本发明涉及药物化学和治疗学领域，具体涉及脑磷脂类似物、制备方法及其作为抗肿瘤药物的用途。
背景技术
脑磷脂(即磷脂酰乙醇胺)是由甘油二酯、磷酸和乙醇胺缩合而成的一种磷脂。脑磷脂在动物体内广泛分布，尤富集于脑和脊髓中。脑磷脂是神经细胞膜的重要组成部分，参与调节神经细胞的代谢活动，影响着神经组织的一系列重要功能，如细胞渗透性、髓鞘形成、线粒体转移、氧化加磷氧基作用等。口服脑磷脂能直接为人脑利用，令神经细胞膜修复，恢复神经元的正常代谢。脑磷脂与血液凝固有关，凝血激酶是由脑磷脂与蛋白质组成的，存在于血小板内,能促使血液凝固，可应用于局部止血。此外，脑磷脂还对神经衰弱、动脉粥样硬化、肝硬化和脂肪性病变等疾病具有一定的疗效。早在20世纪70年代，美国就将脑磷脂用于保健食品，长期临床应用结果表明脑磷脂除了健脑、美容、防衰老、保护心血管等营养保健作用外无不良反应，深受广大消费者青睐，成为市场上重要的保健食品。
喜树碱(camptothecin，cpt)是从我国特有植物喜树中提取得到的生物碱，喜树碱具有较强的抗肿瘤活性，对多种实体肿瘤和白血病具有明显的抑制作用，但喜树碱水溶性差、毒性强，因此限制了它在肿瘤治疗上的应用。目前，对喜树碱及其衍生物的研究多集中于化学结构修饰，主要致力于改善其在人体内的吸收状况和增强治疗效果。
喜树碱衍生物的制备方法研究较多，以下给出部分文献作为参考。
美国专利104894，1990-3-1号
pct专利申请2001009139，2001-2-8号
pct专利申请9602546，1996-7-12号
jbiolchem，1985，260，14873-14878
jmedchem，1991，34(1)，98-107
jmedchem，1998，41(1)，31-37
bioorgmedchemlett，2002，12(9)，1241-1244
bioorgmedchemlett，2003，13(21)，3739-3741
bioorgmedchem，2004，12(15)，4003-4008
bioorgmedchem，2004，12(13)，3657-3662
chempharmbull，1991，39，3183-3188
cancerres，1993，53，1577-1582
cancerres，1995，55，753-760
nyacadasci，1996，803，231-246
archpharmres，1998，21，581-590
jmedchem，1995，38(3)，395-401
脑磷脂是一种两性分子，具有与磷酸相连的氨醇构成的亲水头和由脂肪酸链构成的疏水尾组成，可自组装成类似于生物膜的结构，即脂质体。通过化学键合作用使单脂肪酰甘油脑磷脂与喜树碱或喜树碱衍生物分子结合，可以形成喜树碱(喜树碱衍生物)-脑磷脂复合物。该复合物能通过自组装制成相应的脂质体药物传递系统，进而提高了其生物利用度。
技术实现要素：
本发明的一个目的是提供一类与抗癌药物结合的脑磷脂类似物，有利于提高药物的抗癌活性和生物利用度。
本发明的另一个目的是提供该类脑磷脂类似物的制备方法。
本发明的再一个目的是提供该类脑磷脂类似物作为抗肿瘤药物的应用。
为了实现上述目的，本发明提供的是具有式(1)所示的脑磷脂类似物。
r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3。
本发明提供制备具有(1)所示的脑磷脂类似物的方法，包括如下步骤：
(1)在干燥的有机溶剂中，喜树碱或其衍生物与相应的酸酐进行酯化反应，得到具有式(2)结构的中间体a；
其中，r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3；
(2)中间体a与缩水甘油进行酯化反应后，再与相应的脂肪酰氯进行氧酰化反应得到具有式(3)结构的中间体b；
其中，r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3；
(3)中间体b与2-邻苯二甲酰亚胺乙基-二氯磷酰进行缩合反应后，用水合肼脱保护得到权利要求1所述的脑磷脂类似物。
其中，制备脑磷脂类似物的方法中所述的有机溶剂是吡啶、四氢呋喃、二氯甲烷；所述的酸酐是丁二酸酐或戊二酸酐；所述的脂肪酰氯是硬脂酰氯、油酰氯、棕榈酰氯。
本发明还涉及含有作为活性成分的本发明化合物及药效学上可接受载体的各种制剂。
“药效学上可接受载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，他们适合于人使用，而且有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺合，而不明显降低化合物的药效。药效学上可接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如油豆、芝麻油、花生油、橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润滑剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
本发明还涉及本发明所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
体外活性筛选实验表明所述的脑磷脂类似物具有明显的抗肿瘤作用及良好的剂量依赖关系。以人卵巢癌细胞系hxb1309h为受试细胞株，测定了脑磷脂类似物的半数抑制浓度(ic50)，其中部分样品的实验结果见表1：
表1：脑磷脂类似物对xb1309的半数抑制浓度
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细描阐述：
具有式(1)所示的脑磷脂类似物。
r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3。
本发明提供制备具有(1)所示的脑磷脂类似物的方法，包括如下步骤：
(1)在干燥的有机溶剂中，喜树碱或其衍生物与相应的酸酐进行酯化反应，得到具有式(2)结构的中间体a；
其中，r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3；
(2)中间体a与缩水甘油进行酯化反应后，再与相应的脂肪酰氯进行氧酰化反应得到具有式(3)结构的中间体b；
其中，r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；r2选自：-h或-och3；r3选自：-h或-no2、；n＝2或3；
(3)中间体b与2-邻苯二甲酰亚胺乙基-二氯磷酰进行缩合反应后，用水合肼脱保护得到权利要求1所述的脑磷脂类似物。
其中，制备脑磷脂类似物的方法中所述的有机溶剂是吡啶、四氢呋喃、二氯甲烷；所述的酸酐是丁二酸酐或戊二酸酐；所述的脂肪酰氯是硬脂酰氯、油酰氯、棕榈酰氯。
本发明还涉及含有作为活性成分的本发明化合物及药效学上可接受载体的各种制剂。
“药效学上可接受载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，他们适合于人使用，而且有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺合，而不明显降低化合物的药效。药效学上可接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如油豆、芝麻油、花生油、橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润滑剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
本发明还涉及本发明所述的化合物制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的脑磷脂类似物和制备方法在如下实施例中更详细地叙述，但实施例不构成对本发明的限制。
实施例1制备喜树碱-20-o-丁二酰单酯(中间体a)
将1.0克(0.01摩尔)丁二酸酐溶于100毫升吡啶中，加入3.5克(0.01摩尔)喜树碱，回流反应24小时，冷却至室温后，将反应液倒入500毫升石油醚中，过滤、收集沉淀，将沉淀用硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝100：1),得浅黄色喜树碱-20-o-丁二酰单酯3.9克，收率87％。
1hnmr(300mhz，dmso-d6，ppm)：δ0.90(3h，t，h-19)，1.96(2h，m，h-18)，2.52-2.75(4h，m，-oocch2ch2coo-)，5.20(2h，s，h-5)，5.50(2h，s，h-17)，6.89(1h，d，n-h)，7.14(h，s，h-14)，7.72(1h，q，h-10)，7.87(h，t，h-11)，8.00(1h，d，h-12)，8.14(1h，d，h-9)，8.42(1h，t，n-h)，8.65(1h，s，h-7)。
esimsm/z：539.3(m-1)-
实施例2制备1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)甘油(中间体b)
将4.5克(0.01摩尔)喜树碱-20-o-丁二酰单酯溶于500毫升二氯甲烷中，冷却至0℃，搅拌下缓慢滴加0.74克(0.01摩尔)缩水甘油，在0℃下，搅拌24小时后，依次加入3.1克(0.01摩尔)硬脂酰氯、2.0克碳酸钠，升温至室温，搅拌24小时，过滤，减压浓缩滤液，将浓缩液用硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝25：1),得黄色1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)甘油1.5克，收率18％。
1hnmr(300mhz，dmso-d6，ppm)：1.96(2h，m，h-18)，2.29(2h，m，-oocch2-)，2.52-2.75(4h，m，-oocch2ch2coo-)，4.19-4.26(4h，dd，-och2-choh-ch2o-)，4.56(1h，m，-och2-choh-ch2o-)，5.20(2h，s，h-5)，5.50(2h，s，h-17)，6.89(1h，d，n-h)，7.14(h，s，h-14)，7.72(1h，q，h-10)，7.87(h，t，h-11)，8.00(1h，d，h-12)，8.14(1h，d，h-9)，8.42(1h，t，n-h)，8.65(1h，s，h-7)。
实例3制备1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)-2-o-甘油磷酰乙醇胺(脑磷脂类似物)
将0.8克(0.001摩尔)1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)甘油溶于50毫升体积比为4：1的四氢呋喃-吡啶混合液中，冷却至0℃，搅拌下加入0.3克(0.001摩尔)2-邻苯二甲酰亚胺乙基-二氯磷酰在0℃下，搅拌10小时后，依次加入40毫升体积比为1：3的四氢呋喃-无水乙醇混合液、0.2克水合肼(12g)，加热至50℃，搅拌反应2小时，应完毕后滴加2n盐酸调节ph值为5，冷却至室温，冷冻离心，弃去上清液，将离心剩余物水洗3次后，冷冻干燥得1.1克橙黄色固体，将其用硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇：水＝65：25：2),得黄色1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)-2-o-甘油磷酰乙醇胺(即脑磷脂类似物)0.3克，收率32％。
1hnmr(300mhz，dmso-d6，ppm)：1.96(2h，m，h-18)，2.29(2h，m，-oocch2-)，2.52-2.75(4h，m，-oocch2ch2coo-)，2.90(2h，m，nh2ch2ch2o-)，3.82(2h，m，nh2ch2ch2o-)，4.19-4.26(4h，dd，-och2-choh-ch2o-)，4.56(1h，m，-och2-choh-ch2o-)，5.20(2h，s，h-5)，5.50(2h，s，h-17)，6.89(1h，d，n-h)，7.14(h，s，h-14)，7.72(1h，q，h-10)，7.87(h，t，h-11)，8.00(1h，d，h-12)，8.14(1h，d，h-9)，8.42(1h，t，n-h)，8.65(1h，s，h-7)。
实例4制备脑磷脂类似物自组装脂质体
将0.05克1-o-硬脂酰-3-o-(喜树碱-20-o-丁二酰)-2-o-甘油磷酰乙醇胺溶于20毫升二氯甲烷中，并加入50毫升蒸馏水，超声20分钟后，室温下搅拌，挥发除去二氯甲烷后，剩余物经冷冻干燥制得纳米级别微粒(粒径≤200nm)，即为含脑磷脂类似物自组装脂质体。