1.一种哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于包括:(1)构建敲除基因片段；(2)PEG-CaCl2原生质体转化；(3)菌落PCR筛选阳性突变子；
其中，构建敲除基因片段包括以下步骤：
以木霉基因组DNA为模板，分别PCR扩增目标基因约1200bp的5’和3’端同源臂，以引物Hyg-F和Hyg-R扩增潮霉素抗性基因，Hyg-F与扩增5’同源臂的反向引物设置16bp的重叠区域；Hyg-R与扩增3’同源臂的正向引物设置16bp的重叠区域；BamH1酶切载体pUC19，利用一步法无缝克隆试剂盒对5’端同源臂、潮霉素抗性基因、3’端同源臂和pUC19线性载体进行体外重组并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，用5’同源臂的上游引物5F和3’同源臂的下游引物3R扩增敲除片段验证阳性克隆；引物5F和3R进行PCR扩展大量制备敲除片段，纯化敲除片段使敲除片段浓度达到500ng/μL。
2.根据权利要求1所述的哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于所述的PEG-CaCl2原生质体转化包括：制备哈茨木霉原生质体；将哈茨木霉原生质体悬浮液、纯化敲除片段、PEG溶液；用枪头混匀；加PEG溶液，轻轻混匀，常温下放置；加溶液B，轻轻混匀；将混合液涂布在覆盖层析纸的含1M蔗糖PDA平板上，层析纸预先剪成条形；28℃避光培养24h；将条形层析纸片转到含抗生素的PDA平板上，28℃，避光培养30-36h，待条形层析纸边缘长出菌落后，挑取菌落，转接至新鲜的抗生素平板上，培养2天；其中所述的溶液B配方为：1Msorbitol，50mM CaCl2，10mM TrisHCl，pH 7.5；所述的PEG溶液配方为：25％PEG6000，50mM CaCl2、10mM TrisHCl，pH 7.5。
3.根据权利要求2所述的哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于所述的PEG-CaCl2原生质体转化包括：制备哈茨木霉原生质体；冰上放置15mL离心管，分别加200μL哈茨木霉原生质体悬浮液、10μL纯化敲除片段、50μL PEG溶液；用枪头混匀，冰上放置20min；加2mL PEG溶液，轻轻混匀，常温下放置5min；加2mL溶液B，轻轻混匀；将2mL混合液涂布在覆盖层析纸的含1M蔗糖PDA平板上，层析纸预先剪成条形；28℃避光培养24h；将条形层析纸片转到含抗生素的PDA平板上，28℃，避光培养36h，待条形层析纸边缘长出菌落后，挑取菌落，转接至新鲜的抗生素平板上，培养2天。
4.根据权利要求2或3所述的哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于所述的制备原生质体的方法为：接种哈慈木霉于PDA平板，28℃培养10天后，产生大量新鲜分生孢子；用10mL生理盐水洗涤菌丝表面，经玻璃绒过滤，去除菌丝体，得到孢子悬液；在玻璃纸覆盖的PDA平板上，取200μL孢子悬液涂布，28℃，避光培养16-20h直至孢子萌发；取玻璃纸，用溶解酶溶液洗涤玻璃纸，收集萌发的孢子；28℃，100rpm培养萌发的孢子悬液90 min；预冷离心机和转子，准备装有玻璃绒的离心管；90min后，萌发的孢子悬液经装有玻璃绒的离心管过滤，除去菌丝，用溶液A冲洗，终悬液体积控制在20-30mL；4℃、2000rpm离心10min，去上清；加20mL溶液A，再次离心，去上清；加1mL溶液B，冰上得到原生质体；用血球板观察、计数，稀释原生质体至108个/mL；所述的溶液A配方为：1.2M sorbitol，0.1M KH2PO4，pH 5.6；所述的溶液B配方为：1Msorbitol，50mM CaCl2，10mM TrisHCl，pH 7.5；所述的溶解酶溶液的配方为：0.15g溶解酶溶于20mL溶液A，0.2μm滤膜过滤除菌；所述的生理盐水为0.8-0.9％NaCl加0.05％Tween。
5.根据权利要求1所述的哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于所述的菌落PCR筛选阳性突变子包括直接刮取少量哈次木霉菌丝体，裂解后离心，利用菌落PCR试剂盒共同筛选阳性突变转化子；其中使用的引物1以5’端同源臂的上游序列设置正向引物，潮霉素基因序列设置反向引物，跨5’端同源序列扩增片段；引物2以潮霉素基因序列设置正向引物，3’端下游序列设置反向引物，跨3’端同源序列扩增片段。
6.根据权利要求5所述的哈茨木霉基因敲除方法，其特征在于在获得阳性敲除突变子后，光照培养至产孢子，再通过单孢分离纯化突变子。