本发明属于中药提取工艺技术领域，具体涉及一种亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法。
背景技术：
青蒿为菊科蒿属植物，又名臭蒿，苦蒿，黄花蒿，青蒿入药现存最早的记载为出土于马王堆汉墓的《五十二病方》，东晋葛洪在《肘后备急方》中记录了青蒿治疗疟疾的方法“青蒿一握，以水二升渍，绞取汁，尽服之”的记载，也是现存最早的用青蒿治疗疟疾的记载，明代李时珍将青蒿分为青蒿和黄花蒿两种，青蒿为一年生草本植物，其入药部分为干燥的地上部分，性寒味苦，辛，归肝、肾经，具抗菌、解热、止咳、平喘之功效，用于暑邪发热、阴虚发热、夜热早凉、骨蒸痨热、疟疾寒热、湿热黄疸等症；20世纪七十年代，我国科学家自主研发了的青蒿素是其主要截疟成分，随着疟原虫对奎宁等众多治疟药产生抗药性，青蒿素这类新型抗疟药被广泛应用于临床，临床上主要用于治疗疟疾，急慢性支气管炎，呼吸道感染、神经性皮炎和皮肤真菌等多种疾病。
青蒿入药，在我国已有数千年的历史，但主要作为解表药，青蒿作为解表药，其主要作用于其所含有的挥发油成分密切相关。陈伟民报道了青海产青蒿的挥发油主要含樟脑、蒿酮、龙脑、松油醇、桉叶油素等成分，青蒿素的成分主要是抗疟疾作用，据世界卫生组织估计，目前世界约有3亿人长期感染疟疾，而每年又有约1.5亿新增感染病例，全球平均约有150万人死于疟疾，期中约有100万是儿童，可见疟疾仍然是世界上最严重的传染病之一，随着青蒿素类抗疟药的发现，为人类治愈疟疾带来了新的希望，青蒿素治疗疟疾有着治愈力高，复发率小，副作用小的特点，因此被世界卫生组物织称为“世界上唯一有效疟疾治疗药”，也是我国唯一被世界卫生组织认可的按西药研究标准开发的新药，青蒿素的发现不仅为治疗疟疾提供了一种新药，也为新抗疟药物的发明指明了新的方向。
青蒿素及其衍生物除了有抗疟疾和抗血吸虫等作用外，研究人员还发现其在调节免疫系统、抗肿瘤和治疗艾滋病等方面都有一定的作用，这些作用的发现为青蒿素产业的发展开拓了更为广阔的前景，who建议对青蒿素的使用宜使用联合化疗的防范，以避免疟原虫产生抗药性而导致青蒿素及其衍生物重蹈奎宁等抗疟药的覆辙。
目前，青蒿素的提取方法研究较多，根据目的和规模的不同，主要有工业提取和实验提取，现在青蒿素的提取方法主要有有机溶剂萃取，超临界萃取和超声提取等，其中，有机溶剂提取是目前广为应用的提取方法，根据所采用的有机溶剂不同，提取方法有差异，该方法的优点是所采用的溶剂一般都价格低廉，容易获得，对技术设备等要求不高，该类方法的主要流程为：干燥—粉碎—浸泡—萃取—浓缩提取液—粗品—纯品——青蒿素，赵兵等通过对青蒿采取不同提取方法以及不同有机溶剂萃取，认为在乙醚、氯仿、正己烷和石油醚作为溶剂中，石油醚为较理想的溶剂，但该类方法需要对原材料做多次萃取，对溶剂的需求量大，能耗较高，时间较长，且考虑到环保和安全问题，该方法的问题越来越引起企业重视。
技术实现要素：
本发明的目的是为了克服现有技术的不足，而提供一种能耗小、可实现有机溶剂的循环利用的亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法。
本发明的目的是这样实现的：一种亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法，它包括以下步骤：
步骤1，预处理：将黄蒿干燥叶粉碎，得黄蒿粉末，将黄蒿粉末装入绢袋并投入萃取罐中，预热实验设备至60-75℃，启动真空泵将萃取罐和分离罐内压力抽至0-0.10mpa；
步骤2，萃取：打开萃取罐的溶剂进样阀，注入有机溶剂至溶剂浸没所有绢袋上方3-5cm，打开热水循环系统泵，萃取得到油溶混合物；
步骤3，脱溶分离：打开萃取罐出样阀、分离罐进样阀，将步骤2中得到的油溶混合物由萃取罐压入分离罐后，启动压缩机和冷凝系统，对油溶混合物进行升温加压和脱溶处理，待分离罐压力降至0.1mpa-0.20mpa，启动真空泵，与压缩机联动加速脱溶分离，得到液态的有机溶剂和液态的混合物；
步骤4，收集青蒿粗提物：步骤3中得到的液态有机溶剂进入储存罐循环使用，打开分离罐出料阀，收集所述的青蒿素粗品，重复上述的提取3-4次；
步骤5，青蒿素初纯化：将步骤4中得到的青蒿素粗提物溶入10倍量75%乙醇中，充分溶解后过滤，滤液采用膜分离技术后，浓缩并冷却结晶得结晶粗品；
步骤6，青蒿素精制：将步骤5中的结晶粗品溶于5倍量无水乙醇中，充分溶解后过滤，滤液浓缩冷却结晶，真空干燥得青蒿素精制品。
所述的步骤1中的黄蒿粉末为20-80目。
所述的步骤2中的萃取温度维持在30-65摄氏度，萃取压力为0.2-0.8mpa。
所述的步骤2中的萃取时间为30-90分钟。
所述的步骤2中的机溶剂为丙烷、丁烷、二甲醚中的一种。
所述的步骤3中，在脱溶分离过程中开启压缩机和循环水进行压缩和冷凝，收集有机溶剂进行压缩和冷凝，以便于有机溶剂循环利用。
所述的步骤5中的膜分离技术采用的是截留分子量小于3000d的超滤膜，所述的步骤5中滤液浓缩采用纳滤膜分子量小于200d。
所述的步骤5中粗提物溶解于乙醇时，加热温度为40-50℃。
本发明的有益效果：本发明采用亚临界流体技术萃取青蒿素，与有机溶剂提取相比，具有安全环保、能耗低、产量纯度高的优点，而且具有工业化程度高，生产成本低的优势；与现有的提取方法相比，本发明的生产工艺简单易行，且产品质量稳定，经济适用、能耗少、收率高，适宜于大规模生产。
具体实施方式
实施例1
一种亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法，它包括以下步骤：
步骤1，预处理：将黄蒿干燥叶粉碎至80目，得黄蒿粉末，将5kg黄蒿粉末分别装入5个绢袋并投入萃取罐中，预热实验设备至60℃，启动真空泵将萃取罐和分离罐内压力抽至0-0.10mpa；
步骤2，萃取：打开萃取罐的溶剂进样阀，注入丁烷溶剂至溶剂浸没所有绢袋上方5cm，打开热水循环系统泵，维持萃取温度在45℃、萃取压力在0.4mpa进行萃取，萃取时间为60分钟，得到油溶混合物；
步骤3，脱溶分离：打开萃取罐出样阀、分离罐进样阀，将步骤2中得到的油溶混合物由萃取罐压入分离罐后，启动压缩机和冷凝系统，对油溶混合物进行升温加压和脱溶处理，待分离罐压力降至0.1mpampa，启动真空泵，与压缩机联动加速脱溶分离，得到液态的有机溶剂和液态的混合物；
步骤4，收集青蒿粗提物：步骤3中得到的液态有机溶剂进入储存罐循环使用，打开分离罐出料阀，收集所述的青蒿素粗品，重复上述的提取3次，手机青蒿粗品162ml；
步骤5，青蒿素初纯化：将步骤4中得到的青蒿素粗提物溶入10倍量75%乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液采用膜分离技术纯化，浓缩后冷却结晶，得晶体粗品49g；
步骤6，青蒿素精制：将步骤5中的结晶粗品溶于5倍量无水乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液浓缩冷却结晶，真空干燥得青蒿素精制品42g。
本发明以青蒿为研究对象，采用亚临界流体制备青蒿素的方法在中温条件下进行，不破坏药材的活性物质，同时可实现溶剂的循环利用，降低生产成本，提高了原材料的利用率，降低能耗，缩短生产周期，安全环保，适合工业化生产。
实施例2
一种亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法，它包括以下步骤：
步骤1，预处理：将黄蒿干燥叶粉碎至20目，得黄蒿粉末，将5kg黄蒿粉末分别装入5个绢袋并投入萃取罐中，预热实验设备至60℃，启动真空泵将萃取罐和分离罐内压力抽至0-0.10mpa；
步骤2，萃取：打开萃取罐的溶剂进样阀，注入丁烷溶剂至溶剂浸没所有绢袋上方5cm，打开热水循环系统泵，维持萃取温度在45℃、萃取压力在0.4mpa进行萃取，萃取时间为60分钟，得到油溶混合物；
步骤3，脱溶分离：打开萃取罐出样阀、分离罐进样阀，将步骤2中得到的油溶混合物由萃取罐压入分离罐后，启动压缩机和冷凝系统，对油溶混合物进行升温加压和脱溶处理，待分离罐压力降至0.1mpampa，启动真空泵，与压缩机联动加速脱溶分离，得到液态的有机溶剂和液态的混合物；
步骤4，收集青蒿粗提物：步骤3中得到的液态有机溶剂进入储存罐循环使用，打开分离罐出料阀，收集所述的青蒿素粗品，重复上述的提取3次，手机青蒿粗品175ml；
步骤5，青蒿素初纯化：将步骤4中得到的青蒿素粗提物溶入10倍量75%乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液采用膜分离技术纯化，浓缩后冷却结晶，得晶体粗品55g；
步骤6，青蒿素精制：将步骤5中的结晶粗品溶于5倍量无水乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液浓缩冷却结晶，真空干燥得青蒿素精制品49g。
本发明以青蒿为研究对象，采用亚临界流体制备青蒿素的方法在中温条件下进行，不破坏药材的活性物质，同时可实现溶剂的循环利用，降低生产成本，提高了原材料的利用率，降低能耗，缩短生产周期，安全环保，适合工业化生产。
实施例3
一种亚临界流体技术提取青蒿素及青蒿素纯化方法，它包括以下步骤：
步骤1，预处理：将黄蒿干燥叶粉碎至80目，得黄蒿粉末，将5kg黄蒿粉末分别装入5个绢袋并投入萃取罐中，预热实验设备至60℃，启动真空泵将萃取罐和分离罐内压力抽至0-0.10mpa；
步骤2，萃取：打开萃取罐的溶剂进样阀，注入丁烷溶剂至溶剂浸没所有绢袋上方5cm，打开热水循环系统泵，维持萃取温度在65℃、萃取压力在0.4mpa进行萃取，萃取时间为60分钟，得到油溶混合物；
步骤3，脱溶分离：打开萃取罐出样阀、分离罐进样阀，将步骤2中得到的油溶混合物由萃取罐压入分离罐后，启动压缩机和冷凝系统，对油溶混合物进行升温加压和脱溶处理，待分离罐压力降至0.1mpampa，启动真空泵，与压缩机联动加速脱溶分离，得到液态的有机溶剂和液态的混合物；
步骤4，收集青蒿粗提物：步骤3中得到的液态有机溶剂进入储存罐循环使用，打开分离罐出料阀，收集所述的青蒿素粗品，重复上述的提取3次，手机青蒿粗品170ml；
步骤5，青蒿素初纯化：将步骤4中得到的青蒿素粗提物溶入10倍量75%乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液采用膜分离技术纯化，浓缩后冷却结晶，得晶体粗品52g；
步骤6，青蒿素精制：将步骤5中的结晶粗品溶于5倍量无水乙醇中，加热至40-50℃充分溶解后过滤，滤液浓缩冷却结晶，真空干燥得青蒿素精制品46g。
本发明以青蒿为研究对象，采用亚临界流体制备青蒿素的方法在中温条件下进行，不破坏药材的活性物质，同时可实现溶剂的循环利用，降低生产成本，提高了原材料的利用率，降低能耗，缩短生产周期，安全环保，适合工业化生产。