1.一种基于CRISPR/Cas9技术的Pdzd7基因突变动物模型的构建方法,步骤是:
(1)在小鼠Pdzd7基因11号外显子上p.C728LfsX18致病突变位点附近设计合适的Guide RNA;其中引物Guide RNA target site 1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,引物Guide RNA target site 2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
(2)体外合成Guide RNA和Cas9 mRNA;
(3)将合成后Guide RNA和Cas9 mRNA等摩尔比配制成100ul注射样品,将样品注射到取自C57BL/6J母鼠受精卵的雄原核中,培养恢复后移植入假孕受体小鼠,等待获得F0代小鼠;
(4)利用PCR反应体系对获得的F0代小鼠进行鉴定;
(5)将阳性F0代小鼠与野生型C57BL/6J交配获得F1代小鼠,即为Pdzd7基因突变小鼠模型。
2.根据权利要求1所述基于CRISPR/Cas9技术的Pdzd7基因突变动物模型的构建方法,其特征在于:步骤(4)所述PCR反应体系的引物为Pdzd7-test-F3和Pdzd7-test-R3;其中Pdzd7-test-F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,Pdzd7-test-R3的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。