一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂、检测方法及应用与流程

文档序号:18737650发布日期:2019-09-21 01:23阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂,其特征在于:所述试剂包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的蓝舌病病毒8型特异性引物对和探针,所述探针在引物对的扩增靶标区域内,所述引物对的上游引物为Seq ID No.1所示序列,下游引物为Seq ID No.2所示序列,所述探针为Seq ID No.3所示序列;

Seq ID No.1:5’-GAGGTTGTGATTGGAACGGCTCACACCGACGATCC-3’

Seq ID No.2:5’-GTCGTACATCATAGTATCTTGCTAGACAATATCGC-3’

Seq ID No.3:

5’-CTGTAGGGCGCAGCGCGAAGGCGTTCACACATGATCCTTTTGACCTGCA-3’

其中,SEQ ID No.3所示的探针序列中,第32个碱基修饰荧光淬灭基团-dT,第33个碱基替换为碱基类似物,第35个碱基修饰荧光基团-dT,3’末端修饰C3Spacer。

2.根据权利要求1所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂,其特征在于:所述荧光淬灭基团-dT为BHQ1-dT。

3.根据权利要求1所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂,其特征在于:所述碱基类似物为dSpacer。

4.根据权利要求1所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂,其特征在于:所述荧光基团-dT为6-FAM-dT。

5.根据权利要求1-4任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂在蓝舌病病毒8型非诊断治疗目的的检测中的应用。

6.根据权利要求1-4任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂在制备蓝舌病病毒8型检测试剂盒、检测试纸条或检测芯片中的应用。

7.一种用于蓝舌病病毒8型检测的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1-4任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂。

8.根据权利要求7所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂盒,其特征在于:还包括用于一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应液、酶和反应添加剂。

9.一种蓝舌病病毒8型的非诊断治疗目的的检测方法,其特征在于:包括采用权利要求1-4任一项所述的用于蓝舌病病毒8型检测的试剂,或权利要求7或8所述的试剂盒,对待测样品的核酸进行一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测,并采用荧光检测仪收集荧光。

10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于:所述一步法逆转录重组酶聚合酶扩增的反应条件为,40℃恒温反应15分钟。

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