技术特征：
技术总结
本发明公开了一种催化效率提高的D,D‑羧肽酶DacA突变体及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明公开了由大肠杆菌(Escherichia coli)BL21来源的D,D‑羧肽酶DacA为母本，基于酶结构解析确定关键位点及突变方式，经分子生物学技术进行定点突变而获得催化效率提高的DacA突变体。在此改造条件下，E.coli D,D‑羧肽酶DacA的突变体K113G催化效率常数kcat值提高最多，由6543.4s‑1提高至9428.1s‑1。利用此策略可以显著提高D,D‑羧肽酶DacA的催化效率，为其在代谢改造E.coli提高其胞外分泌水平等方面的应用提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
技术研发人员：许菲;杨海泉;陈媛;卢潇;王浩坤;王拂祥;代瑶
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2018.04.09
技术公布日：2018.08.17