本发明涉及化合物制备技术领域，更具体地，涉及一种吗啉二酮类天然生物碱javanicuninea，javanicunineb,9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b及其衍生物的制备方法。
背景技术
天然产物javanicuninea，javanicunineb,9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b是一类由微生物代谢产生的生物碱，具有吗啉二酮的骨架结构。其中化合物javanicuninea和javanicunineb是由日本科学从爪哇正青霉(eupenicilliumjavanicum)中分离得到(heterocycles,2006,68,1969-1972)，它们在生物体中的含量较低，它们的生物活性测试仅局限于抗菌活性的测定。化合物9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b由墨西哥科学从曲霉菌(aspergillussp.mexu27854)中分离得到(j.nat.prod.2017,80,2311-2318)，它们在生物体中的含量也是较低，但是此类结构及衍生物对多药耐药糖蛋白(pg-p)具有很好的抑制作用，其作用效果与目前的商品阳性药物维拉帕米相当。
鉴于天然来源的javanicuninea，javanicunineb,9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b在微生物体内含量较低，且分离纯化困难，不利于科研人员研究及应用开发。且至今为止，未见任何文献报到这类化合物的合成及大规模制备方法。因此，急需要开发javanicuninea，javanicunineb,9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b及其衍生物的合成方法。
技术实现要素：
本发明为克服上述现有技术所述的缺陷，提供天然产物javanicuninea或其衍生物的制备方法。
本发明的另一目的在于提供天然产物javanicunineb或其衍生物的制备方法。
本发明的还一目的在于提供天然产物9-deoxy-pf1233b或其衍生物的制备方法。
本发明的还一目的在于提供天然产物9-deoxy-pf1233a或其衍生物的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
天然产物javanicuninea或其衍生物的制备方法，包括如下步骤：
s1.将式(ⅰ)化合物通过傅克偶联反应生成式(ⅱ)化合物；
s2.将式(ⅱ)化合物脱去叔丁氧羰基boc得式(ⅲ)化合物；
s3.将式(ⅲ)化合物与s-2-羟基-4-甲基戊酸进行酰胺化反应、酯交换反应生成吗啉二酮骨架，得到式(ⅳ)化合物；
s4.对式(ⅳ)化合物的仲胺进行乙酰化生成式(ⅴ)化合物，式(ⅴ)化合物为天然产物javanicuninea或其衍生物；
其中r为氢原子、甲基或甲氧基。
r为氢原子时，制得产物为javanicuninea。
本发明中，式(ⅰ)化合物可市售得到，也可由本领域技术人员根据现有技术由l-色氨酸甲酯制备得到。
本发明提供的制备方法成功合成了javanicuninea或其衍生物，能够大规模制备javanicuninea及其衍生物，且总的反应步骤少，实施例中javanicuninea的总收率能够达到20％以上。
优选地，步骤s1.中采用式(ⅰ)化合物与三丁基-(3-甲基-2-丁烯基)-锡、碳酸铯、高氯酸银反应生成式(ⅱ)化合物。
优选地，式(ⅰ)化合物与三丁基-(3-甲基-2-丁烯基)-锡的摩尔比为1:(1～2)。
优选地，式(ⅰ)化合物与碳酸铯的摩尔比为1:(1～2)。
优选地，三丁基-(3-甲基-2-丁烯基)-锡与高氯酸银的摩尔比为1:(1～2)。
优选地，步骤s1.中将式(ⅰ)化合物与碳酸铯在在惰性气氛保护下溶解，然后-75～-80℃条件下加入三丁基-(3-甲基-2-丁烯基)-锡和高氯酸银，反应4～12h，生成式(ⅱ)化合物。
优选地，步骤s2.中采用三甲基碘硅烷tmsi和n，n-二异丙基乙胺dipea脱去式(ⅱ)化合物的boc。
优选地，步骤s2.中将tmsi在-2～2℃条件下缓慢加入式(ⅱ)化合物的溶液中，搅拌50～70min后，缓慢加入dipea，然后在室温下反应1～12h，式(ⅱ)化合物脱去boc。
优选地，步骤s3.以“一锅法”的方式进行。
优选地，步骤s3.中化学反应的催化剂为2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯hatu、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑hoat和n，n-二异丙基乙胺dipea。
优选地，步骤s3.中式(ⅲ)化合物、s-2-羟基-4-甲基戊酸的摩尔比为1:(1.1～1.5)。
优选地，步骤s3.中式(ⅲ)化合物与s-2-羟基-4-甲基戊酸反应8～16h，得到式(ⅳ)化合物。
优选地，步骤s3.中式(ⅲ)化合物与s-2-羟基-4-甲基戊酸在惰性气氛保护下，在-2～2℃条件下与hatu、hoat和dipea混合，然后在75～85℃条件下反应12～16h，生成式(ⅳ)化合物。
步骤s3.中通过hatu、hoat和dipea催化式(ⅲ)化合物与s-2-羟基-4-甲基戊酸反应，实现“一锅法”得到式(ⅳ)化合物，即在一个操作步骤中实现酰胺化反应和酯化反应。“一锅法”能够有效节省操作步骤，提高生产效率。
优选地，步骤s4.中采用dipea催化式(ⅳ)化合物与醋酸酐进行酰胺化反应生成式(ⅴ)化合物。
优选地，式(ⅳ)化合物与醋酸酐的摩尔比为1:(60～70)。
优选地，式(ⅳ)化合物与dipea的摩尔比为1:(2～4)。
优选地，步骤s4.中式(ⅳ)化合物、dipea和醋酸酐在50～70℃条件下反应10～14h，生成式(ⅴ)化合物。
本发明同时保护天然产物javanicunineb或其衍生物的制备方法，所述制备方法为将上述式(ⅴ)化合物与六甲基二硅基胺基钾khmds和davis氧化剂反应生成式(ⅵ)化合物，式(ⅵ)化合物为天然产物javanicunineb或其衍生物；
其中r为氢原子、甲基或甲氧基。
r为氢原子时，制得产物为javanicunineb。
优选地，式(ⅴ)化合物、khmds、davis氧化剂的摩尔比为1:(1～2):(1～2)。
优选地，所述制备方法为，在-75～80℃条件下，在惰性气氛保护下分别溶解khmds和式(ⅴ)化合物，然后缓慢滴加混合，反应15～25min后，加入davis氧化剂反应1.5～2.5h生成式(ⅵ)化合物。
本发明同时保护天然产物9-deoxy-pf1233b或其衍生物的制备方法，包括如下步骤：
m1.将式(ⅶ)化合物通过酰胺化反应生成式(ⅷ)化合物；
m2.将式(ⅷ)化合物进行酯交换反应生成吗啉二酮骨架，得到式(ⅸ)化合物；
m3.将式(ⅸ)化合物与二甲基过氧化酮dmdo反应得到式(ⅹ)化合物，式(ⅸ)化合物与二甲基过氧化酮的摩尔比为1:(2～3)；式(ⅹ)化合物为天然产物9-deoxy-pf1233b或其衍生物；
其中，r1和r2分别独立选自氢原子、甲基或甲氧基。
本发明中，式(ⅶ)化合物可市售得到，也可由本领域技术人员根据现有技术由l-色氨酸甲酯制备得到。
r1和r2均为氢原子时，制得产物为9-deoxy-pf1233b。
上述制备方法中，二甲基过氧化酮的加入量对步骤m3.反应有重要影响，如果二甲基过氧化酮加入过少，则步骤m3.反应不彻底；如果二甲基过氧化酮加入过多，则步骤m3.反应的收率降低。
优选地，步骤m1.中采用hatu、hoat和dipea催化式(ⅶ)化合物与芳基乳酸进行酰胺化反应生成式(ⅷ)化合物。
优选地，式(ⅶ)化合物与芳基乳酸的摩尔比为1:(1.0～1.1)。
优选地，式(ⅶ)化合物、hatu和dipea的摩尔比为1:(1.2～1.5):(5～7)。
hoat采用催化量。
优选地，步骤m1.中式(ⅶ)化合物与芳基乳酸在惰性气氛保护下，在-2～2℃条件下与hatu、hoat和dipea混合，然后在75～85℃条件下反应2.5～3.5h，生成式(ⅷ)化合物。
优选地，步骤m2.中化学反应的催化剂为对甲苯磺酸。
优选地，式(ⅷ)化合物与对甲苯磺酸的摩尔比为1:(1.1～1.3)。
优选地，步骤m2.中式(ⅷ)化合物与对甲苯磺酸溶解后在110～130℃条件下反应1.3～2.0h生成式(ⅸ)化合物。
优选地，步骤m2.中反应结束后进行后处理，后处理包括萃取，萃取剂为二氯甲烷。
式(ⅸ)化合物不可用乙酸乙酯萃取，可以选用用二氯甲烷萃取。
优选地，步骤m3.中式(ⅸ)化合物与二甲基过氧化酮在惰性气体保护下，在-75～-80℃条件下生成天然产物9-deoxy-pf1233b或其衍生物。
二甲基过氧化酮采用丙酮为溶剂。
二甲基过氧化酮的丙酮溶液可根据现有技术制备得到。
优选地，所述惰性气体为氩气。
本发明还保护天然产物9-deoxy-pf1233a或其衍生物的制备方法，所述制备方法为将上述式(ⅹ)化合物进行酯化反应生成式(ⅻ)化合物；式(ⅻ)化合物为天然产物9-deoxy-pf1233a或其衍生物；
其中，r1和r2分别独立选自氢原子、甲基或甲氧基。
r1和r2均为氢原子时，制得产物为9-deoxy-pf1233a。
优选地，所述制备方法为，以吡啶为溶剂，式(ⅹ)化合物与过量的醋酸酐在4-二甲氨基吡啶dmap催化下进行酯化反应生成式(ⅻ)化合物；式(ⅹ)化合物与dmap的摩尔比为1:(0.9～1.1)。
发明人通过大量研究，通过改进现有的dmap催化体系，得到上述dmap催化酯化反应的方法。该方法能够提高产率，节省反应时间，提高效率。
优选地，式(ⅹ)化合物与醋酸酐的摩尔比为1:(35～45)
优选地，所述式(ⅹ)化合物、dmap、吡啶和醋酸酐在75～85℃条件下反应10～14h生成式(ⅻ)化合物。
优选地，所述惰性气氛为氮气气氛。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供的制备方法能够大规模制备javanicuninea，javanicunineb,9-deoxy-pf1233a和9-deoxy-pf1233b及其衍生物，而且操作步骤少，其中，javanicuninea的总收率能够达到20％以上，javanicunineb的总收率能够达到10％以上，9-deoxy-pf1233a的总收率能够达到8％以上，9-deoxy-pf1233b的总收率能够达到12％以上。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
实施例中的原料均可可通过市售得到；
本发明中：
tmsi是指三甲基碘硅烷；
boc是指叔丁氧羰基；
hatu是指2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯；
hoat是指1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑；
dipea是指n，n-二异丙基乙胺；
khmds是指六甲基二硅基胺基钾；
ptsa是指对甲苯磺酸；
dmap是指4-二甲氨基吡啶；
dmdo是指二甲基过氧丙酮。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
其中，本实施例中采用的试剂和仪器信息如下：
试剂:l-色氨酸甲酯、s-2-羟基-4-甲基戊酸、dmf、(s)-(-)-3-苯乳酸、对甲苯磺酸、氯仿、二氯甲烷、thf、bop-cl、碳酸钾、甲醇、石油醚、乙酸乙酯、hatu、hoat等。
仪器:abimaldi-tof和qstarelite高分辨质谱系统；brukeravance400mhz核磁共振波谱仪(瑞士bruker公司)；agilentgc-ms；eyla(sb-1200)旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)；
实施例1天然产物javanicuninea的合成
1、式(ⅱ)化合物(r＝h)的合成
100ml圆底烧瓶中称取式(ⅰ)化合物(r＝h)(2.08g,4.19mmol)和碳酸铯(2.08g,6.40mmol)，放入搅拌子，塞紧橡胶塞，抽真空。在氮气保护下加入无水二氯甲烷溶解，于-78℃下搅拌。15分钟后依次加入三丁基-(3-甲基-2-丁烯基)-锡(2.31g,6.40mmol)和高氯酸银(1.76g,8.50mmol)。5小时后加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，过滤，滤液用二氯甲烷(100ml×2)和水(150ml)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝20:1)，得到橙黄色油状物式(ⅱ)化合物(r＝h)(1.83g,90％)；1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.33(s,1h),7.24(d,j＝7.0hz,1h),7.16(d,j＝7.5hz,1h),7.05(dd,j＝7.5,7.0hz,1h),6.16(s,1h),5.86(dd,j＝17.5,10.5hz,1h),5.08(d,j＝10.5hz,1h),5.00(d,j＝17.5hz,1h),3.80(dd,j＝10.5,6.5hz,1h),3.71(s,3h),2.38(dd,j＝12.5,6.5hz,1h),2.31–2.24(m,1h),1.55(s,9h),1.42(s,9h),1.02(s,3h),0.94(s,3h)；13cnmr(125mhz,cdcl3)δ173.2,150.9,144.5,132.4,129.3,125.5,120.4,117.4,114.5,111.3,82.2,63.8,62.4,52.7,41.9,39.3,35.8,27.3,23.9,22.8,14.2；hresimsm/z487.2803[m+h]+,calcdforc27h39n2o6,487.2803.
步骤1的反应流程如下：
2、式(ⅲ)化合物(r＝h)的合成
100ml圆底烧瓶中称取式(ⅱ)化合物(r＝h)(1.26g,2.59mmol)，抽真空后用氮气保护，加入乙腈(35ml)溶解，0℃下搅拌。缓慢滴加tmsi(1.8ml,12.58mmol)，0℃下搅拌1小时。之后在缓慢滴加dipea(2.6ml,15.54mmol)，室温下搅拌过夜。蒸干溶剂后用乙酸乙酯(50ml×2)和水(100ml)萃取，合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝3:1)，得到橙黄色油状物式(ⅲ)化合物(r＝h)(653mg,88％)；1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.13(d,j＝7.5hz,1h),7.05(dd,j＝8.0,7.5hz,1h),6.71(dd,j＝8.0,7.5hz,1h),6.56(d,j＝8.0hz,1h),6.00(dd,j＝17.0,10.5hz,1h),5.12–5.02(m,2h),5.01(s,1h),3.70(s,3h),3.62–3.54(m,2h),2.27(dd,j＝11.5,5.0hz,1h),2.15(t,j＝11.5hz,1h),1.11(s,3h),1.00(s,3h)；13cnmr(125mhz,cdcl3)δ174.1,151.0,144.5,130.8,128.4,125.3,118.3,113.7,108.9,79.9,65.7,59.8,52.1,41.4,41.0,23.3,22.9；hresimsm/z287.1750[m+h]+,calcdforc17h23n2o2,287.1754.
步骤2的反应流程如下：
3、式(ⅳ)化合物(r＝h)的合成
50ml圆底烧瓶中称取式(ⅲ)化合物(r＝h)(550mg,1.92mmol)和s-2-羟基-4-甲基戊酸(305mg,2.31mmol)，抽真空，加氮气保护。用dmf(10ml)溶解后0℃下搅拌10分钟，再称取hatu(1.02g,2.69mmol)和hoat(8mg,0.06mmol)加入反应中。之后滴加dipea(1.9ml,11.54mmol)。80℃加热14小时。蒸干溶剂后用二氯甲烷(50ml×2)和水(100ml)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝7:1)，得到橙黄色油状物式(ⅳ)化合物(r＝h)(368mg,52％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.16(d,j＝7.6hz,1h),7.11(td,j＝7.6,1.2hz,1h),6.77(td,j＝7.2,2.0hz,1h),6.58(d,j＝7.6hz,1h),5.97(dd,j＝17.2,10.8hz,1h),5.49(s,1h),5.16–5.05(m,3h),4.69(dd,j＝9.6,2.4hz,1h),4.06(dd,j＝10.0,7.2hz,1h),2.66–2.53(m,2h),1.97–1.88(m,2h),1.79(t,j＝9.6hz,1h),1.12(s,3h),1.00(s,3h),0.97(d,j＝6.4hz,3h),0.90(d,j＝6.4hz,3h)；13cnmr(125mhz,cdcl3)δ168.9,165.9,149.6,143.2,129.1,128.6,124.9,119.1,114.9,109.6,77.8,77.6,61.8,57.6,40.8,37.8,36.0,23.9,23.3,22.8,22.5,21.2；hresimsm/z369.2174[m+h]+,calcdforc22h29n2o3,369.2173.
步骤3的反应流程如下：
4、式(ⅴ)化合物(r＝h)的合成，即天然产物javanicuninea
50ml圆底烧瓶中称取式(ⅳ)化合物(r＝h)(295mg,0.80mmol)，依次加入dipea(0.4ml,2.40mmol)和醋酸酐(5ml,52.89mmol)，60℃加热12小时。蒸干溶剂，用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)和二氯甲烷(50ml×2)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝6:1)，得到淡黄色固体式(ⅴ)化合物(r＝h)，即javanicuninesa(249mg,76％,总收率为22％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.99(s,1h),7.36–7.31(m,1h),7.29(d,j＝7.6hz,1h),7.16(dd,j＝9.6,5.6hz,1h),5.92(s,1h),5.79(dd,j＝17.2,10.8hz,1h),5.14(dd,j＝14.0,10.8hz,2h),4.69–4.63(m,1h),4.00(dd,j＝10.8,6.4hz,1h),2.70(dd,j＝12.8,6.0hz,1h),2.63(s,3h),2.53(dd,j＝12.8,10.8hz,1h),1.96–1.87(m,2h),1.79(t,j＝10.0hz,1h),1.16(s,3h),0.97(s,3h),0.94(d,j＝6.0hz,3h),0.89(d,j＝6.0hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.8,168.5,165.2,142.9,142.8,131.7,129.4,124.7,124.3,119.7,114.9,79.5,77.3,60.9,57.7,40.4,37.8,35.2,23.9,23.5,23.3,23.0,22.4,21.1；hresimsm/z411.2279[m+h]+,calcdforc24h31n2o4,411.2278.
步骤4的反应流程如下：
实施例2天然产物javanicunineb的合成
式(vi)化合物(r＝h)的合成
5、化合物javanicuninesb的合成
取25ml圆底烧瓶，放入搅拌子，抽真空，加氮气保护。加入无水thf(4ml)后-78℃预冷，再抽取khmds(1mol/linthf，0.17ml)加入其中。另取圆底烧瓶称取式(ⅴ)化合物(r＝h)，即javanicuninesa(43mg,0.11mmol)，塞紧橡胶塞后抽真空。用无水thf(4ml)溶解后逐滴加入反应中，-78℃搅拌20分钟。再另用圆底烧瓶称取davis氧化剂(43mg,0.17mmol)，抽真空后用无水thf(4ml)溶解，-78℃预冷后迅速加入反应体系中。2小时后加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(50ml×2)和水(100ml)萃取，合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝5:1)，得到白色固体式(ⅵ)化合物(r＝h)，即javanicuninesb(23mg,50％,总收率为11％)；1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.09(s,1h),7.44(dd,j＝8.0,7.5hz,1h),7.39(d,j＝7.5hz,1h),7.24(dd,j＝8.0,7.5hz,1h),5.94(s,1h),5.76(dt,j＝22.5,14.0hz,1h),5.16(dd,j＝22.5,14.0hz,2h),5.02(d,j＝9.5hz,1h),2.96(d,j＝14.0hz,1h),2.71(d,j＝14.0hz,1h),2.63(s,3h),2.07(d,j＝6.5hz,1h),1.96–1.88(m,2h),1.78(t,j＝10.0hz,1h),1.15(s,3h),0.98(s,3h),0.96(d,j＝5.5hz,3h),0.91(d,j＝5.5hz,3h)；13cnmr(125mhz,cdcl3)δ169.9,167.2,165.3,147.2,142.5,142.1,130.0,125.0,124.5,120.7,115.3,87.4,80.5,42.0,40.4,37.6,23.9,23.5,23.3,22.9,22.3,21.2；hresimsm/z427.2225[m+h]+,calcdforc24h31n2o5,427.2227.
步骤5的反应流程如下：
实施例3天然产物9-deoxy-pf1233b的合成
6、式(ⅷ)化合物(r1＝h,r2＝h)的合成
50ml圆底烧瓶中称取式(ⅶ)化合物(r1＝h,r2＝h)(440mg,1.54mmol)和(s)-(-)-3-苯乳酸(261mg,1.57mmol)，抽真空，加氮气保护。加入dmf(10ml)溶解后0℃下搅拌10分钟，再分别称取hatu(760mg,2.00mmol)和hoat(10mg,0.08mmol)加入反应体系中。之后滴加dipea(1.5ml,9.23mmol)。80℃加热3小时。蒸干溶剂后用二氯甲烷(50ml×2)和水(100ml)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝5:1)，得到淡黄色油状物式(ⅷ)化合物(r1＝h,r2＝h)(421mg,63％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12(s,1h),7.52(d,j＝7.2hz,1h),7.30(dd,j＝6.8,1.3hz,1h),7.27–7.20(m,2h),7.20–7.09(m,4h),6.17(dd,j＝17.2,10.4hz,1h),5.27–5.18(m,2h),4.97–4.86(m,1h),4.16(dt,j＝8.4,4.0hz,1h),3.62(s,3h),3.36(dd,j＝14.4,6.8hz,1h),3.20(dd,j＝14.4,8.8hz,1h),2.93(dd,j＝14.0,4.0hz,1h),2.72(d,j＝4.8hz,1h),2.29(dd,j＝14.0,8.8hz,1h),1.61(s,3h),1.59(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ172.9,172.6,145.8,140.6,137.0,134.2,129.9,129.5,128.5,126.8,121.6,119.5,118.2,112.3,110.6,105.4,72.8,53.1,52.4,40.2,39.1,28.1,27.7,27.6；hresimsm/z435.2272[m+h]+,calcdforc26h31n2o4,435.2278.
步骤6的反应流程如下：
7、式(ⅸ)化合物(r1＝h,r2＝h)的合成
250ml圆底烧瓶中称取式(ⅷ)化合物(r＝h)(460mg,1.06mmol)和ptsa(242mg,1.27mmol)，放入搅拌子，用甲苯(50ml)溶解后，120℃加热回流1.5小时。底物反应完全后，立即用水(100ml)和二氯甲烷(60ml×2)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝7:1)，得到橙黄色晶体式(ⅸ)化合物(r1＝h,r2＝h)(3.89g,65％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.10(s,1h),7.36(brs,4h),7.27(dd,j＝8.8,7.6hz,3h),7.16(dd,j＝7.6,7.2hz,1h),7.10(dd,j＝7.6,7.2hz,1h),6.05(dd,j＝17.2,10.4hz,1h),5.70(s,1h),5.13(dd,j＝14.0,8.4hz,2h),5.06–5.01(m,1h),4.36(dd,j＝11.2,2.8hz,1h),3.50(dd,j＝14.0,3.6hz,1h),3.39(dd,j＝14.0,3.6hz,1h),3.27(dd,j＝14.4,6.0hz,1h),2.62(dd,j＝14.4,11.2hz,1h),1.48(s,6h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ166.8,165.6,145.4,141.5,135.2,134.2,130.4,128.9,128.8,127.5,122.2,120.3,117.9,112.9,110.9,103.9,78.9,54.0,38.9,37.5,28.5,27.8,27.8；hresimsm/z401.1874[m-h]-,calcdforc25h25n2o3,401.1871.
步骤7的反应流程如下：
8、式(ⅹ)化合物(r1＝h,r2＝h)的合成，即天然产物9-deoxy-pf1233b
50ml圆底烧瓶中称取式(ⅸ)化合物(r1＝h,r2＝h)(29mg,0.07mmol)，放入搅拌子，抽真空，加氩气保护。加入无水thf(5ml)溶解，置于-78℃搅拌10分钟。加入在-78℃中预冷的dmdo(自制0.08mmol/mlinacetone,2ml)，tlc检测，原料反应完全后加入硫代硫酸钠水溶液淬灭反应，蒸干溶剂后用二氯甲烷(25ml×2)和水(50ml)萃取，合并浓缩有机层，加二氯甲烷(5ml)溶解后室温下搅拌过夜。蒸干溶剂，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝9:1)，得到无色油状物式(ⅹ)化合物(r1＝h,r2＝h)，即9-deoxy-pf1233b(21mg,70％,总收率为12％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.29(d,j＝7.6hz,1h),7.25–7.14(m,5h),6.83(dd,j＝8.0,7.6hz,1h),6.68(d,j＝8.0hz,1h),6.37(dd,j＝17.6,10.8hz,1h),6.29(s,1h),5.24–5.09(m,2h),4.77(dd,j＝8.8,3.6hz,1h),4.34(dd,j＝10.4,2.0hz,1h),3.31(ddd,j＝16.0,14.4,2.8hz,2h),2.86(ddd,j＝18.4,14.4,9.6hz,2h),1.38(s,3h),1.36(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ167.4,166.1,147.7,143.9,136.1,130.9,129.5,129.4,128.5,126.9,124.7,120.6,113.8,111.0,94.7,87.9,78.5,57.1,44.9,36.8,34.8,25.8,23.3；hresimsm/z419.1964[m+h]+,calcdforc25h27n2o4,419.1965.
步骤8的反应流程如下：
9、式(ⅺ)化合物(r1＝h,r2＝h)的合成
50ml圆底烧瓶中称取式(ⅸ)化合物(r1＝h,r2＝h)(30mg,0.07mmol)，放入搅拌子，抽真空，加氩气保护。加入无水thf(5ml)溶解，置于-78℃搅拌10分钟。加入在-78℃中预冷的dmdo(自制0.08mmol/mlinacetone,3ml)，-78℃搅拌过夜。加入硫代硫酸钠水溶液淬灭反应，蒸干溶剂后用二氯甲烷(25ml×2)和水(50ml)萃取，合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝9:1)，得到无色油状物式(ⅺ)化合物(r1＝h,r2＝h)(21mg,66％)；1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.35–7.25(m,5h),7.24–7.18(m,2h),6.85(dd,j＝8.0,7.5hz,1h),6.75(d,j＝8.0hz,1h),6.24(s,1h),6.22(dd,j＝14.5,6.5hz,1h),5.05(dd,j＝14.5,6.5hz,2h),4.72(dd,j＝7.5,3.5hz,1h),3.77(dd,j＝11.0,7.5hz,1h),3.42(dd,j＝15.0,3.5hz,1h),3.11(dd,j＝15.0,7.5hz,1h),2.85(dd,j＝13.0,11.0hz,1h),2.70(dd,j＝13.0,7.5hz,1h),2.32(s,1h),1.17(s,6h)；13cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.1,167.6,148.7,143.6,135.8,131.1,129.9,129.5,128.4,127.1,123.7,120.3,113.9,111.4,91.9,88.8,80.4,56.9,44.8,35.9,35.5,26.4,22.9；hresimsm/z419.1969[m+na]+,calcdforc25h27n2o4,419.1965.
步骤9的反应流程如下：
实施例4天然产物9-deoxy-pf1233a的合成
式(ⅻ)化合物(r1＝h,r2＝h)的合成，
10、化合物9-deoxy-pf1233a的合成
25ml圆底烧瓶中称取式(ⅹ)化合物(r1＝h,r2＝h)，即9-deoxy-pf1233b(15mg,0.04mmol)和dmap(5mg,0.04mmol)，依次加入吡啶(2.5ml,27.30mmol)和醋酸酐(0.15ml,1.59mmol)，80℃下加热12小时。蒸干溶剂，用碳酸氢钠水溶液(50ml)和二氯甲烷(25ml×2)萃取。合并浓缩有机层，用硅胶柱进行纯化(pe:etoac＝9:1)，得到淡黄色油状物式(ⅻ)化合物(r1＝h,r2＝h)，即9-deoxy-pf1233a(11mg,68％,总收率为8％)；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.62(d,j＝7.6hz,1h),7.25–7.11(m,6h),6.78(dd,j＝8.0,7.6hz,1h),6.67(d,j＝8.0hz,1h),6.32(dd,j＝8.0,7.6hz,1h),6.28(d,j＝12.0hz,1h),5.14(dd,j＝20.0,12.0hz,2h),4.74(dd,j＝8.8,3.2hz,1h),4.37(d,j＝9.6hz,1h),4.20(d,j＝14.0hz,1h),3.32(dd,j＝14.0,3.2hz,1h),2.83(ddd,j＝24.0,14.0,9.6hz,2h),1.99(s,3h),1.43(s,3h),1.36(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ168.7,167.0,166.0,148.6,144.0,136.0,131.2,129.5,128.6,128.5,126.9,125.6,120.4,112.8,110.9,98.3,91.1,78.4,58.4,45.3,34.9,34.6,25.5,24.9,21.6；hresimsm/z461.2077[m+h]+,calcdforc27h29n2o5,461.2071.
步骤10的反应流程如下：
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。