一种可口服的新型抗肿瘤Pt(IV)配合物制备方法及其应用与流程

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物制备方法及其应用。

背景技术：

癌症是严重威胁着人类的健康疾病之一，全世界每年约有700万人死于癌症。近年来，因人们的不良生活习惯和环境污染，癌症的发病率和死亡率急剧上升，已成为人类亟待攻克的难题。为了减小癌症的发病率，降低癌症患者的死亡率，因此，不断开发适合癌症治疗的治疗方案势在必行。化疗是目前治疗癌症较为安全且对人体伤害较小的3大手段之一。在临床使用的众多化疗药物中，铂类药物作为一种抗肿瘤效果突出、抗肿瘤谱广等优势被广泛用于癌症治疗。顺铂，自1967年rosenberg等人发现具有抗肿瘤活性以来，在临床治疗上取的了巨大的成功。但由于用药反复出现的耐药性、毒副作用和剂量限制方面，使顺铂的功效受到了严重的阻碍。几十年来，研究人员试图基于经典顺铂的经典构型合成大量的新型的pt(ii)配合物，然而其治疗疗效不仅没有超过顺铂，而且仍具有和顺铂相同的毒副作用及耐药性，对于生物利用度和口服给药仍然是一个巨大的挑战。

八面体的pt(iv)配合物由于其一定的动力学惰性，使得作为前药可通过避免与生物分子的副反应而完整地到达肿瘤部位，然后将被体内生物还原剂(谷胱甘肽或抗坏血酸)激活，以释放细胞毒性的亲本pt(ii)配合物。赛特铂，化学名为顺式-二氯-反式-二乙酸-顺式-氨-环己胺合铂(iv)，简称jm216，是由美国bristol-squibb公司开发的新型口服铂类抗肿瘤药物，它与顺铂和卡铂无交叉耐药性或交叉耐药度低，口服生物利用度高，其细胞毒性与顺铂相当，赛特铂无明显的肾毒性和神经毒性，主要表现的毒性为骨髓抑制。尽管jm216于1992年已进入临床试验研究，已经数达几十年，但迟迟不能上市，主要存在以下三大问题：(1)目前癌症的化疗大部分采用联合用药，与铂类药物联用的大部分抗肿瘤药物以静脉注射形式具有最佳疗效，因而寻找全口服给药的联合化疗方案较难；(2)在疗效方面，与顺铂、卡铂比较，jm216除具有口服活性优势外并不突出；(3)jm216合成过程复杂，且存在口服给药所需剂量较大等问题，导致治疗成本高。

为了解决jm216存在的一系列问题，我们在一端保留jm216具有口服的特征，在轴向上另一端引入一个氯化物，使得铂配合物进入人后，氧化还原电位的负值降低并且增加还原动力；同时改变jm216离去基团配体，合成一系列新型具有口服作用的pt(iv)化合物。我们期望该化合物在铂类药物以后的研究中既能发挥赛特铂的口服作用，又能发挥铂类药物抗肿瘤的优势。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物。

本发明的第二个目的是提供一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物的制备方法。

本发明的第三个目的是提供一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物，结构式i如下所示：

其中r为cl、

一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式i的制备方法，包括如下步骤：

1、以三氯氨铂酸钾为原料，溶于纯化水中，分别加入碘化钾和环己胺，水浴45℃～70℃，反应3～7小时，抽滤，所得滤饼用纯化水润洗2～3次，甲醇润洗1～2次，60℃～80℃干燥，得i/cl中间体。其中三氯胺铂酸钾，碘化钾和环己胺的摩尔比为1:1:1。

2、将步骤1中制备得到的i/cl中间体加入适量的纯化水溶于烧杯中，水浴45℃～70℃，均匀搅拌。另称取适量的agno3溶于纯化水，缓慢滴加于烧杯中，继续反应1～4h。反应结束后，抽滤除去agi、agcl沉淀，收集滤液；其中，i/cl中间体与硝酸银的摩尔比为1:2。

3、将步骤2中收集的滤液加热至45℃～70℃，称取r溶于纯化水缓慢加入溶液中，45℃～70℃搅拌1～4h，制得以氨基和环己胺为不对称的载体基团的pt(ii)化合物，产物使用纯化水润洗2～3次，乙醇润洗1～2次，60℃～80℃干燥。

其中r为cl、

4、将步骤3制备的pt(ii)化合物溶于乙酸中，称取n-氯代丁二酰亚胺加入到反应体系中，室温均匀搅拌过夜。反应结束后，减压蒸发浓缩除去溶剂后冷冻干燥，制得轴向具有亲脂性基团的pt(iv)配合物；其中pt(ii)和n-氯代丁二酰亚胺的摩尔比为1:1，

其中r为cl、

一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式i在制备抗肿瘤药物中的应用，如结构式i式中具有氨基和环己胺的不对称胺配体，它是克服经典铂类药物耐药性的重要组成部分，且在轴向上一端保留亲脂性基团用于口服作用，另一端引入氯化物使得铂配合物的氧化还原电位的负值降低并且增加还原动力。此外，选择了奥沙利铂、卡铂的离去基团草酸钾、1,1-环丁二羧酸作为新型pt(iv)配合物的离去配体，增加新型pt(iv)化合物的水溶性。一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物既能发挥卡铂、奥沙利铂的抗肿瘤作用，同时又能发挥新型pt(iv)配合物的抗肿瘤优势。

本发明的主要优点在于：

1)本发明提供的结构式i式所示的配合物，保留赛特铂非离去基团的不对称氨配体，铂药通过静脉注射进入到人体内所诱导的加合物不被dna错配修复蛋白识别，使dna错配修复的丢失而避免了用药耐药性；在轴向一端保留亲脂性基团用于口服作用，另一端引入氯化物使得铂配合物的氧化还原电位的负值降低并且增加还原动力；并且在实例中部分化合物已经初步显现出优于现有的顺铂、卡铂的抗肿瘤活性，故可成为未来可口服的pt(iv)配合物；

2)本方法合成过程简单易操作，且后处理是通过冷冻干燥，操作简单易行，并且反应过程中没有高温高压，也没有使用剧毒物质，安全环保，有利于工业化生产。

附图说明

图1为实施例1中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅱ的氢谱图；

图2为实施例1中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅱ的质谱图；

图3为实施例2中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅲ的氢谱图；

图4为实施例2中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅲ的质谱图；

图5为实施例3中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅳ的氢谱图；

图6为实施例3中一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式ⅳ的质谱图。

具体实施方式

本发明提到的上述特征，或实例提到的特征可以任意组合。说明书所揭示的所有特征可与任何组合形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，尤其实施例的具体实验条件仅是举例说明而不限制本发明的范围。除非另外说明，否则所有的百分数和比率都按重量计算。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅做示范之用。

发明采用的试剂及材料

三氯胺铂酸钾、碘化钾和环己胺、氯化钾、草酸钾、生物素均为市售产品

本发明一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物式i的制备中，pt(ii)配合物合成路线如下：

1、以20g(1mol)三氯胺铂酸钾为原料，溶于200ml纯化水中，然后加入19.7g(1.8mol)碘化钾和6.6g(1mol)环己胺，水浴65℃，反应5小时，抽滤，滤饼用纯化水润洗2～3次，50ml乙醇润洗1次，70℃干燥，得25.81gi/cl中间体。产率：97.65％。

2、将步骤(1)中制备得到的25.81g(1mol)i/cl中间体加入400ml纯化水溶于烧杯中，水浴65℃，均匀搅拌。称取17.6gagno3(2mol)溶于纯化水，缓慢滴加于烧杯中，继续反应2.5h。反应结束后，抽滤除去agi、agcl沉淀，收集滤液；

3、将步骤(2)中收集的滤液，加热至65℃，称取8g(2mol)kcl加入溶液中，65℃搅拌反应3h，制得以氨基和环己胺为不对称的载体基团的pt(ii)化合物，产物使用50ml纯化水润洗2～3次，甲醇润洗1～2次，80℃干燥，得pt(ii)化合物13.424g。产率：64.47％。

其中r为cl。

anal.calcdforc6h16cl2n2pt(％):c,18.85；n,7.32；h,4.18.

found(％):c,19.91；n,7.36；h,4.52.

ir(ν,cm-1):v(nh)br3240,3194cm-1,vs(ch),vas(ch):2922,2859cm-1,δ(nh):1453cm-1,v(c-c):1299cm-1,v(pt-cl):783cm-1,v(pt-n):534cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso):δ4.66-4.91(m,3h),4.0(m,1h),2.14-2.30(m,2h),1.49-1.76(m,4h),0.94-1.28(m,4h).

hr-ms(m/z):[c6h16cl2n2pt+h]+＝382.0411(100％),381.0390(97.4％),383.0413(74.6％),384.0382(63.9％),385.0383(47.7％)。

4、将步骤2中收集的滤液，加热至65℃，称取环酸钠6.376g(1mol)加入溶液中，65℃搅拌3h，制得以氨基和环己胺为非对称的载体基团的pt(ii)化合物，产物使用50ml纯化水润洗2～3次，甲醇润洗1～2次，80℃干燥，得pt(ii)化合物8.73g。产率：62.453％。

其中r为

anal.calcdforc12h22n2o4pt(％):c,31.78；n,6.17；h,4.85.

found(％):c,30.94；n,6.47；h,4.14.

ir(ν,cm-1):v(nh)br3235,3117cm-1,vs(ch),vas(ch):2927,2848cm-1,δ(nh):1453cm-1,v(c-o):1639,1566cm-1,v(c-c):1275cm-1,v(pt-o):807cm-1,v(pt-n):565cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso):δ4.88-5.02(d,2h),4.01-4.17(s,3h),2.58-2.70(m,4h),2.30-2.42(s,1h),2.17-2.26(m,2h),1.52-1.68(m,4h),0.96-1.27(m,6h)。hr-ms(m/z):[c12h22n2o4pt+h]+＝454.1300(100％),453.1279(97.4％),455.1302(74.6％),457.1331(21.2％).

5、将步骤2中收集滤液，加热至65℃，称取草酸钾4.279g(1mol)加入溶液中，65℃搅拌1～4h，制得以氨基和环己胺为非对称的载体基团的pt(ii)化合物，产物使用50ml纯化水润洗2～3次，甲醇润洗1～2次，80℃干燥，得pt(ii)配合物15.85g。产率:72.738％。

其中r为

anal.calcdforc8h16n2o4pt(％):c,24.04；n,7.01；h,4.01.

found(％):c,24.12；n,6.85；h,4.32％.

ir(ν,cm-1):v(nh)br3267,3116cm-1,vs(ch),vas(ch):2936,2854cm-1,δ(nh):1448cm-1,v(c-o):1696,1586cm-1,v(c-c):1248cm-1,v(pt-o):807cm-1,v(pt-n):633cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso):δ5.12(s,2h),4.27(s,3h),2.14-2.22(m,2h),1.63-1.71(m,2h),1.48-1.56(m,1h),0.97-1.26(m,6h).

hr-ms(m/z):[c8h16n2o4pt+h]+＝400.0831(100％),399.0809(97.4％),401.0832(74.6％).

实施例1：制备如式ⅱ所示化合物(c-1)，即：

将步骤3制备的的pt(ii)化合物1.5g(1.1mol)溶于20ml乙酸中，称取0.524g(1.1mol)n-氯代丁二酰亚胺加入到反应体系中，室温均匀搅拌过夜。反应结束后，减压蒸发浓缩除66去溶剂，干燥，制得轴向具有亲脂性基团的0.45gpt(iv)配合物。产率：24.051％。其氢谱图如图1所示，其质谱图如图2所示。

ir(ν,cm-1):v(nh)br3188,3073cm-1,vs(ch),vas(ch):2931,2855cm-1,δ(nh):1448cm-1,v(c-o):1698,1615cm-1,v(c-c):1177cm-1,v(pt-o):897cm-1,v(pt-cl):694cm-1，v(pt-n):638cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso):δ3.12-3.57(s,3h,ch3),2.65-2.87(s,1h,ch),1.46-2.22(m,6h,ch2),0.97-1.38(m,4h,ch2).

hr-ms(m/z):[c8h19cl3n2o2pt+h]+＝476.0233(100％),475.0212(97.4％),478.0203(95.9％),477.0182(93.4％),479.0205(71.5％),480.0174(30.6％).

实施例2：制备如式ⅲ所示化合物(c-2)，即：

将步骤5制备的pt(ii)化合物1g(1.1mol)溶于20ml乙酸中，称取0.34g(1.1mol)n-氯代丁二酰亚胺加入到反应体系中，室温均匀搅拌过夜。反应结束后，减压蒸发浓缩除去溶剂，冷冻干燥，制得轴向具有亲脂性基团的0.33gpt(iv)配合物。产率：26.70％。其氢谱图如图3所示，其质谱图如图4所示。

ir(ν,cm-1):v(nh)br3197,3076cm-1,vs(ch),vas(ch):2935,2857cm-1,δ(nh):1451cm-1,v(c-o):1674,1613cm-1,v(c-c):1298cm-1,v(pt-o):916cm-1,v(pt-cl):697cm-1，v(pt-n):535cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso):δ6.38-6.52(m,3h,nh3),2.69-2.79(s,1h,ch),2.00-2.10(m,2h,nh2),1.93-1.97(s,3h,ch3),1.51-1.72(m,4h,ch2),1.05-1.44(m,6h,ch2).

hr-ms(m/z):[c10h19cln2o6pt+h]+＝494.0645(100％),493.0627(97.4％),495.0662(74.6％),496.0627(32.00％).

实施例3：制备如式ⅳ所示化合物(c-3)，即：

将步骤4制备的0.96g(1.1mol)的pt(ii)化合物溶于20ml乙酸中，称取0.28g(1.1mol)n-氯代丁二酰亚胺加入到反应体系中，室温均匀搅拌过夜。反应结束后，减压蒸发浓缩除去溶剂，冷冻干燥，制得轴向具有亲脂性基团的0.35gpt(iv)配合物。产率：30.17％。其氢谱图如图5所示，其质谱图如图6所示。

ir(ν,cm-1):v(nh)br3164,3078cm-1,vs(ch),vas(ch):2939,2858cm-1,δ(nh):1454cm-1,v(c-o):1680,1655cm-1,v(c-c):1208cm-1,v(pt-o):901cm-1,v(pt-cl):697cm-1，v(pt-n):573cm-1.

1hnmr(600mhz,dmso)：δ6.08-6.39(m,4h),2.64-2.70(s,1h,ch),2.44-2.46(m,3h,nh3),1.99-2.07(m,2h),1.89-1.91(s,3h,ch3),1.75-1.82(m,2h,ch2),1.48-1.70(m,4h,ch2),1.19-1.33(m,4h,ch2),1.04-1.13(m,2h,ch2).

hr-ms(m/z):[c14h25cln2o6pt-na]+＝524.1146(100％),523.1125(97.4％),525.1147(74.6％),526.1116(32％),525.1095(31.1％),527.1118(23.8％).

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明保护范围。

以mtt法测试了本发明所得的具有口服作用的新型pt(iv)化合物对人体肺癌细胞a549、人体乳腺癌细胞mcf-7、人体肝癌细胞hepg-2以及人体结肠癌细胞sw480的体外抗肿瘤活性，分别选择顺铂、赛特铂作为阳性对照。取人体肺癌细胞a549、人体乳腺癌细胞mcf-7、人体肝癌细胞hepg-2以及人体结肠癌细胞sw480悬液各180ul，铺在相应的96孔板中，在37℃，饱和湿度，5％co2的培养箱中培养24小时使细胞完全贴壁；更换其中的150ul培养基后，再加入不同浓度的新型pt(iv)化合物各20ul，继续培养48h；用mtt法分别测定od值，并计算各个化合物的ic50值。上述实验平行操作三次后取均值。

表1一种可口服的新型抗肿瘤pt(iv)配合物在各癌细胞中的ic50值(μm)