1.一种海参皂苷cladolosidea的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)选取新鲜仿刺参经解剖去内脏后粉碎,得到仿刺参糜肉,加入80%的乙醇水溶液进行回流提取,提取3次,提取液趁热过滤,收集滤液进行浓缩回收,得浓缩浸膏为总提取物;
(2)将步骤(1)中得到的总提取物,均匀分散在水中,过大孔树脂柱进行梯度洗脱,洗脱顺序为水、80%乙醇,经薄层色谱分析,收集80%乙醇的洗脱液;
(3)将步骤(2)中得到的80%乙醇洗脱液回收,进行浓缩,得海参总皂苷提取物;
(4)将步骤(3)中得到的海参总皂苷提取物通过正向硅胶柱,用不同比例的氯仿、甲醇和水作为洗脱溶剂进行梯度洗脱,洗脱液经过薄层色谱分析,选取含量大的部分进一步通过两次反向硅胶柱层析进行分离纯化,浓缩后得到海参皂苷cladolosidea。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(1)中仿刺参糜肉与80%的乙醇水溶液的质量比为1:7,提取的时间分别为2小时、1.5小时和0.5小时,滤液浓缩的方式为真空旋转浓缩,浓缩的温度为40℃。
3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中大孔树脂层析柱中的大孔树脂填料的粒度为0.3-1.25mm。
4.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中总提取物与大孔树脂的质量比为1:7-1:8。
5.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中大孔树脂洗脱中的洗脱溶剂为大孔树脂质量的6-7倍,洗脱流速为每小时1个柱床体积。
6.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中薄层色谱展开剂为氯仿、甲醇和乙酸乙酯,其中氯仿:甲醇:乙酸乙酯的体积为9:3:2;步骤(4)中薄层色谱展开剂为氯仿、甲醇和水,其中氯仿:甲醇:水的体积为4:1:0.1。
7.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)和步骤(4)中浓缩的方式均为真空旋转浓缩,浓缩的温度均为40℃。
8.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中氯仿:甲醇:水的体积比依次为10:1:0.1、9:1:0.1、4.5:1:0.1、4:1:0.1、3:1:0.1、2:1:0.1、1:1:0.1。
9.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中两次反向硅胶柱层析的洗脱溶剂依次分别为体积比为5:1的甲醇和水以及体积比为1:1的甲醇和水。
10.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(4)中正向硅胶柱中填料的粒度为200-300目,反向硅胶柱中填料的粒度为50μm。