本发明属于医药领域，尤其是涉及一种甾体扩环化合物及其制备方法。
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：甾体激素类药物是一类重要的生物活性物质，在维持生命活动、保持正常生理运行、促进性器官发育等方面发挥非常重要的作用，并具有很强的抗炎、抗过敏和抗病毒等药理作用，临床医药上广泛应用于皮肤、眼睛、关节、呼吸系统等病灶以及几种自身免疫疾病的治疗。美国专利4335121、4472393、3929768分别公布了氟替卡松、莫米松糠酸酯和布地奈德，这三种甾体类药物已经在临床应用上较为成熟。但是，有报道表明这些药物会引起一定的不良反应。因此，期望的较理想的甾体激素类药物能够对标靶组织具有有效的针对性的药理作用，同时在标靶组织之外具有最小的或不具有明显的毒副作用。将甾体结构的d环进行扩环使其生成六元环，是一类研究较少的反应，文献thea-hydroxyketone(a-ketol)andrelatedrearrangements,organicreactions(hoboken,nj,unitedstates)volume62,2003)公开了在乙醇溶剂中，与氢氧化钾加热反应，将甾体的d环进行扩环，收率为83％。文献carbon-13nuclearmagneticresonancespectraofd-homoannulated17-hydroxypregnan-20-ones(steroidsvolume54，1-10，1989)中，以甲醇和水为溶剂，与氢氧化钾反应，生成六元环的扩环化合物。该反应均需要在加热的条件下，与碱反应。技术实现要素：根据
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的缺陷，本发明公开了一种能与糖皮质激素受体结合的甾体扩环化合物及其制备方法，这类化合物具有高效的局部抗炎抗过敏作用，同时在多次有效剂量下对非标靶部位具有很小的或不具有明显的毒作用。本发明的技术方案是：一种甾体的扩环化合物，具有式i所述结构：式i化合物的对映异构体，或溶剂合物，或水合物。式i化合物具有与糖皮质激素受体结合的作用。式i化合物的制备方法：包括以下步骤1)：环氧反应将化合物4溶解于甲醇中，在低温下滴加naoh溶液，调至碱性后，滴加双氧水进行反应，反应结束后，冷却结晶得化合物3；2)：开环反应将hf溶解在dmf中，溶液冷却，加入化合物3进行反应，反应结束后加入氨水调ph至中性，冷却结晶的化合物2；3)：扩环反应将化合物2用丙酮溶解，加酸调至酸性后，阶段性降温反应，得化合物1。为了取得更好的技术效果，步骤1)环氧反应中，所述naoh溶液为12mol/l的浓度。滴加naoh保持温度在30℃以下；为了取得更好的技术效果，步骤1)环氧反应中，所述反应通氮气保护，30℃～50℃反应2～10h；为了取得更好的技术效果，步骤1)环氧反应中，所述双氧水的浓度为35％～40％；为了取得更好的技术效果，步骤2)开环反应中，所述hf的浓度为45％～65％；所用氨水浓度为20％～35％；为了取得更好的技术效果，步骤2)开环反应中，所述反应温度为-5℃～5℃搅拌反应，2～4h；为了取得更好的技术效果，步骤3)扩环反应中，所述阶段性降温反应为：75℃～85℃搅拌反应1.5～3.5h后，45～55℃反应1.5～3.5h，降至20～30℃反应1.5～3.5h。为了取得更好的技术效果，步骤3)扩环反应中，所述酸选自有机酸，或无机酸，优选乙酸，甲酸，磷酸，盐酸，柠檬酸，苯甲酸中的一种或几种。为了取得更好的技术效果，步骤3)扩环反应中，所述酸性条件为ph在2～6之间的范围。所述式i化合物的h-nmrh-nmr(ppm，400mhz，氘代dmso)：7.28(d，1h)，6.35(dd，1h)；6.11(s，1h)，4.,0-4.70(m，2-oh)，4.21(m，1h)，2.50-2.00(5h)，1.43(s，3h)，1.26(s，3h)，1.09(d，3h)，2.00-1.00(6h)，0.81(s，3h)。ms(m+1，m/z)：377.02。所述式i化合物制备成药学上可接受的剂型。所述剂型包括包括膏剂，溶液剂，注射剂，片剂，胶囊剂，滴眼剂，栓剂，喷雾剂，鼻喷剂，粉吸入剂。本发明具有的优点和积极效果是：式i化合物能与糖皮质激素受体有效结合，产生与糖皮质激素一样的药理学作用；且与糖皮质激素相比其毒性较低。具体实施方式实施例1一种甾体扩环化合物，其具有式i化合物的结构，其制备方法包括以下步骤：(1)将20g化合物4加入到350ml甲醇中，升温回流使之全部溶解。室温下滴加10ml的12mol/l的naoh溶液，滴加过程中保持温度在25℃左右，加毕，通氮气保护，滴加28ml的35％双氧水，30℃维温反应8h，50℃维持温度反应2h。冷却至室温，用乙酸调ph至8～9减压蒸馏去甲醇，得固体加水稀释，用乙酸调ph至7，冷却，结晶，过滤，得17.2g化合物3，hplc纯度89.7％，收率86％。(2)先将80ml58％hf-dmf溶液置于干燥聚乙烯瓶中，冷至-4℃，激烈搅拌下加入10g化合物3，0℃继续搅拌反应3h后，加入25％的氨水，调ph至7，加冰水，析出结晶，静置3h，过滤水洗至中性，干燥后用丙酮重结晶得8.6g化合物2，hplc纯度90.6％，收率86％。(3)5g化合物2投入到100ml丙酮中，升温回流使之溶清，降至室温，滴加乙酸，维持温度25℃左右。调至ph4～5，80℃搅拌反应2h后，50℃反应2h，降至室温反应3h。冰水过滤，水洗，干燥得4.7g化合物1，hplc纯度91.6％，收率94％。实施例2一种甾体扩环化合物，其具有式i化合物的结构，其制备方法包括以下步骤：(1)将20g化合物4加入到350ml甲醇中，升温回流使之全部溶解。室温下滴加8ml的12mol/l的naoh溶液，滴加过程中保持温度在20℃左右，加毕，通氮气保护，滴加30ml的38％双氧水，40℃维温反应6h，50℃维持温度反应1h。冷却至室温，用乙酸调ph至8～9减压蒸馏去甲醇，得固体加水稀释，用乙酸调ph至7，冷却，结晶，过滤，得16.8g化合物3，hplc纯度85.9％，收率84％。(2)先将100ml58％hf-dmf溶液置于干燥聚乙烯瓶中，冷至-4℃，激烈搅拌下加入10g化合物3，5℃继续搅拌反应2.5h后，加入30％的氨水，调ph至7，加冰水，析出结晶，静置3h，过滤水洗至中性，干燥后用丙酮重结晶得7.6g化合物2，hplc纯度91.5％，收率76％。(3)5g化合物2投入到100ml丙酮中，升温回流使之溶清，降至室温，滴加甲酸，维持温度25℃左右。调至ph为5，75℃搅拌反应3h后，45℃反应2h，降至25℃反应3h。冰水过滤，水洗，干燥得4.6g化合物1，纯度98.6％，收率92％。实施例3一种甾体扩环化合物，其具有式i化合物的结构，其制备方法包括以下步骤：(1)将20g化合物4加入到350ml甲醇中，升温回流使之全部溶解。室温下滴加9ml的12mol/l的naoh溶液，滴加过程中保持温度在28℃，加毕，通氮气保护，滴加30ml的40％双氧水，35℃维温反应7h，45℃维持温度反应2h。冷却至室温，用乙酸调ph至8～9减压蒸馏去甲醇，得固体加水稀释，用乙酸调ph至7，冷却，结晶，过滤，得17.6g化合物3，hplc纯度89.1％，收率88％。(2)先将100ml58％hf-dmf溶液置于干燥聚乙烯瓶中，冷至-4℃，激烈搅拌下加入10g化合物3，-3℃继续搅拌反应3.8h后，加入20％的氨水，调ph至7，加冰水，析出结晶，静置3h，过滤水洗至中性，干燥后用丙酮重结晶得8.2g化合物2，hplc纯度88％，收率82％。(3)5g化合物2投入到100ml丙酮中，升温回流使之溶清，降至室温，滴加磷酸，维持温度25℃左右。调至ph为5，78℃搅拌反应2h后，52℃反应2h，降至27℃反应3h。冰水过滤，水洗，干燥得4.3g化合物1，hplc纯度92.3％，收率86％。实施例4(1)将20g化合物4加入到350ml甲醇中，升温回流使之全部溶解。室温下滴加8ml的12mol/l的naoh溶液，滴加过程中保持温度在25℃，加毕，通氮气保护，滴加30ml的40％双氧水，35℃维温反应7h，45℃维持温度反应2h。冷却至室温，用乙酸调ph至8～9减压蒸馏去甲醇，得固体加水稀释，用乙酸调ph至7，冷却，结晶，过滤，得17.0g化合物3，hplc纯度86.7％，收率85％。(2)先将100ml58％hf-dmf溶液置于干燥聚乙烯瓶中，冷至-4℃，激烈搅拌下加入10g化合物3，-5℃继续搅拌反应4h后，加入25％的氨水，调ph至7，加冰水，析出结晶，静置3h，过滤水洗至中性，干燥后用丙酮重结晶得8.2g化合物2，hplc纯度88.6％收率82％。(3)5g化合物2投入到100ml丙酮中，升温回流使之溶清，降至室温，滴加盐酸，维持温度25℃左右。调至ph为3.5，82℃搅拌反应2h后，48℃反应2.5h，降至25℃反应3h。冰水过滤，水洗，干燥得4.0g化合物1，hplc纯度92.6％，收率80％。实施例5(1)将20g化合物4加入到350ml甲醇中，升温回流使之全部溶解。室温下滴加10ml的12mol/l的naoh溶液，滴加过程中保持温度在20℃，加毕，通氮气保护，滴加25ml的40％双氧水，30℃维温反应6.5h，48℃维持温度反应2.5h。冷却至室温，用乙酸调ph至8～9减压蒸馏去甲醇，得固体加水稀释，用乙酸调ph至7，冷却，结晶，过滤，得17.2g化合物3，hplc纯度89.8％，收率86％。(2)先将100ml58％hf-dmf溶液置于干燥聚乙烯瓶中，冷至～4℃，激烈搅拌下加入10g化合物3，-3℃继续搅拌反应3.8h后，加入20％的氨水，调ph至7，加冰水，析出结晶，静置3h，过滤水洗至中性，干燥后用丙酮重结晶得8.2g化合物2，hplc纯度91.7％，收率82％。(3)5g化合物2投入到100ml丙酮中，升温回流使之溶清，降至室温，滴加乙酸，维持温度25℃左右。调至ph为5.5，80℃搅拌反应1.5h后，50℃反应3h，降至20℃反应3h。冰水过滤，水洗，干燥得4.1g化合物1，hplc纯度93.7％，收率82％。实施例6：药理活性实验检测样品：式i化合物对照品1：醋酸地塞米松对照品2：具有式ii的结构的化合物6对照品3：具有式iii的结构的化合物7阴性对照：生理盐水6.1糖皮质激素受体结合实验采用放射性配体结合实验，评价式i化合物和对照品对糖皮质激素受体的活性，25℃下，在rpmi-1640，10nmhepes，ph7.0的培养基中，配制3nm、10nm的浓度式i化合物和对照品，用糖皮质激素受体转染的人hela细胞孵育2h。离心除去游离的待测物，通过液体闪烁计数测定上清液中受体结合配体的浓度。为确保实验结果的有效性，上述实验采用单因素变量法，保持各受试化合物在相同条件下实验。结果用特异性结合抑制率表示，每一结果为重复测试的平均值。实验结果如下：实验表明，测试物与糖皮质激素受体体外结合能力与对照品1即醋酸地塞米松相当，证明式i化合物有糖皮质激素样作用；对照品2和对照品3即扩环化合物，其与糖皮质激素受体结合能力与式i化合物相差较大，与阴性对照相当，其没有糖皮质激素样作用。6.2棉球肉芽肿实验清洁实验大鼠随机分5组，每组雌雄各半，各组大鼠用乙醚麻醉后，背部切开小口，肩甲区植入标准重量为20mg的灭菌棉球后缝合。术后次日给药，每组施用一种测试物，实验剂量1000mcg，500mcg，250mcg，连续7d。第8d取出棉球连带肉芽肿和胸腺，并称重。将含肉芽肿的棉球80℃下干燥24h后称重。计算干肉芽肿和胸腺平均重量。实验结构如下：实验结果表明，式i化合物对棉球引起的肉芽肿的抑制能力优于对照品。式i化合物，式ii化合物，和式iii化合物对大鼠胸腺无明显退化作用，醋酸地塞米松对大鼠胸腺有轻微的退化作用。并且实验过程中，实验大鼠健康状况良好，无高血糖症状，体重无明显变化。6.3巴豆耳水肿实验将若干健康雄性小鼠分成5组，每组10只。实验组为式i化合物和对照品，对照组为醋酸地塞米松。将等剂量测试物及对照品溶于吡啶～丙酮～水(5:15:3)中，取20ul溶解液施于小鼠左右耳，2h后滴入巴豆油。5h后处死小鼠，割下耳朵称重，实验结果如下：样品耳水肿平均抑制率％式i化合物85.01式ii化合物68.59式iii化合物77.12醋酸地塞米松75.32阴性对照1.02实验结果表明，测试物对巴豆引起的耳水肿的抑制能力明显优于对照品。6.4骨质疏松副作用50只sd大鼠按体重随机分为五组:分别臀肌注式i化合物，式ii化合物，式iii化合物，醋酸地塞米松和生理盐水，浓度均为1mg/kg,每间隔3d注射一次,连续5周；5周后停用,并从该两组中各取10只大鼠,颈动脉放血处死大鼠,取股骨,腰椎作骨密度(bmd)和骨生物力学性质测定。通过检测扩环化合物及对照品对骨质疏松的影响，在实验周期内，发现式i化合物不会引起骨质疏松的副作用，对照品1和2会造成轻微的骨质疏松，但不明显；醋酸地塞米松会造成严重的骨质疏松。因此，通过上述药理毒理学实验可见，本发明涉及结构式i的化合物在体外糖皮质激素受体结合、体内抑制棉球肉芽肿和巴豆耳水肿方面都明显优于对照品，具有较优的药理活性，且副作用如胸腺退化和体重增加十分不明显，甚至在高剂量施用时仍具有微小的或不显著副作用。可以说本发明化合物的抗炎活性和使用的安全性都是我们期望达到的效果。以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。当前第1页12