多靶点编辑载体及其构建方法和应用与流程

文档序号:16501894发布日期:2019-01-05 08:48阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了一种多靶点编辑载体,包括Cpfl蛋白表达元件和至少两个sgRNA转录元件。多靶点编辑载体通过共表达Cpfl蛋白与多个sgRNA,实现了对基因组不同靶位点的同时编辑,提高了基因编辑的效率,降低了基因编辑的脱靶效应,提高了基因编辑的精确度。本发明还公开了一种上述多靶点编辑载体的构建方法,通过两步Golden Gate克隆将多个sgRNA顺次串联至到带有Cpfl蛋白表达元件和荧光表达元件的第二载体,得到上述的多靶点编辑载体。上述构建方法步骤简单,简化了实验设计过程,降低了基因编辑的成本。本发明还公开了包括上述多靶位点载体的试剂盒,能够用于高效率和低脱靶的多靶点的共同编辑。

技术研发人员:栗凤鹏;曹青;吴昕;廖国娟
受保护的技术使用者:苏州金唯智生物科技有限公司
技术研发日:2018.08.29
技术公布日:2019.01.04
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