脂肪酶生产菌株及其应用的制作方法

文档序号:21407202发布日期:2020-07-07 14:41阅读:来源:国知局

技术特征:

1.脂肪酶生产菌,其为经表达甘油单-二酰酯脂肪酶的质粒转化的产泡沫量少的巴斯德毕赤酵母,其中所述表达甘油单-二酰酯脂肪酶的核苷酸序列如seqidno.:1所示;任选地,其中所述质粒还包含如seqidno.:3所示的表达液泡天冬氨酸蛋白酶的核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的脂肪酶生产菌,其保藏编号为cgmcc16706。

3.获得权利要求1或2所述的脂肪酶生产菌的方法,其包括利用表达甘油单-二酰酯脂肪酶的质粒转化巴斯德毕赤酵母,并经筛选获得。

4.权利要求1或2所述的脂肪酶生产菌在制备甘油单-二酰脂肪酶中的应用。

5.制备甘油单-二酰酯脂肪酶的方法,其包括发酵培养权利要求1或2所述的脂肪酶生产菌。

6.如权利要求5所述的方法,其中所述发酵培养包括添加甲醇诱导脂肪酶生产菌表达甘油单-二酰酯脂肪酶的步骤;任选地,其中所述添加甲醇诱导脂肪酶生产菌表达甘油单-二酰酯脂肪酶的条件如下:甲醇用量1-5%(v/v),优选2%(v/v);温度25-35℃;以连续流加或每间隔8-12小时流加一次的方式添加。

7.如权利要求5或6所述的方法,所述发酵培养条件如下:接种量5-15%(v/v),c源10-100g/l,n源浓度1-20g/l,温度20-40℃,ph3.5-8.5,溶氧量10%-90%。

8.如权利要求5至7中任一项所述的方法,其还包括添加消泡剂的步骤;优选地,所述消泡剂选自以下中的一种或多种:烷氧基脂肪酸酯,聚丙烯乙二醇,硅氧烷聚合物,矿物油和硅酸盐;优选地,其中所述消泡剂的用量为1.3-4g/l发酵液。

9.甘油单-二酰酯脂肪酶,其通过权利要求5至8中任一项所述的方法制备。

10.制备甘油单酰酯的方法,其包括利用权利要求9所述的甘油单-二酰酯脂肪酶催化合成甘油单酰酯。


技术总结
本申请提供了脂肪酶生产菌株及其应用。具体地,本申请提供了甘油单‑二酰酯脂肪酶生产菌株,并提供了由该菌株制备甘油单‑二酰酯脂肪酶的方法及其应用。本申请提供的脂肪酶生产菌株稳定、蛋白产量高且产泡沫量少,具有极大的工业化生产价值。

技术研发人员:赵强;徐正军;宣姚吉;牛其文
受保护的技术使用者:丰益(上海)生物技术研发中心有限公司
技术研发日:2018.12.27
技术公布日:2020.07.07
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