本发明属于医学材料技术和药物领域，具体地本发明涉及一种环状rnas核苷酸，尤其是涉及人环状rnas核苷酸。该核苷酸可与circ_0001017互补，从而抑制人circ_0001017的表达，与其他抗肿瘤药物其起到抗肿瘤的作用。
背景技术：
：circrnas是一种普遍的其分子呈封闭环状结构的rna，可由外显子或内含子、非编码rna等环化形成。adar1、qki、fus、hnrnpl和dhx9等参与了circrnas形成过程的调控。circrnas通过多种方式发挥作用，研究表明circrnas含有mirna应答元件可以竞争性结合mirna，通过影响mirna方式调节基因表达的；有的circrnas可与小核糖核蛋白相互作用，调控基因的转录；部分circrnas可以调节pre-mrna的剪接，改变mrna含量，从而影响蛋白质的产量。在细胞的生长、增值、分化、周期调控和应激等多个过程中circrnas均起重要作用，其表达变化与神经系统疾病、糖尿病、冠心病以及多种癌症的发生、发展、和预后密切相关。rna干扰(rnainterference，rnai)技术利用双链小rna高效、特异性降解细胞内同源rna从而沉默靶基因，从而实现干扰靶基因的功能。近年，尽管临床上肿瘤的联合疗法得到普及，但是联合疗法对肿瘤患者的5年生存率提高不大，中晚期患者生存率更低，约为20％。部分化疗药物副作用大限制了药物的运用。因此，寻找更安全有效的靶向性联合疗法是提高肿瘤患者生存的途径。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种能够特异高效地抑制circ_0001017表达的sirna及其应用。本发明的目的是这样实现的，包括合成核苷酸的序列由auagauuacuucgcacugguucc(seqidno.1)序列中的18-23个连续核苷酸序列组成或者互补序列中的18-23个连续核苷酸序列组成。特别是其包含序列：auagauuacuucgcacugg(seqidno.2)和agauuacuucgcacugguucc(seqidno.3)。核苷酸为核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或者核糖核苷酸与脱氧核糖核苷酸的嵌合体。核苷酸进一步被核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种修饰。修饰选自氟代修饰、硫代修饰、2-甲氧基修饰、胆固醇修饰、lna修饰中的一种或几种。核苷酸和其他抗肿瘤治疗药物特别是三价无机砷。制备治疗癌症药物中的应用。癌症包括：肝癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、大肠癌、胃癌、、鼻咽癌、卵巢癌、前列腺癌症、慢性或急性白血病、脑瘤、食道癌、口腔癌、贲门癌、结肠癌、胆囊癌、喉癌、牙龈癌、尿道癌、皮肤癌、直肠癌、中耳癌、骨癌、睾丸癌、内分泌系统的癌症、淋巴细胞性淋巴瘤。本研究受国家自然科学基金的支持（81860572）。本发明（优点）：发明的核苷酸具有很好的circ_0001017抑制效果，作用于特异性的靶位点，特异性强、毒性低、副作用小和修饰半衰期长，可以与多种抗肿瘤药物合用。具体实施方式下面对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。具体实施方式：实施例1本实施例中的沉默rna序列为auagauuacuucgcacuggdtdt(seqidno.2),以及互补序列ccagugcgaaguaaucuaudtdt(seqidno.4)。所有的序列都是从5端到3端,其中dtdt是不足19核苷酸加上去了tt尾巴，circ_0001017的rna序列信息存在于ucsc数据库中。本研究受国家自然科学基金的支持（81860572）。对照合成:首先，由上海吉玛制药技术有限公司合成核苷酸，合成包含其互补序列的双链rna序列，对照组使用吉玛制药技术有限公司的a06001序列为uucuccgaacgugucacgudtdt(seqidno.5)以及互补的acgugacacguucggagaadtdt(seqidno.6)作为阴性对照。细胞培养：将a549或者mba-md-231细胞在含有10％胎牛血清的1640培养基中培养，胎牛血清购自cellmax公司，1640培养基来自于hyclone，于37℃，5％co2条件下培养。收集生长状态良好的细胞，离心计数，以5000个每孔铺于96孔板内200000个接种于六孔板内，37℃，5％co2培养。rna转染：采用碧云天公司lipo8000™转染试剂，按照操作说明进行操作，a549使用六孔板转染时候，六孔板中sirna量为每孔20ul，转染试剂为15ul,培养基为2ml，mba-md-231使用六孔板转染时候，六孔板中sirna量为每孔10ul，转染试剂为7.5ul,培养基为2ml，96小时检测沉默效果,其结果见表1。表1.circ_0001017沉默效果沉默效果对照组沉默组1沉默组1a5491.02±0.070.21±0.020.24±0.08mba-md-2311.04±0.090.18±0.040.16±0.03表1为本发明sirna沉默的效果表1，对照组使用的是阴性对照片段，沉默组1为实施例1沉默核苷酸片段的结果；沉默组2为实施例2沉默核苷酸片段的的结果，数据使用2^-δδct表示。a549使用96孔板转染时候96孔板sirna量为每孔0.5ul，转染试剂为0.5ul培养基为0.1ml，mba-md-231使用96孔板转染时候96孔板sirna量为每孔0.25ul，转染试剂为0.25ul培养基为0.1ml，二者转染后24小时加入亚砷酸钠a549加入30um(微摩尔每升),mba-md-2315um，其中一排不加入亚砷酸钠，再培养48小时后mts检测细胞活力,其结果见表2。表2.circ_0001017沉默后加入砷后活力（%）活力%未加砷组对照组实验组1实验组2a549100±4.5383±3.5267±2.3165±5.38mba-md-231101±5.6284±3.7757±4.0153±3.40表2为本发明mtt的结果表2；未加入砷组：不加入亚砷酸钠，对照组：为使用阴性对照片段后加入亚砷酸钠的结果，定为100%，实验组1实施例1沉默核苷酸片段沉默后加入亚砷酸钠的结果，实验组2实施例2沉默核苷酸片段沉默后加入亚砷酸钠的结果。mts检测采用promega公司celltiter96®aqueousonesolutioncellproliferationassay，an说明书的方法进行操作计算。检测沉默效果采用荧光定量pcr，pcr的条件是1、95度2-10分，2、95度10秒，3、60度10秒，4、72度15秒，pcr试剂采用罗氏或者康为世纪的，引物序列如下：caaggaaccagtgcgaagtaatc(seqidno.7)和ttccaaaattgtgtcgactcttgt(seqidno.8).采用2^δδct表示表达量。实施例2本实施例中的rna序列为：agauuacuucgcacugguucc(seqidno.3),互补序列：ggaaccagugcgaaguaaucu(seqidno.9)，细胞培养和转染等试验方法同实施例1，仅使用的沉默rna序列不同。沉默效果，其结果见表1,mtt其结果见表2。sequencelisting<110>昆明医科大学<120>一种抑制circ_0001017表达的sirna及其应用<130><140><141><160>9<170>patentinversion3.3<210>1<211>23<212>rna<213>人工序列<400>1auagauuacuucgcacugguucc23<210>2<211>19<212>rna<213>人工序列<400>2auagauuacuucgcacugg19<210>3<211>21<212>rna<213>人工序列<400>3agauuacuucgcacugguucc21<210>4<211>19<212>rna<213>人工序列<400>4ccagugcgaaguaaucuau19<210>5<211>19<212>rna<213>人工序列<400>5uucuccgaacgugucacgu19<210>6<211>19<212>rna<213>人工序列<400>6acgugacacguucggagaa19<210>7<211>23<212>dna<213>人工序列<400>7caaggaaccagtgcgaagtaatc23<210>8<211>24<212>dna<213>人工序列<400>8ttccaaaattgtgtcgactcttgt24<210>9<211>21<212>rna<213>人工序列<400>9ggaaccagugcgaaguaaucu21当前第1页12