技术总结
本发明为一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用,其包括以下步骤:1)首先将293T细胞传代至60mm*15mm皿中,培养过夜,使其密度达到80%,按照目的质粒/psPAX2/pMD2.G的顺序以6/3/1的比例进行慢病毒的包装,以获得高滴度慢病毒,滴度为2~3×107TU/mL(总体积5mL);2)取小鼠骨髓,加入鼠源M‑CSF(10ng/mL)进行巨噬细胞诱导,在诱导的第二天加入慢病毒,可以获得高转染效率。本发明在巨噬细胞诱导过程中加入慢病毒,不但能够提高了慢病毒的转染效率,同时还能在不影响巨噬细胞得率的情况下,缩短实验时间。
技术研发人员:沈萍萍;章文龙;唐嘉荩;黄亚红
受保护的技术使用者:南京大学
技术研发日:2018.10.17
技术公布日:2020.04.24