柑橘籽中联合提取柑橘籽油和柠檬苦素类化合物的方法与流程

本发明属于从植物中提取化合物的技术领域，涉及一种从柑橘籽中联合提取柑橘籽油和柠檬苦素类化合物的方法。

背景技术

柑橘籽为芸香科柑橘属植物的种子，一般占柑橘果实重量的0.1％～4.0％，在我国的柑橘加工产业中每年会产生大约4万t的柑橘籽废弃物。但是柑橘籽并非没有利用价值，它不仅富含油脂(38.86％～42.59％)、蛋白质(28.56％～36.20％)等，还含有柠檬苦素类化合物、黄酮等生物活性成分，尤其是柠檬苦素类化合物在抗炎、镇痛、调节体内胆固醇水平、防止动脉粥养化及对肿瘤细胞的抑制作用，使柑橘籽在功能食品和药品原料应用方面具有广阔前景。

柑橘籽油以脂肪酸为主，是从柑橘籽中提取的油脂成分，含有大量不饱和脂肪酸如：油酸、亚油酸和亚麻酸，及饱和脂肪酸如硬脂酸、棕榈酸等。国内外学者通过对不同品种柑橘籽油的理化性质进行研究后发现其酸值(koh)均低于4mg/g，过氧化值小于20meq/kg，碘值(i)为80～120g/100g，基本符合食用植物油的理化指标，是理想的食用油料资源。

但是，目前柑橘籽绝大多数被柑橘加工企业废弃，只有极少数用作中药原料或被当饲料收购，而柑橘籽油的利用和柠檬苦素提取之间缺乏技术偶联是造成柑橘籽加工业附加值不高、经济效益低的主要原因。即如果柑橘籽仅用于榨油，则损失了其中的柠檬苦素类化合物；若柑橘籽仅用于提取柠檬苦素，则所含天然油脂必将浪费。

造成这一现状的工艺缺陷为：

1、通过物理压榨法制取的柑橘籽油因含有一定量的柠檬苦素类化合物而具有强烈的苦味，根本无法食用，商业价值难以体现。且含有大量柠檬苦素的柑橘籽油渣只能被当作垃圾抛弃。

2、而采用有机溶剂剂法提取柠檬苦素之前通常都将干燥的柑橘籽粉碎后再使用石油醚、丙酮等具有毒性的有机溶剂抽提脱脂，柑橘籽所含油脂几乎失去收集和利用的价值。

技术实现要素：

本发明针对现有技术的不足，提供了一种柑橘籽中联合提取柑橘籽油和柠檬苦素类化合物的方法，该方法所制备的柑橘籽油中柠檬苦素类化合物含量较低，苦味不明显，且主要柠檬苦素类化合物——柠檬苦素和诺米林得到初步分离，既不影响柑橘籽油的出油率，还能改善油品口感，做到了资源的充分利用。

为解决上述技术问题，本发明的目的通过下述技术方案得以实现：

柑橘籽中联合提取柑橘籽油和柠檬苦素类化合物的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)压榨分离：将柑橘籽投入螺旋式压榨机中充分压榨，分别收集柑橘籽油粗品和柑橘籽渣；

(2)低苦味柑橘籽油的提取：将步骤(1)中的柑橘籽油粗品使用低浓度的乙醇溶液进行第一次醇提，低温静置待油、水两相分离即收集油层为第一次粗提油，水层为第一次醇提液；将第一次粗提油使用高浓度的乙醇溶液进行第二次醇提，低温静置待油、水两相分离即收集油层为低苦味柑橘籽油，水层为第二次醇提液；

(3)醇提柑橘籽渣：将步骤(1)中的柑橘籽渣使用低浓度的乙醇溶液进行醇提，过滤，分别收集滤液为柑橘籽渣醇提液，滤渣为醇提渣；

(4)水提醇提渣：将步骤(3)中的醇提渣在高温高压条件下进行热水浸提，收集柑橘籽渣水提液；

(5)柠檬苦素和诺米林的提取：将步骤(2)中的第一次醇提液和步骤(3)中的柑橘籽渣醇提液合并，减压蒸干即为诺米林粗提物，将步骤(2)中的第二次醇提液和步骤(4)中的柑橘籽渣水提液合并，减压蒸干即为柠檬苦素粗提物。

上述步骤(1)中的充分压榨是通过两次或两次以上的压榨至无油渗出为止。

上述步骤(2)中的第一次醇提和步骤(3)中的醇提使用的低浓度乙醇溶液的浓度为10％～30％，步骤(2)中的第二次醇提使用的高浓度乙醇溶液的浓度为70％～90％。

上述步骤(2)中的第一次醇提和步骤(3)中的醇提所使用的醇提温度≥80℃，所述步骤(2)中的第二次醇提所使用的醇提温度≥60℃，且＜80℃。

上述步骤(2)中的第一次醇提、第二次醇提，步骤(3)中的柑橘籽渣醇提是在搅拌或震荡状态下进行的。

上述步骤(2)中低温静置的温度为0～8℃。

上述步骤(4)中热水浸提的浸提条件是：温度为180～200℃。压力≥2.5mpa。

上述步骤(5)中减压蒸干的压力范围为-0.05～-0.09mpa。

本发明和现有技术相比，具有如下有益效果:

1、本发明实现了柑橘籽油和柠檬苦素类化合物的联合提取，且提取率与单一提取相当，充分利用了柑橘籽天然资源，提高了柑橘籽经济价值。

2、本发明实现了柑橘籽油的苦味脱除与柠檬苦素类化合物提取的同步，降低了柑橘籽油中柠檬苦素类化合物的含量，提高了柑橘籽油的商品食用性，减少了柑橘籽油中柠檬苦素类化合物的浪费。

3、本发明利用柠檬苦素和诺米林两种单体化合物在不同浓度乙醇溶液中的分配差异，实现了柑橘籽中柠檬苦素和诺米林的梯度分离，避免了后续纯化工艺的复杂操作，提高了这两种化合物粗品的经济效益。

4、本发明采用高温高压热水和食品加工用助剂——乙醇为提取介质，提取剂无毒无害、廉价易得，提取过程中无有毒有害的污水产生，降低了对环境的影响，属环境友好型技术。且乙醇可通过蒸发回收反复利用，降低了提取溶剂的采购成本。

附图说明

图1是本发明的工艺流程图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或者改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

本发明实施例中使用的柑橘籽为瓯柑籽。

本发明实施例中使用的乙醇等其它原料和试剂均为市售购买。

本发明实施例中使用的高效液相色谱仪为agilent1200。

本发明实施例中柠檬苦素和诺米林的检测条件为流动相：乙腈/水(40/60)；流速：1.0ml/min；进样体积：10μl；柱温：30℃；检测波长：210nm；色谱柱：agilentc18柱(4.6mm×250mm，5μm)。

实施例1

(1)压榨分离：称取柑橘籽1000g，投入螺旋式榨油机重复压榨2遍以上，至无油渗出，分别收集柑橘籽油粗品279.05g，柑橘籽渣717.90g。

(2)低苦味柑橘籽油的提取：将柑橘籽油粗品中加入30％乙醇溶液2000ml，快速搅拌并加热至80℃保温提取30min后，置于4℃冷藏柜中静置分层。收集上层为第一次粗提油约310ml，下层为第一次醇提液约1890ml，备用。将第一次粗提油中加入70％乙醇溶液1200ml，快速搅拌并加热至60℃保温提取30min后，置于4℃冷藏柜中静置分层。收集油层约301ml，即为低苦味柑橘籽油。同时收集第二次醇提液1205ml，备用。

(3)醇提柑橘籽渣：将上述柑橘籽渣再加入30％乙醇溶液3500ml后开始加热至80℃保温提取60min，过滤收集柑橘籽渣醇提液3200ml，醇提渣855g，备用。

(4)水提醇提渣：将上述柑橘籽渣醇提渣装入孔径为200目的不锈钢丝网袋中，扎紧袋口放入压力罐中，注入沸水4000ml，加热至180℃，压力2.5mpa，保温保压提取10min后收集水提液3600ml，备用。

(5)诺米林的粗提：将上述1次醇提液1890ml与醇提液3200ml合并，置于压力-0.05mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得诺米林粗提物38.71g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为129.1mg/g，柠檬苦素37.7mg/g。

(6)柠檬苦素的粗提：将上述2次醇提液1205ml与水提液3600ml合并，置于压力-0.05mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得柠檬苦素粗提物53.28g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为27.5mg/g，柠檬苦素207.2mg/g。

实施例2

(1)压榨分离：称取柑橘籽1000g，投入螺旋式榨油机重复压榨2遍以上，至无油渗出，分别收集柑橘籽油粗品272.11g，柑橘籽渣719.07g。

(2)低苦味柑橘籽油的提取：将柑橘籽油粗品中加入20％乙醇溶液2000ml，快速搅拌并加热至85℃保温提取30min后，置于6℃冷藏柜中静置分层。收集上层为第一次粗提油约319ml，下层为第一次醇提液约1900ml，备用。将第一次粗提油中加入80％乙醇溶液1200ml，快速搅拌并加热至70℃保温提取30min后，置于6℃冷藏柜中静置分层。收集油层约298ml，即为低苦味柑橘籽油。同时收集第二次醇提液1210ml，备用。

(3)醇提柑橘籽渣：将上述柑橘籽渣再加入20％乙醇溶液3500ml后开始加热至85℃保温提取60min，过滤收集柑橘籽渣醇提液3150ml，醇提渣830g，备用。

(4)水提醇提渣：将上述柑橘籽渣醇提渣装入孔径为200目的不锈钢丝网袋中，扎紧袋口放入压力罐中，注入沸水4000ml，加热至190℃，压力2.8mpa，保温保压提取10min后收集水提液3500ml，备用。

(5)诺米林的粗提：将上述1次醇提液1900ml与醇提液3150ml合并，置于压力-0.07mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得诺米林粗提物33.37g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为132.6mg/g，柠檬苦素29.4mg/g。

(6)柠檬苦素的粗提：将上述2次醇提液1210ml与水提液3500ml合并，置于压力-0.07mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得柠檬苦素粗提物48.58g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为19.3mg/g，柠檬苦素250.9mg/g。

实施例3

(1)压榨分离：称取柑橘籽1000g，投入螺旋式榨油机重复压榨2遍以上，至无油渗出，分别收集柑橘籽油粗品250.50g，柑橘籽渣739.00g。

(2)低苦味柑橘籽油的提取：将柑橘籽油粗品中加入10％乙醇溶液2000ml，快速搅拌并加热至90℃保温提取30min后，置于8℃冷藏柜中静置分层。收集上层为第一次粗提油约275ml，下层为第一次醇提液约2000ml，备用。将第一次粗提油中加入90％乙醇溶液1200ml，快速搅拌并加热至65℃保温提取30min后，置于8℃冷藏柜中静置分层。收集油层约245ml，即为低苦味柑橘籽油。同时收集第二次醇提液1250ml，备用。

(3)醇提柑橘籽渣：将上述柑橘籽渣再加入10％乙醇溶液3500ml后开始加热至90℃保温提取60min，过滤收集柑橘籽渣醇提液3350ml，醇提渣900g，备用。

(4)水提醇提渣：将上述柑橘籽渣醇提渣装入孔径为200目的不锈钢丝网袋中，扎紧袋口放入压力罐中，注入沸水4000ml，加热至200℃，压力3mpa，保温保压提取10min后收集水提液3600ml，备用。

(5)诺米林的粗提：将上述1次醇提液2000ml与醇提液3350ml合并，置于压力-0.09mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得诺米林粗提物30.22g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为99.1mg/g，柠檬苦素23.7mg/g。

(6)柠檬苦素的粗提：将上述2次醇提液1250ml与水提液3600ml合并，置于压力-0.09mpa，温度70℃的旋转蒸发器中减压浓缩，得柠檬苦素粗提物48.91g。经高效液相色谱检测得诺米林含量为41.2mg/g，柠檬苦素200.2mg/g。