γ-ch3),0.93-0.86(6h,m,2×leu3-δ-ch3).lrms[m+h⁺]880.5.hrms(esim/z)[m+h⁺]c45h66n7o11计算值880.4818，测量值880.4824。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基-3-(萘-2-基)丙酰氨基)乙基)-5-异丁基12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s27)

根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用hatu(45mg，120μmol)和n，n-二异丙基乙胺(33μl，180μmol)将树脂结合的s25(60μmol)与boc-2-nal-oh(38mg，120μmol)进行偶联。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体中间体s27(31.4mg，56％)。

ir(atr):3334,2979,1708,1660cm^-1.¹hnmr(400mhz,丙酮-d6):δ8.10(1h,app.t,j＝7.6hz,ar-h),7.87-7.72(4h,m,ar-h),7.67-7.58(1h,m,ar-h),7.51-7.38(4h,m,ar-h),7.29(1h,ddd,j＝8.4,7.3,1.4hz,ar-h),7.23(1h,app.td,j＝7.5,1.2hz,ar-h),6.18(1h,d,j＝8.1hz),6.11(1h,d,j＝12.7hz),5.98(1h,d,j＝8.8hz),5.12-5.04(1h,m,daba1-β-ch),4.94-4.84(1h,m,daba1-α-ch),4.80(1h,app.dt,j＝9.1,4.6hz,nal2-α-ch),4.72-4.59(1h,m,trp4-α-ch),4.50-4.32(1h,m,leu3-α-ch),3.27(1h,dd,j＝14.1,4.0hz,nal2-β-ch2),3.13(3h,s,nch3),3.11-3.01(2h,m,trp4-β-ch2),2.98-2.89(1h,m,nal2-β-ch2),1.81-1.69(1h,m,leu3-γ-ch),1.68-1.58(10h,m,3×ch3+leu3-β-ch2),1.57-1.45(1h,m,leu3-β-ch2),1.39-1.31(9h,m,3×ch3),1.27-1.08(12h,m,3×ch3+daba1-γ-ch3),0.96-0.85(6h,m,2×leu3-δ-ch3).lrms[m+h⁺]929.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c50h68n6o11na计算值951.4838，测量值951.4846。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-环己基-n-甲基丙酰氨基)乙基)-5-异丁基-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s28)

在dmf(0.6ml)中，使用hatu(45mg，120μmol)和n，n-二异丙基乙胺(23μl，126μmol)，将树脂结合的s25(60μmol)与boc-cha-oh二环己胺盐(54mg，120μmol)偶联反应16小时。从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体中间体s28(22mg，41％)。

ir(atr):3346,2924,1728,1627cm^-1.¹hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.99(1h,app.s,ar-h),7.86(1h,s),7.63-7.53(1h,m,ar-h),7.41(1h,s,ar-h),7.28-7.20(2h,m,ar-h),6.23(1h,s),6.03(1h,s),5.64(1h,s),5.05-4.87(1h,m,daba1-β-ch),4.79-4.66(1h,m,trp4-α-ch),4.65-4.45(2h,m,daba1-α-ch+leu3-α-ch),4.45-4.15(1h,m,cha2-α-ch),3.27-3.07(2h,m,trp4-β-ch2),2.98(3h,s,nch3),1.97-1.81(1h,m,ch2),1.64(12h,m,3×ch3+0.5×ch2+leu-β-ch2+ch),1.51-1.01(23h,m,6×ch3,ch2+ch+daba1-γ-ch3),0.95-0.65(7h,m,0.5×ch2+2×leu3-δ-ch3).lrms[m+h⁺]885.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c45h70n6o11na计算值907.5151，测量值907.5150。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-环己基-n-甲基丙酰氨基)乙基)-5-异丁基-12,12-二甲基-4,7,10-三氧-11-氧杂-3,6,8三氮杂十三烷酸(s29)

在dmf(0.6ml)中，使用hatu(124mg，480μmol)，hoat(324mg，2.4μmmol)和n，n-二异丙基乙胺(132μl，720μmol)加入到树脂结合的s25中，使树脂结合的s25(60μmol)与boc-chg-oh(122mg，480μmol)偶联，反应容器在室温下振荡4.5小时。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体中间体s29(19mg，36％)。

ir(atr):3336,2977,1729,1641,1522cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.12(1h,app.d,j＝8.1hz,ar-h),7.72(1h,d,j＝8.9hz,ar-h),7.71-7.65(1h,m,ar-h),7.50(1h,s,ar-h),7.31(1h,ddd,j＝8.3,7.3,1.4hz,ar-h),7.26(1h,app.td,j＝7.5,1.2hz,ar-h),6.09(1h,d,j＝8.1hz),6.04(1h,d,j＝9.8hz),5.73(1h,d,j＝9.3hz),5.06-4.98(1h,m,daba1-β-ch),4.73-4.69(1h,m,daba1-α-ch),4.64(1h,app.t,j＝6.5hz,trp4-α-ch),4.41-4.31(2h,m,chg2-α-ch+leu3-α-ch),3.23-3.06(2h,m,trp4-β-ch2),3.01(3h,s,nch3),1.75-1.70(1h,m,leu3-γ-ch),1.67(9h,s,3×ch3),1.62-1.52(2h,m,leu3-β-ch2+ch2),1.52-1.44(2h,m,leu3-β-ch2+ch2),1.32-1.14(7h,m,daba1-γ-ch3+2×ch2),1.14-1.02(3h,m),1.02-0.94(1h,m),0.95-0.87(6h,m,2×leu3-δ-ch3).lrms[m+h⁺]871.5.hrms(esim/z)c45h70n6o11na计算值893.4994，测量值893.5001。

(2s，3s)-2-(((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(2-((叔-丁氧基羰基))氨基)-n-甲基乙酰胺基)丁酸甲酯(s35)

根据通用步骤2，使用n，n-二异丙基乙胺(500μl，400μmol)将氨基酸20(219mg，805μmol)加载到ch2cl2(2ml)中的2-氯三苯甲基氯树脂(514mg，730μmol)上。随后根据通用步骤5，使用四(三苯基膦)钯(0)(186mg，161μmol)和苯基硅烷(2.0ml，16.1mmol)脱去烯丙基氨基甲酸酯。在dmf(1.4ml)中，使用固相异肽形成法(通用步骤6)，在hatu(554mg，160μmol)和n，n-二异丙基乙胺(381μl，2.1mmol)作用下使boc-gly-oh(256mg，1.46mmol)进行偶联反应，得到树脂结合的异肽s35。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-5-((r)-仲丁基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s36)

将树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，然后根据通用步骤3，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(50μl，480μmol)，与fmoc-ile-oh(85mg，240μmol)进行偶联。随后根据通用步骤4，与氨基甲酸酯s12(64mg，120mol)偶联。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松白色固体的缩酚酸肽s36(17mg，36％)。

ir(atr):3308,2978,2929,1726,1637cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.12(1h,d,j＝7.9hz),7.80(1h,app.d,j＝8.9hz,ar-h),7.69(1h,d,j＝7.3hz),7.59(1h,app.d,j＝8.6hz,ar-h),7.51(1h,s,ar-h),7.31(1h,app.t,j＝7.7hz,ar-h),7.27(1h,app.t,j＝7.5hz,ar-h),6.17-6.01(2h,m),5.85-5.75(1h,m),5.01-4.91(1h,m,daba1-β-ch),4.75(1h,app.t,j＝7.2hz,daba1-α-ch),4.64(1h,app.t,j＝7.3hz,trp4-α-ch),4.31-4.19(1h,m,ile3-α-ch),3.92-3.83(1h,m,gly2-α-ch2),3.75-3.68(1h,m,gly2-α-ch2),3.20-3.07(2h,m,trp4-β-ch2),2.85(3h,s,nch3),1.87-1.72(1h,m,ile3-β-ch),1.67(9h,s,3×ch3),1.60-1.49(1h,m,ile3-γ-ch2),1.44-1.33(18h,s,6×ch3),1.21(3h,d,j＝6.9hz,daba1-γ-ch3),1.17-1.07(1h,m,ile3-γ-ch2),0.96-0.76(6h,m,2×ch3).lrms[m+h⁺]789.4.hrms(esim/z)[m+na⁺]c39h60n6o11na计算值811.4212，测量值811.4227。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-5-异丙基-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s37)

树脂结合的异肽s35(45μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，然后根据通用步骤6，在dmf(0.45ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(53μl，480μmol)与fmoc-val-oh(81.5mg，240μmol)进行偶联。随后根据通用步骤4，与氨基甲酸酯s12(63mg，120μmol)偶联。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50至100％mecn，40分钟，50％mecn，10分钟)获得纯化的肽，得到蓬松的白色固体缩酚酸肽s37(19.7mg，53％)。

ir(atr):3034,1735,1639,1384cm^-1.¹hnmr(400mhz,(丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.14(1h,d,j＝8.3hz,ar-h),7.70(1h,d,j＝7.4hz,ar-h),7.52(1h,s,ar-h),7.35-7.26(2h,m,2xar-h),6.21–6.13(2h,m,2xn-h),5.86(1h,m,n-h),5.04–4.97(1h,m,daba1-β-ch),4.77(1h,m,daba1-α-ch),4.69(1h,m,trp4-α-ch),4.26(1h,m,val3-α-ch),4.05–3.72(2h,m,gly2-α-ch2),3.17(2h,d,j＝6.0hz,trp4-β-ch2),2.88(3h,s,nch3),2.08(1h,m,val3-β-ch),1.68(9h,s,3xch3),1.42(18h,m,6xch3),1.24(3h,d,j＝7.0hz,daba1-γ-ch3),0.95(3h,d,j＝6.7hz,val3-γ-ch3),0.91(3h,d,j＝6.8hz,val3-γ-ch3).lrms[m⁺h⁺]775.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c38h58n6o11na计算值797.4061，测量值797.4063。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-5-戊基-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s38)

树脂结合的异肽s35(70μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，然后根据通用步骤3，在dmf(0.7ml)中，使用pybop(144mg，280μmol)和nmm(58μl，560μmol)与fmoc-aha-oh(103mg，280mol)进行偶联。随后根据通用步骤4，与氨基甲酸酯s12(75mg，140μmol)偶联。从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过柱色谱(98：2v/vch2cl2：meoh→9：1v/vch2cl2：meoh，0.5vol％acoh)纯化所述肽，得到白色泡沫中间体s38(30mg，53％)。

ir(atr):3356,2977,2932,1731,1638cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.12(1h,d,j＝8.2hz,ar-h),7.69(1h,d,j＝7.6hz,ar-h),7.60(1h,d,j＝8.5hz),7.52(1h,s,ar-h),7.33-7.24(2h,m,ar-h),6.19-6.01(1h,m),5.86-5.74(1h,m),5.04-4.91(1h,m,daba1-β-ch),4.80-4.68(1h,m,daba1-α-ch),4.64(1h,app.t,j＝6.4hz,trp4-α-ch),4.30(1h,app.t,j＝6.8hz,aha3-α-ch),3.90-3.80(1h,m,gly2-α-ch2),3.79-3.66(1h,m,gly2-α-ch2),3.19-3.10(2h,m,trp4-β-ch2),2.83(3h,s,nch3),1.76(1h,dd,j＝16.3,8.3hz,aha3-β-ch2),1.67(9h,s,3×ch3),1.61-1.48(1h,m,aha3-β-ch2),1.45-1.33(20h,s,6×ch3+ch2),1.32-1.24(4h,m,2×ch2),1.20(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3),0.90-0.81(3h,m).lrms[m+h⁺]803.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c40h62n6o11na计算值825.4368，测量值825.4364。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-5-环己基-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s39)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤3，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(124mg，240μmol)和nmm(50μl，480μmol)与fmoc-chg-oh(91mg，240μmol)进行偶联。随后根据通用步骤4，在dmf(1ml)中，在n，n-二异丙基乙胺(21μl，120μmol)的存在下，使氨基甲酸酯s12(64mg，120μmol)进行偶联。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松白色固体的缩酚酸s39(20mg，40％)。

ir(atr):3308,2979,2929,1726,1637cm^-1.¹hnmr(400mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.11(1h,app.d,j＝8.1hz,ar-h),7.74-7.60(1h,m,ar-h),7.50(1h,s,ar-h),7.36-7.22(2h,m,ar-h),6.25-6.12(2h,m),5.90-5.79(1h,m),5.06-4.91(1h,m,daba1-β-ch),4.81-4.70(1h,m,daba1-α-ch),4.70-4.58(1h,m,trp4-α-ch),4.29-4.19(1h,m,chg3-α-ch),3.90-3.81(1h,m,gly2-α-ch2),3.77-3.66(1h,m,gly2-α-ch2),3.17-3.06(2h,m,trp4-β-ch2),1.79-1.54(15h,3×ch3+2.5×ch2+chg3-β-ch),1.43-1.32(18h,m,6×ch3),1.25-0.93(8h,m,daba1-γ-ch3+2.5×ch2).lrms[m+h⁺]815.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c41h62n6o11计算值815.4549，测量值为815.4548。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-5-(环己基甲基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s40)

将树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用hatu(45mg，120μmol)和n，n-二异丙基乙胺(33μl，180μmol)与fmoc-cha-oh(47mg，120μmol)进行偶联。随后根据通用步骤4，与氨基甲酸酯s12(64mg，120μmol)偶联。从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，60分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体缩酚酸肽s40(17mg，34％)。

ir(atr):3390,2977,2936,1730,1644cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6,旋转异构体比例4:1,主要旋转异构体):δ8.12(1h,app.d,j＝8.2hz,ar-h),7.72-7.66(1h,m),7.61(1h,app.d,j＝8.9hz,ar-h),7.52(1h,s,ar-h),7.32(1h,ddd,j＝8.3,7.1,1.4hz,ar-h),7.27(1h,app.td,j＝7.5,1.2hz,ar-h),6.16-5.97(2h,m),5.89-5.69(1h,m),5.00-4.93(1h,m,daba1-β-ch),4.79-4.70(1h,m,daba1-α-ch),4.68-4.60(1h,m,trp4-α-ch),4.42-4.35(1h,m,cha3-α-ch),3.96(1h,t,j5.5hz),3.87-3.81(1h,m,gly2-α-ch2),3.75-3.69(1h,m,gly2-α-ch2),3.19-3.11(2h,m,trp4-β-ch2),2.82(3h,s,nch3),1.84-1.75(1h,m,ch2),1.67-1.56(13h,m,3×ch3+1.5×ch2+cha3-β-ch2),1.48-1.31(22h,m,6×ch3+cha3-β-ch2+cha3-γ-ch+ch2),1.24-1.08(5h,m,daba1-γ-ch3+ch2),1.00-0.77(2h,m,ch2).lrms[m+h⁺]829.5。hrms(esim/z)[m+na⁺]c42h64n6o11na计算值851.5425，测量值851.4526。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-5-((s)-1-羟乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s41)

树脂结合的异肽s35(40μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.4ml)中，使用hatu(30.4mg，80μmol)和n，n-二异丙基乙胺(20μl，120μmol)双重偶联至fmoc-thr-oh(13.7mg，80μmol)。随后根据通用步骤偶联氨基甲酸酯s12(46mg，90μmol)。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50至100％mecn，40分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体缩酚酸肽s41(18.2mg，49％)。

ir(atr):3004,1709,1422,1359cm^-1.¹hnmr(400mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.08(1h,d,j＝8.1hz,ar-h),7.66(1h,d,j＝8.6hz,ar-h),7.49(1h,s,ar-h),7.30-7.21(2h,m,2xar-h),6.37(1h,m,n-h),6.24(1h,m,n-h),5.85(1h,m,n-h),4.97(1h,m,daba1-β-ch),4.69(1h,m,daba1-α-ch),4.63(1h,m,trp4-α-ch),4.24(2h,m,thr3-α-ch+thr3-β-ch),3.92–3.77(2h,m,gly2-α-ch2),3.14(2h,m,trp4-β-ch2),2.80(3h,s,nch3),1.63(9h,s,3xch3),1.38–1.34(18h,m,6xch3),1.18(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3),1.08(3h,d,j＝6.4hz,thr3-γ-ch3).lrms[m+h⁺]777.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c37h56n6o12na计算值799.3853，测量值799.3850。

(2s，5s，9s)-5-(2-(叔丁氧羰基)-2-氧代乙基)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1-h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰胺基)乙基)-12,12-二甲基4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s42)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(53μl，480μmol)偶联到fmoc-asp(o^tbu)-oh(99mg，240μmol)。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(62mg，120μmol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过柱色谱法纯化肽(洗脱液95：5v/vch2cl2：meoh，0.1体积％acoh)，得到黄色油状缩酚酸肽s42(37.2mg，69％)。

ir(atr):3359,2978,2933,1726,1640cm^-1.¹hnmr(300mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.11(1h,d,j＝7.8hz,ar-h),7.79(1h,d,j＝6.9hz,ar-h),7.52(1h,s,ar-h),7.34-7.25(2h,m,2xar-h),6.36-6.24(2h,m,2xn-h),5.83(1h,m,n-h),4.93(1h,m,daba1-β-ch),4.74-4.63(3h,m,daba1-α-ch+asp3-α-ch+trp4-α-ch),3.94–3.66(2h,m,gly2-α-ch2),3.17(2h,d,j＝6.3hz,trp4-β-ch2),2.75(3h,s,nch3),2.67–2.60(2h,m,asp3-β-ch2),1.66(9h,m,3xch3),1.41–1.38(27h,m,9xch3),1.10(3h,d,j＝6.9hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]847.6.hrms(esim/z)[m+na⁺]计算值c41h62n6o13na869.4272，测量值869.4272。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-5-(4-((叔丁氧羰基)氨基)丁基)-12,12–二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s43)

树脂结合的异肽s35(45μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(53μl，480μmol)与fmoc-lys(boc)-oh(112mg，240μmol)偶联。随后根据通用步骤4偶联氨基甲酸酯s12(63mg，126μmol)。在从树脂上裂解后(通用步骤6)，通过柱色谱(97：3v/vch2cl2：i-proh，0.1vol％乙酸-9：1v/vch2cl2：i-proh，0.1％乙酸)得到白色泡沫缩酚酸肽s43(15.4mg，38％)。

ir(atr):3325,2977,1701,1647cm^-1.¹hnmr(400mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.08(1h,d,j＝10.4hz,ar-h),7.66(1h,d,j＝9.2hz,ar-h),7.47(1h,s,ar-h),7.30-7.20(2h,m,2xar-h),6.09(2h,m,2xn-h),5.88(1h,m,n-h),4.96(1h,m,daba1-β-ch),4.72-4.61(2h,m,daba1-α-ch+trp4-α-ch),4.30(1h,m,lys3-α-ch),3.94–3.66(2h,m,gly2-α-ch2),3.12(2h,d,j＝8.0hz,trp4-β-ch2),2.99(2h,d,j＝8.4hz,lys3-β-ch2),2.80(3h,s,nch3),1.63(6h,m,lys-γ-ch2+lys-δ-ch2+lys-ε-ch2),1.37–1.24(36h,m,12xch3),1.16(3h,d,j＝9.2hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]904.6.hrms(esim/z)[m+na⁺]c44h69n7o13na计算值926.4851，测量值926.4854。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-5-(4-(三氟甲基)苄基)-11-氧6杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s45)

树脂结合的异肽s35(88mol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤3，在dmf(0.9ml)中，使用pybop(183mg，352μmol)和nmm(73μl，704μmol)与fmoc-phe(4-cf3)-oh(160mg，352μmol)偶联。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(94mg，176mol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松的白色固体缩酚酸肽s45(29mg，36％)。

ir(atr):3374,2979,2932,1731,1666cm^-1.¹hnmr(400mhz,cdcl3,主要旋转异构体):δ8.04(1h,app.d,j＝8.2hz,ar-h),7.76-7.60(1h,m),7.64(1h,d,j＝6.8hz),7.53(1h,app.d,j＝7.5hz,ar-h),7.47-7.36(4h,m,ar-h),7.30-7.14(3h,m,ar-h),5.93(1h,s),5.82(1h,s),5.54(1h,s),4.98-4.82(1h,m,daba1-β-ch),4.76-4.32(3h,m,daba1-α-ch+4-cf3-phe3-α-ch+trp4-α-ch),3.85-3.67(2h,m,gly2-α-ch2),3.17-3.05(3h,m,4-cf3-phe3-β-ch2+trp4-β-ch2),3.00-2.91(1h,m,trp4-β-ch2),2.73(3h,s,nch3),1.62(9h,s,3×ch3),1.42-1.19(18h,m,6×ch3),1.15(3h,d,j＝6.9hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]891.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c43h57f3n6o11891.4110，测量值891.4103。

(2s，5s，9s)-5-(4-(叔丁氧羰基)苄基)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基4,7,10-三氧-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s46)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(53μl，480μmol)与fmoc-tyr(o^tbu)-oh(110mg，240μmol)偶联的。随后根据通用步骤4，与氨基甲酸酯s12(63mg，120μmol)偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过柱色谱法纯化肽(洗脱液：95：5v/vch2cl2：meoh，0.1体积％乙酸)，得到黄色油状缩酚酸肽s46(34.8mg，56％)。

ir(atr):3350,2978,2929,1726,1637cm^-1.¹hnmr(400mhz,cdcl3,主要旋转异构体):δ8.06(1h,d,j＝7.2hz,ar-h),7.55(1h,d,j＝7.6hz,ar-h),7.39(1h,s,ar-h),7.29-7.18(2h,m,2xar-h),7.04(2h,d,j＝8.4hz,2xar-h),6.82(2h,d,j＝8.4hz,2xar-h),5.72–5.61(2h,m,2xn-h),4.84(1h,m,daba1-β-ch),4.65(1h,m,daba1-α-ch),4.57(1h,m,trp4-α-ch),4.52(2h,m,tyr3-α-ch),3.91–3.71(2h,m,gly2-α-ch2),3.12(2h,m,trp4-β-ch2),2.98(2h,m,trp4-β-ch2),2.79(3h,s,nch3),1.63(9h,s,3xch3),1.40–1.25(27h,m,9xch3),1.14(3h,d,j＝6.8hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]895.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c46h66n6o12na计算值895.4817，测量值为895.4810。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-5-(吡啶-3-基(甲基)-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s47)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护(通用步骤2)，根据通用步骤3，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(50μl，480μmol)偶联到fmoc-3-pal-oh(92mg，240μmol)。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(64mg，120μmol)进行偶联。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50-100％mecn，60分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松白色固体的缩酚酸s47(14mg，29％)。

ir(atr):3366,2979,2936,1726,1660cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.70-8.61(2h,m,nh+ar-h),8.21(1h,app.d,j＝7.9hz,ar-h),8.11(1h,app.d,j＝8.2hz,ar-h),7.98(1h,d,j＝8.8hz,ar-h),7.83-7.81(1h,m,ar-h),7.64(1h,d,j＝7.0hz,ar-h),7.50(1h,s,ar-h),7.33-7.28(1h,m,ar-h),7.25(1h,app.td,j＝7.5,1.2hz,ar-h),6.37-6.21(2h,m,2×nh),5.86-5.73(1h,m),4.97-4.89(1h,m,daba1-β-ch),4.81-4.73(1h,m,j＝7.0hz,3-pal3-α-ch),4.71-4.62(1h,m,daba1-α-ch),4.61-4.52(1h,m,trp4-α-ch),3.94-3.81(1h,m,gly2-α-ch2),3.78-3.69(1h,m,gly2-α-ch2),3.31(1h,app.dt,j＝15.6,7.6hz,3-pal3-β-ch2),3.20-3.06(3h,m,3-pal3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.83(3h,s,nch3),1.65(9h,s,3×ch3),1.43-1.31(18h,s,6×ch3),1.18(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]829.5.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c41h57n7o11824.4188，测量值824.4182。

(2s，5s，9s)-5,9-双((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-11-氧杂3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s48)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，根据通用步骤7，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(125mg，240μmol)和nmm(53μl，480μmol)偶联到fmoc-trp(boc)-oh(126.4mg，240μmol)上。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(90.4mg，172μmol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过柱色谱法纯化肽(洗脱液：95：5v/vch2cl2：在失活的二氧化硅上的meoh，0.1vol％乙酸)，得到黄色油状缩酚酸肽s48(30.2mg，52％)。

ir(atr):3352,2980,2928,1731,1646,1553cm^-1.¹hnmr(500mhz,cdcl3,主要旋转异构体):δ8.04(1h,m,2xar-h),7.53(1h,d,j＝7.6hz,2xar-h),7.40(2h,m,ar-h),7.28-7.11(4h,m,4xar-h),6.29(1h,m,n-h),6.06(1h,m,n-h),5.57(1h,m,n-h),4.84(1h,m,daba1-β-ch),4.68-4.52(2h,m,trp3-α-ch+trp4-α-ch),4.47(1h,m,daba1-α-ch),3.75–3.48(2h,m,gly2-α-ch2),3.16-2.91(4h,m,trp3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.88(3h,s,nch3),1.61(18h,s,6xch3),1.42–1.22(18h,m,6xch3),1.11(3h,d,j＝6.6hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]962.6.hrms(esim/z)[m+h⁺]c49h68n7o11计算值962.4876，测量值962.4869。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-5-苯基-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s49)

树脂结合的异肽s35(70μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.7ml)中，使用hoat(11.2mg，84μmol)和dic(13.3μl，84μmol)与fmoc-phg-oh(31.5mg，84μmol)偶联。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(73.6mg，140μmol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，得到9：1非对映异构体的混合物肽，其可通过反相hplc(50至100％mecn，40分钟)容易地分离，得到单一的非对映异构体蓬松的白色固体缩酚酸肽s49(14.5mg，25％)。

ir(atr):3343,2978,2933,1727,1700,1638cm^-1.¹hnmr(400mhz,丙酮-d6,主要旋转异构体):δ8.13(1h,d,j＝7.6hz,ar-h),7.72(1h,d,j＝6.8hz,ar-h),7.52(1h,s,ar-h),7.46(2h,d,j7.2hz,2xar-h),7.47-7.24(5h,m,5xar-h),6.66(1h,m,n-h),6.27(1h,m,n-h),5.80(1h,m,n-h),5.57(1h,m,phg3-α-ch),4.99(1h,m,daba1-β-ch),4.79(1h,m,daba1-α-ch),4.65(1h,m,trp4-α-ch),3.95-3.71(2h,m,gly2-α-ch2),3.17(2h,m,trp4-β-ch2),2.88(3h,s,nch3),1.67(9h,s,3xch3),1.40(9h,m,3xch3),1.35(9h,m,3xch3),1.25(3h,d,j＝6.8hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]809.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c41h56n6o11na计算值809.4085，测量值809.4080。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧代-5-苯乙基-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷-1-酸(s50)

树脂结合的异肽s35(70μmol)经fmoc去保护(通用步骤2)，根据通用步骤6，在dmf(0.7ml)中，使用hoat(11.2mg，84μmol)和dic(13.3μl，84μmol)与fmoc-hphe-oh(33.7mg，84μmol)偶联。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(73.6mg，140μmol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，得到9：1非对映异构体的混合物肽，其可通过反相hplc(50至100％mecn，40分钟)容易地分离，得到作为单一非对映异构体蓬松白色固体缩酚酸肽s50(18.8mg，27％)。

ir(atr):3342,2977,2931,1730cm^-1.¹hnmr(500mhz,cdcl3,主要旋转异构体):δ8.11(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.69(1h,d,j＝7.5hz,ar-h),7.53(1h,s,ar-h),7.32-7.12(7h,m,7xar-h),6.39(1h,m,n-h),6.25(1h,m,n-h),5.95(1h,m,n-h),4.96(1h,m,daba1-β-ch),4.71(1h,m,daba1-α-ch),4.64(1h,m,trp4-α-ch),4.36(1h,m,hphe3-α-ch),3.96–3.69(2h,m,gly2-α-ch2),3.15(2h,m,trp4-β-ch2),2.80(3h,s,nch3),2.64(2h,m,hphe3-β-ch2),2.02(2h,m,hphe3-γ-ch2),1.63(9h,s,3xch3),1.36–1.34(18h,m,6xch3),1.16(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]837.5.hrms(esim/z)[m+na⁺]c43h60n6o11na计算值859.4218，测量值859.4205。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-n-甲基乙酰氨基)乙基)-12,12-二甲基-5-(萘-2-基甲基)-4,7,10-三氧代-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s51)

树脂结合的异肽s35(60μmol)经fmoc-去保护的(通用程序2)，根据通用步骤3，在dmf(0.6ml)中，使用pybop(124mg，240μmol)和nmm(50μl，480μmol)偶联到fmoc-2-nal-oh(104mg，240μmol)。随后根据通用步骤4，在dmf(1ml)中，dipea(21μl，120μmol)的存在下，对氨基甲酸酯s12(64mg，120mol)进行偶联。在从树脂上裂解后(通用步骤7)，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松白色固体的缩酚酸肽s51(22mg，42％)。

ir(atr):3390,2978,2936,1730,1644cm^-1.¹hnmr(500mhz,丙酮-d6,主要的旋转异构体):δ8.11(1h,d,j＝8.2hz,ar-h),7.86-7.61(6h,m,5×ar-h+nh),7.50(1h,s,ar-h),7.45-7.37(3h,m,ar-h),7.34-7.21(2h,m,ar-h),6.22-6.12(2h,m,nh),5.82(1h,s,nh),5.01-4.92(1h,m,daba1-β-ch),4.82-4.69(2h,m,daba1-α-ch+2-nal3-α-ch),4.66-4.58(1h,m,trp4-α-ch),3.93-3.83(1h,m,gly2-α-ch2),3.72(1h,dd,j＝17.0,4.2hz,gly2-α-ch2),3.39-3.25(1h,m,2-nal3-β-ch2),3.19-3.05(3h,m,2-nal3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.84(3h,s,nch3),1.65(9h,s,3×ch3),1.46-1.30(18h,m,6×ch3),1.17(3h,d,j＝7.2hz,daba1-γ-ch3).lrms[m+h⁺]873.4.hrms(esim/z)[m+na⁺]c46h60n6o11na计算值895.4212，测量值895.4212。

(2s，5s，9s)-9-((1-(叔丁氧羰基)-1h-吲哚-3-基)甲基)-2-((s)-1-((s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)苯基)-n-甲基丙酰胺基)乙基)-5-(环己基甲基)-12,12-二甲基-4,7,10-三氧杂-11-氧杂-3,6,8-三氮杂十三烷酸(s52)

根据通用步骤6，在dmf(0.9ml)中，使用hatu(65mg，174μmol)和n，n-二异丙基乙胺(48μl，260μmol)，将树脂结合的氨基酸s25(87μmol)与fmoc-cha-oh(68mg，174μmol)偶联。随后根据通用步骤4，对氨基甲酸酯s12(93mg，174μmol)进行偶联。随后根据通用步骤5，使用四(三苯基膦)钯(0)(20mg，17μmol)和苯基硅烷(20μl，170μmol)，在ch2cl2(1ml)中，除去氨基甲酸烯丙酯。随后，在dmf(0.87ml)中溶液，使用hatu(49mg，130μmol)，hoat(25mg，130μmol)和n，n-二异丙基乙胺(23μl，130μmol)偶联到boc-m-tyr(otbs)-oh(51mg，130μmol)。在从树脂上裂解(通用步骤7)后，通过反相hplc(50-100％mecn，40分钟；50％mecn，10分钟)纯化肽，得到蓬松白色固体的缩酚酸肽s52(18mg，20％)。

ir(atr):3314,2928,2856,1730,1630cm^-1.¹hnmr(500mhz,cdcl3,主要的旋转异构体):δ8.08-7.92(1h,m,ar-h),7.79(1h,s),7.61-7.52(1h,m,ar-h),7.45-7.36(1h,m,ar-h),7.31-7.15(2h,m,ar-h),7.01-6.87(1h,m,ar-h),6.72-6.46(3h,m,ar-h),6.11-5.73(1h,m,nh),5.69-5.53(1h,m,nh),4.94-4.84(1h,m,daba1-β-ch),4.76-4.60(3h,m,daba1-α-ch+m-tyr2-α-ch+trp4-α-ch),4.46-4.19(1h,m,cha3-α-ch),3.30-3.07(2h,m,trp4-β-ch2),3.02(3h,s,nch3),2.98-2.87(1h,m,m-tyr2-β-ch2),2.61-2.46(1h,m,m-tyr2-β-ch2),1.78-0.74(58h,m).lrms[m+h⁺]1049.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c55h84n6o12si计算值1049.5989，测量值1049.5981。

类似物的合成

通用步骤8：通过片段缩合策略合成类似物

条件a：

向胺18(15-25mol，1.2eq.)的ch2cl2和dmf(1：1v/vch2cl2：dmf0.1m)的溶液中加入缩酚酸肽s24，s26，s27，s29和s53(13-21μmol，1eq.)和hoat(5-5.5eq.)，然后立即加入dic(1eq.)。将反应物在室温下搅拌1.5-2小时，此时，将反应混合物用h2o(5ml)和饱和nahco3水溶液(5ml)稀释，并用etoac(30ml)萃取。将有机相用另一部分饱和nahco3水溶液(5ml)洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩，得到粗残余物，然后将其重新悬浮于tfa和含有ch2cl2的ipr3sih的混合物中(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol％ipr3sih，0.1ml/μmol)，并将反应在室温下搅拌(1.5-16小时)。真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过反相hplc纯化。

条件b：

向edc·hcl(12-30μmol，1.3-3.3eq.)的1：1v/vch2cl2：dmf(180-240μl)溶液加入nmm(19-30μmol，1.3eq.)，并将溶液在室温下振荡15分钟。然后将该溶液滴加到缩酚酸肽s28，s36-s43，s45-s52(15-25μmol，1eq.)，胺18(28-50μmol，1.2-3.3eq.)和hoat(70-120μmol，5eq.)的溶液中。并将反应在室温下搅拌3-4小时。此时，将反应混合物用etoac(15-25ml)稀释，并用hcl(0.5m，4-7ml)，饱和nahco3水溶液(5×4-7ml)，h2o(4-7ml)和盐水(4-7ml)洗涤，用mgso4干燥。然后在真空中除去溶剂，得到粗残余物，将其再溶于ch2cl2，tfa和ipr3sih(1：1ch2cl2：tfa,2.5vol.％ipr3sih,0.1ml/μmol)的混合物中，并将反应在室温下搅拌(5-16小时)。真空除去溶剂，得到粗残余物，将其通过反相hplc纯化。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-((s)-2-氨基-n-甲基-3-(吡啶-3-基)丙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(8)

根据通用步骤8的条件a，在室温下，hoat(18mg，134μmol)和dic(4.3μl，27μmol)存在下，使缩酚酸s26(24mg，27μmol)与胺18(7.2mg，32μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，260μl)中反应1.5小时，获得完全保护类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，2.7ml)，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后，得到无定形白色固体8(作为甲酸盐)(11mg，2步，收率46％)。

ir(atr):2951,2836,1662cm^-1.¹hnmr(500mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.3:1，旋转异构体1):δ8.69-8.64(1h,m,nh),8.63-8.57(1h,m,nh),8.57-8.49(1h,m,nh),8.12(1h,d,j＝7.5hz,ar-h),7.98(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.66-7.59(2h,m,ar-h+h-6),7.58-7.51(1h,m,ar-h),7.35-7.23(1h,m,ar-h),7.11(1h,s,ar-h),7.10-7.04(1h,m,ar-h),7.03-6.93(1h,m,ar-h),5.74(1h,d,j＝2.7hz,h-1’),5.69(1h,d,j＝8.0hz,h-5),5.00-4.91(1h,m,pal2-α-ch),4.89-4.81(1h,m,daba1-β-ch),4.76-4.72(1h,m,daba1-α-ch),4.64-4.37(3h,m,h-2’+h-4’+trp4-α-ch),4.30-4.04(2h,m,leu3-α-ch),3.52-3.41(1h,m,h-5’),3.30-3.24(2h,m,h-5’+trp4-β-ch2),3.23-3.11(3h,m,pal2-β-ch2+trp4-β-ch2),2.81(3h,s,nch3),2.31(1h,dt,j＝13.8,6.9hz,h-2’),2.23(1h,ddd,j＝13.7,7.5,6.2hz,h-2’),1.86-1.77(1h,m,h-2’),1.78-1.61(3h,m,h-2’+leu3-γ-ch),1.60-1.40(2h,m,leu3-β-ch2),1.28(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3),1.24(3h,d,j＝7.1hz,daba1-γ-ch3),0.98-0.86(6h,m,2×leu3-δ-ch3).¹³cnmr(125mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.3:1,旋转异构体1):δ176.0(c＝o),175.6(c＝o),171.3(c＝o),169.2(c＝o),166.1(c＝o),159.8(c＝o),151.9(c＝o),147.6,144.4,142.0,141.6,137.9,128.9,126.5,124.6(×2),122.2,119.6,119.1,111.9,110.6,102.2,94.9,80.6,76.2,56.4,54.7,54.3,53.0,52.3,44.6,41.6,35.6,34.8,28.8,28.4,25.4,22.4,12.5.¹hnmr(500mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.3:1,旋转异构体2):δ8.06(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.48(1h,d,j＝8.1hz,h-6),5.77(1h,d,j＝3.0hz,h-1’),5.64(1h,d,j＝8.1hz,h-5),5.11-5.04(1h,m,daba1-β-ch),4.64-4.37(2h,m,daba1-α-ch+pal2-α-ch),3.40-3.32(1h,m,pal2-β-ch2),3.11-3.05(1h,m,pal2-β-ch2),3.01(3h,s,nch3)；¹³cnmr(125mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.3:1，旋转异构体2):δ165.7(c＝o),146.7,141.7,51.9,33.4,30.6,12.2.lrms[m+h⁺]833.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c40h52n10o10计算值833.3940，测量值833.3938。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-((s)-2-氨基-n-甲基-3-(萘-2-基)丙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(9)

根据通用步骤8的条件a，在室温下，hoat(23mg，165μmol)和dic(5.3μl，33μmol)存在下，使缩酚酸肽s27(30mg，33μmol)与胺18(9.8mg，40μmol)在ch2cl2中反应2.5小时，获得完全保护类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，3.3ml)，反相hplc(0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后得到无定形白色固体9(甲酸盐)(10mg，2步，32％)。

ir(atr):3264,3056,2954,2918,2851,1672,1636cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.8:1,主要的旋转异构体):10.78(1h,s),8.52(1h,s),8.32(1h,s),8.20(2h,s),7.88-7.77(3h,m,ar-h),7.65(1h,app.s,ar-h),7.58(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.54-7.39(1h,m,ar-h),7.47-7.35(3h,m,ar-h),7.32-7.27(1h,m,ar-h),7.12-7.07(1h,m,ar-h),7.05-6.99(1h,m,ar-h),6.97-6.88(1h,m,ar-h),6.46(1h,d,j＝8.0hz),6.39(1h,d,j＝8.0hz),6.13(1h,s),5.64(1h,d,h-1’),5.58(1h,d,h-5),4.46(1h,app.t,j＝9.2hz,daba1-α-ch),4.39-4.24(3h,m,h-2’+h-4’+trp4-α-ch),4.24-4.08(3h,m,daba1-β-ch+nal2-α-ch+leu3-α-ch),3.34-3.28(1h,m,h-5’),3.12-2.96(3h,h-5’+trp4-β-ch2),2.91-2.86(1h,m,nal2-β-ch2),2.81(1h,dd,j＝13.2,6.7hz,nal2-β-ch2),2.60(3h,s,nch3),2.58-2.52(1h,m,nal2-β-ch2),2.10(1h,app.dt,j＝13.4,6.8hz,h-3’),1.68-1.50(2h,m,h-3’+leu3-γ-ch),1.36-1.28(2h,m,leu3-β-ch2),0.89-0.76(6h,m,2×leu3-δ-ch3),0.63(3h,d,j＝6.5hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.8:1,主要的旋转异构体):δ174.3(c＝o),172.8(c＝o),169.9(c＝o),164.6(c＝o),163.2(c＝o),157.3(c＝o),150.4(c＝o),141.8,136.2,135.9,135.7,132.0,131.7,128.0,127.8,127.6,127.5,127.4(×2),127.3,125.4,123.4,120.4,118.4,118.0,111.0,110.0,101.4,92.1,78.8,74.0,55.2,54.1,51.8,51.6,43.4,41.2,40.1,35.2,27.9,27.3,23.7,21.8,14.5.lrms[m+h⁺]882.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c45h55n9o10计算值882.4144，测量值882.4140。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-((s)-2-氨基-3-环己基-n-甲基丙酰胺)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(10)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(17mg，123μmol)和edc·hcl(5.2mg，25μmol)和nmm(3μl，25μmol)存在下，使缩酚酸肽s28(22mg，25μmol)与胺18(6.8mg，30μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，240μl)中反应3小时，获得完全保护的类似物。按照通用步骤8，该化合物用用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，2.5ml)，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟；100％h2o，10分钟)纯化后得到无定形白色固体10(tfa盐)(10.4mg，两步，44％)。

ir(atr):3346,2924,1728,1627cm^-1.¹hnmr(500mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.6:1,主要的旋转异构体):δ8.67(1h,t,j＝6.0hz),8.45(1h,d,j＝9.0hz),8.16-8.05(1h,m),7.62(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.58(1h,dd,j＝7.9,4.0hz,ar-h),7.33(1h,dd,j＝8.1,5.6hz,ar-h),7.14-7.05(2h,m,ar-h),7.03-6.98(1h,m,ar-h),5.74(1h,d,j＝2.7hz,h-1’),5.70(1h,d,j＝8.0hz,h-5),4.88-4.78(1h,m,daba1-β-ch),4.67-4.54(3h,m,daba1-α-ch+cha2-α-ch+trp4-α-ch),4.49-4.38(2h,m,h-2’+h-4’),4.19-4.08(1h,m,leu3-α-ch),3.52-3.46(1h,m,h-5’),3.29-3.23(2h,m,h-5’主要的+trp4-β-ch2),3.24-3.14(1h,m,trp4-β-ch2),2.85(3h,s,nch3),2.30-2.18(1h,m,h-3’),1.84-1.55(10h,m,4×ch2+h-3’+leu3-γ-ch),1.52-1.40(3h,ch2+cha2-γ-ch),1.36-1.26(2h,m,leu3-β-ch2),1.24-1.10(3h,m,daba1-γ-ch3),1.07-0.95(2h,m,ch2),0.94-0.86(6h,m,2×leu3-δ-ch3).¹³cnmr(125mhz,cd3od,旋转异构体的比例1.6:1,主要的旋转异构体):δ176.2(c＝o),175.6(c＝o),171.8(c＝o),171.0(c＝o),166.3(c＝o),159.8(c＝o),152.3(c＝o),142.2,137.9,128.6,124.4,122.0,119.4,119.2,111.9,110.6,102.2,95.0,80.9,76.1,54.9,54.0,52.6,50.3,44.8,41.8,39.6,36.0,34.8,34.2,29.0,28.3,26.9,25.6,22.9,14.6.lrms[m+h⁺]838.4.hrms(esim/z)[m+na⁺]c46h72n6o11na计算值907.5151，测量值907.5150。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-((s)-2-氨基-2-环己基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(11)

根据通用步骤8的条件a，在室温下，hoat(14mg，107μmol)和dic(5.2μl，33μmol)存在下，将缩酚酸肽s29(19mg，22μmol)与胺18(5.8mg，26μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，200μl)中反应18小时，获得完全保护类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，2.2ml)，反相hplc(0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后得到无定形白色固体11(tfa盐)(5.4mg，2步，收率26％)。

ir(atr):3261,2931,2856,1665cm^-1.¹hnmr(400mhz,cd3od,1.6:1比例的旋转异构体，主要的旋转异构体):δ10.30(1h,s,nh),8.67(1h,s,nh),8.12(1h,s,nh),7.62(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.58(1h,dd,j＝8.0,3.0hz,ar-h),7.39-7.24(1h,m,ar-h),7.18-7.03(2h,m,ar-h),7.04-6.98(1h,m,ar-h),5.74(1h,d,j＝2.7hz,h-1’),5.71(1h,d,j＝8.0hz,h-5),4.91-4.78(1h,m,daba1-β-ch),4.71-4.53(1h,trp4-α-ch),4.51-4.37(2h,m,h-2’+h-4’),4.30-4.22(1h,m,daba1-α-ch),4.20-4.08(1h,m,leu3-α-ch),4.03(1h,d,j＝4.6hz,chg2-α-ch),3.55-3.45(1h,m,h-5’),3.29-3.25(2h,m,h-5’主要的+trp4-β-ch2),3.22-3.09(1h,m,trp4-β-ch2),2.86(3h,s,nch3),2.35-2.16(1h,m,h-2’),1.87-1.54(6h,m,h-2’+chg2-β-ch+1.5×chg2-ch2+leu3-γ-ch),1.53-1.42(2h,m,leu3-β-ch2),1.35-1.02(6h,m,daba1-γ-ch3+1.5×chg2-ch2,主要的),0.91(6h,m,2×leu3-δ-ch3主要的).¹³cnmr(100mhz,cd3od,主要的旋转异构体):δ176.1(c＝o),175.1(c＝o),171.4(c＝o),169.7(c＝o),166.0(c＝o),159.5(c＝o),151.9(c＝o),142.3,137.8,128.6,124.7,122.0,119.6,119.2,111.9,110.5,109.1,102.3,95.0,80.8,76.2,56.4,55.0,54.4,53.8,52.8,44.6,43.6,42.0,40.5,35.8,30.2,29.0,28.3,26.7,25.7,23.4,15.2.lrms[m+h⁺]824.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c40h57n9o10计算值824.4301，测量值824.4294。

(((2s，3r)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)(甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(21)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(15mg，108μmol)和edc·hcl(5.4mg，28μmol)和nmm(3.0μl，28μmol)存在下，使缩酚酸肽s36(17mg，22μmol)与胺18(7.4mg，32μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，210μl)反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，2.2ml)4小时。根据通用步骤8，反相hplc(0至50％mecn，45分钟；100％h2o，10分钟，流速9ml/min)纯化后，得到无定形白色固体21(如甲酸盐)(7.4mg，44％，2步)。

ir(atr):3374,2979,2932,1731,1666cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1):δ10.77(s,1h),8.37(s,1h),8.05(s,1h),7.62-7.47(2h,m,ar-h+h-6),7.30(1h,dd,j＝8.1,5.0hz,ar-h),7.13(1h,s,ar-h),7.09(1h,s,ar-h),7.04-6.99(1h,m,ar-h),6.94(1h,app.td,j＝7.2,3.0hz,ar-h),6.40(1h,d,j＝8.6hz),6.22(1h,s),5.70(1h,d,j＝3.6hz,h-1’),5.60-5.56(1h,m,h-5),4.59-4.52(1h,m,daba1-α-ch),4.40-4.16(3h,m,h-2’+h-4’+trp4-α-ch),4.04-3.89(2h,m,daba1-β-ch+ile3-α-ch),3.67(1h,d,j＝16.2hz,gly2-α-ch2),3.62-3.54(1h,m,gly2-α-ch2),3.41(1h,j＝14.5hz),3.28-3.04(3h,m,h-5’+trp4-β-ch2),3.00(1h,dd,j＝14.5,6.3hz,trp4-β-ch2),2.70(3h,s,nch3),2.20-2.07(1h,m,h-3’),1.80-1.56(2h,m,h-3’+ile3-β-ch),1.47-1.34(1h,m,ile3-γ-ch2),1.11(3h,d,j＝6.5hz,daba1-γ-ch3),1.08-0.98(1h,m,ile3-γ-ch2),0.78(6h,m,2×ch3).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1,有一个模糊的¹³c信号):δ174.8(c＝o),172.2(c＝o),169.8(c＝o),169.3(c＝o),163.2(c＝o),150.6(c＝o),141.1,136.0,127.5,123.4,120.6,118.4,117.8,111.5,110.3,101.5,91.9,78.2,72.7,57.4,55.3,54.5,52.3,43.2,40.4,39.6,36.8,35.2,27.7,24.2,14.9,14.5,10.9.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ8.52(s,1h),8.18(d,j＝9.0hz,1h),5.65(1h,d,j＝3.6hz,h-1’),4.82-4.74(1h,m,daba1-β-ch),4.51-4.44(1h,m,daba1-α-ch),2.72(3h,s,nch3).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ50.0.lrms[m+h⁺]742.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c34h48n9o10计算值742.3518，测量值742.3516。

(2s，6s，9s，10s)-2-((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-6-异丙基-10,11-二甲基-4,7,12-三氧代-3,5,8,11-四氮杂十三烷-1-酸(22)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(15.7mg，115μmol)，edc·hcl(5.8mg，30μmol)和nmm(3.3μl，30μmol)存在下，使缩酚酸肽s37(17.8mg，23.4μmol)与胺18(10.5mg，46μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，240μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，反相hplc纯化(0至50％mecn，40分钟，0.1vol％甲酸)不能分离的非对映异构体的9：1混合物，蓬松的白色固体22(8.5mg，62％，在hplc纯化后基于非对映异构体甲酸盐计算的产率)。因此提交了不可分离的非对映异构体9：1混合物用于表征和生物测定。

ir(atr):3316,2925,2872,1672,1558cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.4:1，旋转异构体1):δ7.52(2h,m,h-6+ar-h),7.30(1h,m,ar-h),7.09(1h,m,ar-h),7.02(1h,m,ar-h),6.92(1h,m,ar-h),5.64(1h,m,h-1’),5.59(1h,m,h-5),4.57(1h,m,daba1-α-ch),4.30(2h,m,h-2’+h-4’+val3-α-ch+trp4-α-ch),3.98(1h,m,daba1-β-ch),3.89(2h,m,gly2-α-ch2),3.22-3.00(4h,m,trp4-β-ch2+2xh-5’),2.73(3h,s,nch3),2.14–2.11(1h,m,h-3’),1.63-1.60(1h,m,h-3’),1.11(3h,m,daba1-γ-ch3),1.04(1h,m,val3-β-ch),0.79(6h,m,2xval-γ-ch3).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.4:1,旋转异构体1):δ173.7(c＝o),172.4(c＝o),170.1(c＝o),167.2(c＝o),163.3(c＝o),157.9(c＝o),151.0(c＝o),141.4,136.5,128.0,123.6,120.9,118.9,111.7,110.7,101.4,91.9,78.6,74.1,58.4,55.0,54.6,52.9,43.7,40.0,35.9,31.4,29.1,27.6,19.8,18.1,15.1,14.5.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.4:1,旋转异构体2):δ5.67(1h,m,h-1’).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6,旋转异构体的比例1.4:1,旋转异构体2):δ92.3.lrms[m+h⁺]728.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c33h45n9o10计算值728.3362，测量值：728.3359.

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-1-氧代庚烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(23)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(25mg，185μmol)和edc·hcl(9.2mg，48μmol)和nmm(5.0μl，48μmol)存在下，使缩酚酸肽s38(30mg，37μmol)与胺18(20mg，92μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，370μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，3.7ml)4小时，反相hplc(0至50％mecn，40分钟；h2o％，10分钟)纯化后，得到无定形白色固体23(作为甲酸盐)(8.1mg，2步，收率27％)。

ir(atr):3356,2977,2932,1731,1638cm^-1.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1):δ10.79(1h,s),8.64(s,1h),8.37(s,1h),8.23(s,1h),8.16(s,1h),7.54(2h,m,h-6+ar-h),7.33-7.28(1h,m,ar-h),7.13(1h,s,ar-h),6.97-6.91(1h,m,ar-h),6.45(1h,d,j＝7.8hz),6.15(1h,s),5.71(1h,d,j＝3.3hz,h-1’),5.58(1h,app.dd,j＝8.0,2.5hz,h-5),4.55(1h,app.t,j＝9.4hz,daba1-α-ch),4.24-4.17(3h,m,h-2’+h-4’+trp4-α-ch),4.09-4.00(1h,m,aha3-α-ch),3.99-3.88(1h,m,daba1-β-ch),3.32-3.00(3h,m,h-5’+trp4-β-ch2),3.70-3.61(1h,m,gly2-α-ch2),3.46(1h,d,j＝14.9hz,gly2-α-ch2),2.99(1h,dd,j＝14.6,6.5hz,trp4-β-ch2),2.72(3h,s,nch3),2.71(3h,s,nch3),2.15-2.05(1h,m,h-3’),1.71-1.63(1h,m,h-3’),1.56-1.37(2h,m,aha3-β-ch2),1.30-1.14(6h,m),1.10(3h,d,j＝6.5hz,daba1-γ-ch3),0.86-0.77(3h,m).¹³cnmr(100mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1):δ175.2(c＝o),173.9(c＝o),170.1(c＝o),169.8(c＝o),168.8(c＝o),163.3(c＝o),150.9(c＝o),141.5,136.4,128.0,124.2,123.8,120.7,117.8,111.6,110.6,101.2,92.0,78.4,73.8,54.3,53.4,50.7,42.9,40.2,34.7,31.2,28.6,28.4,24.9,21.8,15.3,13.1.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ8.06(s,1h),7.06-6.99(1h,m,ar-h),7.10(1h,app.d,j＝2.3hz,ar-h),5.65(1h,d,j＝3.4hz,h-1’),4.82-4.73(1h,m,daba1-β-ch),4.49-4.42(1h,m,daba1-α-ch),4.41-4.34(1h,m,h-4’),2.15-2.05(1h,m,h-3’),h-3’次要),1.77(1h,app.d,j＝13.0hz,h-3’).¹³cnmr

(100mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ27.0.lrms[m+h⁺]756.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c35h50n9o10计算值756.3675，测量值756.3674。

(((s)-2-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1--氧代丁烷-2-基)氨基)-1-环己基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(24)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(20mg，150μmol)和edc·hcl(7.4mg，39μmol)和nmm(4.0μl，39μmol)存在下，使缩酚酸肽s39(24mg，30μmol)与胺18(14mg，60μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，300μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，3.0ml)4小时，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后，得到无定形白色固体24(tfa盐)(13.7mg，2步，收率60％)。

ir(atr):3323,2979,2932,1626cm^-1.¹hnmr(400mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.6:1,主要的旋转异构体):δ8.78(1h,t,j＝5.9hz),8.37(1h,d,j＝8.9hz),8.22(1h,d,j＝8.5hz),8.15(1h,t,j＝5.8hz),7.62(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.58-7.54(1h,m,ar-h),7.38-7.26(1h,m,ar-h),7.16-7.04(2h,m,ar-h),7.04-6.95(1h,m,ar-h),5.77-5.70(2h,m,h-1’+h-5),4.62-4.56(2h,m,daba1-α-ch+trp4-α-ch),4.50-4.42(2h,m,h-2’),4.39-4.31(1h,m,h-4’),4.16(1h,d,j＝16.0hz,gly2-α-ch2),4.03-3.88(3h,m,daba1-β-ch+gly2-α-ch2+chg3-α-ch),3.54-3.46(1h,m,h-5’),3.29-3.13(3h,m,h-5’+trp4-β-ch2),2.87(3h,s,nch3),2.78(3h,s,nch3),2.21(1h,ddd,j＝13.6,7.6,6.1hz,h-3’),1.84-1.48(6h,m,h-3’+2.5×ch2+chg3-β-ch),1.25-0.95(8h,m,daba1-γ-ch3+2.5×ch2).¹³cnmr(100mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.6:1,主要的旋转异构体):δ176.2(c＝o),175.0(c＝o),171.3(c＝o),167.6(c＝o),167.2(c＝o),160.0(c＝o),152.2(c＝o),142.4,137.9,128.8,124.2,122.1,119.6,119.4,111.8,110.4,102.0,94.7,81.2,75.8,60.0,56.6,54.6,54.1,45.0,41.5,40.8,35.6,30.6,29.6,29.0,27.8,26.8,14.9.lrms[m+h⁺]768.3.hrms(esim/z)[m+h⁺]c36h50n9o10计算值768.3875，测量值768.3867。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(25)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(14mg，103μmol)和edc·hcl(5.1mg，27μmol)和nmm(3.0μl，27μmol)存在下，使缩酚酸肽s40(17mg，20μmol)与胺18(9.5mg，42μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，200μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，4ml)4小时，在反相hplc(0至50％mecn，45分钟；10分钟，100％h2o)纯化后得到无定形白色固体25(6.0mg，2步，收率35％)。

ir(atr):3368,2926,1647,1549cm^-1.¹hnmr(600mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ7.62(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.60-7.54(1h,m,ar-h),7.33(1h,dd,j＝9.1,8.2hz,ar-h),7.11(1h,s,ar-h),7.10-7.05(1h,m,ar-h),7.04-6.98(1h,m,ar-h),5.73(1h,d,j＝2.6hz,h-1’),5.71(1h,d,j＝8.0hz,h-5),4.65(1h,d,j＝7.6hz,daba1-α-ch),4.60-4.52(2h,m,h-4’+trp4-α-ch),4.49-4.44(1h,m,h-2’),4.21-4.12(2h,m,gly2-ch2+cha3-α-ch),3.99(1h,dq,j＝10.1,6.6hz,daba1-β-ch),3.91(1h,d,j＝16.0hz,gly2-ch2),3.55-3.49(1h,dd,m,h-5’),3.29-3.16(2h,m,trp4-β-ch2),2.88(3h,s,nch3),2.22(1h,ddd,j＝13.8,7.7,6.2hz,h-3’),1.84-1.60(5h,m,2×cha3-ch2+h-3’),1.49-1.41(2h,m,cha3-β-ch2),1.36-1.31(1h,m,cha3-γ-ch),1.26-1.09(7h,m,2×cha3-ch2+daba1-γ-ch3),1.03-0.79(2h,m,cha3-ch2).¹³cnmr(150mhz,cd3od旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ176.3(c＝o),175.9(c＝o),171.9(c＝o),167.4(c＝o),167.1(c＝o),160.2(c＝o),152.5(c＝o),142.6,138.1,129.1,124.5,122.0,119.3,119.0,112.0,110.4,102.3,95.1,80.6,76.2,56.6,54.8,54.4,53.0,44.8,40.9,40.6,36.2,34.9,34.4,28.5,28.4,27.5,26.8,13.9.lrms[m+h⁺]782.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c37h52n9o10计算值782.3831，测量值782.3824。

(((2s，3s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-羟基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(26)

根据通用步骤8，在室温下，hoat(15.8mg，116.0μmol)，edc·hcl(5.8mg，30.1μmol)和nmm(3.3μl，30.1μmol)存在下，使缩酚酸肽s41(18.0mg，23.2μmol)与胺18(10.5mg，46.4μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，240μl)反应，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc纯化(0至30％mecn，40分钟)后得到蓬松的白色固体26(甲酸盐)(8.3mg，两步，46％)。

ir(atr):3293,2922,1677,1594,1436cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,1.3:1比率的旋转异构体,旋转异构体1):δ7.53(2h,m,h-6+ar-h),7.30(1h,m,ar-h),7.12(1h,m,ar-h),7.03(1h,m,ar-h),6.94(1h,m,ar-h),6.55(1h,brs,thr3-γ-oh),5.64(1h,d,j＝3.1hz,h-1’),5.57(1h,d,j＝6.4hz,h-5),4.60(1h,m,daba1-α-ch),4.30(1h,m,trp4-α-ch),4.27–4.23(2h,m,h-2’+h-4’),4.00–3.94(3h,m,thr3-α-ch+thr3-β-ch+daba1-β-ch),3.36–3.00(6h,m,gly2-α-ch2+2xh-5’+trp4-β-ch2),2.49(3h,s,nch3),2.14–2.11(1h,m,h-3’),1.71–1.62(1h,m,h-3’),1.15(3h,d,j＝4.7hz,thr3-γ-ch3),0.99(3h,d,j＝5.5hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.3:1,旋转异构体1):δ179.3(c＝o),173.7(c＝o),171.8(c＝o),170.0(c＝o),164.5(c＝o),163.6(c＝o),150.8(c＝o),141.7,136.4,127.9,124.3,121.2,119.2,118.5,111.7,110.0,102.1,92.6,79.0,78.9,74.1,66.9,59.4,55.3,55.2,44.1,40.3,35.8,29.2,27.6,20.1,15.1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6；旋转异构体的比率1.3:1,旋转异构体1):δ5.68(1h,m,h-1’),5.58(1h,m,h-5).lrms[m+h⁺]c32h44n9o11计算值730.3154，测量值730.3150。

(2s，6s，9s，10s)-2-((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-6-(羧甲基)-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-10,11-二甲基-4,7,12-三氧代-3,5,8,11-四氮杂十三烷酸(27)

根据通用步骤8条件b，在室温下，hoat(14.7mg，107.8μmol)，edc·hcl(5.4mg，28.0μmol)和nmm(3.1μl，28.0μmol)，使缩酚酸肽s42(19.2mg，21.6μmol)与胺18(12.2mg，53.9μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，220μl)中反应4小时条件b获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟)后，得到白色固体27(甲酸盐)(10.0mg，两步，62％)。

ir(atr):3304,2952,2844,1643,1450,1411cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体1):δ7.52(2h,m,h-6+ar-h),7.31(1h,m,ar-h),7.12(1h,s,ar-h),6.99(1h,m,ar-h),6.93(1h,m,ar-h),5.65(1h,m,h-5),5.57(1h,m,h-1’),4.41(1h,m,asp3-α-ch),4.33-4.28(4h,m,h-2’+h-4’+daba1-α-ch+trp4-αch),3.94–3.55(2h,m,gly2-α-ch2),3.27(1h,m,daba1-β-ch),3.12(1h,m,h-5’),2.99(1h,m,h-5’),2.71(3h,m,nme),2.44(4h,m,asp3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.15–2.11(1h,m,h-3’),1.68–1.65(1h,m,h-3’),1.08(3h,m,daba1-γ-ch3).¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体2):δ5.59(1h,m,h-1’),5.66(1h,m,h-5),2.65(3h,m,nme),1.75-1.68(1h,m,h-3’).¹³cnmr:(126mhz,dmso-d6):δ179.5(c＝o),172.1(c＝o),167.8(c＝o),166.8(c＝o),166.1(c＝o),163.8(c＝o),163.7(c＝o),150.9(c＝o),141.5,136.3,128.0,124.0,123.9,121.0,118.9,111.6,110.7,110.9,101.9,92.5,78.8,74.4,55.6,55.0,51.2,43.9,40.2,40.0,35.9,29.4,28.5,27.8,15.0.旋转异构体2:不可区分.lrms[m+h⁺]744.4.hrms(esim/z)[m+h]⁺c32h42n9o12计算值744.2947，测量值744.2943。

(((s)-6-氨基-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(28)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(10mg，74.0μmol)，edc·hcl(3.7mg，19.2μmol)和nmm(2.1μl，19.2μmol)存在下，使缩酚酸肽s43(13.4mg，14.8μmol)与胺18(11mg，48.7μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，180μl)中反应4小时，获得相应的受保护的类似物。然后按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc(0至30％mecn，40分钟)后得到蓬松白色固体28(tfa盐)(7.2mg，两步，62％)。

ir(atr):3285,3083,2941,1672,1555cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率2.2:1,主要的旋转异构体):δ7.55-7.49(2h,m,h-6+ar-h),7.32(1h,d,j＝8.0hz,ar-h),7.11(1h,s,ar-h),7.04(1h,m,ar-h),6.95(1h,m,ar-h),5.68–5.57(2h,m,h-5+h-1’),4.79–4.73(1h,m,lys3-α-ch),4.36-4.32(3h,m,h-2’+daba1-α-ch+h-4’),4.11–4.09(1h,m,trp4-α-ch),3.89–3.86(1h,m,daba1-β-ch),3.86–3.65(2h,m,gly2-α-ch2),3.25–3.24(1h,m,h-5’),3.19–2.98(3h,m,h-5’+2xtrp4-β-ch2),2.74(5h,m,nme+lys3-ε-ch2),2.21–2.08(1h,m,h-3’),1.51-1.48(3h,m,h-3’+lys3-δ-ch2),1.27–1.24(2h,m,lys3-γ-ch2),1.11(3h,d,j＝6.4hz,daba1-γ-ch3),1.02(2h,d,j＝6.7hz,lys3-β-ch2).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6，旋转异构体的比率2.2:1,主要的旋转异构体):δ173.7(c＝o),172.0(c＝o),169.8(c＝o),169.0(c＝o),165.6(c＝o),162.8(c＝o),150.0(c＝o),141.7,135.6,126.9,124.0,121.2,118.7,111.7,109.0,79.0,74.3,55.4,55.1,54.8,53.7,53.1,44.0,40.1,39.1,36.0,32.2,29.0,28.1,27.7,27.0,22.7,15.0,14.3.lrms[m+h⁺]757.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c34h49n10o10计算值757.3627，测量值757.3620。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-异丁烷-2-基)氨基)-1-氧代-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(30)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(22mg，161μmol)和edc·hcl(8.0mg，42μmol)和nmm(4.4μl，42μmol)存在下，使缩酚酸肽s45(28mg，32μmol)与胺18(15mg，64μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，320μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，3.2ml)4小时，在反相hplc(0至50％mecn，45分钟；10分钟，100％h2o)纯化后获得无定形白色固体30(甲酸盐)(5.6mg，2步，20％)。

ir(atr):3331,2948,2837,1668cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1):δ10.73(1h,s),8.64(1h,s),8.45-8.29(1h,m),8.21(1h,s),7.66-7.42(4h,h-6+ar-h),7.37-7.29(2h,m,ar-h),7.30-7.16(1h,m,ar-h),7.05(1h,s,ar-h),6.97(1h,app.t,j＝7.5hz,ar-h),6.88(1h,app.t,j＝7.5hz,ar-h),6.52(1h,s),6.22(1h,s),5.76-5.59(1h,m,h-1’),5.55(1h,d,j＝8.0,h-5),4.54(1h,app.t,j＝9.1hz,daba1-α-ch),4.43-4.20(3h,m,h-2’+h-4’+p-cf3-pal3-α-ch),4.19-4.08(1h,m,trp4-α-ch),3.94-3.82(1h,m,daba1-β-ch),3.79-3.86(1h,m,gly2-α-ch2),3.60-3.34(1h,m,gly2-α-ch2),3.61-3.39(m,1h),3.34-2.89(5h,m,h-5’+p-cf3-pal3-β-ch2+trp4-β-ch2),2.88-2.78(1h,m,p-cf3-pal3-β-ch2),2.70(3h,s,nch3),2.19-2.04(1h,m,h-3’),1.73-1.53(1h,m,h-3’),1.03(3h,d,j＝6.0hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体1):δ175.1(c＝o),173.0(c＝o),170.9(c＝o),169.0(c＝o),167.0(c＝o),163.1(c＝o),150.4(c＝o),142.1,140.6,135.3,129.4,127.4,126.6,123.9,123.6,119.7,118.0,117.4,117.1,110.4,110.3,100.9,91.3,78.6,73.4,54.4,54.1,53.5,52.1,42.8,39.3,36.8,34.6,27.2,26.5,13.8.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ4.77-4.70(1h,m,daba1-β-ch),4.46(1h,app.t,j＝8.7hz,daba1-α-ch),2.68(3h,s,nch3).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1:1,旋转异构体2):δ53.5,49.6,28.0,13.2.lrms[m+h⁺]844.3.hrms(esim/z)[m+h⁺]c38h45f3n9o10计算值844.3260，测量值844.3234。

(2s，6s，9s，10s)-2-((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-6-(4-羟基苄基)-10,11-二甲基-4,7,12-三氧代-3,5,8,11-四氮杂十三烷-1-酸(31)

根据通用步骤8，在室温下，hoat(22.5mg，165.0μmol)，edc·hcl(8.2mg，42.9μmol)和nmm(4.7μl，42.9μmol)存在下，使缩酚酸肽s46(29.5mg，33.0μmol)与胺18(18.7mg，82.4μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，340μl)中反应4小时，获得完全受保护的类似物。然后按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc纯化(0至50％mecn，40分钟)后得到蓬松的白色固体31(甲酸盐)(15.7mg，50％，两步)。

ir(atr):3325,2928,1676,1541,1498cm^-1.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ7.53(2h,m,h-6+ar-h),7.30(1h,d,j＝8.0hzar-h),7.10(1h,app.dd,j＝6.2hz,ar-h),7.03(1h,m,ar-h),6.95(3h,m,3xar-h),6.61(2h,m,2xar-h),5.67(1h,d,j＝3.2hz,h-1’),5.59(1h,d,j＝2.3hz,h-5),4.55(1h,m,daba1-α-ch),4.32-4.24(4h,m,trp4-α-ch+tyr3-α-ch,h-2’+h-4’),3.91(1h,m,daba1-β-ch),3.33–2.96(6h,m,trp4-β-ch2+tyr3-β-ch2+2xh-5’),2.82-2.60(5h,m,gly2-α-ch2+nch3),2.14–2.11(1h,m,h-3’),1.70-1.62(1h,m,h-3’),1.10(3h,d,j6.5hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(101mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ175.0(c＝o),172.3(c＝o),169.1(c＝o),168.3(c＝o),163.6(c＝o),159.9,156.2(c＝o),156.0(c＝o),141.3,135.6,130.4,127.3,127.1,124.0,121.1,118.8,118.5,116.2,115.2,109.9,108.8,92.3,79.0,74.4,55.3,54.2,50.8,43.9,40.6,35.8,29.3,28.3,27.6,15.0.lrms[m+h⁺]792.5.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c37h46n9o11792.3311，测量值792.3304。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-异丁烷-2-基)氨基)-1-氧代-3-(吡啶-3-基)丙-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(32)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(12mg，86μmol)和edc.hcl(4.1mg，22μmol)和nmm(2.3μl，22μmol)存在下，使缩酚酸肽s47(14mg，17μmol)与胺18(10mg，44μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，170μl)中持续反应3.5小时，获得完全保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.7ml)4小时，在反相hplc0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后得到无定形白色固体32(作为tfa盐)(8.2mg，2步收率54％)。

ir(atr):3367,3063,1666cm^-1.¹hnmr(400mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.4:1,旋转异构体1):δ8.74(1h,t,j＝6.0hz),8.60-8.54(1h,m,ar-h),8.41(1h,d,j＝8.8hz),8.25-8.16(1h,m,ar-h),7.77-7.67(1h,m,ar-h),7.63(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.57-7.47(1h,m,ar-h),7.35-7.30(1h,m,ar-h),7.11-7.04(2h,m,ar-h),7.03-6.97(1h,m,ar-h),5.76-5.74(1h,m,h-1’),5.71(1h,d,j＝8.0hz,h-5),4.74-4.62(1h,m,daba1-α-ch),4.61-4.43(4h,m,h-2’+daba1-α-ch+3-pal3-α-ch+trp4-α-ch),4.41-4.32(1h,m,h-4’),4.14(1h,d,j＝16.0hz,gly2-α-ch2),4.01-3.88(2h,m,daba1-β-ch+gly2-α-ch2),3.55-3.46(1h,m,h-5’),3.30-3.10(4h,m,h-5’,3-pal3-β-ch2+trp4-β-ch2),3.07-2.97(1h,m,3-pal3-β-ch2主要的),2.88(3h,s,nch3),2.28-2.18(1h,m,h-3’),1.84-1.69(1h,m,h-3’),1.25-1.17(3h,m,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(100mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.4:1,旋转异构体1):δ176.3(c＝o),172.8(c＝o),171.4(c＝o),167.3(c＝o),166.8(c＝o),165.9(c＝o),152.2(c＝o),145.8,145.4,142.8,142.2,137.9(×2),128.8,126.6,124.3,122.1,119.6,119.2,111.8,110.5,102.2,94.8,81.0,76.1,56.8,55.0,54.8,54.2,44.9,41.0,36.1,36.0,28.6,27.8,14.8.¹hnmr(400mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.4:1,旋转异构体2):δ8.33(1h,d,j＝8.2hz),8.15-8.10(1h,m,ar-h),7.57-7.47(1h,m,ar-h,h-6),5.67(1h,d,j＝8.1hz,h-5),4.74-4.62(1h,m,daba1-β-ch),4.61-4.43(1h,m,h-4’),3.83(1h,d,j＝16.2hz,gly2-α-ch2),3.75(1h,d,j＝16.2hz,gly2-α-ch2),3.46-3.35(1h,m,h-5’),3.30-3.10(4h,m,h-5’,3-pal3-β-ch2+trp4-β-ch2),3.07-2.97(1h,m,3-pal3-β-ch2),2.81(3h,s,nch3),2.35(1h,app.dt,j＝13.6,7.0hz,h-3’),1.84-1.69(1h,m,h-3’),1.25-1.17(3h,m,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(100mhz,cd3od,旋转异构体的比率1.4:1,旋转异构体2):δ145.2,102.5,80.4,75.9,56.4,53.3,44.6,41.2,36.4,30.4,13.6.lrms[m+h⁺]777.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c36h45n10o10计算值777.3314，测量值777.3311。

(2s，6s，9s，10s)-2,6-双((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-10,11-二甲基-4,7,12-三氧代-3,5,8,11-四氮杂十三烷-1-酸(33)

根据通用步骤8，hoat(25.5mg，187.0μmol)，edc.hcl(9.3mg，48.6μmol)和nmm(5.4μl，48.6μmol)存在下，使缩酚酸肽s48(36.0mg，37.4μmol。)与胺18(21.3mg，93.5μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，380μl)中反应4小时，获得完全保护的类似物。然后按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟)后，得到蓬松的白色固体33(甲酸盐)(9.1mg，两步，32％)。

ir(atr):3327,2964,2928,1680,1554cm^-1.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体1):δ7.54(2h,m,h-6+2xar-h),7.30(2h,d,j＝8.0hz,2xar-h),7.11-6.92(6h,m,6xar-h),7.02(1h,m,ar-h),6.92(1h,m,ar-h),5.67(1h,d,j＝3.4hz,h-1’),5.59(1h,app.d,h-5),4.56(1h,m,daba1-α-ch),4.48-4.25(4h,m,h-2’+h-4’+trp3-α-ch+trp4-α-ch),3.88(1h,m,daba1-β-ch),3.71(2h,m,gly2-α-ch2),3.34-2.88(6h,m,trp3-β-ch2+trp4-β-ch2+2xh-5’),2.73(3h,s,nch3),2.14-2.11(1h,m,h-3’),1.76-1.65(1h,m,h-3’),1.11(3h,m,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(101mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体1):δ173.7(c＝o),169.0(c＝o),168.0(c＝o),167.3(c＝o),163.7(c＝o),163.6(c＝o),150.8(c＝o),141.2,136.4,136.3,127.9,127.8,124.3,123.7,121.9,120.8,119.7,119.5,118.6,118.5,112.2,111.5,111.4,110.2,101.8,92.4,78.8,74.3,55.2,54.5,51.0,44.0,40.4,39.4,35.8,29.3,28.3,27.2,14.9.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体2):δ5.72(1h,m,h-1’).¹³cnmr(101mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.1:1,旋转异构体2):93.4,102.8.lrms[m⁺h⁺]815.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c39h47n10o10815.3471，测量值为815.3465。

(2s，6s，9s，10s)-2-((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-10,11-二甲基-4,7,12-三氧-6-苯基-3,5,8,11-四氮杂十三烷-1-酸(34)

将缩酚酸肽s49(25.3mg，31.3μmol)与胺18(17.8mg，78.2μmol)在ch2cl2中反应：根据通用步骤8，在hoat(21.3mg，156.5μmol)，edc.hcl(7.8mg，40.7μmol)和nmm(4.5μl，40.7μmol)存在下，dmf(1：1v/v，320μl)4小时获得完全保护的类似物。然后根据通用步骤8，用ch2cl2中的tfa和i-pr3sih的混合物处理该化合物(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5体积％i-pr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc纯化(0至50％mecn，40分钟)后得到34(甲酸盐)，为蓬松的白色固体(12.0mg，两步47％)。

ir(atr):3407,2923,2853,1679,1437cm^-1.¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.3:1,旋转异构体1):δ7.52(2h,m,h-6+ar-h),7.35–7.29(6h,m,6xar-h),7.11–6.93(3h,m,3xar-h),5.64–5.59(2h,m,h-1’+h-5),4.81(1h,m,phg3-α-ch),4.34(1h,m,daba1-α-ch),4.32–4.25(3h,m,h-2’+h-4’+trp4-α-ch),3.90(1h,m,daba1-β-ch),3.71-3.50(4h,m,gly2-α-ch2+trp4-β-ch2),3.24–2.99(4h,m,trp4-β-ch2+2xh-5’),2.73(3h,s,nch3),2.06–1.98(1h,m,h-3’),1.76–1.65(1h,m,h-3’),1.13(3h,m,daba1-γ-ch3).¹hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.3:1,旋转异构体2):δ2.17-2.08(1h,m,h-3’).¹³cnmr(101mhz,dmso-d6；旋转异构体比例1.3:1,旋转异构体1):δ175.1(c＝o),174.8(c＝o),173.0(c＝o),169.9(c＝o),168.7(c＝o),167.9(c＝o),163.6,150.8(c＝o),141.5,136.2,128.5,128.0,127.7,123.8,121.0,118.9,118.5,111.5,110.6,101.9,92.4,78.7,74.4,57.0,55.4,54.6,53.3,50.8,44.0,40.5,36.5,29.1,28.3,27.3,14.9.¹³cnmr(101mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.3:1,旋转异构体2):δ35.7.lrms[m+h⁺]762.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c36h44n9o10计算值762.3206，测量值762.3200。

(2s，6s，9s，10s)-2-((1h-吲哚-3-基)甲基)-13-氨基-9-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酰基)-10,11-二甲基-4,7,12-三氧代-6-苯乙基-3,5,8,11-四氮杂十三烷-1-酸(35)

根据通用步骤8，在hoat(23.9mg，175.5μmol)，edc.hcl(8.7mg，45.6μmol)和nmm(5.0μl，45.6μmol)存在下，使缩酚酸肽s50(29.3mg，35.1μmol)与胺18(19.9mg，87.7μmol)在ch2cl2：dmf(1：1v/v，360μl)中反应4小时，获得完全受保护的类似物。然后用按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，1.2ml)16小时，在反相hplc纯化(0至50％mecn，40分钟)后得到蓬松的白色固体35(甲酸盐)(7.0mg，两步，24％)。

ir(atr):3377,2960,2929,1680,1435cm^-1.¹hnmr(500mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ7.53(2h,m,h-6+ar-h),7.30(7h,m,7xar-h),7.01(2h,m,2xar-h),5.64(1h,m,h-1’),5.55(1h,m,h-5),4.56(1h,m,daba1-α-ch),4.28(3h,m,trp4-α-ch+h-2’+h-4’),4.10–4.04(2h,m,hphe3-α-ch+daba1-β-ch),3.69(2h,m,gly2-α-ch2),3.26-3.14(4h,m,trp4-β-ch2+2xh-5’),2.73(3h,s,nch3),2.50(2h,obscure,hphe3-γ-ch2),2.09(1h,m,h-3’),1.83-1.66(3h,m,h-3’+hphe3-β-ch2),1.12(3h,m,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6,旋转异构体的比率1.5:1,主要的旋转异构体):δ177.7(c＝o),172.7(c＝o),171.4(c＝o),169.9(c＝o),169.0(c＝o),163.7(c＝o),150.8(c＝o),141.4,136.3,128.8,128.7,126.2,126.0,125.1,124.1,121.0,118.9,111.4,110.3,101.6,92.5,79.0,78.9,74.2,55.5,53.4,52.9,50.8,43.8,40.9,40.3,35.7,31.4,29.2,27.5,15.1.lrms[m+h⁺]790.5.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c38h48n9o10790.3518，测量值790.3509。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(36)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(17mg，123μmol)和edc.hcl(6.1mg，32μmol)和nmm(3.5μl，32μmol)存在下，使缩酚酸肽s51(21mg，25μmol)与胺18(14mg，63μmol)在ch2cl2：dmf(1：1vμ/v，250μl)中反应4小时，获得完全受保护的类似物。按照通用方法8，该化合物用tfa和含有ipr3sih的ch2cl2混合物处理(1：1v/vtfa：ch2cl2,2.5vol.％ipr3sih，2.5ml)4小时，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟，10分钟，100％h2o，流速9ml/min)纯化后，得到无定形白色固体36(甲酸盐)(6.0mg，28％，2步)。

ir(atr):3390,2977,2936,1730,1644cm^-1.¹hnmr(500mhz,cd3od,主要的旋转异构体):δ8.56(1h,t,j＝6.0hz,1h),8.16(1h,d,j＝9.1hz),8.13(0.4h,d,j＝8.6hz),7.84(1h,t,j＝5.9hz),7.81-7.69(2h,m,ar-h),7.65-7.60(1h,m,ar-h),7.58-7.54(2h,m,ar-h+h-6),7.45-7.40(3h,m,ar-h),7.36-7.29(2h,m,ar-h),7.11-7.04(2h,m,ar-h),7.03-6.92(1h,m,ar-h),5.72-5.66(2h,m,h-1’+h-5),4.64-4.53(1h,m,trp-α-ch),4.53-4.48(1h,m,daba1-α-ch),4.48-4.34(2h,h-2’+nal3-α-ch),4.25-4.16(1h,m,h-4’),4.07(1hd,j＝15.9hz,gly2-α-ch2),3.88-3.81(2h,m,daba1-β-ch+gly2-α-ch2),3.30-3.23(1h,m,trp4-β-ch2),3.22-3.04(4h,m,h-5’+trp4-β-ch2+nal3-β-ch2),3.13-3.03(1h,m,h-5’),2.91(1h,ddd,j＝13.6,8.6,4.8hz,h-5’),2.83(3h,s,nch3),2.14(1h,ddd,j＝13.6,7.5,6.0hz,h-3’),1.66-1.59(1h,m,h-3’),1.17(3h,d,j＝6.6hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(125mhz,cd3od,主要的旋转异构体,两个¹³c信号模糊):δ176.0(c＝o),174.4(c＝o),171.0(c＝o),167.6(c＝o),166.3(c＝o),159.5(c＝o),152.4(c＝o),142.6,142.4,137.6,135.8,134.7,134.0,128.8(×2),128.6,128.2,126.6,124.4,122.0,119.6,119.2,112.0,110.6,102.3,94.8,81.1,76.0,56.6(×2),55.0,54.8,45.0,40.9,39.2,35.9,29.1,27.7,14.5.lrms[m+h⁺]826.4.hrms(esim/z)[m+h⁺]c41h48n9o10计算值826.3518，测量值为826.3515。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-((s)-2-氨基-3-(3-羟基苯基)-n-甲基丙酰胺)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(37)

根据通用步骤8的条件b，在室温下，hoat(11mg，150μmol)和edc.hcl(4.4mg，22μmol)和nmm(2.6μl，22μmol)存在下，使缩酚酸酯s52(18mg，17μmol)与胺18(12mg，52μmol)在ch2cl2：在dmf(1：1v/v，180μl)中持续反应2.5小时，获得完全保护的类似物。用tfa和含ipr3sih的h2o(9：1v/vtfa：ch2cl2,2vol.％ipr3sih，1.7ml)中的混合物处理该化合物，在0℃下保持45分钟，在室温下2小时，在反相hplc(0至50％mecn，40分钟；10分钟，100％h2o)纯化后得到无定形白色固体37(tfa盐)为(8.0mg，2步，收率53％)。

ir(atr):3388,2926,1647cm^-1.¹hnmr(500mhz,cd3od,旋转异构体的比率2.6:1,主要的旋转异构体):δ7.62(1h,d,j＝8.1hz,h-6),7.54(1h,app.t,j＝7.8hz,ar-h),7.32(1h,app.d,j＝8.2hz,ar-h),7.18(1h,app.t,j＝7.9hz,ar-h),7.12-7.04(2h,m,ar-h),7.02-6.96(1h,m,ar-h),6.78-6.71(2h,m,ar-h),6.69-6.66(1h,m,ar-h),5.74(1h,d,j＝2.5hz,h-1’),5.71(1h,d,j＝8.1hz,h-5),4.91-4.75(1h,m,m-tyr2-α-ch),4.59-4.49(2h,m,daba1-α-ch+trp4-α-ch),4.48-4.35(2h,h-2’+h-4’),4.23-4.07(2h,m,daba1-β-ch+cha3-α-ch),3.52(1h,dd,j＝13.9,3.9hz,h-5’),3.29-3.23(2h,m,h-5’+trp4-β-ch2),3.23-3.11(1h,m,trp4-β-ch2),3.02-2.97(2h,m,m-tyr2-β-ch2),2.78(3h,s,nch3),2.23(1h,app.dt,j＝13.7,7.0hz,h-3’),1.82-1.58(5h,m,h-3’+2×ch2),1.48-1.40(2h,m,cha3-β-ch2),1.38-1.11(6h,m,cha3-γ-ch+2.5×ch2),0.98-0.85(1h,m,0.5×ch2),0.82(3h,d,j＝6.5hz,daba1-γ-ch3).¹³cnmr(125mhz,cd3od,旋转异构体的比率2.6:1,主要的旋转异构体):δ175.8(c＝o),175.4(c＝o),171.3(c＝o),170.2(c＝o),165.8(c＝o),159.8(c＝o),159.0,151.6(c＝o),142.1,137.6,136.1,131.2,128.6,124.4,122.2,121.7,119.7,119.3,116.9,115.7,112.1,110.5,102.3,94.9,80.9,76.2,56.9,54.6,54.5,52.9,52.8,44.8,40.4,38.3,35.7,35.0,33.8,28.8,28.3,27.1,14.2.lrms[m+h⁺]888.3.hrms(esim/z)[m+h⁺]计算值c44h58n9o11888.4250，测量值888.4244。

叔-丁基(s)-3-(2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(烯丙氧基)-3-氧代丙基)-1h-吲哚-1-羧酸盐(38)

在0℃下，向fmoc-trp(boc)-oh(1.0g，1.9mmol，1eq.)的dmf(2.8ml)的溶液中滴加ipr2etn(660μl，3.8mmol，2eq.)，然后滴加烯丙基溴(330μl，3.8mmol，2eq.)。使反应加热至室温，并搅拌16小时，然后用etoac(80ml)稀释。然后有机层用h2o(6×40ml)，盐水(40ml)洗涤，干燥(mgso4)并真空浓缩，得到白色泡沫38(1.1g，2.0mmol，定量)。

ir(atr):2923,2853,1731,1512cm^-1；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.13-8.12(m,1h,ar-h),7.76-7.75(m,2h,ar-h),7.57-7.51(m,3h,ar-h),7.41-7.37(m,3h,ar-h),7.33-7.27(m,3h,ar-h),7.24-7.21(m,1h,ar-h),5.89-5.81(m,1h,och2ch＝ch2)5.41(d,j＝8.4hz,1h,nh),5.31-5.23(m,2h,och2ch＝ch2),4.80-4.77(m,1h,α-ch),4.59(d,j＝5.5hz,2h,och2ch＝ch2),4.42-4.34(m,2h,fmoc-ch2),4.21(t,j＝7.1hz,1h,fmoc-ch),3.52(d,j＝4.6hz,2h,β-ch2),1.66(s,9h,co2t-bu)；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.5,155.9,149.7,144.0,143.9,141.4,138.2,135.5,131.5,130.7,128.9,127.9,127.2,127.2,125.3,124.8,124.4,122.8,122.8,121.2,120.1,120.0,119.4,119.0,115.5,114.9,107.9,83.9,67.4,66.4,54.4,47.3,28.4,28.1；lrms[m+na]⁺589.4.

叔-丁基(s)-3-(3-(烯丙氧基)-2-氨基-3-氧代丙基)-1h-吲哚-1-羧酸酯(39)

将烯丙基酯38(1.1g，2.0mmol，1eq.)用20％v/v哌啶的mecn(9.5ml)溶液处理，并搅拌30分钟。真空除去溶剂，所得残余物通过柱色谱纯化(洗脱液：1：1v/v己烷：etoac，0.1％v/v二乙胺至纯etoac，0.1％v/v二乙胺)，得到黄色油状39(0.56g，1.6mmol，85％)。

ir(atr):2924,2854,1732,1454cm^-1；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.13-8.11(m,1h,ar-h),7.57-7.55(m,1h,ar-h),7.51(m,1h,ar-h),7.33-7.29(m,1h,ar-h),7.25-7.22(m,1h,ar-h),5.91-5.83(dddd,1h,och2ch＝ch2),5.29(dq,j＝17.2,1.5hz,1h,och2ch＝ch2),5.23(dq,j＝10.4,1.2hz,1h,och2ch＝ch2),4.59(ddd,j＝6.0,5.9,1.3hz,2h,och2ch＝ch2),3.94(dd,j＝7.5,5.3hz,1h,α-ch),3.26(dd,j＝14.3,5.1hz,1h,β-ch2)3.08(dd,j＝14.4,7.4hz,1h,β-ch2),1.66(s,9h,co2t-bu)；¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ174.7,149.6,135.5,131.8,130.4,124.5,124.2,122.5,118.9,118.8,116.0,115.3,83.6,65.7,54.5,30.5,28.2；lrms[m+h]⁺345.1.

叔-丁基(s)-3-(3-(烯丙氧基)-2-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)-3-氧代-丙基)-1h-吲哚-1-羧酸酯(40)

向39(0.56g，1.6mmol，1eq.)和ipr2etn(2804-，1.6mmol，1eq.)的ch2cl2(8ml)溶液中滴加对硝基苯氯甲酸(0.33g，1.6mmol，1eq.)的ch2cl2(4ml)溶液)并搅拌1小时。真空除去溶剂，得到粗黄色油状40(1.3g)，将其直接用于后续步骤。

叔-丁基(s)-3-(2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基)-1h–吲哚-1-羧酸酯(41)

在0℃下，向fmoctrp(boc)-oh(0.20mg，0.38mmol，1eq.)的meoh(3ml)溶液中滴加socl2(40μl，0.53mmol，1.4eq.)。随后加热反应至室温，并搅拌30分钟，然后在40℃加热4小时。然后使反应冷却至室温，真空浓缩。将粗残余物重新溶解在meoh(1.6ml)中，并再次真空浓缩。将烧瓶冷却至0℃，然后将残余物溶于na2co3(5ml)的饱和水溶液中。将反应物用chcl3(10ml)和h2o(5ml)萃取。将水相用chcl3(10ml)萃取一次。将合并的有机萃取液干燥(mgso4)，并真空浓缩。将所得泡沫再溶解于ch2cl2中，并再次真空浓缩，得到灰白色泡沫，随后通过柱色谱法纯化(洗脱液：4：1v/v己烷：etoac)，得到白色泡沫41(0.11mg，0.20mmol，52％)。

ir(atr):3333,2924,1730cm^-1；¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.12(m,1h,ar-h),7.78-7.74(m,2h,ar-h),7.58-7.49(m,3h,ar-h),7.43-7.32(m,7h,ar-h),5.38(m,1h,nh),4.83-4.71(m,1h,α-ch),4.40-4.36(m,2h,fmoc-ch2),4.28-4.21(m,1h,fmoc-ch),3.71(s,3h,ch3),3.28-3.26(m,2h,β-ch2),1.65(s,4.5h,co2t-bu),1.57(s,4.5h,co2t-bu)；¹³cnmr(75.5mhz,cdcl3)δ172.1,155.7,149.5,143.7,141.2,135.3,130.4,127.6,127.0,125.1,124.5,124.1,122.6,119.9,118.7,115.3,114.9,83.6,67.1,52.3,47.0,28.1,27.7；lrms[m+na]⁺563.5；hrms计算值c32h32n2o6：mna⁺，563.21581。测量值：mna⁺,563.21531。

叔-丁基(s)-3-(3-甲氧基-2-(((4-硝基苯氧基)羰基)氨基)-3-氧代丙基)-1h-吲哚-1-羧酸酯(42)

将化合物41(0.69g，1.3mmol，1eq.)用20％v/v哌啶的mecn(6.5ml)溶液处理1小时。通过柱色谱法纯化粗混合物(洗脱液：2：1v/v己烷：etoac，0.1％v/v二乙胺至纯etoac，0.1％v/v二乙胺)，得到黄色油状物(0.27g)。将其重新溶解于ch2cl2(6.6ml)中，在ipr2etn(0.15ml，0.86mmol，1eq.)存在下，用对硝基苯基氯甲酸酯(0.21g，1mmol，1.2eq.)处理，并搅拌20小时，得到氨基甲酸酯。通过柱色谱法(洗脱液：3：1v/v己烷：etoac)，得到白色泡沫(0.37g，0.77mmol，2步，60％)。

ir(atr):3346,2923,1733,1595,1371cm^-1；¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.23-8.20(m,2h,ar-h),8.15-8.12(1h,ar-h),7.55-7.49(m,2h,ar-h),7.37-7.32(m,1h,ar-h),7.24(m,3h,ar-h),5.91(m,1h,nh),4.79-4.77(m,1h,α-ch),3.78(s,3h,ch3),3.41-3.27(m,2h,β-ch2),1.69(s,9h,co2t-bu)；¹³cnmr(75.5mhz,cdcl3)δ171.6,155.6,152.7,149.6,144.9,135.4,130.4,125.1,124.8,124.3,122.7,122.0,118.7,115.5,114.5,84.0,54.4,52.8,28.2；lrms[m+na]⁺506.13；hrms计算值：mna⁺，506.15393。测量值：mna⁺,506.15349。

3-乙氧基-3-氧代丙酸(43)

在0℃下，向丙二酸二乙酯(3.1ml，20mmol，1eq.)的1:10v/vthf：h2o(400ml)溶液中滴加koh(aq)(64ml，0.25m，16mmol，0.8eq.)。将反应物搅拌1小时，然后在0℃下，用1mhcl(aq)酸化至ph2。然后将水溶液用饱和nacl水溶液(50ml)稀释，用etoac(3×200ml)萃取，干燥(mgso4)并真空浓缩。所得残余物通过柱色谱纯化(2：1v/v己烷：etoac)，得到无色油状43(1.2g，8.9mmol，45％)。

ir(atr):3000,1714cm^-1；¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ4.24(q,j＝7.1hz,2h,och2),3.43(s,2h,ch2),1.30(t,j＝7.2hz,3h,ch3)；¹³cnmr(75.5mhz,cdcl3)δ170.6,167.2,62.0,40.6,14.0；lrms[m+h]⁺133.1。这些数据与niwayama等人在tetrahedronlett2008,49,4434-4436.报道的一致。

丙二酸单乙酯镁(44)

将化合物43加入到乙醇镁(0.47g，4.1mmol，1eq.)的无水thf(11ml)溶液中，并搅拌2小时。将得到的黄色溶液真空浓缩，并用于后续步骤，无需进一步纯化.该步骤改编自kuhn，s.等人发表于j.am.chem.soc.2011,133,3708-3711.的步骤1-(叔丁基)-6-乙基(s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氧代己二酸酯(45)

向boc-asp-otbu(2.2g，7.5mmol，1eq.)的无水thf(30ml)溶液中加入羰基二咪唑(1.3g，8.3mmol，1.1eq.)并搅拌2小时。然后将反应冷却至0℃，然后将44的无水thf(5.2ml)溶液加入上述溶液。然后加热反应至室温并搅拌20小时，然后用h2o(30ml)稀释，并用1mhcl(水溶液)酸化至ph2。然后水溶液用et2o(3×30ml)萃取。有机相用饱和nahco3水溶液，nahco3(水溶液)(30ml)洗涤，干燥(mgso4)并真空浓缩。所得残余物通过柱色谱纯化(2：1v/v己烷：etoac)，得到黄色油状45(1.9g，5.3mmol，71％)。

ir(atr):2979,2923,2852,1718cm^-1；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ5.41(d,j＝8.1hz,1h,nh),4.40-4.37(m,1h,α-ch),4.19(q,j＝7.2hz,2h,och2),3.44(s,2h,ch2),3.21(dd,j＝18.2,4.4hz,1h,β-ch2),3.04(dd,j＝18.1,4.3hz,1h,β-ch2)；1.43(s,18h,9xco2t-bu+9xot-bu),1.27(t,j＝7.1hz,3h,ch3)；¹³cnmr(75.5mhz,cdcl3)δ200.7,169.9,166.5,155.5,82.2,79.8,61.4,50.0,49.2,45.0,28.3,27.8,14.0；lrms[m+na]⁺382.2。这些数据与brun，m.等人发表于angew.chem.int.ed.engl.2004,43,3432-3436.上的数据一致。

(s)-1-羧基-2-(6,7-二甲氧基-2-氧代-2h-苯并吡喃-3-基)乙-1-氨基甲基磺酸盐(46)

在室温下，用1：1v/vtfa：ch2cl2(14ml)处理化合物45(1.5g，4.2mmol，1eq.)1小时。然后真空除去溶剂并与甲苯(3×20ml)共沸，然后加入3,4-二甲氧基苯酚(0.97g，6.3mmol，1.5eq.)。然后在0℃下，加入甲磺酸(6.8ml，100mmol，25eq.)，随后使反应加热至室温并搅拌2小时。将产物在乙醚中沉淀出来，并以3600g离心20分钟。将沉淀物重新溶解在h2o中并冻干，得到蓝色油状46(3.2g，8.1mmol，定量)。

ir(atr):2954,2923,1707,1613cm^-1；¹hnmr(300mhz,(ch3)2so)δ8.42(s,3h,nh3),7.15-7.06(m,2h,ar-h),6.28(s,1h,h-3),4.30-4.25(m,1h,α-ch),3.84(s,3h,ome),3.83(s,3h,ome),3.36(dd,j＝14.7,6.4hz,1h,β-ch2),3.26(dd,j＝14.7,8.0hz,1h,β-ch2)；¹³cnmrδ173.0,160.7,156.4,153.3,149.5,146.4,112.5,111.5,106.2,100.9,56.6,56.5,53.4,47.0,33.3；lrms[m+h]⁺294.0。这些数据与brun，m.等人发表于angew.chem.int.ed.engl.2004,43,3432-3436.上的数据一致。

(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(6,7-二甲氧基-2-氧代-2h-苯并吡喃-3-基)丙酸(47)

向46(3.0g，7.7mmol，1eq.)的1.5：1v/vthf：饱和nahco3(aq)(77ml)溶液中加入fmoc-osu(2.8mg，8.4mmol，1.1eq.)并搅拌17小时。然后将反应用h2o(80ml)稀释，并用乙醚(3×80ml)洗涤。然后用1mhcl(水溶液)将水相酸化至ph2，用etoac(3×100ml)萃取，干燥(mgso4)并真空浓缩，得到绿色粉末25(2.0g，3.8mmol，50％)。

ir(atr):3368,1701,1614cm^-1；¹hnmr(500mhz,(ch3)2so)δ7.88-7.86(m,2h,ar-h),7.63-7.60(m,2h,ar-h),7.40-7.38(m,2h,ar-h),7.29-7.25(m,3h,ar-h),7.07(m,1h,ar-h),6.24(s,1h,h-3),4.37-4.32(m,1h,α-ch),4.24-4.22(m,2h,fmoc-ch2),4.16(m,1h,fmoc-ch),3.85(s,3h,ome),3.84(s,3h,ome),3.32(dd,j＝14.5,4.0hz,1h,β-ch2)3.10(dd,j＝14.4,9.9hz,1h,β-ch2)；¹³cnmrδ173.0,160.7,156.4,153.3,149.5,146.4,144.2,144.1,144.1,144.1,128.1,127.5,125.6,125.6,120.6,112.5,111.5,106.2,100.9,66.2,56.6,56.5,53.4,47.0,33.3,25.7；lrms[m+h]⁺516.3。这些数据与brun，m.等人发表于angew.chem.int.ed.engl.2004,43,3432-3436.上的数据一致。

通用步骤7.1

在ch2cl2(0.04m)中，将树脂结合的假肽用四(三苯基膦)钯(0)(0.028-0.052mmol，0.20eq.)溶液和苯基硅烷(2.8-5.2mmol，20eq.)处理，同时摇动15分钟，然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂。通过lcms检测少量裂解溶液确认alloc-保护基完全除去。

通用步骤7.2

条件a：

在无水ch2cl2(0.5m)中，树脂结合的假肽51-54,58-62用n，n’-二异丙基碳二亚胺(dic)(0.62-1.3mmol，5eq.)振荡5分钟激活。然后其中加入醇(0.62-1.3mmol，5eq.)和4-二甲基氨基吡啶(dmap)(12-26μmol，0.1eq.)的无水ch2cl2(0.5m)溶液。将树脂振荡16-20小时，然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤。通过对少量裂解溶液的lcms检测偶联成功。

条件b：

在无水ch2cl2(0.5m)中，树脂结合的假肽55-57,63-65用n，n-二异丙基碳二亚胺(dic)(0.54-0.98mmol，5eq.)振荡5分钟激活。向其中加入胺(0.21-0.39mmol，2eq.)的无水ch2cl2(0.5m)溶液。将树脂摇动2小时，然后用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤。通过对少量裂解溶液进行lcms检测确认偶联成功。

通用步骤8

条件c：

通过用30％v/vhfip的ch2cl2(5ml)溶液处理40分钟，在室温下振荡，从固体支持物上裂解假肽51-65。然后用ch2cl2(6×10ml)洗涤树脂，与裂解溶液合并并真空浓缩。随后将粗残余物直接用于溶液相偶联而无需进一步纯化。

在2：1v/vch2cl2：dmf(190-260μl)中，用nmm(46-65mmol，1.3eq.)对edc·hcl(46–65μmol,1.3eq.)室温下振荡15分钟，进行预活化。然后0℃下，将该溶液滴加到粗残余物51-65(36-50μmol，1eq.)，尿嘧啶胺18(0.11-0.15mmol，3eq.)和hoat(0.18-0.25mmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(190-260μl)溶液中。使反应加热至室温并搅拌3-4小时，然后用etoac(44-60ml)稀释，用0.5mhcl水溶液(11-16ml)，饱和nahco3水溶液(11-16ml)，h2o(11-16ml)，盐水(11-16ml)洗涤，并干燥(mgso4)。将有机相真空浓缩，然后再以1：1v/vch2cl2：tfa(5.2-6.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.11-0.16ml)再溶解。将反应搅拌14-17小时，然后真空浓缩。将得到的残余物再溶于1％tfa的h2o(25ml)中，并在n2(g)流下吹出。然后将所得残余物重新溶解于含有20-30％v/vmecn的h2o中，并通过反相hplc纯化。

树脂结合假肽(48)

如通用步骤2所述，将含有ipr2etn(350μl，2mmol，4eq.)的ch2cl2(0.1m，5.5ml)中的氨基酸20(240mg，0.55mmol，1.1eq.)上样到2-氯三苯甲基(2-ctc)树脂(420-560mg，0.50mmol，1eq.)上，alloc脱保护，然后如通用步骤5和6中所述，在dmf(0.1m，11ml)中，用hatu(420mg，1.1mmol，2eq.)和ipr2etn(290μl，1.7mmol，3eq.)与boc-gly-oh(190mg，1.1mmol，2eq.)偶联。随后fmoc脱保护，按照通用步骤3条件a，在dmf(0.1m,12ml)中，用pybop(0.62g，1.2mmol，4eq.)和nmm(0.27ml，2.4mmol，8eq.)与fmoccha-oh(0.47g，1.2mmol，4eq.)偶联。按照通用步骤4，在无水dmf(0.1m，3.5ml)中，用ipr2etn(0.12ml，0.70mmol，4eq.)，粗烯丙基氨基甲酸酯40(0.18g，0.35mmol，2eq.)与fmoc去保护的树脂结合的三肽偶联。按照通用步骤7.1，烯丙基脱保护，得到树脂结合的假肽48。

树脂结合假肽(49)

如通用步骤2所述，将含有ipr2etn(350μl，2mmol，4eq.)的ch2cl2(0.1m，5.5ml)中的氨基酸20(240mg，0.55mmol，1.1eq.)上样到2-氯三苯甲基(2-ctc)树脂(420-560mg，0.50mmol，1eq.)上，alloc脱保护，然后如通用步骤5和6中所述，在dmf(0.1m，11ml)中，用hatu(420mg，1.1mmol，2eq.)和ipr2etn(290μl，1.7mmol，3eq.)与boc-gly-oh(190mg，1.1mmol，2eq.)偶联。随后fmoc脱保护，按照通用步骤3条件a，在dmf(0.1m,12ml)中，用pybop(0.54g，1.1mmol，4eq.)和nmm(0.23ml，2.1mmol，8eq.)与fmoc2-nal-oh(0.46g，1.1mmol，4eq.)偶联。按照通用步骤4，在无水dmf(0.1m，3.5ml)中，用ipr2etn(0.12ml，0.70mmol，4eq.)，粗烯丙基氨基甲酸酯40(0.18g，0.35mmol，2eq.)与fmoc去保护的树脂结合的三肽偶联。按照通用步骤7.1，烯丙基脱保护，得到树脂结合的假肽49。

树脂结合的假肽(50)

如通用步骤2所述，将含有ipr2etn(350μl，2mmol，4eq.)的ch2cl2(0.1m，5.5ml)中的氨基酸20(240mg，0.55mmol，1.1eq.)上样到2-氯三苯甲基(2-ctc)树脂(420-560mg，0.50mmol，1eq.)上，alloc脱保护，然后如通用步骤5和6中所述，在dmf(0.1m，11ml)中，用hatu(420mg，1.1mmol，2eq.)和ipr2etn(290μl，1.7mmol，3eq.)与boc-gly-oh(190mg，1.1mmol，2eq.)偶联。化合物47(0.13g，0.25mmol，1.5eq.)，hatu(95mg，0.25mmol，1.5eq.)，hoat(34mg，0.25mmol，1.5eq.)和ipr2etn(89μl，0.51mmol，3eq.)的无水dmf(0.1m，1.7ml)溶液，加入到fmoc脱保护的树脂结合的同种肽中，并振荡2小时。用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤树脂，然后用10％v/v乙酸酐的吡啶(5ml)封端，振荡3分钟。用dmf(5×5ml)，ch2cl2(5×5ml)和dmf(5×5ml)洗涤。按照通用步骤4，在无水dmf(0.1m，3.5ml)中，用ipr2etn(0.12ml，0.70mmol，4eq.)，粗烯丙基氨基甲酸酯40(0.18g，0.35mmol，2eq.)与fmoc去保护的树脂结合的三肽偶联。然后按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽用dic(150μl，0.96mmol，5eq.)在ch2cl2(1.9ml)中预活化，然后加入苄醇(99μl，0.96mmol，5eq.)和dmap(2.3mg,19μmol,0.1eq.)的ch2cl2(1.9ml)溶液中，得到树脂结合的假肽50。

树脂结合假肽(51)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽48用dic(150μl，0.97mmol，5eq.)在ch2cl2(1.9ml)中预活化，然后加入甲醇(39μl，0.97mmol，5eq.)和dmap(2.4mg，19mol，0.1eq.)的ch2cl2(1.9ml)溶液，得到树脂结合的假肽51。

树脂结合假肽(52)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽48用dic(140μl，0.88mmol，5eq.)在ch2cl2(1.8ml)中预活化，然后加入己醇(110μl，0.88mmol，5μeq.)和dmap(2.14mg，17.5mol，0.1eq.)的ch2cl2(1.74ml)溶液，得到树脂结合的假肽52。

树脂结合假肽(53)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽48用dic(110μl，0.69mmol，5eq.)在ch2cl2(1.4ml)中预活化，然后加入十二烷醇(150，然，0.69mmol，5eq.)和dmap(1.7mg，14μmol，0.1eq.)的ch2cl2(1.4ml)溶液，得到树脂结合的假肽53。

树脂结合假肽(54)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽48用dic(96μl，0.62mmol，5eq.)在ch2cl2(1.2ml)中的预活化，然后加入苯甲醇(64μl，0.62mmol，5eq.)和dmap(1.5mg，12μmol，0.1eq.)的ch2cl2(1.2ml)溶液，得到树脂结合的假肽54。

树脂结合假肽(55)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽48用dic(150μl，0.98mmol，5eq.)在ch2cl2(2ml)中预活化，然后加入己胺(52μl，0.39mmol，2eq.)的ch2cl2(2ml)溶液，得到树脂结合的假肽55。

树脂结合假肽(56)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽48用dic(83μl，0.54mmol，5eq.)在ch2cl2(1.1ml)中预活化，然后加入新戊胺(25μl，0.21mmol，2eq.)的ch2cl2(1.1ml)溶液，得到树脂结合的假肽56。

树脂结合假肽(57)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽48用dic(90μl，0.58mmol，5eq.)在ch2cl2(1.2ml)中预活化，然后加入苄胺(25μl，0.23mmol，2eq.)的ch2cl2(1.2ml)溶液，得到树脂结合的假肽57。

树脂结合假肽(58)

如通用步骤2所述，将含有ipr2etn(350μl，2mmol，4eq.)的ch2cl2(0.1m，5.5ml)中的氨基酸20(240mg，0.55mmol，1.1eq.)上样到2-氯三苯甲基(2-ctc)树脂(420-560mg，0.50mmol，1eq.)上，alloc脱保护，然后如通用步骤5和6中所述，在dmf(0.1m，11ml)中，用hatu(420mg，1.1mmol，2eq.)和ipr2etn(290μl，1.7mmol，3eq.)与bocgly-oh(190mg，1.1mmol，2eq.)偶联。随后随后fmoc脱保护，按照通用步骤3条件a，在dmf(0.1m，11ml)中，用pybop(0.54g，1.1mmol，4eq.)和nmm(0.23ml，2.1mmol，8eq.)与fmoc2-nal-oh(0.46g，1.1mmol，4eq.)偶联。按照通用步骤4，在无水dmf(0.1m，1.6ml)中，用ipr2etn(60μl，0.35mmol，4eq.)，烯丙基氨基甲酸酯42(78mg，0.16mmol，1.9eq.)与fmoc去保护的树脂结合的三肽偶联，得到树脂结合的假肽58。

树脂结合假肽(59)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽49用dic(190μl，1.3mmol，5eq.)在ch2cl2(2.5ml)中预活化，然后加入己醇(160μl，1.3mmol，5eq.)和dmap(3.1mg，25μmol，0.1eq.)的ch2cl2(2.5ml)中，得到树脂结合的假肽59。

树脂结合假肽(60)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽49用dic(200μl，1.3mmol，5eq.)在ch2cl2(2.6ml)中预活化，然后加入十二烷醇(290μl，1.3mmol，5eq.)和dmap(3.2mg，26μmol，0.1eq.)的ch2cl2(2.6ml)中，得到树脂结合的假肽60.

树脂结合假肽(61)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽49用dic(130μl，0.81mmol，5eq.)在ch2cl2(1.6ml)中预活化，然后加入新戊醇(88μl，0.81mmol，5eq.)和dmap(2.0mg，16μmol，0.1eq.)的ch2cl2(1.6ml)中，得到树脂结合的假肽61。

树脂结合假肽(62)

按照通用步骤7.2条件a，将树脂结合的假肽49用dic(160μl，1.1mmol，5eq.)在ch2cl2(2.1ml)中预活化，然后加入苯甲醇(110μl，1.1mmol，5eq.)和dmap(2.6mg，21μmol，0.1eq.)。根据通用步骤7.2条件a，在ch2cl2(2.1ml)中，得到树脂结合的假肽62。

树脂结合假肽(63)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽49用dic(150μl，0.98mmol，5eq.)在ch2cl2(2ml)中预活化，然后加入己胺(52μl，0.39mmol，2eq.)的ch2cl2(2ml)溶液，得到树脂结合的假肽63。

树脂结合假肽(64)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽49用dic(85μl，0.55mmol，5eq.)在ch2cl2(1.1ml)中预活化，然后加入新戊胺(26μl，0.22mmol，2eq.)的ch2cl2(1.1ml)溶液，得到树脂结合的假肽64。

树脂结合假肽(65)

按照通用步骤7.2条件b，将树脂结合的假肽49用dic(130μl，0.8mmol，5eq.)在ch2cl2(1.6ml)中预活化，然后加入苄胺(40μl，0.32mmol，2eq.)的ch2cl2(1.6ml)溶液，得到树脂结合的假肽65。

甲基((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸盐(66)

按照通用步骤8条件c，将假肽51从树脂上裂解。将预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)在2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)的溶液逐滴加入到粗残余物51(32mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到保护的类似物66。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到98：2的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体66(8.0mg，8.8μmol，22％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3279,2926,1680cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.90(s,1h,trp-nh),8.56(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.23(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.17(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.08(t,j＝5.3hz,0.5h,conhch2),8.02(brs,3h,nh3),7.53(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.45-7.43(m,1h,ar-h),7.34-7.33(m,1h,ar-h),7.12-7.11(m,1h,ar-h),7.07-7.04(m,1h,ar-h),6.99-6.96(m,1h,ar-h),6.38(d,j＝8.0hz,1h,nhconh),6.34-6.31(m,1h,nhconh),5.71(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.61-5.58(m,1h,h-5),4.82-4.76(m,0.5h,daba-β-ch),4.58(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.49(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.42-4.36(m,1.5h,1xtrp-α-ch+0.5xh-4’),4.35-4.30(m,1h,h-2’),4.28-4.25(m,0.5h,h-4’),4.16-4.12(m,1h,cha-α-ch),3.94-3.77(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.57(m,0.5h,gly-α-ch2),3.55(s,3h,och3),3.28-3.22(m,1h,h-5’),3.18-3.13(m,1h,h-5’),3.06-3.05(m,2h,trp-β-ch2),2.77(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.21-2.10(m,1h,h-3’),1.69-1.60(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.41-1.28(m,2h,cha-β-ch2),1.23(m,1h,cy),1.15-1.08(m,3.5h,1.5xch3+2xcy),1.02(d,j＝7.1hz,1.5h,ch3),0.87-0.76(m,3h,cy)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.8,173.5,170.4,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.6,158.4,158.1,157.7,157.6,151.2,141.7,141.5,136.7,127.8,124.5,121.6,119.0,118.7,112.0,109.6,102.3,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,55.4,55.0,54.2,53.4,52.2,51.7,51.0,44.4,44.3,36.2,36.0,34.1,33.8,32.8,32.7,29.4,28.3,27.8,26.6,26.5,26.3,15.2,14.4；lrms[m+h]⁺796.7；hrms计算值c38h53n9o10：mh⁺,796.39882。测量值：mh⁺,796.39969。

己基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸盐(67)

按照通用步骤8条件c，将假肽52从树脂上裂解。edc·hcl(8.8mg，46μmol，1.3eq.)和nmm(5.1μl，46μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(180μl)溶液预活化，逐滴加入到粗残余物52(30mg，35μmol，1eq.)，尿苷胺18(24mg，110μmol，3eq.)和hoat(24mg，180μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(180μl)溶液中，得到受保护的类似物67。用1：1v/vch2cl2：tfa(4.4ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.11ml)处理脱保护得到98：2的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体67(9.3mg，9.5μmol，27％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3306,2925,2854,1664,1555cm^-1；(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.56(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.23(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.18(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.08(t,j＝5.3hz,0.5h,conhch2),8.01(brs,3h,nh3),7.53(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.45-7.44(m,1h,ar-h),7.34-7.32(m,1h,ar-h),7.12-7.11(m,1h,ar-h),7.07-7.04(m,1h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.37(d,j＝8.0hz,1h,nhconh),6.35-6.32(m,1h,nhconh),5.70(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.61-5.58(m,1h,h-5),4.82-4.76(m,0.5h,daba-β-ch),4.59(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.49(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.41-4.36(m,1.5h,1xtrp-α-ch+0.5xh-4’),4.35-4.30(m,1h,h-2’),4.28-4.25(m,0.5h,h-4’),4.16-4.12(m,1h,cha-α-ch),3.92-3.77(m,4h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch+2xoch2(ch2)4ch3),3.59-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.28-3.21(m,1h,h-5’),3.18-3.13(m,1h,h-5’),3.04(d,j＝6.4hz,2h,trp-β-ch2),2.77(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.21-2.10(m,1h,h-3’),1.69-1.60(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.44-1.38(m,2h,och2(ch2)4ch3),1.35-1.31(m,2h,cha-β-ch2),1.24-1.08(m,10.5h,3xcy+1.5ch3,6xoch2(ch2)4ch3),1.02(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3),0.87-0.77(m,6h,3xcy+3xoch2(ch2)4ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.5,173.4,170.4,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.8,158.6,158.4,158.1,157.7,157.6,151.2,141.7,141.5,136.7,127.8,124.3,121.5,119.0,118.7,116.6,112.0,109.7,102.3,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,64.8,55.4,55.0,54.3,53.3,51.7,44.4,44.3,36.2,36.0,34.0,33.9,33.8,32.8,32.7,31.4,29.4,28.5,28.4,27.8,26.6,26.5,26.3,25.5,22.5,15.2,14.5,14.4；lrms[m+h]⁺866.8；hrms计算值c43h63n9o10：mh⁺,866.47707。测量值：mh⁺,866.47737。

十二烷基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸盐(68)

按照通用步骤8条件c，将假肽53从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(9.3mg，48μl，1.3eq.)和nmm(5.3μl，48μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(190μl)溶液，逐滴加入到粗残余物53(35mg，37μmol，1eq.)，尿苷胺18(25mg，110μmol，3eq.)和hoat(25mg，190μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(190μl)溶液中，得到受保护的类似物68。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到97：3的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体68(12mg，12μmol，29％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3310,2924,2853,1671,1556cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.30(s,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.57(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.24(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.19(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.09(t,j＝5.1hz,0.5h,conhch2),8.01(brs,3h,nh3),7.53(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.45-7.43(m,1h,ar-h),7.34-7.32(m,1h,ar-h)7.11-7.10(m,1h,ar-h),7.07-7.03(m,1h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.56,(s,1h,oh),6.34-6.31(m,2h,nhconh),5.71(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.3hz,0.5h,h-1’),5.61-5.58(m,1h,h-5),4.82-4.75(m,0.5h,daba-β-ch),4.57(t,j＝9.5hz,0.5h,daba-α-ch),4.49(t,j＝9.1hz,0.5h,daba-α-ch)4.41-4.35(m,1.5h,1xtrp-α-ch+0.5xh-4’),4.32-4.30(m,1h,h-2’),4.28-4.24(m,0.5h,h-4’)4.15-4.12(m,1h,cha-α-ch),3.92-3.77(m,4h,1.5xgly-α-ch2+2xoch2(ch2)10ch3+0.5xdaba-β-ch),3.58-3.53(m,0.5h,gly-α-ch2),3.26-3.22(m,1h,h-5’),3.18-3.12(m,1h,h-5’),3.04(d,j＝6.3hz,2h,trp-β-ch2),2.77(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.21-2.09(m,1h,h-3’),1.68-1.59(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.45-1.38(m,2h,och2(ch2)10ch3),1.36-1.28(m,2h,cha-β-ch2),1.26-1.15(m,17h,1xcy+16xoch2(ch2)10ch3),1.12-1.10(m,5.5h,1.5xch3+2xcy+2xoch2(ch2)10ch3),1.01(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3),0.86-0.78(m,6h,3xoch2(ch2)10ch3+3xcy)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.5,173.4,170.4,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.9,158.6,158.4,158.1,157.7,157.6,151.2,141.7,141.5,136.7,127.8,124.4,121.5,118.9,118.7,116.6,112.0,109.7,102.3,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,64.8,55.4,55.0,54.3,53.3,51.7,51.0,44.4,44.3,36.2,36.0,34.1,33.9,33.8,32.9,32.8,31.9,29.6,29.6,29.6,29.5,29.3,29.2,28.6,28.5,26.6,26.5,26.3,25.8,22.7,15.1,14.6；lrms[m+h]⁺951.0；hrmsc49h75n9o10计算值：mh⁺,950.57097。测量值：mh⁺,950.57081。

苄基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸盐(69)

按照通用步骤8条件c，将假肽54从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物54(35mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物69。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到97：3的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体69(12mg，12μmol，29％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3316,2926,2851,1665,1552cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.90(s,1h,trp-nh),8.55(t,j＝5.2hz,0.5h,conhch2),8.24(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.19(d,j＝8.9hz,0.5h,conh),8.07(t,j＝5.4hz,0.5h,conhch2),8.00(brs,3h,nh3),7.53(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.49-7.44(m,1h,ar-h),7.36-7.34(m,1h,ar-h),7.32-7.30(m,3h,ar-h)7.19-7.17(m,2h,ar-h),7.10-7.09(m,1h,ar-h),7.07-7.05(m,1h,ar-h),6.99-6.95(m,1h,ar-h),6.40-6.36(m,2h,nhconh),5.71(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.61-5.57(m,1h,h-5),5.00(q,j＝12.7hz,2h,och2(c6h5)),4.82-4.75(m,0.5h,daba-β-ch),4.58(t,j＝9.6hz,0.5h,daba-α-ch),4.52-4.43(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch)4.40-4.36(m,0.5h,h-4’),4.33-4.31(m,1h,h-2’),4.29-4.24(m,0.5h,h-4’)4.18-4.13(m,1h,cha-α-ch),3.95-3.76(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.53(m,0.5h,gly-α-ch2),3.29-3.21(m,1h,h-5’),3.19-3.12(m,1h,h-5’),3.08(d,j＝6.4hz,2h,trp-β-ch2),2.77(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.21-2.09(m,1h,h-3’),1.69-1.60(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.39-1.29(m,2h,cha-β-ch2),1.28-1.22(m,1h,cy),1.13-1.07(m,3.5h,2xcy+1.5xch3),1.02(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.87-0.78(m,3h,cy)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.3,173.2,170.3,169.9,166.5,166.2,163.7,163.7,158.5,158.1,157.6,157.5,151.0,141.5,141.3,136.6,136.3,128.8,128.4,128.1,127.6,124.3,121.4,118.9,118.6,111.9,109.5,102.2,101.9,92.5,92.3,79.0,74.5,74.4,66.2,55.2,54.9,54.3,53.2,51.6,44.2,44.2,36.0,35.9,33.9,33.6,32.7,32.6,29.2,28.3,27.7,26.5,26.3,26.1,15.0,14.3；lrms[m+h]⁺872.8；hrms计算值c44h57n9o10：mh⁺,872.43012。测量值：mh⁺,872.43013。

(2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-2-((s)-3-环己基-2-(3-((s)-1-(己基氨基)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-氧代丙-2-基)脲基)丙酰氨基)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)丁酰胺(70)

按照通用步骤8条件c，将假肽55从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物55(34mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物70。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到99：1的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体70(18mg，19μmol，46％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3293,2926,2853,1650,1554cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so)δ,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.79(s,1h,trp-nh),8.56(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.24(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.13-8.09(m,1h,0.5xconh+0.5xconhch2),8.05(brs,3h,nh3),7.75-7.72(m,1h,conhch2(ch2)4ch3),7.55-7.52(m,1.5h,1xh-6+0.5xar-h),7.52-7.50(m,0.5h,ar-h),7.32-7.30(m,1h,ar-h),7.08-7.02(m,2h,ar-h),6.97-6.93(m,1h,ar-h),6.35-6.33(m,1h,nhconh),6.24-6.22(m,1h,nhconh),5.71(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.67(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.62-5.58(m,1h,h-5),4.83-4.76(m,0.5h,daba-β-ch),4.59(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.51(t,j＝9.3hz,0.5h,daba-α-ch),4.41-4.25(m,3h,1xtrp-α-ch+1xh-4’+1xh-2’),4.17-4.11(m,1h,cha-α-ch),3.90-3.77(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.58-3.55(m,0.5h,gly-α-ch2),3.30-3.24(m,1h,h-5’),3.18-3.12(m,1h,h-5’),3.03-2.88(m,4h,2xtrp-β-ch2+2xconhch2(ch2)4ch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.22-2.09(m,1h,h-3’),1.69-1.60(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.44-1.29(m,2h,cha-β-ch2),1.28-1.12(m,12.5h,3xcy+1.5xch3+8xconhch2(ch2)4ch3),1.03(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.89-0.70(m,6h,3xcy+3xconhch2(ch2)4ch3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.4,172.3,170.3,169.9,166.5,166.1,163.7,163.7,158.9,158.6,158.3,157.6,157.6,151.0,141.5,141.4,136.5,128.0,123.9,121.2,119.2,119.0,118.6,116.2,111.6,110.5,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,74.5,74.4,55.2,54.8,54.5,53.2,51.7,51.6,50.9,44.2,44.1,36.0,35.9,33.9,33.7,32.7,32.6,31.4,29.3,29.2,27.7,26.5,26.4,26.3,26.1,22.5,15.0,14.4,14.2；lrms[m+h]⁺865.8；hrmsc43h64n10o9计算值：mh⁺,865.49305。测量值：mh⁺,865.49207。

(2s，3s)-2-((s)-2-(3-((s)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-(新戊)-1-氧代丙-2-基)脲基)-3-环己丙酰胺)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)丁酰胺(71)

按照通用步骤8条件c，将假肽56从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物56(34mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物71。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到98：2的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体71(20mg，21μmol，53％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3305,2925,1654,1551cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.80(s,1h,trp-nh),8.56(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.18(d,j＝9.3hz,0.5h,conh),8.12(d,j＝9.3hz,0.5h,conh),8.09-8.05(m,3.5h,3xnh3+0.5xconhch2),7.65-7.61(m,1h,conhch2c(ch3)3),7.57-7.50(m,2h,1xh-6+1xar-h),7.33-7.30(m,1h,ar-h),7.11-7.10(m,1h,ar-h),7.07-7.03(m,2h,ar-h),6.98-6.94(m,1h,ar-h),6.34-6.27(m,2h,nhconh),5.71(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.67(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.62-5.58(m,1h,h-5),4.82-4.75(m,0.5h,daba-β-ch),4.57(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.49(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.44-4.38(m,1h,trp-α-ch),4.36-4.24(m,2h,1xh-4’+1xh-2’),4.17-4.12(m,1h,cha-α-ch),3.93-3.75(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.53(m,0.5h,gly-α-ch2),3.29-3.22(m,1h,h-5’),3.18-3.11(m,1h,h-5’),3.02(dd,j＝14.6,6.3hz,1h,trp-β-ch2),2.93-2.85(m,2h,1xtrp-β-ch2+1xconhch2c(ch3)3),2.80(dd,j＝13.2,6.3hz,1h,conhch2c(ch3)3),2.75(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.22-2.10(m,1h,h-3’),1.69-1.60(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.43-1.30(m,2h,cha-β-ch2),128-1.25(m,1h,1xcy)1.16-1.10(m,3.5h,2xcy+1.5xch3),1.00(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.92-0.82(m,2h,cy),0.76(s,10h,9xconhch2c(ch3)3+1xcy)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.4,172.8,170.3,169.9,166.5,166.1,163.7,163.7,159.0,158.7,158.4,158.1,157.7,157.6,151.0,141.5,141.4,136.5,127.9,123.9,121.8,121.2,119.0,118.8,118.6,115.8,112.9,111.6,110.6,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,74.5,74.4,55.2,54.9,54.5,53.2,51.6,51.5,50.9,50.1,44.2,44.1,36.0,35.9,33.9,33.7,32.6,32.4,29.2,29.0,27.6,26.5,26.3,26.1,15.0,14.2；lrms[m+h]⁺851.8；hrmsc42h62n10o9计算值：mh⁺,851.47740。测量值：mh⁺,851.7703。

(2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-2-((s)-2-(3-((s)-1-(苄基氨基)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-氧代丙-2-基)脲基)-3-环己丙酰胺)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)丁酰胺(72)

按照通用步骤8条件c，将假肽57从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物57(34mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物72。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到99：1的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体72(13mg，14μmol，34％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3292,2924,1672,1550cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.82(s,1h,trp-nh),8.55(t,j＝5.3hz,0.5h,conhch2),8.34-8.31(m,1h,conhch2(c6h5)),8.19(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.14(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.09-8.03(m,3.5h,3xnh3+0.5conhch2),7.58-7.49(m,2h,1xar-h+1xh-6),7.35-7.30(m,1h,ar-h),7.25-7.17(m,3h,ar-h),7.08-7.03(m,4h,ar-h),6.98-6.94(m,1h,ar-h),6.35-6.33(m,1h,nhconh),6.30-6.27(m,1h,nhconh),5.70(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.61-5.57(m,1h,h-5),4.83-4.75(m,0.5h,daba-β-ch),4.58(t,j＝9.5hz,0.5h,daba-α-ch),4.50(t,j＝9.2hz,0.5h,daba-α-ch),4.44-4.36(m,1h,trp-α-ch),4.32-4.26(m,2h,1xh-4’+1xh-2’),4.24-4.20(m,2h,conhch2(c6h5)),4.17-4.12(m,1h,cha-α-ch),3.88-3.76(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.58-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.29-3.22(m,1h,h-5’),3.17-3.11(m,1h,h-5’),3.04(dd,j＝14.5,6.6hz,1h,trp-β-ch2),2.95(dd,j＝14.3,6.7hz,1h,trp-β-ch2),2.75(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.21-2.19(m,1h,h-3’),1.68-1.58(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.44-1.29(m,2h,cha-β-ch2),128-1.23(m,1h,1xcy)1.16-1.09(m,3.5h,2xcy+1.5xch3),1.02(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.88-0.76(m,3h,cy)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.4,172.7,170.3,169.9,166.5,166.1,163.7,158.6,158.3,157.6,151.0,141.5,141.4,139.7,136.6,128.6,127.9,127.4,127.0,124.1,121.3,119.1,118.7,116.3,111.7,110.4,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,74.5,74.4,55.2,54.6,53.2,51.7,50.9,44.2,44.1,42.5,36.0,35.9,33.9,33.7,32.7,32.6,29.3,27.7,26.5,26.3,26.1,15.0,14.2；lrms[m+h]⁺871.8；hrmsc44h58n10o9计算值：mh⁺,871.44610。测量值：mh⁺,871.44632。

甲基((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代)-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(73)

按照通用步骤8条件c，将假肽58从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(13mg，65μmol，1.3eq.)和nmm(7.3μl，65μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(160μl)溶液，逐滴加入到粗残余物58(42mg，50μmol，1eq.)，尿苷胺18(34mg，0.15mmol，3eq.)和hoat(34mg，0.25mmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(160μl)溶液中，得到受保护的类似物73。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到97：3的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体73(13mg，14μmol，27％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3213,1673,1549,1440cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.61(t,j＝5.1hz,0.5h,conhch2),8.43(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.38(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.13(t,j＝5.1hz,,0.5h,conhch2),8.05(brs,3h,nh3),7.84-7.83(m,1h,ar-h),7.77-7.75(m,2h,ar-h),7.62(m,1h,ar-h),7.55(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.51(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.48-7.42(m,3h,ar-h),7.33-7.30(m,2h,ar-h),7.11-7.04(m,2h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.56-6.54(m,1h,nhconh),6.43-6.39(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.60-5.57(m,1h,h-5),4.81-4.78(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.54-4.48(m,1.5h,1xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.41-4.33(m,2.5h,0.5xh-4’+1xh-2’+1xnal-α-ch),4.28-4.26(m,0.5h,h-4’),3.96-3.78(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.55(m,0.5h,gly-α-ch2),3.52(s,1.5h,och3),3.51(s,1.5h,och3),3.26-3.12(m,2h,h-5’),3.11-3.07(m,1h,trp-β-ch2),3.05-2.98(m,2h,nal-β-ch2),2.93-2.89(m,1h,trp-β-ch2),2.78(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.22-2.12(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.14(d,j＝6.5hz,1.5h,ch3),1.04(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.8,172.1,170.3,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.7,158.5,157.5,151.2,141.8,141.5,136.7,135.8,135.7,133.5,132.4,128.6,128.5,128.3,128.0,128.0,127.9,127.9,127.8,126.4,125.9,124.4,121.5,119.0,118.7,112.0,109.7,102.4,102.0,92.6,92.5,79.2,79.2,74.6,74.5,55.4,55.0,54.9,54.8,54.2,53.6,52.2,51.0,44.5,44.3,38.9,38.7,36.3,36.1,29.4,28.4,27.9,15.2,14.4；lrms[m+h]⁺840.4；hrms计算值c42h49n9o10：mh⁺,840.36752。测量值：mh⁺,840.36862。

己基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(74)

按照通用步骤8条件c，将假肽59从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物59(36mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物74。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到99：1的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体74(12mg，12μmol，30％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3350,2931,1679,1555cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.88(s,1h,trp-nh),8.61(t,j＝5.3hz,0.5h,conhch2),8.44(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.40(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.13(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.05(brs,3h,nh3),7.85-7.83(m,1h,ar-h),7.78-7.75(m,2h,ar-h),7.63(m,1h,ar-h),7.55(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.52(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.49-7.42(m,3h,ar-h),7.34-7.30(m,2h,ar-h),7.11(m,1h,ar-h),7.08-7.04(m,1h,ar-h),6.99-6.95(m,1h,ar-h),6.59-6.56(m,1h,nhconh),6.43-6.39(m,1h,nhconh),5.73(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.70(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.61-5.58(m,1h,h-5),4.84-4.77(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.49(m,1.5h,1xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.41-4.32(m,2.5h,0.5xh-4’+1xh-2’+1xnal-α-ch),4.29-4.25(m,0.5h,h-4’),3.96-3.79(m,4h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch+2xoch2(ch2)4ch3),3.64-3.51(m,0.5h,gly-α-ch2),3.27-3.12(m,2h,h-5’),3.10-3.06(m,1h,trp-β-ch2),3.02-3.00(m,2h,nal-β-ch2),2.97-2.90(m,1h,trp-β-ch2),2.79(s,1.5h,nch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.24-2.12(m,1h,h-3’),1.71-1.62(m,1h,h-3’),1.39-1.37(m,2h,och2(ch2)4ch3),1.24-1.13(m,7.5h,6xoch2(ch2)4ch3+1.5xch3),1.04(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.83(t,j＝6.8hz,3h,ch3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.3,171.9,170.2,169.8,166.5,166.2,163.7,158.6,158.2,157.9,157.4,151.0,141.6,141.4,136.6,135.6,135.5,133.4,132.3,128.4,128.1,127.9,127.8,127.8,127.7,127.6,126.2,125.8,124.2,121.4,118.8,118.5,111.8,109.6,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,74.5,74.3,64.7,55.3,54.9,54.7,54.6,54.1,53.4,50.9,44.3,44.2,38.8,38.6,36.1,35.9,31.3,29.2,28.4,27.7,25.3,22.4,15.0,14.3；lrms[m+h]⁺910.9；hrmsc47h59n9o10计算值：mh⁺,910.44577。测量值：mh⁺,910.44614。

十二烷基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(75)

按照通用步骤8条件c，将假肽60从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物60(39mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物75。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到99：1的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体75(14mg，13μmol，31％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3305,2924,2854,1677,1557cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.86(s,1h,trp-nh),8.60(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.44-8.39(m,1h,conh),8.13(t,j＝5.1hz,0.5h,conhch2),8.01(brs,3h,nh3),7.84-7.82(m,1h,ar-h),7.77-7.74(m,2h,ar-h),7.62(m,1h,ar-h),7.54(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.48-7.42(m,3h,ar-h),7.33-7.29(m,2h,ar-h),7.10(m,1h,ar-h),7.06-7.03(m,1h,ar-h),6.97-6.94(m,1h,ar-h),6.58-6.55(m,1h,nhconh),6.41-6.36(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.64-5.57(m,1h,h-5),4.82-4.77(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.49(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.41-4.33(m,2.5h,0.5xh-4’+1xh-2’+1xnal-α-ch),4.30-4.25(m,0.5h,h-4’),3.95-3.78(m,4h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch+2xoch2(ch2)10ch3),3.59-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.27-3.12(m,2h,h-5’),3.10-3.05(m,1h,trp-β-ch2),3.04-2.97(m,2h,nal-β-ch2),2.94-2.90(m,1h,trp-β-ch2),2.78(s,1.5h,nch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.22-2.12(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.41-1.36(m,2h,och2(ch2)10ch3),1.26-1.12(m,19.5h,18xoch2(ch2)10ch3+1.5xch3),1.03(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.84(t,j＝7.0hz,3h,ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.5,172.0,170.3,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.8,158.5,158.3,157.5,151.2,141.7,141.5,136.7,135.7,135.6,133.5,132.4,128.6,128.5,128.3,128.0,128.0,127.9,127.8,126.4,125.9,124.3,121.5,118.9,118.7,112.0,109.7,102.4,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,64.8,55.4,55.0,54.8,54.7,54.3,53.5,44.5,44.3,39.0,38.8,36.2,36.1,29.6,29.6,29.5,29.4,29.3,29.2,28.5,27.9,25.8,22.7,15.2,14.6；lrms[m+h]⁺995.1；hrmsc53h71n9o10计算值：mh⁺,994.53967。测量值：mh⁺,994.54051。

新戊基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(76)

按照通用步骤8条件c，将假肽61从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物61(35mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物76。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到97：3的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体76(13mg，13μmol，32％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3285,3063,2957,1676,1552cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.86(s,1h,trp-nh),8.59(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.43(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.39(d,j＝9.3hz,0.5h,conh),8.12(t,j＝5.2hz,0.5h,conhch2),8.02(brs,3h,nh3),7.84-7.82(m,1h,ar-h),7.77-7.74(m,2h,ar-h),7.62(m,1h,ar-h),7.54(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.46-7.42(m,3h,ar-h),7.33-7.29(m,2h,ar-h),7.10(m,1h,ar-h),7.07-7.04(m,1h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.57-6.54(m,1h,nhconh),6.43-6.39(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.60-5.57(m,1h,h-5),4.81-4.77(m,0.5h,daba-β-ch),4.60(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.49(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.45-4.41(m,1h,nal-α-ch),4.38-4.31(m,1.5h,0.5xh-4’+1xh-2’),4.29-4.24(m,0.5h,h-4’),3.96-3.77(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.61-3.57(m,2.5h,2xoch2c(ch3)3+0.5xgly-α-ch2),3.26-3.11(m,2h,h-5’),3.09-3.01(m,3h,1xtrp-β-ch2+2xnal-β-ch2),2.94-2.89(m,1h,trp-β-ch2),2.78(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.22-2.12(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.12(d,j＝6.6hz,1.5h,ch3),1.03(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.75(s,4.5h,och2c(ch3)3),0.74(s,4.5h,och2c(ch3)3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.4,172.1,170.3,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.7,158.4,157.5,151.2,141.7,141.5,136.8,135.7,135.6,133.5,132.5,128.5,128.5,128.2,128.0,127.9,127.8,126.4,125.9,124.3,121.5,119.0,118.7,112.0,109.8,102.4,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,73.8,55.4,55.0,54.8,54.7,54.3,53.5,51.0,44.5,44.3,39.0,38.8,36.2,36.1,31.5,29.4,28.6,27.9,26.6,15.2,14.4；lrms[m+h]⁺896.8；hrms计算值c46h57n9o10：mh⁺,896.43012。测量值：mh⁺,896.43189。

苄基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(77)

按照通用步骤8条件c，将假肽62从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物62(36mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物77。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到99：1的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体77(11mg，11μmol，27％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3331,3057,2945,1677,1550cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.61(t,j＝5.0hz,0.5h,conhch2),8.44(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.41(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.13(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.03(brs,3h,nh3),7.83-7.82(m,1h,ar-h),7.75-7.72(m,2h,ar-h),7.60(m,1h,ar-h),7.55(d,j＝8.0hz,0.5h,h-6),7.51(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.47-7.42(m,3h,ar-h),7.35-7.34(m,1h,ar-h),7.30-7.23(m,4h,ar-h),7.16-15(m,2h,ar-h),7.08-7.05(m,2h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.64--6.61(m,1h,nhconh),6.42-6.38(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.3hz,0.5h,h-1’),5.60-5.57(m,1h,h-5),5.02-4.95(m,2h,och2(c6h5)),4.83-4.79(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.3hz,0.5h,daba-α-ch),4.56-4.50(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.48-4.44(m,1h,nal-α-ch),4.39-4.33(m,1.5h,0.5xh-4’+1xh-2’),4.30-4.25(m,0.5h,h-4’),3.96-3.78(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.60-3.55(m,0.5h,gly-α-ch2),3.25-3.11(m,2h,h-5’),3.10-3.01(m,3h,1xtrp-β-ch2+2xnal-β-ch2),2.94-2.90(m,1h,trp-β-ch2),2.78(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.22-2.12(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.13(d,j＝6.4hz,1.5h,ch3),1.03(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.3,172.0,170.3,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.9,158.7,158.4,157.5,151.2,141.7,141.5,136.8,136.4,135.7,135.6,133.5,132.4,129.5,128.9,128.8,128.5,128.3,128.3,128.0,128.0,127.9,127.9,127.8,126.4,125.9,124.5,121.6,119.1,118.7,112.0,109.7,102.4,102.0,92.6,92.5,79.2,74.6,74.5,67.6,66.4,55.4,55.0,54.8,54.7,54.4,53.6,51.0,44.5,44.3,39.0,38.8,36.2,36.1,31.3,29.4,28.5,27.9,25.7,15.2,14.5；lrms[m+h]⁺916.8；hrms计算值c48h53n9o10：mh⁺,916.39882。测量值：mh⁺,916.39964。

(2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-((s)-2-(3-((s)-1-(己基氨基)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-氧代丙-2-基)脲基)-3-(萘-2-基)丙酰氨基)丁酰胺(78)

按照通用步骤8条件c，将假肽63从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物63(36mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物78。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到98：2的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体78(22mg，22μmol，54％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3292,2930,1663,1551cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.78(s,1h,trp-nh),8.59(t,j＝5.2hz,0.5h,conhch2),8.37(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.33(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.10(t,j＝5.2hz,,0.5h,conhch2),8.05(brs,3h,nh3),7.84-7.74(m,3h,ar-h),7.68(t,j＝5.5hz,1h,conhch2(ch2)4ch3),7.63(m,1h,ar-h),7.55-7.51(m,2h,1xh-6+1xar-h),7.49-7.42(m,2h,ar-h),7.33-7.29(m,2h,ar-h),7.06-7.01(m,2h,ar-h),6.96-6.92(m,1h,ar-h),6.42-6.40(m,2h,nhconh),5.72(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.61-5.57(m,1h,h-5),4.82-4.73(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.3hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.41(m,1.5h,1xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.38-4.24(m,3h,1xh-4’+1xh-2’+1xnal-α-ch),3.91-3.77(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.27-3.07(m,3h,2xh-5’+1xconhch2(ch2)4ch3),3.00-2.85(m,5h,2xtrp-β-ch2+2xnal-β-ch2+1xconhch2(ch2)4ch3),2.77(s,1.5h,nch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.22-2.11(m,1h,h-3’),1.70-1.61(m,1h,h-3’),1.24-1.13(m,9.5h,8xconhch2(ch2)4ch3+1.5xch3),1.03(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3),0.81(t,j＝6.9hz,3h,conhch2(ch2)4ch3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ172.3,172.1,170.2,169.8,166.5,166.1,163.7,163.7,159.1,158.8,158.6,158.5,158.1,157.4,151.0,141.6,141.4,136.5,135.8,135.7,135.0,133.4,132.3,128.4,128.1,127.9,127.9,127.8,127.8,126.3,125.8,123.9,121.2,119.0,118.7,118.5,115.7,113.9,111.6,110.5,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,79.0,74.5,74.3,63.0,55.5,55.3,54.9,54.8,54.5,53.4,50.9,44.3,44.1,38.9,38.7,36.1,35.9,31.4,29.3,29.2,27.7,26.4,22.4,15.0,14.4,14.2；lrms[m+h]⁺909.9；hrms计算值c47h60n10o9：mh⁺,909.47175。测量值：mh⁺,909.46152。

(2s，3s)-2-((s)-2-(3-((s)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-(新戊)-1-氧代丙-2-基)脲基)-3-(萘-2-基)丙酰氨基)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)丁酰胺(79)

按照通用步骤8条件c，将假肽64从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液逐滴加入到粗残余物64(35mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物79。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到98：2的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体79(13mg，13μmol，32％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3292,2935,1672,1556cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.31(s,1h,尿嘧啶-nh),10.79(s,1h,trp-nh),8.60(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.40(d,j＝8.9hz,0.5h,conh),8.34(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.13(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.03(brs,3h,nh3),7.85-7.83(m,1h,ar-h),7.79-7.74(m,2h,ar-h),7.64-7.61(m,2h,1xar-h+1xconhch2c(ch3)3),7.57-7.54(m,1.5h,0.5xh-6+1xar-h),7.51(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.49-7.42(m,2h,ar-h),7.33-7.30(m,2h,ar-h),7.10-7.09(m,1h,ar-h),7.06-7.02(m,1h,ar-h),6.97-6.94(m,1h,ar-h),6.47--6.44(m,1h,nhconh),6.40-6.37(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.62-5.58(m,1h,h-5),4.84-4.76(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.48(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.43-4.38(m,1h,nal-α-ch),4.37-4.31(m,1.5h,0.5xh-4’+1xh-2’),4.29-4.24(m,0.5h,h-4’),3.92-3.77(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.59-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.28-3.14(m,2h,h-5’),3.11-3.06(m,1h,trp-β-ch2),3.03-2.98(m,1h,nal-β-ch2),2.94-2.85(m,2h,1xtrp-β-ch2+1xnal-β-ch2),2.83-2.78(m,2h,conhch2c(ch3)3),2.77(s,1.5h,nch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.23-2.11(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.13(d,j＝6.5hz,1.5h,ch3),1.02(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.72(s,4.5h,conhch2c(ch3)3),0.71(s,4.5h,conhch2c(ch3)3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ172.8,172.0,170.2,169.8,166.5,166.1,163.7,159.0,158.7,158.3,158.0,157.5,151.0,141.6,141.4,136.5,135.7,135.6,133.4,132.3,128.4,128.1,127.9,127.8,127.8,127.7,126.2,125.8,123.9,121.2,119.0,118.7,118.6,115.7,111.6,110.6,102.2,101.9,92.4,92.3,79.0,79.0,74.5,74.3,55.3,54.8,54.7,54.4,53.4,50.9,50.1,44.3,44.1,38.8,38.5,36.1,35.9,32.3,29.2,29.1,27.7,27.6,15.0,14.2；lrms[m+h]⁺895.8；hrmsc46h58n10o9计算值：mh⁺,895.44610。测量值：mh⁺,895.44543。

(2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-2-((s)-2-(3-((s)-1-(苄基氨基)-3-(1h-吲哚-3-基)-1-氧代丙-2-基)脲基)-3-(萘-2-基)丙酰胺基)-n-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)丁酰胺(80)

按照通用步骤8条件c，将假肽65从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物65(36mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物80。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到97：3的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体80(12mg，12μmol，29％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3293,3041,2937,1655,1549cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.81(s,1h,trp-nh),8.59(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.38-8.28(m,2h,1xconh+1xconhch2(c6h5)),8.10(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.03(brs,3h,nh3),7.84-7.82(m,1h,ar-h),7.77-7.73(m,2h,ar-h),7.62(m,1h,ar-h),7.58-7.56(m,1h,ar-h),7.54(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.50(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.47-7.42(m,2h,ar-h),7.34-7.30(m,2h,ar-h),7.22-7.14(m,3h,ar-h),7.07-7.03(m,4h,ar-h),6.97-6.93(m,1h,ar-h),6.48-6.45(m,1h,nhconh),6.40-6.37(m,1h,nhconh),5.71(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.61-5.57(m,1h,h-5),4.84-4.76(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.3hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.46(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.44-4.38(m,1h,nal-α-ch),4.37-4.30(m,1.5h,0.5xh-4’+1xh-2’),4.28-4.24(m,0.5h,h-4’),4.21-4.14(m,2h,conhch2(c6h5)),3.95-3.76(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.57-3.54(m,0.5h,gly-α-ch2),3.26-3.14(m,2h,h-5’),3.12-3.07(m,1h,trp-β-ch2),3.06-3.01(m,1h,nal-β-ch2),2.95-2.90(m,2h,1xtrp-β-ch2+1xnal-β-ch2),2.77(s,1.5h,nch3),2.75(s,1.5h,nch3),2.23-2.11(m,1h,h-3’),1.69-1.61(m,1h,h-3’),1.13(d,j＝6.5hz,1.5h,ch3),1.03(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ172.7,172.0,170.2,166.1,163.7,163.7,158.5,158.2,157.9,157.5,151.0,141.6,139.7,136.5,135.7,133.4,132.3,128.6,128.1,127.9,127.8,127.4,127.0,126.3,125.8,124.1,121.3,119.1,118.6,111.7,110.4,102.2,101.9,92.5,92.3,79.0,74.5,74.3,55.3,54.9,54.9,54.6,53.4,50.9,44.3,44.1,42.4,38.7,38.5,36.1,35.9,29.2,27.7,15.0,14.2；lrms[m+h]⁺915.8；hrmsc48h54n10o9计算值：mh⁺,915.41480。测量值：mh⁺,915.41373。

苄基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代)-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-(6,7-二甲氧基-2-氧代-2h-色烯-4-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸酯(81)

按照通用步骤8条件c，将假肽50从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物50(39mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物81。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到95：5的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体81(9.2mg，8.3μmol，21％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3332,2929,1676,1556cm^-1；¹hnmr(500mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.88(s,1h,trp-nh),8.57(t,j＝5.7hz,0.5h,conhch2),8.42-8.38(m,2h,conh),8.12(t,j＝5.8hz,0.5h,conhch2),7.99-7.97(m,3h,nh3),7.53(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.49(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.45-7.42(m,2h,ar-h),7.35-7.34(m,1h,ar-h),7.26-7.24(m,3h,ar-h),7.16-7.13(m,2h,ar-h),7.08-7.05(m,2h,ar-h),7.01(m,1h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.70-6.65(m,2h,nhconh),5.95(s,0.5h,h-3”),5.94(s,0.5h,h-3”),5.69(d,j＝3.6hz,0.5h,h-1’),5.65(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.61-5.57(m,1h,h-5),4.99-4.98(m,2h,och2(c6h5)),4.70-4.67(m,0.5h,daba-β-ch),4.56-4.47(m,3h,1xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch+1xh-10”),4.37-4.28(m,1.5h,0.5xh-4’+1xh-2’),4.22-4.17(m,0.5h,h-4’),3.84-3.73(m,8.5h,2xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch+6xoch3),3.33-3.21(m,1h,h-5’),3.13-2.99(m,4h,2xtrp-β-ch2+1xh-5’+1xh-9”),2.94-2.86(m,1h,h-9”),2.74(s,1.5h,nch3),2.72(s,1.5h,nch3),2.22-2.17(m,0.5h,h-3’),2.15-2.10(m,0.5h,h-3’),1.67-1.59(m,1h,h-3’),1.08(d,j＝6.5hz,1.5h,ch3),0.98(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3)；¹³cnmr(125mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.1,171.0,170.8,170.0,169.6,166.6,166.6,162.2,164.0,163.9,160.9,160.8,158.8,158.6,157.6,153.0,152.6,151.2,149.6,146.5,141.7,136.8,136.3,128.9,128.6,128.3,128.3,127.8,124.4,121.6,119.1,118.7,112.7,112.1,111.9,109.5,106.9,102.4,102.0,100.7,92.5,79.3,79.2,74.7,74.5,66.5,56.7,56.5,55.4,54.9,54.5,53.5,44.3,36.2,35.9,31.3,28.5,27.9,15.1,14.4；lrms[m+h]⁺994.9；hrms计算值c49h55n9o14：mh⁺,994.39412。测量值：mh⁺,994.39394。

树脂结合假肽(82)

按照通用步骤7.2条件a，树脂结合的假肽48用dic(150μl，0.94mmol，5eq.)在ch2cl2(1.9ml)中预活化，然后加入新戊醇(83μl，0.94mmol，5eq.)和dmap(2.3mg，19mol，0.1eq.)的ch2cl2(1.9ml)溶液，得到树脂结合的假肽82。

新戊基(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-(((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代)-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙-2-基氨基甲酰基)-l-色氨酸盐(83)

按照通用步骤8条件c，将假肽82从树脂上裂解。预活化的edc·hcl(10mg，52μmol，1.3eq.)和nmm(5.7μl，52μmol，1.3eq.)的2：1v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液，逐滴加入到粗残余物82(34mg，40μmol，1eq.)，尿苷胺18(27mg，120μmol，3eq.)和hoat(27mg，200μmol，5eq.)的1：2v/vch2cl2：dmf(210μl)溶液中，得到受保护的类似物83。用1：1v/vch2cl2：tfa(5.2ml)和2.5vol.％ipr3sih(0.13ml)处理脱保护得到96：4的可分离的非对映异构体混合物。通过反相hplc纯化，得到白色蓬松固体83(15mg，16μmol，39％，hplc纯化后以tfa盐计算的产率)。

ir(atr):3293,2953,2852,1668,1557cm^-1；¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(s,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.54(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.22(d,j＝8.9hz,0.5h,conh),8.17(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.03(brs,3.5h,0.5xconhch2+3xnh3),7.54-7.50(m,1h,h-6),7.46-7.44(m,1h,ar-h),7.34-7.32(m,1h,ar-h),7.12-7.11(m,1h,ar-h),7.07-7.04(m,1h,ar-h),6.99-6.96(m,1h,ar-h),6.38(d,j＝7.9hz,1h,nhconh),6.35-6.31(m,1h,nhconh),5.70(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.61-5.58(m,1h,h-5),4.82-4.75(m,0.5h,daba-β-ch),4.56(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.45-4.41(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.39-4.24(m,2h,1xh-4’+1xh-2’),4.14-4.10(m,1h,cha-α-ch),3.94-3.76(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.66-3.54(m,2.5h,0.5xgly-α-ch2+2xoch2c(ch3)3),3.29-3.21(m,1h,h-5’),3.18-3.11(m,1h,h-5’),3.09-3.01(m,2h,trp-β-ch2),2.76(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.21-2.11(m,1h,h-3’),1.68-1.59(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.37-1.28(m,2h,cha-β-ch2),1.26-1.23(m,1h,cy),1.14-1.10(m,3.5h,1.5xch3+2xcy),1.01(d,j＝6.8hz,1.5h,ch3),0.87-0.80(m,12h,3xcy+9xoch2c(ch3)3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ173.4,173.3,170.3,169.9,166.5,166.2,163.7,163.7,158.9,158.6,158.3,158.0,157.6,157.6,151.0,141.6,141.4,136.6,127.6,124.2,121.4,118.8,118.5,111.9,109.6,102.2,101.9,92.5,92.3,79.1,74.5,74.4,73.7,55.2,54.9,54.2,53.2,51.5,50.8,44.2,44.1,36.0,35.9,33.8,33.7,33.7,32.7,32.6,31.4,29.2,28.4,27.7,26.5,26.3,26.1,15.0,14.3；lrms[m+h]⁺852.8；hrms计算值c42h61n9o10：mh⁺,852.46142。实测值：mh⁺,852.46191。

通用步骤8

条件d：

将树脂结合的肽用95：2.5：2.5v/v/vtfa：h2o：tis震荡处理1小时。随后用tfa：h2o：tis(×10)洗涤树脂，与裂解溶液合并并浓缩。通过反相hplc纯化所得粗残余物。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-环己基-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(99)

按照通用步骤2条件b，使用pybop(110mg，0.21mmol，4eq.)和nmm(23μl,0.21mmol,4eq.)将连接子88(50mg，0.21mmol，4eq.)连接到rink酰胺树脂(112mg，0.053mmol，1eq.)上，然后在1,2-二氯乙烷(0.60ml)中，将ppts(15mg，0.058mmol，1.1eq.)负载至87(60mg，0.13mmol，2.5eq.)。fmoc去保护后，按照步骤6条件a，在dmf(0.40ml)中，使用hatu(15mg，0.040mmol，2eq.)和ipr2etn(11μl，0.060mmol，3eq.)与20(18mg，0.040mmol，2eq.)偶联。然后按照通用步骤5，在含有phsih3(49μl,0.40mmol,20eq.)的ch2cl2(0.50ml)中，树脂用pd(pph3)4(4.6mg，4.0μmol，0.2eq.)处理，接着按照通用步骤6条件a，在dmf(0.4ml)中，使用hatu(15mg，0.040mmol，2eq.)和ipr2etn与(11μl,0.060mmol,8eq.)与boc-gly-oh(7.0mg，0.040mmol，2eq.)偶联。将树脂进行fmoc脱保护，按照通用步骤6条件b，在dmf(0.8ml)中，使用pybop(42mg，0.08mmol，4eq.)和nmm(18μl，0.16mmol，8eq.)与fmoc-cha-oh(32mg，0.080mmol，4eq.)偶联。fmoc脱保护后，根据通用步骤4，在dmf(0.40ml)中，使用ipr2etn(14μl，0.080mmol，4eq.)实现氨基甲酸酯s12(21mg，0.040mmol，2eq.)的偶联。然后按照通用步骤8条件e中所述，将树脂结合的肽从树脂上裂解，得到粗制残余物，将其通过反相hplc纯化，得到蓬松的白色固体99(8.8mg，11μmol，53％，在hplc纯化后以fa盐计算产率)。

¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.29(brs,1h,尿嘧啶-nh),10.89(s,1h,trp-nh),8.57(t,j＝5.5hz,0.5h,conhch2),8.21(d,j＝9.0hz,0.5h,conh),8.15(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.08(t,j＝5.4hz,0.5h,conhch2),7.54(d,j＝8.1hz,1h,h-6),7.52-7.50(m,1h,ar-h),7.34-7.32(m,1h,ar-h),7.12-7.11(m,1h,ar-h),7.07-7.03(m,1h,ar-h),6.98-6.94(m,1h,ar-h),6.38(d,j＝7.9hz,1h,nhconh),6.24-6.21(m,1h,nhconh),5.70(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.66(d,j＝3.4hz,0.5h,h-1’),5.61(d,j＝8.0hz,0.5h,h-5),5.58(d,j＝8.0hz,0.5h,h-5),4.82-4.74(m,0.5h,daba-β-ch),4.57(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.49(t,j＝9.3hz,0.5h,daba-α-ch),4.40-4.24(m,3h,1xtrp-α-ch+1xh-2’+1xh-4’),4.17-4.11(m,1h,cha-α-ch),3.92-3.84(m,1.5h,1xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.76(d,j＝16.4hz,0.5h,gly-α-ch2),3.55(d,j＝16.0hz,0.5h,gly-α-ch2),3.26-3.25(m,1h,h-5’),3.18-3.00(m,3h,1xh-5’+2xtrp-β-ch2),2.75(s,1.5h,nch3),2.74(s,1.5h,nch3),2.22-2.10(m,1h,h-3’),1.69-1.59(m,6h,1xh-3’+5xcy),1.41-1.27(m,3h,1xcy+2xcha-β-ch2),1.16-1.01(m,3.5h,2xcy+1.5ch3),1.02(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3),0.88-0.76(m,3h,3xcy)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ174.1,172.9,169.8,169.4,166.0,165.7,163.3,163.2,157.7,157.2,157.1,150.5,141.1,141.0,136.0,127.4,127.3,123.8,120.8,118.4,118.3,111.3,109.4,101.7,101.4,91.9,91.8,78.6,74.0,73.9,54.8,54.4,53.4,52.8,51.1,50.4,43.8,43.6,41.4,35.6,35.4,33.4,33.2,32.1,28.7,27.2,26.0,25.8,25.7,22.9,14.5,13.8；lrms[m+h]⁺782.0.。这些数据与tran等人^[4]报道的数据一致。

(((s)-1-(((2s，3s)-3-(2-氨基-n-甲基乙酰氨基)-1-((((2r，4r，5r)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2h)-基)-4-羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-3-(萘-2-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酰基)-l-色氨酸(100)

按照通用步骤2条件b，使用pybop(32mg，0.062mmol，4eq.)和nmm(7μl,0.062mmol,4eq.)将连接子88(15mg,0.062mmol,4eq.)连接到rink酰胺树脂(30mg，0.016mmol，1eq.)上，然后在1,2-二氯乙烷(0.12ml)中，将ppts(3mg，0.012mmol，1.1eq.)负载至87(17mg,0.038mmol,2.5eq.)。fmoc去保护后，按照步骤6条件a，在dmf(0.20ml)中，使用hatu(8mg,0.021mmol,2eq.)和ipr2etn(5.5μl,0.032mmol,3eq.)与20(9.2mg,0.021mmol,2eq.)偶联。然后按照通用步骤5，在含有phsih3(26μl,0.21mmol,20eq.)的ch2cl2(0.26ml)中，树脂用pd(pph3)4(2.4mg,2.1μmol,0.2eq.)处理，接着按照通用步骤6条件a，在dmf(0.20ml)中，使用hatu(8mg,0.021mmol,2eq.)和ipr2etn(5.5μl,0.032mmol,3eq.)与boc-gly-oh(3.7mg,0.021mmol,2eq.)偶联。按照通用步骤6条件b，将树脂进行fmoc脱保护，在dmf(0.40ml)中，使用pybop(22mg,0.042mmol,4eq.)和nmm(9μl,0.084mmol,8eq..)与fmoc-cha-oh(19mg,0.042mmol,4eq.)偶联。fmoc脱保护后，根据通用步骤4，在dmf(0.20ml)中，使用ipr2etn(7μl,0.042mmol,4eq.)实现氨基甲酸酯s12(11mg,0.021mmol,2eq.)的偶联。然后按照通用步骤8条件e中所述，将树脂结合的肽从树脂上裂解，得到粗制残余物，将其通过反相hplc纯化，得到蓬松的白色固体100(5.8mg，6.2ol蓬松，59％，在hplc纯化后以tfa盐计算产率)。

¹hnmr(400mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ11.30(s,1h,尿嘧啶-nh),10.86(s,1h,trp-nh),8.60(t,j＝5.6hz,0.5h,conhch2),8.41(d,j＝9.1hz,0.5h,conh),8.37(d,j＝9.2hz,0.5h,conh),8.12(t,j＝5.4hz,0.5h,conhch2),8.04(brs,3h,nh3),7.84-7.82(m,1h,ar-h),7.79-7.74(m,2h,ar-h),7.64(m,1h,ar-h),7.55(d,j＝8.1hz,0.5h,h-6),7.52-7.50(m,1.5h,1xar-h+0.5hxh-6),7.47-7.42(m,2h,ar-h),7.33-7.30(m,2h,ar-h),7.11(m,1h,ar-h),7.06-7.03(m,1h,ar-h),6.98-6.95(m,1h,ar-h),6.47-6.44(m,1h,nhconh),6.42-6.38(m,1h,nhconh),5.72(d,j＝3.7hz,0.5h,h-1’),5.69(d,j＝3.5hz,0.5h,h-1’),5.60-5.57(m,1h,h-5),4.82-4.77(m,0.5h,daba-β-ch),4.61(t,j＝9.4hz,0.5h,daba-α-ch),4.55-4.48(m,1.5h,0.5xdaba-α-ch+1xtrp-α-ch),4.39-4.33(m,2.5h,0.5xh-4’+1xh-2’+1xnal-α-ch),4.30-4.25(m,0.5h,h-4’),3.96-3.78(m,2h,1.5xgly-α-ch2+0.5xdaba-β-ch),3.58-3.55(m,0.5h,gly-α-ch2),3.26-3.12(m,2h,h-5’),3.15-3.06(m,2h,1xtrp-β-ch2+1xnal-β-ch2),2.99(dd,j＝14.7,6.9hz,1h,nal-β-ch2),2.94-2.90(m,1h,trp-β-ch2),2.78(s,1.5h,nch3),2.76(s,1.5h,nch3),2.22-2.12(m,1h,h-3’),1.70-1.62(m,1h,h-3’),1.14(d,j＝6.5hz,1.5h,ch3),1.04(d,j＝6.9hz,1.5h,ch3)；¹³cnmr(100mhz,(cd3)2so,ca.旋转异构体的1:1混合物)δ174.8,172.1,170.3,170.0,166.7,166.3,163.9,163.8,158.9,158.7,158.4,158.2,157.6,151.2,141.8,141.5,136.7,135.8,135.7,133.6,132.4,128.6,128.5,128.3,128.1,128.0,127.9,127.8,126.4,125.9,124.4,124.3,121.4,119.1,119.0,116.7,111.9,110.1,102.4,102.0,92.6,92.5,79.2,79.1,74.6,74.5,55.4,55.0,54.9,54.8,54.0,53.9,53.6,51.1,44.5,44.3,38.8,38.6,36.3,36.1,29.4,28.4,27.9,15.2,14.4；lrms[m+h]⁺940.0.。这些数据与tran等人报道的数据一致。^[4]

评估/药理学测试结果

全细胞抑制试验mtb

材料和方法

mtbh37rv(atcc27294)和mtbh37ra(atcc25177)菌株在补充有oadc(difco实验室，底特律，mi，usa)，0.05％甘油和0.05％吐温-80的米德尔布鲁克(middlebrook)7h9液体培养基中生长。新接种的培养物在37℃下生长约14天，至指数中期(od6000.4-0.8)，用于抑制试验。

这些类似物对mtbh37rv生长的影响通过先前由taneja和tyagi描述的步骤²使用刃天青还原微孔板测定法测量。在7h9s培养基(米德尔布鲁克7h9含10％adc，0.05％甘油，0.05％吐温80,1％胰蛋白胨)中，生长至指数中期(od6000.4-0.8)的mtb被稀释到od6000.002；96孔微量滴定板备有100滴定抑制剂，连续稀释到7h9s中。向每个孔中加入稀释的mtb(100μl，代表～2×10⁴cfuml^-1)。将板在37℃下，潮湿的培养箱中，孵育5天，然后向每个孔中加入0.02％刃天青溶液(30μl)和20％吐温-80(12.5μl)。24小时后，在bmglabtechpolarstaromega仪器上测量样品荧光，激发波长为530nm，发射波长为590nm。我们绘制了相对于阳性对照孔(没有抑制剂的mtbh37rv)减去阴性对照孔(无mtbh37rv)的荧光变化图，以测定mic50值。

这些测定的结果如图1至21，和下表1所示。

表1

细胞内杀伤试验

材料

利福平购自sigma-aldrich(r3501)。将所有阳性对照溶解于100％二甲基亚砜(dmso)(0231-500ml；amresco)中，并用含有10％adc(bsal；moregatebiotech),0.05％甘油(ga010-p；chem-supply)和0.05％吐温80(p6224-500ml；sigma-aldrich)的7h9液体培养基(27131；difcobectondickinson)稀释。

使用mtb感染的巨噬细胞培养物进行易感性测试

mtbh37ra株(atcc25177)用于感染人巨噬细胞样细胞系(thp-1；atcctib-202)。简而言之，在补充有10％fbs(fbs-500；scientifix-life)和0.05mmβ-巯基乙醇(m7522；sigma-aldrich)的rpmi-1640培养基(含有酚红，25mmhepes和2mml-谷氨酰胺；gibco)中，使thp-1原种维持在1×10⁵和1×10⁶细胞/ml之间的培养密度。将thp-1细胞以1×10⁵细胞/孔的密度接种于96孔组织培养板(costar3903；康宁(corning))中，加入佛波醇肉豆蔻酸乙酯(pma；sigma-aldrich，100nm)。使thp-1细胞在37℃，5％co2下分化48小时。

将超声处理的mtbh37ra在rpmi-1640细胞培养基中的细胞悬浮液用于感染分化的thp-1细胞，在37℃，5％co2下感染4小时，感染复数(moi)为5。然后从所有孔中除去上清液，用200μl磷酸盐缓冲盐水(pbs)(98-317-lb；cellgro)洗涤thp-1细胞三次，随后用新鲜的rpmi-1640细胞培养基，在37℃和5％co2下，再培养24小时。

将类似物在新鲜的rpmi-1640细胞培养基中稀释，并加入相应的孔中。在37℃，5％co2培养72小时后，从孔中除去含有试验化合物的组织培养基。用200μlpbs洗涤细胞，然后用含有0.1％tritonx的无菌水(t7253；sigma-aldrich)裂解。将细胞裂解物以1:10连续稀释，并在1/10000稀释的米德尔布鲁克7h11/oadc(283010；difco)琼脂上铺板。然后将琼脂平板在37℃培养3-4周，之后计数细菌菌落并测定cfu/ml细胞裂解物。

类似物25,36和37的细胞内抗分枝杆菌活性如图22-24所示。

一组革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌菌株的生长抑制筛选

选择性计数筛选：

筛选的生物包括：枯草芽孢杆菌168，金黄色酿脓葡萄球菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)，表皮葡萄球菌，伊氏利斯特菌，屎肠球菌，大肠杆菌，霍乱弧菌，鼠伤寒沙门氏菌，铜绿假单胞菌，假结核耶尔森氏菌，产碱普罗威登斯菌，人苍白杆菌，产气肠杆菌，鲍曼不动杆菌。

材料和方法

使用wong等人³的先前报道的方法评估了类似物对15种临床相关革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌菌株的作用。具体来说，筛选小组由六个革兰氏阳性菌株组成(bsl1：枯草芽孢杆菌168，表皮葡萄球菌[atcc14990]，屎肠球菌[atcc6569]，伊氏利斯特菌[baa-139]；bsl2：金黄色葡萄球菌[atcc29213]，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)[baa-44]和9种革兰氏阴性菌株(bsl1：大肠杆菌k12[bw25113]，鲍曼不动杆菌[ncimb12457]，产气肠杆菌[atcc35029]，人苍白杆菌[atcc49687]，产碱普罗威登斯菌[atcc9886]；bsl2：假结核耶尔森氏菌[ip2666pibi]，铜绿假单胞菌[atcc27835]，鼠伤寒沙门氏菌lt2，霍乱弧菌o1[生物型eltora1552]。

所有葡萄球菌菌株，伊氏利斯特菌和屎肠球菌在10ml胰蛋白酶大豆液体培养基(在1l蒸馏水中，17g胰蛋白胨，3g大豆胨，2.5g右旋糖，5gnacl和2.5g磷酸氢二钾；ph7.5)中培养。产碱普罗威登斯菌，人苍白杆菌，产气肠杆菌和鲍曼不动杆菌在营养液体培养基(difco，usa)中生长，而枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，霍乱弧菌，鼠伤寒沙门氏菌，铜绿假单胞菌和假结核耶尔森氏菌在luria培养基(在1l蒸馏水中，10g胰蛋白胨，5g酵母提取物和10gnacl；ph7.5)中生长。将所有三种培养基在121℃下高压灭菌30分钟。将接种的培养物在摇床(200rpm；30℃)中培养过夜。

将致病菌株的过夜饱和细胞培养物用新鲜培养基稀释为1：1000，在无菌透明384孔板的每个孔中分配30μl培养物。使用perkinelmerjanusmdt机器人将300nldmso预分馏储备溶液固定于筛板中。接种后，将筛板堆叠在读板器/振荡器(perkinelmerenvision)中，每小时一次读取od600读数，持续24小时。通过将细菌指数前期的od600读数与各孔中的浓度相关联，使用连续稀释的纯化合物(最终筛选浓度为100μm)的计算机生成的生长曲线来确定mic值。

类似物针对一组革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的活性

表2.类似物4-17对一组革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的活性的初步数据。

表3.类似物对一组革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的活性的初步数据。

murx酶抑制

材料

udp-n-乙酰基-d-葡糖胺[葡糖胺-¹⁴c(u)]([¹⁴c]udp-glcnac，比活度为300mci/mmol)获自americanradio花型，udp-murnac-五肽购自bacwan，英国考文垂华威大学(www.warwick.ac.uk/bacwan)。按照9.4.3节所述，由udp-murnac-五肽是由丹参素标记的udp-murnac-五肽合成。tlc硅胶60f254板购自merck(德国)。使用的所有其他化学品至少是分析纯，并且购自sigma-aldrich。mtbmc²6230是纽约爱因斯坦医学院williamjacobs博士惠赠。

方法：从mtbmc²6230制备膜

mtbmc²6230在7h9培养基中生长(补充有0.5％(v/v)油酸，0.5％(w/v)白蛋白，0.2％(w/v)葡萄糖，24μg/mld-泛酸盐和0.2％酪蛋白氨基酸)。2ml/g细胞，将洗过的细胞重悬浮于缓冲液a(50mmmopsph7.9，5mmmgcl2，5mmdtt，10％甘油(v/v))中，并通过用soniprep150探针超声处理破碎(10个循环，60秒开，90秒关)。将全细胞裂解物在4℃下，以5,000×g离心20分钟。将上清液在optimatlx超速离心机(beckman)中以100,000×g(在4℃下1小时)进一步离心。膜富集的沉淀物在缓冲液a中洗涤，然后以100,000×g超速离心。将洗涤的沉淀重悬于缓冲液a中，分成等分试样并在-80℃冷冻。使用bca蛋白质测定试剂盒(pierce)估算富含膜的级分的蛋白质浓度。

丹磺酰化udp-murnac五肽的制备

通过体外细胞质合成途径的化学酶学再现实现udp-murnac-五肽的合成和纯化⁴。将在无菌水中脱盐的udp-murnac-五肽与等体积的丙酮混合，并在搅拌下，与42倍摩尔比的丹磺酰氯反应过夜。在旋转蒸发之前，将反应用10倍摩尔过量的tris.clph9淬灭丹磺酰氯以除去溶剂。将干燥的产物重悬于1ml无菌水中，并用1.5cv0.1m碳酸氢铵预平衡的superdex肽10/300柱(gehealthcare)上通过尺寸排阻色谱法纯化。丹磺酰化udp-murnac-五肽是该过程中洗脱的第一个峰，在340nm和280nm处具有特征吸光度。将含有所需产物的级分冷冻干燥4次，并重悬于少量无菌水中。分别通过吸光度和质谱确认定量和纯度。

放射化学murx抑制测定

测定混合物(200μl)含有50mmmopsph7.9,5mmmgcl2,5mmdtt，10％甘油(v/v)，0.1％chaps，100μmatp，25μmudp-murnac-五肽，0.5μm[¹⁴c]]udp-glcnac和不同浓度的抑制剂(初始筛选在200nm的单一浓度下进行，并且在一系列浓度下筛选最有效的化合物以确定ic50值)。通过加入400-500μgmtbmc²6230膜蛋白引发反应，并在37℃下培养1小时。加入6ml氯仿/meoh(2：1)终止反应，然后低速离心，将有机萃取液移至第二管中。将提取物反洗两次[一次用水(800μl)，然后用氯仿/meoh/水(3:47:48)]，在氮气流下蒸发至干，并溶于氯仿/meoh(2：1v/v)。将一份等分试样进行液体闪烁计数(ls6500，beckmancoulter)；将第二份等分试样进行在氯仿/meoh/水/氢氧化铵(88：48：10：1)中薄层色谱(硅胶60f254)显影。通过磷光成像(typhoontrio，amershambiosciences)检测放射性的分布，并用imagequanttlv2005软件(amershambiosciences)定量。使用grafit软件(版本5.0.13)计算ic50值。

类似物在200nm下对murx的抑制活性

表4.类似物7-11对murx的抑制

表5.类似物21-28和30-37对murx的抑制

参见图25-28。

基于荧光的murx抑制测定：类似物25,36和37对murx活性的抑制

连续荧光murx测定，如前所述⁵(稍作修改)，通常为100μl体积，在体外25℃下，在含有83mmtrisph7.5,21mmmgcl2，6％甘油，0.1％tritonx-100,15μm丹磺酰化udp-murnac-五肽，40μg/ml聚异戊二烯基磷酸酯和不同浓度的抑制剂组成的测定缓冲液中进行。通过添加60-70μgmtbmc²6230膜蛋白启动反应，并分别检测340和530nm激发波长和发射波长。一式两份进行测定，并使用grafit软件(版本5.0.13)计算ic50值。

参见图29至33。

初步体外dmpk研究

人和小鼠血浆的稳定性

方法：将汇集的人和瑞士远交小鼠血浆样品解冻并掺入在dmso/乙腈/水(20:40:40)中制备的测试化合物溶液，以提供最终化合物浓度为1000ng/ml和最终dmso和乙腈浓度分别为0.2％和0.4％(v/v)。将血浆涡旋混合并将等分试样(50μl)转移至新鲜的微量离心管中，并在37℃培养。在6小时孵育期的不同时间点，取出一式两份的血浆样品，并立即在干冰中快速冷冻。将所有样品在-80℃下冷冻储存，直至lc-ms分析。使用2倍过量的乙腈通过蛋白质沉淀处理样品，然后离心。使用waters(milford，ma)acquityuplc进行上清液分析，其与watersmicromassquattropremier质谱仪偶联，以具有多反应监测正电喷雾电离模式操作。锥电压为45v，25，36，和37碰撞能量分别为30，30和40v，并且m/z转换分别为782.30>126.06(25)，826.32>170.16(36)和888.39>126.06(37)。将处理的样品(3μl)注射到supelcoascentisexpressrpamide柱(50x2.1mm，2.7μm)上，并使用水/乙腈(各自含有0.05％甲酸)梯度洗脱分析物，历时4分钟，流速为0.4ml/min。通过与在空白人或小鼠血浆中制备的校准曲线比较来定量样品浓度。

表6.在37℃培养6小时后测量人和小鼠血浆中的25，36，37的浓度

表7.71,78,79在人和小鼠血浆中的体外稳定性数据。

数据为每个时间点一式三份样品的平均值和标准偏差。

*相对于2分钟时间点的测量浓度计算剩余百分比

#n＝2个样本的平均值；一个一式两份样品作为异常值被省略

人和小鼠肝微粒体的稳定性

方法：在37℃和0.4mg/ml微粒体蛋白质下，将每种测试化合物(0.5μm)一式两份与人和小鼠肝微粒体(xenotech，kansascity，ks)培养来评估代谢稳定性。通过加入nadph再生系统引发代谢反应，并通过加入含有地西泮作为内标的乙腈，在60分钟的培养期间在不同时间点淬灭。在不存在辅因子的情况下，对照样品(不含nadph)在2,30和60分钟淬灭以监测潜在的降解。离心样品，并通过lcms分析上清液。使用watersacquityuplc进行分析，所述watersacquityuplc与watersxevog2qtof质谱仪偶联，所述质谱仪以正电喷雾电离ms^e模式操作，锥电压为30v。将样品(5μl)注射到ascentisexpressamide柱(50×2.1mm，2.7μm)上，并使用水/乙腈(均含有0.05％甲酸)梯度洗脱4分钟，流速为0.4ml/min。从一级降解曲线确定降解速率半衰期和体外内在清除值。

表8.在人和小鼠肝脏微小体内的稳定性

表9.人和小鼠肝微粒体的稳定性。

表10.71和79对其他分枝杆菌的mic。

1.boojamra,c.g.等人j.am.chem.soc.123,870-874(2001)。

2.taneja,n.k.；tyagi,j.s.j.antimicrob.chemother.60,288-293(2007)。

3.wong,wengr.；等人chem.biol.19,1483-1495(2012)。

4.lloyd,a.j.等人j.biol.chem.283,6402-6417(2008)。

5.mihalyi,a.博士论文,华威大学(2014)。