一种肝素钠的提取工艺的制作方法

文档序号:19747765发布日期:2020-01-21 18:49阅读:1146来源:国知局

本发明涉及生物医药领域,特别涉及一种肝素钠的提取工艺。



背景技术:

肝素是一种广泛存在于哺乳动物组织中的黏多糖,主要存在与肥大细胞中,具有抗凝血作用,被广泛用于手术和脑血栓、心肌梗死等的治疗。肝素的分子量大约3000-37500,对商品肝素的研究提示至少有21种分子个体。肝素钠是肝素的钠盐。肝素钠作为天然抗凝血物质受到世界各国的重视。也是我国主要的出口药物之一。随着研究的深入,人们发现肝素钠不但有抗凝、抗血栓形成和调节血脂的作用,还具有抗炎、抗过敏、抗病毒、抗癌等功能。目前,肝素钠主要是从猪、羊小肠黏膜和牛肺、盹肠衣盐水等中提取。研究显示肝素钠是在猪小肠粘膜中含量最高。肝素钠粗品是我国的传统出口产品,在国际上占有重要的地位。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种肝素钠的提取工艺,该工艺操作简单,肝素钠得到率高,适合工业化推广使用。

本发明是通过如下技术方案实现的:一种肝素钠的提取工艺,其特征在于,包括如下步骤:

(1)原料处理:将新鲜的小肠用清水清洗干净,清洗干净后刮取小肠粘膜,然后将小肠粘膜放入搅拌机中,直至搅成糜状,备用;

(2)加热酶解:将步骤1中得到的糜状肠粘膜放入加热罐中加水混合搅拌,然后依次加入质量为8%的胰蛋白酶和弱碱液调节ph值,直至溶液ph值为8-10,然后进行加热,加热过程中ph要保持在8.5-9.5之间,加热至30-40℃,恒温保持2-3h,然后再继续加热至50-60℃,恒温保持10-20min,趁热过滤,得到滤液;

(3)冷却吸附:将步骤2得到的滤液进行冷却,冷却至30-40℃后清除滤液上层浮油,然后加入树脂搅拌吸附6-7h,吸附完成后将树脂滤出;

(4)洗脱:将收集的树脂放入洗脱器进行冲洗,加入质量分数为10%的氯化钠溶液,温度保持在50-55℃,搅拌3-4小时后,收集洗脱液;洗脱两次,将两次收集的洗脱液合并待用;

(5)沉淀:将两次收集的洗脱液过滤移入沉淀罐中,加入质量分数为80-85%的酒精搅拌均匀,然后调节ph值保持在7-8,静置密封沉淀10-12小时,过滤得到沉淀物,备用;

(6)脱水干燥:将沉淀物放入烘干箱中干燥后即得肝素钠。

作为优选方案,步骤(2)中水与小肠粘膜的量比为1:3。

作为优选方案,所述烘干箱的设定温度为50-60℃,烘干时间为3-5h。

本发明的有益效果:本发明通过将小肠搅拌成糜状,使小肠能充分接触胰蛋白酶,然后采用采用酶解加热的工艺,使胰蛋白酶的活性发挥最大,充分提取肝素钠,提高肝素钠的产率;本发明在沉淀过程中通过过滤去除杂质,得到干净沉淀物,从而提高肝素钠纯度,提升肝素钠质量;本发明得到的肝素钠为淡白色粉末。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行进一步介绍。

实施例1:

一种肝素钠的提取工艺,其特征在于,包括如下步骤:

(1)原料处理:将新鲜的小肠用清水清洗干净,清洗干净后刮取小肠粘膜,然后将小肠粘膜放入搅拌机中,直至搅成糜状,备用;

(2)加热酶解:将步骤1中得到的糜状肠粘膜放入加热罐中加水混合搅拌,其中水与小肠粘膜的量比为1:3,然后依次加入质量为8%的胰蛋白酶和弱碱液调节ph值,直至溶液ph值为9,然后进行加热,加热过程中ph=9,加热至35℃,恒温保持2.5h,然后再继续加热至55℃,恒温保持15min,趁热过滤,得到滤液;

(3)冷却吸附:将步骤2得到的滤液进行冷却,冷却至35℃后清除滤液上层浮油,然后加入树脂搅拌吸附6.5h,吸附完成后将树脂滤出;

(4)洗脱:将收集的树脂放入洗脱器进行冲洗,加入质量分数为10%的氯化钠溶液,温度保持在52℃,搅拌3.5小时后,收集洗脱液;洗脱两次,将两次收集的洗脱液合并待用;

(5)沉淀:将两次收集的洗脱液过滤移入沉淀罐中,加入质量分数为803%的酒精搅拌均匀,然后调节ph=7.5,静置密封沉淀11小时,过滤得到沉淀物,备用;

(6)脱水干燥:将沉淀物放入烘干箱中干燥后即得肝素钠,烘干箱设定温度为55℃,烘干时间为4h。

实施例2:一种肝素钠的提取工艺,其特征在于,包括如下步骤:

(1)原料处理:将新鲜的小肠用清水清洗干净,清洗干净后刮取小肠粘膜,然后将小肠粘膜放入搅拌机中,直至搅成糜状,备用;

(2)加热酶解:将步骤1中得到的糜状肠粘膜放入加热罐中加水混合搅拌,其中水与小肠粘膜的量比为1:3,然后依次加入质量为8%的胰蛋白酶和弱碱液调节ph值,直至溶液ph值为8,然后进行加热,加热过程中ph=8.5,加热至30℃,恒温保持2h,然后再继续加热至50℃,恒温保持10min,趁热过滤,得到滤液;

(3)冷却吸附:将步骤2得到的滤液进行冷却,冷却至30℃后清除滤液上层浮油,然后加入树脂搅拌吸附6h,吸附完成后将树脂滤出;

(4)洗脱:将收集的树脂放入洗脱器进行冲洗,加入质量分数为10%的氯化钠溶液,温度保持在50℃,搅拌3小时后,收集洗脱液;洗脱两次,将两次收集的洗脱液合并待用;

(5)沉淀:将两次收集的洗脱液过滤移入沉淀罐中,加入质量分数为80%的酒精搅拌均匀,然后调节ph=7,静置密封沉淀10小时,过滤得到沉淀物,备用;

(6)脱水干燥:将沉淀物放入烘干箱中干燥后即得肝素钠,烘干箱的设定温度为50℃,烘干时间为3h。

实施例3:

一种肝素钠的提取工艺,其特征在于,包括如下步骤:

(1)原料处理:将新鲜的小肠用清水清洗干净,清洗干净后刮取小肠粘膜,然后将小肠粘膜放入搅拌机中,直至搅成糜状,备用;

(2)加热酶解:将步骤1中得到的糜状肠粘膜放入加热罐中加水混合搅拌,其中水与小肠粘膜的量比为1:3,然后依次加入质量为8%的胰蛋白酶和弱碱液调节ph值,直至溶液ph值为10,然后进行加热,加热过程中ph=9.5,加热至40℃,恒温保持3h,然后再继续加热至60℃,恒温保持20min,趁热过滤,得到滤液;

(3)冷却吸附:将步骤2得到的滤液进行冷却,冷却至40℃后清除滤液上层浮油,然后加入树脂搅拌吸附7h,吸附完成后将树脂滤出;

(4)洗脱:将收集的树脂放入洗脱器进行冲洗,加入质量分数为10%的氯化钠溶液,温度保持在55℃,搅拌4小时后,收集洗脱液;洗脱两次,将两次收集的洗脱液合并待用;

(5)沉淀:将两次收集的洗脱液过滤移入沉淀罐中,加入质量分数为85%的酒精搅拌均匀,然后调节ph=8,静置密封沉淀12小时,过滤得到沉淀物,备用;

(6)脱水干燥:将沉淀物放入烘干箱中干燥后即得肝素钠,烘干箱的设定温度为60℃,烘干时间为5h。

除说明书所述技术特征外,其余技术特征均为本领域技术人员已知技术。

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