本发明属于药物化学、药物分析、药物制剂和药物活性测试等领域的结合，涉及一种化合物、制备方法以及其在治疗疼痛中的应用，所述疼痛为术后痛、慢性痛、癌性疼痛、癌症化疗引起的疼痛、神经痛、伤害感受性痛、炎性痛。
背景技术：
疼痛是机体受到伤害性刺激所引起的一种不愉快感觉和情感体验。疼痛已被列为继呼吸、脉搏、血压、体温之后的第五大生命体征。目前大部分医院已经单独设立疼痛科以缓解病人疾苦，疼痛也是神经内科重要项目。脂肪酰胺水解酶(fattyacidamidehydrolase，faah)是一种内膜酰胺信号家族蛋白酶，是生物体内许多具有生物活性的脂肪酰胺信使脂质分子(fattyacidamides，faas)的主要催化水解代谢酶。研究表明faah参与了多种信号通路的调控，与疼痛、焦虑、睡眠紊乱等多种疾病的发生发展具有密切的关系。当前基于faah信号通路治疗疼痛已成为一个研究热点。faah的催化中心是ser241、ser217和lysl42构成的催化三联体，并含有多个通道及腔室，包括膜接入通道(membraneaccesschannel，mac)，将活性部位与酶定位膜表面相连；细胞质接入通道，允许亲水性物质退出活性中心(cytosolicaccesschannel)；结合脂肪酸链的疏水区域称为脂肪酸链结合区(acylchain-bindingpocket，abp)，可调节共晶体抑制剂的脂肪酸链。尽管目前还未有faah抑制剂上市，但已有多个药物处于临床及临床前生物活性测试阶段。据thomsonreuterscortellis数据库统计，目前有多个药物处于研究阶段。技术实现要素：本发明的目的之一在于设计并提供一种新型的化合物，其结构如式i所示其中，r1、r2、r3各自独立的选自选自-h、-f或者-no2。进一步地，新型的化合物式i具体结构选自：本发明的另一目的在于提供一种新型的化合物式i的合成路线：进一步地，具体的合成步骤为：1)在合适的溶剂中，化合物1与2,2-二甲氧基乙烷-1-胺发生酰胺化反应，生成化合物2；2)化合物2中的羟基与溴甲基苯发生亲核取代反应生成醚也即化合物3；3)化合物3在一定浓度的盐酸的作用下发生水解，生成化合物4；4)化合物4发生环化反应生成化合物5；5)化合物5再与相应的胺发生反应生成对应的最终产物。进一步地，所述步骤1)中溶剂可以是二氯甲烷，1,2-二氯乙烷，乙睛，n,n-二甲基甲酰胺(dmf)，，四氢呋喃，乙酸乙酯，甲苯，二甲苯或者其他合适的溶剂，优选四氢呋喃。进一步地，所述步骤3)中盐酸浓度的选择范围是1mol/l～5mol/l，优选2mol/l。本发明的另一目的在于提供一种化合物式i或其盐在预防、治疗或辅助治疗哺乳动物和人中脂肪酰胺水解酶相关疾病中的应用，所述疾病如疼痛，包括急性的和慢性的，如术后痛、慢性痛、癌性疼痛、癌症化疗引起的疼痛、神经痛、伤害感受性痛、炎性痛、背痛、由如以下各种来源的疾病引起的疼痛：糖尿病性神经病、包括人类免疫缺陷病毒的嗜神经型病毒性疾病、带状疱疹引起的疼痛如后疱疹神经痛；多神经病、神经毒性、机械神经损伤、腕管综合症、免疫学机理如多发性硬化症。本发明的另一目的在于一种组合物，包括所述化合物式i及药学上可接受的辅料。进一步地，所述组合物中所述的脂肪酰胺水解酶抑制剂作为唯一活性成分。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。具体实施方式实施例一：2-(8-(苄氧基)-7-(3-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑的合成1、7-溴-n-(2,2-二甲氧基乙基)-8-羟基喹啉-2-甲酰胺的合成：在室温下，向7-溴-8-羟基喹啉-2-羧酸(化合物1)(77.74g，290mmol)在乙酸乙酯(200ml)的悬浮液中加入亚硫酰氯(41.40g，348mmol)，并加热回流3小时。将反应混合物冷却至室温，用四氢呋喃(50ml)稀释，然后在室温下逐滴加入2,2-二甲氧基乙烷-1-胺(42.69g，406mmol)以及三乙胺(110ml，789mmol)的四氢呋喃(250ml)溶液。然后在40℃下搅拌反应混合物1小时，冷却至室温，加入300ml水并用乙酸乙酯进行萃取。有机层依次用2mol/l盐酸，10％碳酸钾水溶液和水进行洗涤。将溶剂减压浓缩至干，得到89.20g的粗产物7-溴-n-(2,2-二甲氧基乙基)-8-羟基喹啉-2-甲酰胺(化合物2)，产率86.6％，无需纯化，直接用于下一步合成反应中。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.32(d,2h),3.40(s,6h),4.70(t,1h),5.43(s,1h),6.62(s,1h),7.44(d,1h),7.60(d,1h),7.71(d,1h),8.38(d,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:46.79,55.35,102.99,105.60,117.73,122.31,129.02,130.45,132.51,133.38,142.91,151.85,166.77.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:356[m+h].2、8-(苄氧基)-7-溴-n-(2,2-二甲氧基乙基)喹啉-2-甲酰胺的合成：将化合物2(89.20g，251.13mmol)，碳酸钾(35.93g，260.0mmol)，碘化钾(4.65g，28.00mmol)，溴甲基苯(45.84g，268.00mmol)溶解在n,n-二甲基甲酰胺(50.00ml)中，然后将反应混合物在90℃下搅拌6小时。在冰水浴条件下将反应混合物冷却，向反应混合物中依次加入2mol/l盐酸(23.00ml)，meoh(25.00ml)，水(25.00ml)。过滤收集得到的结晶固体，得到101.77g的白色结晶8-(苄氧基)-7-溴-n-(2,2-二甲氧基乙基)喹啉-2-甲酰胺，产率为91.0％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.30(d,2h),3.38(s,6h),4.97(t,1h),5.13(s,2h),6.93(s,1h),7.24-7.46(m,6h),7.56(d,1h),7.64(d,1h),8.21(d,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:46.79,55.35,74.56,102.99,112.40,120.61,121.87,128.16,128.17,128.19,129.01,130.42,133.22,137.56,139.87,143.56,152.39,166.77.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:446[m+h].3、8-(苄氧基)-7-溴-n-(2-氧代乙基)喹啉-2-甲酰胺的合成：将化合物3(101.77g，228.54mmol)溶于四氢呋喃(120ml)溶液中，然后向此溶液中加入2mol/l的盐酸(116ml，231mmol)，并在50℃下搅拌3小时。然后将反应混合物冷却至室温，再加入水(90ml)，用乙酸乙酯萃取，然后用水洗涤有机层两次。减压浓缩溶剂后，用二异丙醚打浆，得到72.81g的白色晶体8-(苄氧基)-7-溴-n-(2-氧代乙基)喹啉-2-甲酰胺(化合物4)，产率为79.8％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.88(d,1h),4.13(d,1h),5.16(s,2h),6.10(s,1h),7.28-7.50(m,6h),7.60(d,1h),7.68(d,1h),8.25(d,1h),9.72(t,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:42.75,74.56,112.40,120.61,121.87,128.16,128.17,128.19,129.01,130.42,133.22,137.56,139.87,143.56,152.39,165.70,194.28.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:400[m+h].4、2-(8-(苄氧基)-7-溴喹啉-2-基)恶唑的合成：在室温下，向溶解在乙腈(60ml)中的化合物4(72.81g，182.37mmol)和六氯乙烷(86.34g，364.74mmol)的悬浮液中加入三苯基膦(95.67g，364.74mmol)，然后搅拌25分钟，加入三乙胺(50.70ml，364.74mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌3小时，并在50℃下再搅拌3小时，然后再加热回流8小时。将反应混合物冷却至室温后，加入水(50ml)，并用乙酸乙酯萃取。将有机层依次用盐水和水洗涤。减压浓缩溶剂后，用甲醇/水进行重结晶，得到59.10g的白色结晶2-(8-(苄氧基)-7-溴喹啉-2-基)恶唑(化合物5)，产率为85.0％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:5.16(s,2h),7.15(d,1h),7.28-7.50(m,7h),7.60(d,1h),7.65(d,1h),7.99(dd,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:74.56,112.40,120.61,120.92,128.16,128.19,129.01,129.98,130.38,130.42,137.21,137.56,139.05,140.05,143.46,152.39,157.98.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:382[m+h].5、2-(8-(苄氧基)-7-(3-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑的合成：在氩气气氛下，向3-甲氧基甲基-吡咯烷(52mmol)的甲苯悬浮液中加入乙酸钯(2.40g)、对甲苯磺酸钠盐(3.90g)、叔戊醇钠(11.8g)的甲苯(37ml)溶液、二金刚烷丁基膦(7.70g)，并在室温下搅拌1小时。在反应悬浮液中，冰水浴条件下加入化合物5(19.10g，50.10mmol)和甲苯(33ml)，然后加热回流4小时。反应完成后将反应混合物冷却至室温，加入2mol/l盐酸(37.5ml)。过滤收集形成的沉淀，得到18.11g的浅棕色晶体2-(8-(苄氧基)-7-(3-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑，产率87％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.42(m,1h),1.74(m,1h),2.03(m,1h),2.89(q,1h),3.12(m,1h),3.31-3.51(m,5h),3.74-3.81(m,2h),5.16(s,2h),6.78(dd,1h),7.15(d,1h),7.27-7.48(m,6h),7.60(d,1h),7.85(dd,1h),8.10(d,1h).13c-nmr(125mhz,cdcl3)δ:29.98,42.33,52.92,56.88,58.75,73.92,74.56,113.39,119.16,123.94,128.16,128.19,129.01,130.13,130.38,136.38,137.21,137.56,138.02,138.52,144,146.4,157.98.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:416[m+h].实施例二：2-(8-(苄氧基)-7-(2-氟-4-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑的合成在氩气气氛下，向2-氟-4-甲氧基甲基-吡咯烷(52mmol)的甲苯悬浮液中加入乙酸钯(2.40g)、对甲苯磺酸钠盐(3.90g)、叔戊醇钠(11.8g)的甲苯(37ml)溶液、二金刚烷丁基膦(7.70g)，并在室温下搅拌1小时。在反应悬浮液中，冰水浴条件下加入化合物5(19.10g，50.10mmol)和甲苯(33ml)，然后加热回流4小时。反应完成后将反应混合物冷却至室温，加入2mol/l盐酸(37.5ml)。过滤收集形成的沉淀，得到18.68g的浅棕色晶体2-(8-(苄氧基)-7-(2-氟-4-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑，产率86％。lc-ms(esi,pos,ion)m/z:434[m+h].实施例三：2-(8-(苄氧基)-7-(2-硝基-4-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑的合成在氩气气氛下，向2-硝基-4-甲氧基甲基-吡咯烷(52mmol)的甲苯悬浮液中加入乙酸钯(2.40g)、对甲苯磺酸钠盐(3.90g)、叔戊醇钠(11.8g)的甲苯(37ml)溶液、二金刚烷丁基膦(7.70g)，并在室温下搅拌1小时。在反应悬浮液中，冰水浴条件下加入化合物5(19.10g，50.10mmol)和甲苯(33ml)，然后加热回流4小时。反应完成后将反应混合物冷却至室温，加入2mol/l盐酸(37.5ml)。过滤收集形成的沉淀，得到19.15g的浅棕色晶体2-(8-(苄氧基)-7-(2-硝基-4-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑，产率83％。lc-ms(esi,pos,ion)m/z:461[m+h].实施例四：2-(8-(苄氧基)-7-(2-硝基-3-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑的合成在氩气气氛下，向2-硝基-3-甲氧基甲基-吡咯烷(52mmol)的甲苯悬浮液中加入乙酸钯(2.40g)、对甲苯磺酸钠盐(3.90g)、叔戊醇钠(11.8g)的甲苯(37ml)溶液、二金刚烷丁基膦(7.70g)，并在室温下搅拌1小时。在反应悬浮液中，冰水浴条件下加入化合物5(19.10g，50.10mmol)和甲苯(33ml)，然后加热回流4小时。反应完成后将反应混合物冷却至室温，加入2mol/l盐酸(37.5ml)。过滤收集形成的沉淀，得到18.23g的浅棕色晶体2-(8-(苄氧基)-7-(2-硝基-3-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)喹啉-2-基)恶唑，产率79％。lc-ms(esi,pos,ion)m/z:461[m+h]。试验例：人和大鼠脂肪酰胺水解酶抑制活性本发明化合物对人和大鼠脂肪酰胺水解酶(faah)抑制活性，试验方法同cn103958473b，除非另有说明，否则所有试剂购自sigma。简述如下：材料和试剂：用于分析的人和大鼠脂肪酰胺水解酶(faah)基因已由patricelli等(biochemistry.1998，37(43)，15177-87)描述。跨膜域删除的脂肪酰胺水解酶(faah)基因克隆至pet15b(novagen，#69661)(人faah)/pet28a(novagen，#69864-3)(大鼠faah基因)质粒中并在大肠杆菌(ecoli)bl21de3中表达。pgr07质粒(takarabioinc，日本)中的伴侣蛋白groel-groes与脂肪酰胺水解酶(faah)共表达，从而改善大肠杆菌中表达的蛋白质的溶解度。如mileni等(procnatlacadsciusa.2008，105(35)，12820-4)中所记载，来表达并富集蛋白质。简言之，室温下用阿拉伯糖(2mm)和异丙基β-d-1-硫代半乳糖苷(iptg)(1mm)诱导lb培养基(luriabroth)(2l)中的细菌培养物20h。将培养物在1200×g下离心10min，并将细胞团(cellpellet)重悬在100ml含20mmnapi(ph7.4)、100mmnacl、核酸酶(500u)、抑肽酶(1μg/ml)和亮抑酶肽(1μg/ml)的缓冲液中。通过声波法(amp20％、脉冲15s×15，冰上)裂解细胞，并通过5000×g下离心20min来除去细胞碎片。悬浮液经100,000×g下超速离心1h富集，并将细胞团重悬在16ml含20mmnapi(ph7.8)、500mmnacl、1％曲拉通x-100的缓冲液中。悬浮的细胞提取物在100,000×g下进行超速离心1h，并将富集的悬浮液用于体外分析。所有蛋白质提取步骤在冰上或4℃下进行。体外分析：化合物的生物活性使用基于荧光的分析来评价，从而定量花生四烯基7-氨基、4甲基香豆素酰胺(aamca)、脂肪酰胺水解酶(faah)的荧光底物的水解(analbiochem.2005、343(1)：143-51)。在96孔黑色聚苯乙烯板(greinerbio-one，germany)中以200μl体积进行分析。各反应由含50mmhepes、1mmedta和0.1％bsa(ph7.4)的分析缓冲液中的人脂肪酰胺水解酶(faah)蛋白和10μmaamca构成。在dmso中用2μl不同浓度的抑制剂(dmso的终浓度1％)在振荡的同时温育反应1min并在50min内监控动力学模式中荧光的增加。在激发波长355nm下和在460nm发射下，使用flexstationiii酶标仪(moleculardevices，sunnyvale，ca)测量荧光的增加。使用作为抑制剂浓度的函数的反应速率来测定抑制剂的ic50。使用graphpadprism(graphpadsoftwareinc.，sandiego，ca)分析数据。如上所述利用大鼠脂肪酰胺水解酶(faah)蛋白和10μmaamca底物评价化合物对大鼠脂肪酰胺水解酶(faah)的活性。表1本发明化合物对人和大鼠faah抑制活性。hfaahic50(nm)rfaahic50(nm)实施例一3106实施例二4113实施例三2122实施例四2131ol-1351283结果表明，经过测试的化合物对于人和大鼠脂肪酰胺水解酶具有很好地抑制活性，阳性对照ol-135对人和大鼠脂肪酰胺水解酶的抑制活性ic50值分别为12nm和83nm。实施例一～实施例四对hfaah的ic50值在2nm至4nm范围内，对rfaah的ic50值在106nm至131nm范围内，对人脂肪酰胺水解酶具有选择性抑制活性。说明本发明的化合物可以作为脂肪酰胺水解酶抑制剂进行后续研发，研发过程中重点关注的疾病如疼痛，包括急性的和慢性的，如术后痛、慢性痛、癌性疼痛、癌症化疗引起的疼痛、神经痛、伤害感受性痛、炎性痛、背痛、由如以下各种来源的疾病引起的疼痛：糖尿病性神经病、包括人类免疫缺陷病毒的嗜神经型病毒性疾病、带状疱疹引起的疼痛如后疱疹神经痛；多神经病、神经毒性、机械神经损伤、腕管综合症、免疫学机理如多发性硬化症。当前第1页12