本发明属于选择性雌激素受体调节剂类化合物的领域，具体涉及一类含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物及其在抗乳腺癌药物中的应用。
背景技术：
乳腺癌(breastcancer)是起源于乳腺组织、最常见的是乳腺导管或乳小叶的一种癌症，在世界范围内，乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一，发病率位居女性恶性肿瘤的首位，严重危害妇女的身心健康。目前在临床上主要是采用激素替代治疗法，即对存在雌激素缺乏的绝经后妇女补充雌激素及孕激素，以缓解其绝经期症状的治疗。常用的治疗药物大多是以er为靶点，但长期使用选择性雌激素受体调节剂(serms)类药物，如他莫昔芬会产生耐药性、增加患子宫内膜癌的风险等副作用。
雌激素受体(estrogenreceptor,er)属于核受体超家族成员，为一种配体依赖转录因子。已知的雌激素受体有α和β两种亚型。erα和erβ在人体中有着不同的器官和组织分布模式。erα主要是促进细胞的增殖，因此erα被认为是治疗乳腺癌的重要靶点。硒，是人体必不可少的一种微量元素，具有广泛的生理作用，如抗炎、抗氧化、神经保护等。其在抗肿瘤方面起着重要作用，可以诱导细胞凋亡，促进淋巴细胞生成，调节机体免疫功能等。含硒抗癌药物乙烷硒林现已进入临床实验阶段。
2005年发明人课题组设计并合成出了一类基于氧桥双庚烯类结构的化合物(式1所示)，该分子具有特殊三维结构，可以更好地与雌激素受体上的结合位点作用，并能有效地阻断雌二醇与雌激素受体结合，抑制癌细胞的增殖，同时也有一定的抗炎作用。
但是目前乳腺癌药物临床治疗中的耐药性问题比较突出，因此，寻找活性更好、安全性更高的抗肿瘤化合物迫在眉睫。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一类含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物，考虑到含硒化合物在肿瘤防治中的重要作用，本发明在er配体最新研究进展和本课题组前期工作基础上，将苯硒基团引入到上述式1的氧桥双环庚烯类serms(obhs)分子结构中，使二者“有机”结合为一个分子，获得具有更好的抗癌活性的抗乳腺癌药物。
本发明的另一目的是提供含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物的合成方法，以3-(4-羟基苯基)-4-(4-苯硒基)苯基-呋喃和乙烯苯磺酸衍生物为原料，无需催化剂，在90℃反应8小时，一步制备得到含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂。
本发明的再一目的是提供上述含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物在制备抗乳腺癌药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
第一方面，提供一类含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物及其药学上可接受的盐，具有以下式i或通式ii所示的结构：
其中，
r为4-och3、4-ch3、4-cl、4-oh、4-cf3、4-br、3-och3、3-ch3、3-cl、3-oh、3-cf3、3-br、
优选地，所述含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物是：
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-甲氧基苯基)酯(13a)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-甲氧基苯基)酯(13b)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-氯苯基)酯(13c)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-氯苯基)酯(13d)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-溴苯基)酯(13e)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-溴苯基)酯(13f)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-甲基苯基)酯(13g)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-甲基苯基)酯(13h)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-羟基苯基)酯(13i)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(4-三氟甲基苯基)酯(13j)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-三氟甲基苯基)酯(13k)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-甲氧基苯基)酯(13l)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-甲基苯基)酯(13m)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-甲氧基苯基)酯(13n)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-氯苯基)酯(13o)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(3-羟基苯基)酯(13p)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-溴苯基)酯(13q)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-3-磺酸-(1-萘酚基)酯(13r)；
5-(4-羟基苯基)-6-(4-苯硒基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(1-萘酚基)酯(13s)；
5,6-二(4-羟基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(4-苯硒基苯基)酯(22a)；
5,6-二(4-羟基苯基)-7-氧桥双环[2.2.1]-5-庚烯-2-磺酸-(3-苯硒基苯基)酯(22b)；或上述化合物的药学上可接受的盐。
第二方面，提供一种上述含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物的制备方法，具体操作步骤为：
(1)3-(4-羟基苯基)-4-(4-苯硒基苯基)呋喃化合物10的合成：
反应试剂及条件:(a)nbs,p-tsoh,chcl3,rt,12h；(b)et3n,ch3cn,rt,12h；(c)nah,dmso,rt,3h；(d)bbr3,ch2cl2,0℃,10h；(e)dibal-h,thf,-78℃,12h.(f)bis(pinacolato)diboron,pd(dppf)cl2,dmso,rt,12h；(g)naio4,nh4cl,actone:h2o＝1:1,0℃tort,12h；(h)phseseph,cui,o2,dmso,100℃,28h.
a、对甲氧基溴代苯乙酮化合物2的合成
称取1equiv对甲氧基苯乙酮1、0.2equiv对甲苯磺酸和1.2equivn-溴代琥珀酰亚胺(nbs)于150ml的圆底烧瓶中，加入50ml的氯仿，室温反应12h后，tlc监测反应完全，加水淬灭，3×20ml二氯甲烷萃取，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，经过硅胶柱纯化，得到黄色固体对甲氧基溴代苯乙酮化合物2；
b、2-(4-甲氧基苯基)-2-羰基乙基-2-(4-溴苯基)乙酸酯化合物4的合成
称取1equiv化合物2和1equiv对溴苯乙酸3于50ml的圆底烧瓶中，加入25ml的无水乙腈，缓慢滴加1equiv无水三乙胺后，室温继续反应8h后，tlc监测反应完全，反应结束之后加水淬灭，3×15ml乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，减压脱溶，经柱层析纯化后得黄色粉末状固体化合物4；
c、3-(4-溴苯基)-4-(4-甲氧基苯基)呋喃-2-酮化合物5的合成
将50ml的两口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物4加入瓶中，加入10ml的无水二甲基亚砜，缓慢加入2equiv60％nah，25℃反应3h后，tlc监测反应完全，加入5ml2n盐酸淬灭反应，用3×15ml乙酸乙酯萃取，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝9:1)得黄色固体化合物5；
d、3-(4-溴苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃-2-酮化合物6的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物5于其中，加入20ml无水二氯甲烷,冰浴下加入3equivbbr3反应12h后，加入20ml水淬灭反应，用3×15ml乙酸乙酯萃取，15ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝7:3)得到白色固体化合物6；
e、3-(4-溴苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物7的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物6于其中，-78℃下加入4equiv二异丁基氢化铝(dibal-h)反应12h后，加入4％硫酸淬灭反应，用3×25ml乙酸乙酯萃取，30ml饱和氯化钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝6:1)得到白色粉末状固体化合物7；
f、3-(4-硼酸酯苯基)-4-(4-羟基苯基)-呋喃8的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物7，1.1equiv双联硼酸酯,3equivkoac,0.05equivpd(dppf)cl2于其中,加入1,4-二氧六环20ml做溶剂，90℃条件下反应12h，反应结束后加20ml水淬灭，用3×25ml乙酸乙酯萃取，30ml饱和氯化钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到白色粉末状固体化合物8；
g、3-(4-硼酸苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物的9合成
将100ml的单口瓶、磁子，称取1equiv化合物8，3.5equivch3coonh4于其中，加入40mlacetone:h2o＝1:1为溶剂,冰浴下分批加入3.5equivnaio4，然后移至常温，反应12h后，加入20ml水淬灭反应，用3×15ml乙酸乙酯萃取，15ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)得到淡黄色固体化合物9；
h、3-(4-苯硒基苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10的合成
将100ml的单口瓶，称取1equiv化合物9，0.5equiv二苯基二硒醚,0.2equivcui,于其中,加入二甲基亚砜20ml做溶剂，100℃条件下反应28h，反应结束后加20ml水淬灭，用3×25ml乙酸乙酯萃取，30ml饱和氯化钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到白色粉末状固体化合物10；
(2)3,4二(4-羟基苯基)-呋喃化合物18:
反应试剂及条件:(a)nbs,p-tsoh,chcl3,rt,12h；(b)et3n,ch3cn,rt,12h；(c)nah,dmso,rt,3h；(d)bbr3,ch2cl2,0℃,10h；(e)dibal-h,thf,-78℃,12h.
a、2-(4-甲氧基苯基)-2-羰基乙基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸酯化合物15的合成
称取1.0eq.化合物2和1.0eq.对甲氧基苯乙酸14(购于阿拉丁公司，货号:s115483)于50ml的圆底烧瓶中，加入25ml的无水乙腈，缓慢滴加1.0eq.无水三乙胺后，室温继续反应2h后，tlc监测反应完全，反应结束之后蒸除乙腈和三乙胺，加入乙酸乙酯溶解，先后用5.0eq2n稀盐酸，2×30ml饱和碳酸氢钠和30ml饱和氯化钠洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤得粗品，经柱层析纯化后得黄色固体化合物15；
b、3,4-二(4-甲氧基-苯基)呋喃-2-酮化合物16的合成
将25ml的两口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物15其中，加入10ml的无水二甲基亚砜，缓慢滴加2equiv80％nah后，25℃反应2h后，tlc监测反应完全，加入5ml2n盐酸淬灭反应，用3×25ml乙酸乙酯萃取，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝9:1)得到化合物16；
c、3,4-二(4-羟基-苯基呋喃)-2-酮化合物17的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物16其中，加入25ml二氯甲烷,-20℃下加入6equivbbr3反应12h后，加入10ml水淬灭反应，用3×20ml乙酸乙酯萃取，15ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝7:3)得到化合物17；
d、3,4-二(4-羟基-苯基)呋喃化合物18的合成
将50ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取1equiv化合物17其中，-78℃下加入4equiv二异丁基氢化铝(1mdibal-h)反应12h后，加入4％硫酸淬灭反应，用3×25ml乙酸乙酯萃取，30ml饱和氯化钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝6:4)得到化合物18；
(3)乙烯磺酸酯亲二烯体化合物12a-u的合成
反应试剂及条件：(i)tea,dcm,0℃,12h
其中，
r为4-och3、4-ch3、4-cl、4-oh、4-cf3、4-br、3-och3、3-ch3、3-cl、3-oh、3-cf3、3-br、
a、化合物12的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取1equiv相应的化合物11溶于无水二氯甲烷，在0℃下缓慢的加入1.2equiv2-氯乙烷磺酰氯，反应10min后，缓慢滴加无水三乙胺；在室温下反应12h后，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝12:1～3:2)得到乙烯磺酸酯亲二烯体12；
(4)苯硒基磺酸酯亲二烯体衍生物的合成
反应试剂及条件:(a)nabh4,meoh,40℃,24h；(b)2-chloroethanesulfonylchloride,tea,ch3cn,rt,12h；
a、苯硒基苯酚化合物20的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取1equiv相应的化合物二苯基二硒醚溶于无水甲醇，在0℃下加入3equivnabh4，反应1h后，缓慢滴加2equiv对应的苯酚化合物；在40℃下反应24h后，冰水浴下缓慢加水淬灭，用3×25ml乙酸乙酯萃取，30ml饱和氯化钠溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:2)得到无色油状化合物20；
b、磺酸酯亲二烯体衍生物化合物21的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取1equiv相应的化合物20溶于无水二氯甲烷，在0℃下缓慢的加入1.2equiv2-氯乙烷磺酰氯，反应10min后，缓慢滴加无水三乙胺；在室温下反应12h后，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝12:1～3:2)得到磺酸酯亲二烯体21；
(5)目标化合物13a-13u,22a,22b,的合成
取25ml双口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下将合成得到的呋喃化合物10或3,4-二(4-羟基苯基)呋喃化合物18和乙烯磺酸酯亲二烯体及其含苯硒基的衍生物溶解在四氢呋喃中，在90℃反应8h一步制备得含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂，反应式如下i和ii所示：
i:
反应试剂及条件:(a)thf,90℃,8h；
其中，
r为4-och3、4-ch3、4-cl、4-oh、4-cf3、4-br、3-och3、3-ch3、3-cl、3-oh、3-cf3、3-br、
ii:
反应试剂及条件:(a)thf,90℃,8h；
其中，22a＝4-seph、22b＝3-seph。
按照本发明所属技术领域的一些通常方法，本发明的上式i或ii可以与酸生成它的药学上可接受的盐，酸可以包括无机酸或有机酸，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等。本发明的药物可以是化合物本身与药学上可接受的稀释剂、辅助剂和/或载体混合的药物，也可以是以本发明化合物或其在药学上可接受的盐、溶剂化物、光学异构体或多晶型物作为活性成分之一的组合物与药学上可接受的稀释剂、辅助剂和/或载体混合的药物。
将本发明的药物加入常规辅料，按照常规工艺，可以制成药学上可接受的各种剂型，如片剂、胶囊剂、口服液剂、注射剂、颗粒剂或各种缓控释制剂等。
本发明药物的载体是药学领域中可得到的常见类型，包括：黏合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂或基质等。
第三方面，提供上述含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物及其药学上可接受的盐在制备抗乳腺癌药物中的应用。
第四方面，提供一种抗乳腺癌药物组合物，包含上述含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物和一种或多种药学上可接受的助剂。
第五方面，提供上述抗乳腺癌药物组合物在制备抗乳腺癌药物中的应用。
和现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明以3-(4-羟基苯基)-4-(4-苯硒基)苯基-呋喃和乙烯苯磺酸衍生物为原料，无需催化剂，在90℃反应8小时，一步制备得到含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂。这种选择性雌激素受体调节剂与现有的抗乳腺癌药物他莫昔芬的作用方式有不同之处，他莫昔芬的碱性侧链取代了雌激素受体中螺旋12原有的位置，使其无法正常闭合，而配体结合区域亦无法招募转录共激活因子而无法启动基因调控功能，本发明所得到的obhs类化合物是抑制间接的拮抗机制，obhs的苯磺酸酯与螺旋h11相互作用进而引起螺旋h12的错位，从而产生拮抗效果。体外实验表明，本发明含有苯硒基团的选择性雌激素受体调节剂类化合物与现有抗乳腺癌药物他莫昔芬比较，对mcf-7细胞具有更强的抑制活性，总的来说，化合物对erα的亲和力越高，对mcf-7的抑制活性越强，所有得到的目标化合物均可以有效抑制乳腺癌细胞mcf-7的生长，显示了此类化合物在乳腺癌治疗中的应用前景。
具体实施方式
通过以下详细说明可以进一步理解本发明的特点和优点。所提供的实施例仅是对本发明方法的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。
【实施例1】3-(4-羟基苯基)-4-(4-苯硒基苯基)呋喃化合物10的合成
1、对甲氧基溴代苯乙酮化合物2的合成
称取对甲氧基苯乙酮1(6.998g,46.6mmol)、对甲苯磺酸(1.617g,9.3mmol)和n-溴代琥珀酰亚胺(nbs,10.049g,55.9mmol)于150ml的圆底烧瓶中，加入50ml的氯仿，室温反应12h后，tlc监测反应完全，加水淬灭，二氯甲烷萃取(3×20ml)，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，经过硅胶柱纯化，得到6.404g(产率60％)黄色固体。
2、2-(4-甲氧基苯基)-2-羰基乙基-2-(4-溴苯基)乙酸酯化合物4的合成
称取化合物2(1.5896g,6.94mmol)和对溴苯乙酸3(1.492g,6.94mmol)于50ml的圆底烧瓶中，加入25ml的无水乙腈，缓慢滴加无水三乙胺(702.3mg,6.94mmol)后，室温继续反应8h后，tlc监测反应完全，反应结束之后加水淬灭，乙酸乙酯萃取(3×15ml)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，减压脱溶，经柱层析纯化后得1.99g(产率79％)黄色粉末状固体。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ7.97–7.92(m,2h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.33(d,j＝8.5hz,2h),7.01(d,j＝9.0hz,2h),5.43(s,2h),3.86(s,3h),3.81(s,2h)。
3、3-(4-溴苯基)-4-(4-甲氧基苯基)呋喃-2-酮化合物5的合成
将50ml的两口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物4(1.022g,2.8mmol)加入瓶中，加入10ml的无水二甲基亚砜，缓慢加入60％nah(224mg,5.6mmol)，25℃反应3h后，tlc监测反应完全，加入5ml2n盐酸淬灭反应，用乙酸乙酯(3×15ml)萃取，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝9:1)得611mg(产率63％)黄色固体化合物5。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50(d,j＝8.2hz,2h),7.31(d,j＝8.4hz,2h),7.27(d,j＝8.9hz,2h),6.85(d,j＝8.8hz,2h),5.13(s,2h),3.81(s,3h)。
4、3-(4-溴苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃-2-酮化合物6的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物5(1.998g,5.81mmol)于其中，加入20ml无水二氯甲烷,冰浴下加入bbr3(1.9ml,20.33mmol)反应12h后，加入20ml水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×15ml)萃取，饱和碳酸氢钠(15ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝7:3)得到1.716g(产率92％)白色固体化合物6。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ9.11(s,1h),7.65–7.58(m,2h),7.41–7.35(m,2h),7.35–7.29(m,2h),6.89–6.82(m,2h),5.27(s,2h)。
5、3-(4-溴苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物7的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物6(1.012g,3.07mmol)于其中，-78℃下加入二异丁基氢化铝(1mdibal-h,12ml,12.12mmol)反应12h后，加入4％硫酸淬灭反应，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，饱和氯化钠(30ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝6:1)得到967.6mg(产率77％)白色粉末状固体化合物7。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.58(s,1h),7.72(d,j＝1.8hz,1h),7.63(d,j＝1.8hz,1h),7.45–7.41(m,2h),7.22–7.15(m,2h),7.11–7.03(m,2h),6.88–6.80(m,2h)。
6、3-(4-硼酸酯苯基)-4-(4-羟基苯基)-呋喃8的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物7(0.542g,1.63mmol)，双联硼酸酯(0.455g,1.79mmol),koac(0.480g,4.89mmol),pd(dppf)cl2(0.059g,0.081mmol)于其中,加入1,4-二氧六环20ml做溶剂，90℃条件下反应12h，反应结束后加20ml水淬灭，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，饱和氯化钠(30ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到289mg(产率63％)白色粉末状固体化合物8。
7、3-(4-硼酸苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物的9合成
将100ml的单口瓶、磁子，称取化合物8(2.00g,4.52mmol)，ch3coonh4(3.20g,15.02mmol)于其中，加入40mlacetone:h2o＝1:1为溶剂,冰浴下分批加入naio4(1.16g,15.02mmol)，然后移至常温，反应12h后，加入20ml水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×15ml)萃取，饱和碳酸氢钠(15ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)得到1.407g(产率91％)淡黄色固体化合物9。
8、3-(4-苯硒基苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10的合成
将100ml的单口瓶，称取化合物9(1.41g,5.034mmol)，二苯基二硒醚(0.780g,2.517mmol),cui(0.19g,1.01mmol),于其中,加入二甲基亚砜20ml做溶剂，100℃条件下反应28h，反应结束后加20ml水淬灭，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，饱和氯化钠(30ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到1.709g(产率86％)白色粉末状固体化合物10。
【实施例2】3,4-二(4-羟基苯基)-呋喃化合物18的合成
1、2-(4-甲氧基苯基)-2-羰基乙基-2-(4-甲氧基苯基)乙酸酯15的合成
称取α-溴代对甲氧基苯乙酮2(6.36g,27.76mmol)和对甲氧基苯乙酸14(4.612g,20.82mmol)于150ml的圆底烧瓶中，加入50ml的乙腈，加入三乙胺(2.809g,27.26mmol)后，室温反应12h，tlc监测反应完全后，减压脱去溶剂，加入乙酸乙酯(50ml)溶解，用稀盐酸(2n，60ml)洗涤，有机层用无水na2so4干燥，减压脱去溶剂得到粗品，经柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)后得8.289g(产率95％)化合物15。
2、3,4-二(4-甲氧基-苯基)呋喃-2-酮化合物16的合成
将25ml的两口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物15(786.2mg,2.5mmol)其中，加入10ml的无水二甲基亚砜，缓慢滴加80％nah(150.1mg,5.0mmol)后，25℃反应2h后，tlc监测反应完全，加入5ml2n盐酸淬灭反应，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝9:1)得到475.9mg(产率64.3％)化合物16。
3、3,4-二(4-羟基-苯基呋喃)-2-酮化合物17的合成
将100ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物16(1.345g,4.56mmol)其中，加入25ml二氯甲烷,-20℃下加入bbr3(2.6ml,27.33mmol)反应12h后，加入10ml水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×20ml)萃取，饱和碳酸氢钠(15ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝7:3)得到1.06g(产率86.7％)化合物17。
4、3,4-二(4-羟基-苯基)呋喃化合物18的合成
将50ml的单口瓶、磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下，称取化合物17(560mg,1.98mmol)其中，-78℃下加入二异丁基氢化铝(1mdibal-h,8ml,7.93mmol)反应12h后，加入4％硫酸淬灭反应，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，饱和氯化钠(30ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝6:4)得到203.1mg(产率40.7％)化合物18。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.41(s,2h),6.94(d,j＝8.4hz,2h),6.87(d,j＝8.8hz,2h)。
【实施例3】乙烯磺酸酯亲二烯体化合物12a-u的合成
化合物12的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取相应的化合物11溶于无水二氯甲烷，在0℃下缓慢的加入2-氯乙烷磺酰氯(1.2equiv.)，反应10min后，缓慢滴加无水三乙胺。在室温下反应12h后，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝12:1～3:2)得到乙烯磺酸酯亲二烯体12(产率61～93％)。
【实施例4】苯硒基磺酸酯亲二烯体衍生物的合成
1、苯硒基苯酚化合物20的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取相应的化合物二苯基二硒醚溶于无水甲醇，在0℃下加入nabh4(3equiv.)，反应1h后，缓慢滴加对应的苯酚化合物(2equiv)。在40℃下反应24h后，冰水浴下缓慢加水淬灭，用乙酸乙酯(3×25ml)萃取，饱和氯化钠(30ml)溶液洗涤，有机层无水硫酸钠干燥，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:2)得到无色油状化合物20(产率83％)。
2、磺酸酯亲二烯体衍生物化合物21的合成通法
取100ml单口瓶，磁子在105℃下烘烤15min后，趁热，无水无氧操作，在氩气保护下称取相应的化合物20溶于无水二氯甲烷，在0℃下缓慢的加入2-氯乙烷磺酰氯(1.2equiv.)，反应10min后，缓慢滴加无水三乙胺。在室温下反应12h后，减压脱溶得到粗产物，经硅胶柱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝12:1～3:2)得到磺酸酯亲二烯体21(产率61～93％)。
【实施例5】化合物13a和13b的制备：
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-甲氧基苯基磺酸酯(65.56mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝6:1，得到63.4mg的棕黄色固体13a，产率41％，1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.88(s,1h),7.59–7.46(m,2h),7.41–7.34(m,5h),7.32–7.19(m,4h),7.17–7.12(m,2h),6.86(dd,j＝11.7,8.9hz,4h),5.68(d,j＝1.2hz,1h),5.46(dd,j＝4.2,1.2hz,1h),3.78(s,3h),3.70(dd,j＝8.3,4.6hz,1h),2.47–2.38(m,1h),2.33(dd,j＝12.1,8.3hz,1h)；同时得到57.2mg的棕色固体13b,产率为37％，1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.81(s,1h),7.56(dd,j＝6.6,2.9hz,2h),7.37(dd,j＝6.4,2.8hz,4h),7.32–7.27(m,3h),7.23(d,j＝8.6hz,2h),7.19(d,j＝9.1hz,2h),6.92–6.86(m,2h),6.82–6.76(m,2h),5.66(d,j＝1.2hz,1h),5.47(dd,j＝4.5,1.2hz,1h),3.84(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),3.79(d,j＝5.8hz,3h),2.38(s,1h),2.23(dd,j＝12.2,8.4hz,1h).
【实施例6】化合物13c和13d的制备
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-氯苯基磺酸酯(66.91mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到62.2mg的身棕色固体13c，产率40％,1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.53(dd,j＝6.5,3.1hz,2h),7.40–7.27(m,7h),7.23–7.09(m,6h),6.82–6.72(m,2h),5.98(s,1h),5.69(d,j＝1.2hz,1h),5.40(dd,j＝4.3,1.2hz,1h),3.56(dd,j＝8.4,4.5hz,1h),2.57(dt,j＝12.2,4.5hz,1h),2.19(dd,j＝12.3,8.4hz,1h)；同时得到60.7mg的浅黄色固体13d，产率为49％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.56(dd,j＝6.5,3.0hz,2h),7.38–7.26(m,8h),7.15(dd,j＝8.3,4.9hz,6h),6.76(d,j＝8.3hz,2h),6.09(s,1h),5.69(s,1h),5.42(d,j＝4.3hz,1h),3.61(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.54(dt,j＝12.3,4.6hz,1h),2.14(dd,j＝12.3,8.4hz,1h).
【实施例7】化合物13e和13f的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-溴苯基磺酸酯(80.51mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到73.37mg的深棕色固体13e，产率44％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.55(dd,j＝6.6,3.0hz,2h),7.50–7.43(m,2h),7.37–7.30(m,5h),7.18(dd,j＝10.8,8.2hz,4h),7.13–7.07(m,2h),6.81(d,j＝8.3hz,2h),5.71(s,1h),5.43(d,j＝4.3hz,1h),3.58(dd,j＝8.4,4.5hz,1h),2.59(dt,j＝12.2,4.4hz,1h),2.21(dd,j＝12.2,8.4hz,1h)；同时得到68.37mg的黄棕色固体13f，产率为41％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.61–7.44(m,5h),7.38–7.25(m,6h),7.21–7.10(m,4h),6.80(dd,j＝8.2,5.1hz,2h),5.77–5.58(m,1h),5.40(dd,j＝16.3,4.5hz,1h),3.63(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.57(dq,j＝12.4,4.6hz,1h),2.16(dd,j＝12.3,8.4hz,1h).
【实施例8】化合物13g和13h的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-甲基苯基磺酸酯(60.66mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝6:1，得到63.14mg的土黄色固体13g，产率42％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.55(dd,j＝6.5,3.0hz,2h),7.34(p,j＝5.4,4.5hz,5h),7.24–7.03(m,8h),6.81(d,j＝8.6hz,2h),5.73(d,j＝5.4hz,1h),5.42(d,j＝4.3hz,1h),3.58(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.60(dt,j＝12.2,4.6hz,1h),2.34(s,3h),2.19(dd,j＝12.2,8.4hz,1h)；同时得到68.13mg的浅棕色固体13h，产率为40％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.58(dt,j＝7.3,3.9hz,2h),7.39–7.30(m,5h),7.20–7.10(m,8h),6.79(d,j＝8.3hz,2h),5.71(s,1h),5.43(d,j＝4.4hz,1h).
【实施例9】化合物13i的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-羟基苯基磺酸酯(61.26mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝3:1，分别得到84.47mg的浅灰色固体13i，产率56％，1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.80(s,1h),8.71(s,1h),7.62–7.51(m,2h),7.46–7.35(m,5h),7.35–7.25(m,4h),7.10–7.02(m,2h),6.91–6.82(m,2h),6.82–6.74(m,2h),5.69(d,j＝1.2hz,1h),5.47(dd,j＝4.3,1.2hz,1h),3.71(dd,j＝8.3,4.6hz,1h),2.43(dt,j＝12.1,4.5hz,1h),2.34(dd,j＝12.1,8.3hz,1h)。
【实施例10】化合物13j和13k的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯4-三氟甲基苯基磺酸酯(77.17mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到68.92mg的深棕色固体13j，产率42％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.65(d,j＝8.4hz,2h),7.56(dd,j＝6.5,2.9hz,2h),7.43–7.30(m,7h),7.24–7.12(m,4h),6.81(d,j＝8.5hz,2h),5.74(s,1h),5.44(d,j＝4.2hz,1h),3.62(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.61(dt,j＝12.2,4.5hz,1h),2.24(dd,j＝12.3,8.5hz,1h)；同时得到64.0mg的深灰色固体13k，产率为39％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.66(d,j＝8.4hz,2h),7.58(dd,j＝7.0,2.8hz,2h),7.48–7.30(m,7h),7.25–7.13(m,4h),6.80(d,j＝8.2hz,2h),5.73(s,1h),5.46(d,j＝4.4hz,1h),3.67(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.59(dt,j＝12.4,4.5hz,1h),2.19(dd,j＝12.3,8.4hz,1h).
【实施例11】化合物13l的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-甲氧基苯基磺酸酯(65.56mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝6:1，得到94.19mg的浅黄色固体13l，产率61％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.55(dd,j＝6.5,3.0hz,2h),7.39–7.27(m,5h),7.18(t,j＝9.0hz,4h),6.81(ddd,j＝12.8,8.5,5.5hz,6h),5.74(d,j＝7.6hz,1h),5.42(d,j＝4.3hz,1h),3.78(s,3h),3.60(dd,j＝8.4,4.5hz,1h),2.61(dt,j＝12.3,4.4hz,1h),2.20(dd,j＝12.3,8.3hz,1h).
【实施例12】化合物13m的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-甲基苯基磺酸酯(60.66mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝6:1，得到102.23mg的浅黄色固体13m，产率68％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.62–7.50(m,3h),7.43–7.25(m,5h),7.19–7.13(m,3h),7.14–6.94(m,4h),6.81(dd,j＝9.0,6.6hz,2h),5.78–5.63(m,1h),5.53–5.39(m,1h),3.62(ddd,j＝12.5,8.4,4.5hz,1h),2.58(dq,j＝12.2,3.9,3.4hz,1h),2.36–2.29(m,3h),2.15(dd,j＝12.2,8.5hz,1h).
【实施例13】化合物13n的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-三氟甲基苯基磺酸酯(77.17mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到101.74mg的深棕色固体13n，产率62％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.64–7.50(m,6h),7.35(dt,j＝5.2,2.8hz,5h),7.19(dd,j＝8.5,2.6hz,4h),6.86–6.77(m,2h),5.75(s,1h),5.46(d,j＝4.4hz,1h),3.71(dd,j＝8.3,4.4hz,1h),2.60(dt,j＝12.3,4.5hz,1h),2.20(dd,j＝12.3,8.4hz,1h).
【实施例14】化合物13o的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-氯苯基磺酸酯(66.91mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到105.77mg的深棕色固体13o，产率68％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.66–7.51(m,3h),7.32(ddd,j＝19.0,6.8,2.8hz,8h),7.18(dd,j＝8.4,3.5hz,4h),6.80(d,j＝8.4hz,2h),5.72(s,1h),5.44(d,j＝4.4hz,1h),3.66(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.58(dt,j＝12.4,4.5hz,1h),2.18(dd,j＝12.4,8.4hz,1h).
【实施例15】化合物13p的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-羟基苯基磺酸酯(61.26mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝3:1，得到82.96mg的浅棕色固体13p，产率55％。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.92(s,1h),8.80(s,1h),7.55(dd,j＝6.6,3.0hz,2h),7.45–7.34(m,5h),7.32(d,j＝8.3hz,2h),7.29–7.21(m,2h),7.18(t,j＝8.5hz,1h),6.91–6.77(m,4h),6.75–6.67(m,1h),5.70(d,j＝1.2hz,1h),5.48(dd,j＝4.3,1.2hz,1h),3.78(dd,j＝8.3,4.5hz,1h),2.46(dt,j＝12.2,4.5hz,1h),2.35(dd,j＝12.2,8.3hz,1h).
【实施例16】化合物13q的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯3-溴苯基磺酸酯(80.51mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，分别得到106.80mg的浅灰色固体13q，产率64％。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ7.57(dt,j＝6.8,2.3hz,2h),7.45(dd,j＝6.8,1.9hz,2h),7.40–7.30(m,5h),7.30–7.15(m,6h),6.85–6.75(m,2h),5.72(d,j＝1.2hz,1h),5.45(dd,j＝4.4,1.2hz,1h),3.65(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.58(dt,j＝12.3,4.5hz,1h),2.18(dd,j＝12.3,8.4hz,1h).
【实施例17】化合物13r和13s的制备:
称取3-(4-(苯硒基)苯基)-4-(4-羟基苯基)呋喃化合物10(100mg,0.255mmol)和乙烯1-萘酚基磺酸酯(71.68mg,0.306mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入4ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝5:1，得到65.40mg的浅灰色固体13r，产率41％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.17–8.04(m,1h),7.90–7.80(m,1h),7.76(d,j＝8.2hz,1h),7.61–7.44(m,6h),7.31(d,j＝9.0hz,5h),7.14(dd,j＝8.2,5.7hz,4h),6.72(d,j＝8.4hz,2h),6.09(s,1h),5.82(s,1h),5.44(d,j＝4.3hz,1h),3.77(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),2.71(dt,j＝12.3,4.5hz,1h),2.23(dd,j＝12.3,8.4hz,1h)；同时得到62.22mg的深灰色固体13s，产率为39％，1hnmr(400mhz,chloroform-d)δ8.18–8.08(m,1h),7.89–7.82(m,1h),7.77(d,j＝8.2hz,1h),7.59–7.46(m,6h),7.32(dd,j＝5.1,1.8hz,3h),7.24(s,2h),7.13(dd,j＝15.2,8.3hz,4h),6.81–6.70(m,2h),5.79(s,1h),5.44(d,j＝4.3hz,1h).
【实施例18】化合物22a的制备:
称取3,4-二羟苯基呋喃化合物18(100mg,0.396mmol)和乙烯4-苯硒基磺酸酯(161.50mg,0.476mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入5ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝3:1，得到168.65mg黄色固体22a，产率72％。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.67(s,2h),7.53(dd,j＝6.5,3.1hz,2h),7.50–7.45(m,2h),7.41–7.35(m,3h),7.24(dd,j＝8.7,3.0hz,6h),6.82(t,j＝8.6hz,4h),5.65(d,j＝1.2hz,1h),5.45(d,j＝4.3hz,1h),3.81(dd,j＝8.3,4.5hz,1h),2.42(dt,j＝12.1,4.4hz,1h),2.29(dd,j＝12.1,8.3hz,1h).
【实施例19】化合物22b的制备:
称取3,4-二羟苯基呋喃化合物18(100mg,0.396mmol)和乙烯3-苯硒基磺酸酯(161.50mg,0.476mmol)置于25ml两口圆底瓶，加入5ml无水四氢呋喃助溶，然后缓慢升温至90℃，反应8h，tlc检测反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，取有机层，无水硫酸钠干燥。减压脱溶，柱层析分离纯化，洗脱剂比例为石油醚:乙酸乙酯＝3:1，得到163.97mg深棕色固体22b，产率70％。1hnmr(400mhz,acetone-d6)δ9.21(d,j＝4.9hz,2h),7.18–7.02(m,2h),6.89(ddd,j＝10.4,4.7,2.8hz,6h),6.73(dq,j＝5.1,3.2,2.8hz,5h),6.34–6.30(m,4h),5.19(d,j＝1.2hz,1h),4.96(d,j＝4.3hz,1h),3.58(q,j＝7.1hz,1h),3.37(dd,j＝8.3,4.3hz,1h),1.80(dt,j＝12.1,4.5hz,1h).
【实施例20】化合物的相对亲和力测定
目标化合物与erα和erβ的亲和力通过荧光偏振法进行测定，化合物的亲和力是内源性e2亲和力的相对值，设定e2与受体亲和力的值rba＝100％。在384孔板中，加入20μl由0.8μmerα或erβ蛋白、150nm荧光配体和2.4μg牛免疫球蛋白的磷酸钾缓冲液后，再加入20μl目标化合物溶液，化合物浓度梯度为:3.16×10-4m,1×10-4m,3.16×10-5m,1×10-5m,3.16×10-6m,1×10-6m,3.16×10-7m,1×10-7m,3.16×10-8m,1×10-8m,3.16×10-9m。避光、室温下放置2小时后，在酶标仪上读板，选取485nm处波长为主波长，528nm处波长为参照波长，分析实验结果，根据公式受体亲和力rba＝测试物ki/雌二醇ki×100计算出每个化合物的rba值。
根据表1的结果发现，这些phse-obhs的缀合物均展现出了较好的er亲和力且绝大多数为erα选择性，其中化合物13m和13n的相对结合力最高，其rba值分别为6.62％和6.39％，同时erα/erβ的选择性最高达到了20.79(13d),比较发现苯磺酸酯苯环上4位的取代基对亲和力有着较大的影响，体积更大的萘类化合物(13r,13s)他们的亲和力明显低于其他化合物，这表明用大体积的基团可能与受体不能很好的结合。
表1.phse-obhs缀合物对erα和erβ的相对亲和力
【实施例21】化合物的抗肿瘤活性实验
mcf-7细胞在含10％胎牛血清的有酚红dmem液体培养基中培养。细胞密度至80％～90％时，消化细胞，并用含10％cs的无酚红dmem培养基将细胞悬浮液铺至96孔细胞培养板中。待细胞完全贴壁后，弃去原培养液，每孔加入100μl新鲜的用含10％cs的dmem培养基配制的化合物溶液，化合物浓度梯度为:1×10-6m,5×10-5m,1×10-5m,5×10-4m,1×10-4m。药物处理培养3天后，取出培养板，每孔加入20μl5mg/mlmtt工作液，置于37℃、5％co2培养箱中孵育4小时。之后吸去每孔液体，然后每孔加入100μl二甲亚砜(dmso)，放在微量搅拌器上震荡10～15分钟使结晶物充分溶解。在酶标仪上读板，选取490nm处波长为主波长，630nm处波长为参照波长，分析实验结果，并计算出ic50。
表2.phse-obhs缀合物的抗肿瘤活性结果(ic50,μm)a
结果讨论:
根据生物活性测试结果，这些phse-obhs的缀合物均展现出了较好的er亲和力且绝大多数为erα选择性，其中化合物13m和13n的相对结合力最高，其rba值分别为6.62％和6.39％。在体外细胞抑制实验中，除化合物22a外所有的化合物的抗乳腺癌活性均强于4oht，当取代基相同时，取代基在对位的化合物展现出了更强的抗乳腺癌活性,其中活性最好的是化合物13i，其ic50达到了2.08μm，这可能是由于对位羟基可以作为氢键供体，同时还可以有效改变分子极性和电荷分布从而提高了分子生物活性。上述结果证明了苯硒基团的引入能够提高化合物抗癌活性，为后续优化设计obhs系列抗乳腺癌小分子化合物提供了一定的基础。