一种单分子核酸靶向扩增检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及分子生物技术领域，具体涉及试剂盒或试剂箱，具体是一种单分子核酸靶向扩增检测试剂盒。

背景技术：

单分子检测技术是一种应用前景非常好的技术，它为基因组学和个体医学的发展带来了很多积极意义，与传统的NGS相比，单分子的检测更能直观地观察和测量DNA/RNA的序列结构，对于每个分子存在的变异进行检测。

常规的分子靶向扩增检测技术为普通PCR技术，无法解决极端条件下的DNA/RNA扩增反应，仅仅能针对常规的生物检测提取出的DNA/RNA模板进行扩增，且对模板的浓度和纯度要求较高。模板的质量直接影响靶向扩增的成败，而本实用新型的试剂盒，可以解决低浓度且纯度较差的单分子靶向扩增。

技术实现要素：

本实用新型目的在于克服现有技术的不足，适应现实发展，提供一种单分子核酸靶向扩增检测试剂盒，主要用于极端环境下临床样本和科研样本的DNA、RNA等单分子靶向扩增。

为达到上述目的，本实用新型采用的技术方案如下：

一种单分子核酸靶向扩增检测试剂盒，包括盒体、盒盖、试剂储存单元和耗材储存单元，所述盒盖可开启地连接在所述盒体上，所述盒体为硬纸板材质；所述盒体内设有PE发泡板制成的第一缓冲凹槽和第二缓冲凹槽，所述试剂储存单元安放于所述第一缓冲凹槽内，所述耗材储存单元安放于所述第二缓冲凹槽内；所述耗材储存单元内放置单分子靶向扩增芯片，所述单分子靶向扩增芯片的主体包括位于所述主体上的加样孔、气孔、加样腔体、裂解液加样孔、样本裂解腔体、核酸纯化系统腔体、PCR反应液加样孔、PCR反应液加样腔体、单分子生成液加样孔、单分子生成液加样腔、单分子核酸靶向扩增反应腔以及用于连接气孔与加样孔的流道、连接气孔与PCR反应液加样孔的流道、连接气孔与单分子生成液加样孔的流道、连接核酸纯化系统腔体与单分子核酸靶向扩增反应腔的流道、连接PCR反应液加样腔与单分子核酸靶向扩增反应腔的流道、连接单分子生成液加样腔与与单分子核酸靶向扩增反应腔的流道。

进一步，所述试剂储存单元包括一个微反应器生成液储存单元、一个核酸提取液储存单元和二个PCR反应液储存单元。

进一步，所述第一缓冲凹槽和所述第二缓冲凹槽的数量比为4:1。

进一步，所述试剂储存单元的总容量为5～100ml；

进一步，所述微反应器生成液储存单元的总容量为50ml，所述核酸提取液储存单元的总容量为5mL，所述PCR反应液储存单元的总容量为100ml。

本实用新型的优点和积极效果：主要用于极端环境下临床样本和科研样本的DNA、RNA等单分子靶向扩增，可以解决低浓度且纯度较差的单分子靶向扩增，对模板的质量要求不高，对生物检材中的模板都可以进行有效的单分子靶向扩增和检测；本实用新型提供的单分子靶向扩增试剂盒还包含了单分子靶向扩增芯片，可以一步完成单分子靶向扩增。

附图说明

图1为本实用新型总体结构示意图；

图2为单分子靶向扩增芯片结构示意图；

图1-2中标记含义如下：1-盒盖，2-微反应器生成液储存单元，3-核酸提取液储存单元，4-盒体，5、6-PCR反应液储存单元，7-第二缓冲凹槽，8-气孔，9-连接气孔与PCR反应液加样孔的流道，10-连接气孔与单分子生成液加样孔的流道，11-单分子生成液加样孔，12-单分子生成液加样腔，13-PCR反应液加样孔，14-PCR反应液加样腔体，15-连接PCR反应液加样腔与单分子核酸靶向扩增反应腔的流道，16-连接单分子生成液加样腔与与单分子核酸靶向扩增反应腔的流道，17-连接气孔与加样孔的流道，18-加样孔，19-加样腔体，20-裂解液加样孔，21-样本裂解腔体，22-核酸纯化系统腔体，23-单分子核酸靶向扩增反应腔，24-单分子靶向扩增芯片的主体。

具体实施方式

在本实用新型的描述中，有必要理解的是，“上”、“下”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系均为基于附图所示的方位或位置关系，目标仅为便于描述本实用新型和简化描述，并不是指示或暗示所指部件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。

下面结合附图对本实用新型的具体实施例做详细说明。

一种单分子核酸靶向扩增检测试剂盒，如图1-2所示，包括盒体4、盒盖1、试剂储存单元和耗材储存单元，所述盒盖1可开启地连接在所述盒体4上，所述盒体4为硬纸板材质；所述盒体4内设有PE发泡板制成的第一缓冲凹槽和第二缓冲凹槽7，所述试剂储存单元安放于所述第一缓冲凹槽内，所述耗材储存单元安放于所述第二缓冲凹槽7内；所述耗材储存单元内放置单分子靶向扩增芯片，所述单分子靶向扩增芯片的主体24包括位于所述主体24上的加样孔18、气孔8、加样腔体19、裂解液加样孔20、样本裂解腔体21、核酸纯化系统腔体22、PCR反应液加样孔13、PCR反应液加样腔体14、单分子生成液加样孔11、单分子生成液加样腔12、单分子核酸靶向扩增反应腔23，连接气孔8与加样孔18的流道17、连接气孔8与PCR反应液加样孔14的流道9、连接气孔8与单分子生成液加样孔11的流道10、连接核酸纯化系统腔体22与单分子核酸靶向扩增反应腔23的流道25、连接PCR反应液加样腔14与单分子核酸靶向扩增反应腔23的流道15、连接单分子生成液加样腔12与与单分子核酸靶向扩增反应腔23的流道16，所述试剂储存单元包括一个总容量为50ml的微反应器生成液储存单元2、一个总容量为5mL的核酸提取液储存单元3和二个总容量为100ml的PCR反应液储存单元5、6；

本实用新型使用步骤如下：

1、从加样孔18向加样腔体19中加入人类血清样本或者全血样本；

2、从裂解液加样孔20加入裂解液；

3、PCR反应液加样孔13加入PCR反应液；

4、单分子生成液加样孔11加入单分子生成液；

5、在气孔8位置加压；

6、使所有反应液体进入单分子核酸靶向扩增反应腔23；

7、进行单分子靶向扩增反应。

上述实施例仅是本实用新型的较优实施方式，凡是依据本实用新型的技术实质对以上实施例所做的任何简单修饰、修改及替代变化，均属于本实用新型技术方案的范围内。