本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及一种jak抑制剂的合成方法。
背景技术：
jak-stat(januskinase-signaltransducerandactivatoroftranscription)信号通路是近年来发现的一条由细胞因子刺激的信号转导通路，参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。与其它信号通路相比，这条信号通路的传递过程相对简单，它主要由三个成分组成，即酪氨酸激酶相关受体、酪氨酸激酶jak和转录因子stat。
细胞因子(如干扰素ifn和白介素il等)和生长因子(如表皮生长因子egf，血小板衍生因子pdgf等)在细胞膜上有相应的受体。这些受体的共同特点是受体本身不具有激酶活性，但胞内段具有酪氨酸激酶jak的结合位点。受体与配体结合后，通过与之相结合的jak的活化，来磷酸化各种靶蛋白的酪氨酸残基以实现信号从胞外到胞内的转递。jak家族是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶(ptk)，迄今为止已鉴定出四种jak家族的激酶，包括jak1、jak2、jak3和tyk2。它们在结构上有7个jak同源结构域(jakhomologydomain，jh)，其中jh1结构域为激酶区、jh2结构域是“假”激酶区、jh6和jh7是受体结合区域。stat在信号转导和转录激活上发挥了关键性的作用，stat是一种dna结合蛋白，是重要的jak底物，stat被jak磷酸化后发生二聚，然后穿过核膜进入核内调节相关基因的表达，该信号通路称为jak-stat途径。jak-stat通路广泛存在于机体内各种组织细胞内，自身免疫、血液生成、及肿瘤发生中起到了很重要的生理作用。该通路的异常活化将会诱发诸如免疫缺陷、炎症及肿瘤等疾病。因此，作用于jak/stat信号通路的抑制剂可以应用在癌症、感染、炎症和自身免疫性疾病疾病中。
因此，寻找和筛选出合成路线简单，原料易得，反应过程中副产物较少，目标产物产率及纯度较高的jak抑制剂具有重要的研究意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种可以用于治疗或预防癌症，感染，炎症及自身免疫性病变等细胞增殖类疾病的jak抑制剂的合成方法，整个合成路线简单，适于工业化生产，且原料易得，有效减少了反应过程中杂质及副产物的产生，提高目标产物的产率及纯度。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种jak抑制剂的合成方法，包括：以4-硝基吡唑和3-氧杂环丁酮为初始原料；将初始原料4-硝基吡唑与环丙基硼酸进行chan-lam偶联反应得到中间体a-1，中间体a-1经氢气还原、tsoh保护得到关键中间体a-2；将初始原料3-氧杂环丁酮与氰亚甲基三苯基膦进行wetting反应得到中间体b-1，中间体b-1与4-吡唑硼酸频那醇酯经过加成反应后得到中间体b-2，中间体b-2与2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶发生亲核取代反应得到关键中间体b-3；关键中间体a-2与关键中间体b-3发生亲核取代反应得到jak抑制剂；
所述jak抑制剂及中间体a-1，关键中间体a-2，中间体b-1，中间体b-2，关键中间体b-3的结构如下所示：
进一步地，所述关键中间体a-2与关键中间体b-3发生亲核取代反应得到jak抑制剂的具体过程如下：
将100mg关键中间体b-3溶于10ml的正丁醇溶液中，向其中加入207mg关键中间体a-2，于100℃下反应12小时；反应结束后，反应液经过减压浓缩，残余物经高效液相制备得到20mg的浅黄色固体jak抑制剂；其中，高效液相中流动相为乙腈、水、0.05％的三氟乙酸，梯度为60％-90％-10％。
进一步地，所述中间体a-1的具体制备过程如下：
将1.45g环丙基硼酸、1.55g无水醋酸铜、2.26g4，4’-二叔丁基联吡啶和1.87g碳酸钠依次加入到30ml的1，2-二氯乙烷中得到混合溶液，在氮气保护气氛下，将1.0g的4-硝基吡唑加入到上述混合溶液中，于70℃反应16小时；反应结束后，冷却至室温，减压浓缩除去溶剂后得到粗品，将粗品用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝8/1体积比的硅胶柱层析纯化得到740mg的中间体a-1。
进一步地，所述关键中间体a-2的具体制备过程如下：
将200mg中间体a-1溶于10ml的甲醇中的得到混合溶液，在氢气气氛下，将30mg质量分数为10％的钯-碳催化剂加入到上述混合溶液中，于25℃反应1小时后过滤，向滤液中加入248mg对甲苯磺酸单水合物，然后经过减压浓缩得到关键中间体a-2粗品，产品无需进一步纯化，直接投入到下一步反应。
进一步地，所述中间体b-1的具体制备过程如下：
室温下，将10.0g氰亚甲基三苯基膦和1.2g3-氧杂环丁酮溶于100ml的二氯甲烷中，搅拌反应16小时；然后经过减压浓缩除去溶剂，然后将残余物加入到50ml体积比为10:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂中，有白色固体生成后进行过滤，将滤液进行减压浓缩除去溶剂，将残余物用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝5/1体积比的硅胶柱层析纯化得到1.0g中间体b-1。
进一步地，所述中间体b-2的具体制备过程如下：
将500mg中间体b-1和1.3g4-吡唑硼酸频那醇酯溶于10ml的乙腈中，再向其中加入1.6gdbu催化剂，然后于60℃下搅拌反应18小时；反应结束后，减压浓缩反应液，向残余物中加入1n盐酸水溶液调ph值至3-4，然后用乙酸乙酯萃取三次，将有机相合并，将合并后的有机相用水和饱和食盐水各20ml分别洗涤三次，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液进行减压浓缩得900mg黄色油状物中间体b-2。
进一步地，所述关键中间体b-3的具体制备过程如下：
在氮气保护气氛下，将300mg中间体b-2，317mg2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶和331mg碳酸钠悬浮于0.5ml的二氧六环和0.5ml的水中，再向其中加入82mg[1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯，于80℃下搅拌反应4小时；反应结束后，减压浓缩反应液，向残余物加入20ml水溶解，然后用二氯甲烷萃取三次，将有机相合并，将合并后的有机相用水和饱和食盐水各20ml分别洗涤三次，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，残余物用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝2/1体积比的硅胶柱层析纯化得到102mg浅黄色固体关键中间体b-3。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明中以4-硝基吡唑和3-氧杂环丁酮为初始原料，初始原料4-硝基吡唑经两步反应合成关键中间体a-2，初始原料3-氧杂环丁酮经三步反应得到关键中间体b-3，关键中间体a-2与关键中间体b-3发生亲核取代反应得到jak抑制剂，整个合成路线简单成熟，适合工业化生产，原料易得，反应条件温和，可控性强，有效减少了反应过程中杂质及副产物的产生，提高目标产物的产率及纯度，最终制备的jak抑制剂对jak激酶的抑制效果较高，用于治疗或预防癌症，感染，炎症及自身免疫性病变等细胞增殖类疾病。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述。这些实施例仅是出于解释说明的目的，而不限制本发明的范围和实质。本发明中所使用的原料可以通过商业途径购买，也可以根据本领域的常规化学合成方法制备。
化合物的结构由核磁共振(nmr)或质谱(ms)来确定，核磁共振谱是通过brukeravance-500仪器获得，氘代二甲亚砜，氘代氯仿和氘代甲醇等为溶剂，四甲基硅烷(tms)为内标。质谱是由液相色谱-质谱(lc-ms)联用仪agilenttechnologies6110获得，采用esi离子源。
高效液相制备所用的仪器是gilson281，所用的制备柱是shimadazushim-pack，prc-ods，20×250mm，15μm。
本发明公开了一种jak抑制剂的合成方法，包括：以4-硝基吡唑和3-氧杂环丁酮为初始原料；将初始原料4-硝基吡唑与环丙基硼酸进行chan-lam偶联反应得到中间体a-1，中间体a-1经氢气还原、tsoh保护得到关键中间体a-2；将初始原料3-氧杂环丁酮与氰亚甲基三苯基膦进行wetting反应得到中间体b-1，中间体b-1与4-吡唑硼酸频那醇酯经过加成反应后得到中间体b-2，中间体b-2与2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶发生亲核取代反应得到关键中间体b-3；关键中间体a-2与关键中间体b-3发生亲核取代反应得到jak抑制剂；
所述jak抑制剂及中间体a-1，关键中间体a-2，中间体b-1，中间体b-2，关键中间体b-3的结构如下所示：
实施例1
制备关键中间体a-2
(1)将1.45g环丙基硼酸、1.55g无水醋酸铜、2.26g4，4’-二叔丁基联吡啶和1.87g碳酸钠依次加入到30ml的1，2-二氯乙烷中得到混合溶液，在氮气保护气氛下，将1.0g的4-硝基吡唑加入到上述混合溶液中，于70℃反应16小时；反应结束后，冷却至室温，减压浓缩除去溶剂后得到粗品，将粗品用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝8/1体积比的硅胶柱层析纯化得到740mg的中间体a-1，产率55％，lc-ms(esi)：m/z＝154[m+h]+；
(2)将200mg中间体a-1溶于10ml的甲醇中的得到混合溶液，在氢气气氛下，将30mg质量分数为10％的钯-碳催化剂加入到上述混合溶液中，于25℃反应1小时后过滤，向滤液中加入248mg对甲苯磺酸单水合物，然后经过减压浓缩得到关键中间体a-2粗品，产品无需进一步纯化，直接投入到下一步反应，lc-ms(esi)：m/z＝124[m+h]+。
实施例2
制备关键中间体b-3
(1)室温下，将10.0g氰亚甲基三苯基膦和1.2g3-氧杂环丁酮溶于100ml的二氯甲烷中，搅拌反应16小时；然后经过减压浓缩除去溶剂，然后将残余物加入到50ml体积比为10:1的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂中，有白色固体生成后进行过滤，将滤液进行减压浓缩除去溶剂，将残余物用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝5/1体积比的硅胶柱层析纯化得到1.0g中间体b-1，产率63％，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：5.39(m，2h)，5.30(m，2h)，5.25(m，1h)ppm；
(2)将500mg中间体b-1和1.3g4-吡唑硼酸频那醇酯溶于10ml的乙腈中，再向其中加入1.6gdbu催化剂，然后于60℃下搅拌反应18小时；反应结束后，减压浓缩反应液，向残余物中加入1n盐酸水溶液调ph值至3-4，然后用乙酸乙酯萃取三次，将有机相合并，将合并后的有机相用水和饱和食盐水各20ml分别洗涤三次，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，将滤液进行减压浓缩得900mg黄色油状物中间体b-2，产率59％；
(3)在氮气保护气氛下，将300mg中间体b-2，317mg2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶和331mg碳酸钠悬浮于0.5ml的二氧六环和0.5ml的水中，再向其中加入82mg[1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯，于80℃下搅拌反应4小时；反应结束后，减压浓缩反应液，向残余物加入20ml水溶解，然后用二氯甲烷萃取三次，将有机相合并，将合并后的有机相用水和饱和食盐水各20ml分别洗涤三次，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩滤液，残余物用洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝2/1体积比的硅胶柱层析纯化得到102mg浅黄色固体关键中间体b-3，产率30％，lc-ms(esi)：m/z＝332[m+h]+。
实施例3
制备jak抑制剂
将100mg关键中间体b-3溶于10ml的正丁醇溶液中，向其中加入207mg关键中间体a-2，于100℃下反应12小时；反应结束后，反应液经过减压浓缩，残余物经高效液相制备得到20mg的浅黄色固体jak抑制剂，产率40％，lc-ms(esi)：m/z＝389[m+h]+，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：8.42(s，1h)，8.36(s，1h)，7.96(s，1h)，7.87(d，j＝6hz，1h)，7.54(s，1h)，7.33(d，j＝6hz，1h)，7.14(s，1h)，5.24(d，j＝8hz，2h)，4.92(d，j＝8hz，2h)，3.63(m，1h)，3.48(s，3h)，1.17(m，2h)，1.10(m，2h)ppm。
其中，高效液相中流动相为乙腈、水、0.05％的三氟乙酸，梯度为60％-90％-10％。
本发明中以4-硝基吡唑和3-氧杂环丁酮为初始原料，初始原料4-硝基吡唑经两步反应合成关键中间体a-2，初始原料3-氧杂环丁酮经三步反应得到关键中间体b-3，关键中间体a-2与关键中间体b-3发生亲核取代反应得到jak抑制剂，整个合成路线简单成熟，适合工业化生产，原料易得，反应条件温和，可控性强，有效减少了反应过程中杂质及副产物的产生，提高目标产物的产率及纯度，最终制备的jak抑制剂对jak激酶的抑制效果较高，用于治疗或预防癌症，感染，炎症及自身免疫性病变等细胞增殖类疾病。
以上应用了具体个例对本发明进行阐述，只是用于帮助理解本发明，并不用以限制本发明。对于本发明所属技术领域的技术人员，依据本发明的思想，还可以做出若干简单推演、变形或替换。