片球菌素优化表达序列、表达载体及其制作方法和菌株与流程

文档序号:19932542发布日期:2020-02-14 22:11阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种片球菌素优化表达序列,其特征在于,所述表达序列的核苷酸序列如seqidno.1所示。

2.如权利要求1所述的片球菌素优化表达序列的制作方法,其特征在于,所述seqidno.1的启动子的核苷酸序列如seqidno.2所示。

3.一种片球菌素表达载体,其特征在于,含有如seqidno.1的所示核苷酸序列。

4.如权利要求3所述的片球菌素表达载体,其特征在于,还含有如seqidno.2的所示核苷酸序列。

5.一种片球菌素优化表达序列的制作方法,其特征在于,所述表达序列的制作方法如下:

步骤一、人工合成seqidno.1所示的核苷酸序列作为模板;

步骤二、使用如seqidno.11和seqidno.12所示的核苷酸序列作为引物,以seqidno.1所示的核苷酸序列进行pcr扩增获得第一pcr产物;使用如seqidno.13和seqidno.14所示的核苷酸序列作为引物,以α-信号肽的核苷酸序列seqidno.15作为模板进行pcr获得第二pcr产物;

步骤三、以第一pcr产物和第二pcr产物为模板进行重叠pcr得到seqidno.1所示的核苷酸序列;

步骤四、将核苷酸序列seqidno.1连接到表达载体的主框架上。

6.如权利要求5所述的片球菌素优化表达序列的制作方法,其特征在于,所述表达载体为表达载体pyes2,表达载体pyes2上连接有启动子。

7.如权利要求6所述的片球菌素优化表达序列的制作方法,其特征在于,所述启动子的核苷酸序列如seqidno.2。

8.一种菌株,其特征在于,所述菌株为重组酿酒酵母工程菌,所述重组酿酒酵母工程菌含有表达载体,表达载体含有如seqidno.1的所示核苷酸序列。

9.如权利要求8所述的菌株,其特征在于,所述表达载体还含有如seqidno.2的所示核苷酸序列。

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