人角膜缘微环境细胞的分离和培养方法及其组合鉴定方法与流程

文档序号:17695872发布日期:2019-05-17 21:30阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了一种人角膜缘微环境细胞的分离和培养方法及其组合鉴定方法,该方法先获得角膜缘小片;用胶原酶A消化,然后用胰蛋白酶溶液进行消化,然后再接种于包被有Matrigel基质胶的六孔板上,获得原代的LNC;将原代的LNC置于改良的MESCM胚胎干细胞培养液连续培养传代扩增;采用Matrigel包被塑料培养板表面,MESCM无血清培养基扩增即得到人角膜缘微环境细胞。鉴定方法包含细胞形态学检测、细胞表面标志物检测、细胞多向诱导分化潜能检测和体外支持角膜缘干细胞活性检测共4种方法。本发明分离培养的人LNC细胞,具有明确的形态、抗原、功能特征,可以用于实验研究或者临床移植材料。

技术研发人员:李贵刚;王玮;徐玲娟;李阳;王云明
受保护的技术使用者:华中科技大学同济医学院附属同济医院
技术研发日:2018.12.24
技术公布日:2019.05.17
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