本发明涉及有机化合物合成领域，特别是涉及2-(羟基-(甲基环丙基)苯基氨基)-1-哌嗪基乙酮衍生物的制备方法，，所述2-(羟基-(甲基环丙基)苯基氨基)-1-哌嗪基乙酮衍生物是2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物。
背景技术：
kras(kirstenratsarcomaviraloncogene，是一种鼠类肉瘤病毒癌基因)是ras家族中的一员，目前已知的ras家族共有三个基因：kras，nras和hras。在人类肿瘤中，kras突变是最为常见的，约占85％，nras和hras分别占12％和3％。kras突变是肺癌中一种最常见形式的突变，在其他几种癌症类型中也是非常常见的。g12c(甘氨酸-12至半胱氨酸)是k-ras基因的经常性突变。该突变已经发现于约13％的癌症事件、约43％的肺癌事件和几乎100％的myh相关性息肉病(家族结肠癌综合症)。亚瑞克西斯制药公司的专利wo2014152588中公开了一种具有选择性的krasg12c共价结合抑制剂1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(下文中可简称作ars-853)，其结构如下式11所示。
ars-853以及具有类似结构的其他的2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物能够与结合了gdp的krasg12c突变蛋白产生共价作用，抑制突变型kras所驱动的信号通路。
在现有技术中，ars-853的合成如上式所示，化合物1经过脱水、成环、脱保护反应制备得到化合物4；化合物4经过还原胺化、水解两步反应制备得到化合物7，两步反应虽为本领域的常规反应，但是收率非常低，仅33％；化合物7通过偶联反应与化合物8对接后脱保护制备得到化合物9。wo2014152588中指出由化合物9制备化合物ars-853参考实施例17的类似化合物的合成，但此类似物脱保护、与丙烯酰氯对接两步反应收率仅10％，-60℃三溴化硼作用下脱甲基反应收率仅5％，wo2014152588中其他类似结构上丙烯酰基和脱甲基的收率都是非常低，原子经济性非常差，自化合物1至ars-853的总收率仅0.5‰。
发明人在重复上述方法制备化合物12会检测到大量的芳环相连氨基取代副产物和分子量多54的二取代副产物；将化合物12在-60℃或-78℃、三溴化硼脱催化下脱保护时，反应体系非常杂，且有大量的开环副产物，很难分离得到化合物ars-853。因此，对于能够高选择性、高收率地合成1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮及其类似物的方法仍然存在需求。
技术实现要素：
为克服现有技术的不足，本发明提供一种可用作krasg12c共价抑制剂的2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物的制备方法，包括以下步骤：
a.化合物a脱水、脱甲基制备得到化合物b；
b.化合物b在有机碱的作用下，上保护制备得到化合物c；
c.化合物c通过环丙烷化反应制备得到化合物d；
d.化合物d在脱保护制备得到化合物e；
e.化合物e与化合物f还原胺化制备得到化合物g；
f.化合物g水解制备化合物h；
g.化合物h与化合物i通过偶联反应制备得到化合物j；
h.化合物j脱保护制备得到化合物k；
i.化合物k与化合物l反应制备得到化合物m；
其中，上述各化合物结构式如下：
在以上各式中，r1选自氟、氯、直链或支链的c1～6烷基，直链或支链的c3～6环烷基；
r2选自三甲基硅基、叔丁基二甲基硅基、三乙基硅基、甲氧基甲基、1-乙氧基乙基；
r3选自甲基、乙基；
r4选自叔丁氧羰基、
r6选自
当r4为叔丁氧羰基时，r5为氢，r7与r6相同；；
当r4选为
具体地，发明的可用作krasg12c共价抑制剂的2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物的制备方法可用下述流程表示：
通过上述反应制备2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物，各个步骤反应时长可采用常规监控手段，比如采用tlc监控反应程度，选择继续反应或结束反应，并且反应结束后根据需要选择是否提纯或直接进行下一步反应等。
更具体的，进行上述各步骤反应的条件可以采用常规手段，但采用下述优选方案时能够提高产物收率，同时提高反应速率，并且降低成本。
优选的，所述步骤a中，化合物a在脱保护试剂的作用下，同时脱水和脱甲基制备得到化合物b。
优选的，所述脱保护试剂选自三溴化硼、三氯化硼、溴化氢，优选为三溴化硼。
优选的，所述脱保护试剂与化合物a的投料摩尔比为2～4:1，优选为3:1。
优选的，适于所述反应的有机溶剂选自二氯甲烷、丙酮、乙酸、四氢呋喃、乙腈、甲苯中的一种或多种，优选为二氯甲烷；
优选的，适于所述反应的温度为0℃至室温；
更进一步地，所述反应结束后，向反应液中先缓慢加入甲醇，再加水分离有机相，水相加入有机溶剂萃取，合并有机相后干燥浓缩，将所得粗品打浆制备得到纯品化合物b。
优选的，所述有机溶剂选自二氯己烷或二氯甲烷-甲醇的混合溶液。
优选的，所述打浆溶剂为二氯甲烷。
所述化合物a参考自wo2014152588中的方法制备得到。
优选的，所述步骤b中，化合物b在有机碱的作用下，上保护制备得到化合物c。
优选的，适于上述反应的上保护试剂选自三甲基氯硅烷、三乙基氯硅烷、叔丁基二甲基氯硅烷、氯甲基甲醚、氯甲基乙醚，优选为三甲基氯硅烷、叔丁基二甲基氯硅烷，最优选为叔丁基二甲基氯硅烷。
优选的，所述上保护试剂与所述化合物b的投料摩尔比为1～2.5:1，优选为2:1。
优选的，适于上述反应的有机溶剂选自二氯甲烷、丙酮、四氢呋喃、乙腈、甲苯中的一种或多种，优选为二氯甲烷。
优选的，适于上述反应的有机碱选自三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、吡啶中的一种或多种，优选为三乙胺；适于所述反应的温度为室温；进一步地，所得粗品化合物c可直接用于下一步反应。
优选的，所述步骤c，所述化合物c在入二乙基锌和二卤代甲烷的作用下制备化合物d。
更优选的，所述反应加入有机酸促进反应进行，减少二卤代甲烷和二乙基锌的用量。
优选的，所述二卤代甲烷选自二碘甲烷、二溴甲烷、氯碘甲烷；所述有机酸选自三氟乙酸、三氯乙酸，优选为三氟乙酸。
优选的，所述二乙基锌、所述二卤代甲烷与化合物c的投料摩尔比为1～5:1～5:1，优选为2:2:1。
优选的，所述有机酸与所述二乙基锌的投料摩尔比为0.5～2:1，优选为1～2:1。
优选的，步骤c采用如下的原料加入顺序及反应方式：冰浴条件下，将所述二乙基锌溶于第一类有机溶剂的溶液中，缓慢加入所述有机酸溶于第二类有机溶剂中后所得溶液，搅拌0.5～1小时后，缓慢加入所述二卤代甲烷溶于第三类有机溶剂后所得的溶液，持续搅拌1～2小时后，加入所述化合物c溶于第四类有机溶剂后所得的溶液，滴加完毕后，升至室温反应至tlc监测原料消失，反应完成。
所述第一至第四类有机溶剂可相同或不同的选自二氯甲烷、丙酮、四氢呋喃、乙腈、甲苯中的一种或多种。
更进一步地，所述反应结束后，向反应体系中加入盐酸溶液，分液，水相加入二氯甲烷或乙酸乙酯萃取后，合并有机相并干燥、浓缩，所得粗品可在乙醇中打浆制即可制得纯品化合物d。
优选的，所述步骤d中，化合物d在酸性条件下脱保护制备得到化合物e。
优选的，适于上述反应的脱保护试剂选自二氯亚砜、盐酸气或盐酸溶液，优选为二氯亚砜。
优选的，所述脱保护试剂与所述化合物d的投料摩尔比为2～6:1，优选为4:1。
优选的，适于上述反应使用的有机溶剂选自甲醇、二氯甲烷、乙腈、甲苯中的一种或多种，优选为甲醇。
优选的，所述反应温度为0～70℃。
优选的，所述步骤e中，化合物e与化合物f还原胺化制备得到化合物g，所述反应的还原剂选自硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢化钠，优选为氰基硼氢化钠。
所述还原剂与所述化合物e的投料摩尔比选自1～4:1，优选为2～3:1，最优选为2:1。
所述化合物f与化合物e的投料摩尔比选自1～2:1，优选为1.5:1。
优选的，适于上述反应的有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷中的一种或多种，优选为甲醇和乙醇。
进一步地，当r3为甲基时，所使用有机溶剂优选为甲醇；当r3为乙基时，所使用有机溶剂优选为乙醇。
优选的，所述反应温度为室温至50℃，优选为50℃。
所述反应以tlc监测反应完全为止。进一步地，所述反应结束后所得粗品化合物g可直接用于下一步水解反应。
优选的，所述步骤f中化合物g进行水解反应，tlc监测反应结束后，调节反应体系的ph值，萃取、干燥、浓缩制备粗品化合物h，可直接用于下一步反应。
优选的，所述步骤g中化合物h与化合物i通过偶联反应制备得到化合物j，所述偶联试剂优选为bop，t3p，更进一步地，所述偶联试剂优选为t3p。
优选的，适于上述反应的有机溶剂选自四氢呋喃、二氯己烷、乙酸乙酯、甲基四氢呋喃、甲苯、n,n-二甲基甲酰胺中的一种或多种，优选为甲基四氢呋喃和n.n-二甲基甲酰胺。
优选的，所述反应温度为-20～0℃，优选为-20～-10℃，所述反应以tlc监测反应完全为止。
进一步地，所述反应结束后，经柱层析纯化得到纯品化合物j。
进一步地，当r4为叔丁氧羰基时，所述化合物i可市售得到；当r4为
其中，化合物i-b可市售得到，化合物i-b与化合物1-苄氧羰基哌嗪通过还原胺化和脱保护两步反应制备得到化合物i，所述还原胺化和脱保护反应为本领域的此类反应的常规方法和条件。
优选的，所述步骤h中，所述化合物j酸性条件下脱保护制备得到化合物k。
优选的，所述脱保护试剂为盐酸、三氟乙酸，优选为盐酸。
优选的，适于上述反应的温度为室温至45℃。
更进一步地，发明人发现，所述化合物k游离态稳定性稍差，放置过程中易变坏，因此，可在脱保护反应结束后直接浓缩得到化合物k的盐酸盐或三氟乙酸盐，并直接用于下一步反应，也可游离后尽快使用。
优选的，所述步骤i中，化合物k与化合物l发生取代反应制备得到化合物m；发明人发现，采用常规方法和条件将化合物k与化合物l对接制备化合物m，会有大量酚羟基和/或苯环相连氨基与化合物l对接的副产物。
优选的，为克服这一问题，本发明采用nah2po4/naoh缓冲体系控制反应的ph值，避免副产物的生成。
优选的，步骤i的取代反应中加入nah2po4/naoh缓冲液和有机碱。
优选的，所述取代反应采用以下的加料次序和反应方式：将所述将化合物k溶于有机溶剂和水的混合溶剂中，加入缓冲溶剂调节反应体系ph值，依次向反应体系中加入有机碱和化合物l，室温条件下反应至tlc检测反应完全。
优选的，适于上述反应的有机溶剂为四氢呋喃、甲基四氢呋喃、n,n-二甲基甲酰胺、乙腈中的一种或多种，优选为四氢呋喃。
优选的，所述有机碱选自三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、吡啶中的一种或多种，优选为三乙胺。
优选的，所述有机溶剂与所述水的体积比为3～6:1，优选为5:1。
优选的，所述反应的ph控制在7.10-7.70，优选为7.14-7.37。
优选的，所述化合物l与所述化合物k的摩尔比为1～1.5:1，优选为1:1。
优选的，所述反应的后处理方式为：所述反应结束后，加入水稀释，加入有机溶剂多次萃取，合并有机相后干燥浓缩，所得粗品快速柱层析分离后，打浆或重结晶得到纯品化合物m。
优选的，所述有机溶剂选自乙酸乙酯或乙酸乙酯和甲醇的混合物溶剂。
优选的，所述打浆使用的有机溶剂为乙酸乙酯。
优选的，所述重结晶使用的溶剂为二甲基亚砜和水，具体为，将化合物m溶解于二甲基亚砜后，加水析出，过滤烘干得到纯品化合物m。
本发明的优点主要在于：
1)合成路线简单，各步反应条件温和；并且多步反应得到粗品可直接进行下一步反应，或是通过简单的打浆处理即可制备得到纯品，生产效率高；
2)本发明采用缓冲溶液和有机碱共同调节的取代反应体系，高选择性高收率的制备2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物；
3)本发明改变的甲基的脱除方法和次序，有效的避免了原路线脱保护反应，原料不稳定、开环副反应、收率低等问题，有效的提高了2-((2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮衍生物的整体合成收率，总收率达到40％以上，相比于现有技术wo2014152588的方法总收率有极大程度的提升。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的操作或步骤，通常按照本领域的常规条件进行。
实施例中所用的原料或试剂除特别说明之外，均市售可得。实施例中所述的室温均指5-35℃。除非特别指出，所述的试剂不经纯化直接使用，所有溶剂均购自商业化供应商。反应通过tlc分析和/或通过lc-ms分析，通过起始材料的消耗来判断反应的终止。分析用的薄层层析(tlc)在预涂覆硅胶60f2540.25毫米板的玻璃板(emd化学品公司(emdchemicals))上进行，用uv光(254nm)和/或硅胶上的碘显像，和/或与tlc染色物如醇制磷钼酸、水合茚三酮溶液、高锰酸钾溶液或硫酸高铈溶液一起加热。1h-nmr谱在万瑞安-默丘利-vx400(varianmercury-vx400)仪上，在400mhz操作下记录。
本发明中使用的缩写具有本领域常规含义。其中，tms为三甲基硅基，tbs为叔丁基二甲基硅基，tes为三乙基硅基，tips为三异丙基硅基，mom为甲氧基甲基，ee为1-乙氧基乙基，thf为四氢呋喃，dcm为二氯甲烷，tfa为三氟乙酸，bop为卡特缩合剂，t3p为1-丙基磷酸酐，bbr3为三溴化硼，ch3mgbr为甲基溴化镁。
实施例11-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(化合物m-1，ars-853)的制备
制备流程如上式所示，包含以下步骤：
步骤a-1：将化合物a-1(其合成参考自wo2014152588，300g，1.164mol)溶解于二氯甲烷(15l)中，降温至0℃后氮气保护下，慢慢加入三溴化硼(336.5ml，3.492mol)的二氯甲烷溶液(2.5l)后升至室温，反应至tlc监控反应原料全部消失。冰浴条件下，向反应液中慢慢加入meoh(1.2l)，然后加入8l水，分离出有机相，水相用dcm/meoh(10:1，8l)萃取一次，合并有机相，浓缩后得黄色固体粗品(270g)，粗品用dcm(1l)打浆得白色固体化合物b-1(236.4g，收率：90％，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：8.97(s,1h),7.50(s,1h),7.02(s,1h),6.84(s,1h),5.19(s,1h),4.93(s,1h),2.26(s,3h),2.06(s,3h))。
步骤b-1：将化合物b-1(225g，1mol)溶解于二氯甲烷中(2.2l)，加入三乙胺(202g，2mol)和叔丁基二甲基氯硅烷(300g，2mol)，室温条件下反应过夜，反应结束后，向反应液中加入水(2l)，分离出有机相，水相用ea萃取(2l×2)。合并有机相，有机相浓缩得淡红色固体粗品化合物c-1(322g，纯度95％，收率：90％)，取少量粗品化合物c-1通过柱层析纯化(ea/pe＝0～5％)得到纯品化合物c-1(1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：8.22(s,1h),7.58(s,1h),6.80(s,1h),5.20(s,1h),4.97(s,1h),2.16(s,3h),2.07(s,3h),1.04(s,9h),0.28(s,6h))。
步骤c-1：将二乙基锌(479ml，2m)分散于二氯甲烷(1l)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入三氟乙酸(72ml，958mmol)的二氯甲烷(400ml)溶液，滴加完毕后继续搅拌30分钟。缓慢加入二碘甲烷(75ml，958mmol)的二氯甲烷(400ml)溶液，滴加完毕后，继续搅拌1小时。缓慢加入化合物c-1(163g，479mmol)的二氯甲烷(800ml)溶液，加完后升至室温反应过夜。tlc监测原料消失，冰浴条件下，向反应液中慢慢加入盐酸溶液(0.1m，2.5l)，分离出有机相，水相用二氯甲烷(2l×3)萃取，合并有机相，浓缩得粗品化合物d-1，快速刷柱(ea/pe＝0～1/15)后浓缩得到米黄色固体化合物d-1(182g)，所得米黄色固体使用乙醇(400ml)打浆得到白色固体纯品化合物d-1(161.1g，收率95％，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：8.20(s,1h),7.50(s,1h),6.68(s,1h),2.09(s,3h),1.20(s,3h),0.92(s,9h),0.74-0.56(m,4h),0.17(s,6h))。
步骤d-1：将化合物d-1(264g，746mmol)溶于甲醇(3.5l)，冰浴条件下慢慢加入二氯亚砜(218ml，2.98mol)，加入完毕后升温至70℃，反应16h，tlc监控原料消失。将反应液减压旋蒸除去溶剂后，加入乙酸乙酯(2.5l)，有机相分别用饱和碳酸氢钠(1.5l)、水(1.5l)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得白色固体纯品化合物e-1(144.50g，收率：98％，1h-nmr(400mhz，dmso)δ：9.27(s,1h),6.59(s,2h),4.57(s,2h),1.22(s,3h),0.63(m,4h))。
步骤e-1：将化合物e-1(200g，1.01mol)溶于乙醇(3l)，然后加入醋酸(70ml)和乙醛酸乙酯(153.1g，1.5mol)，反应在室温下搅拌6小时后加入氰基硼氢化钠(190.4g，3.03mol)，将反应液升温至50℃，反应16h，tlc监控反应原料消失。减压旋蒸除去溶剂后加入水(600ml)，加入hcl(1n)调节ph至4～5，用乙酸乙酯(2.5l×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品化合物g-1(305g，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：6.68(s,1h),6.53(s,1h),4.29-4.15(m,4h),3.91(s,2h),1.35-1.24(m,6h),0.78-0.64(m,4h))。
步骤f-1：将上步所得化合物g-1(305g)溶于四氢呋喃(2l)和水(1l)中，加入一水合氢氧化锂(54.5g，1.3mol)，室温反应16h，tlc监控原料消失，减压旋蒸除去溶剂后加入水(2.5l)，加入盐酸(1n)调节ph至3-4后，用乙酸乙酯(3l×3)萃取，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体化合物h-1(219.5g，两步收率：85％，1h-nmr(400mhz，dmso)δ：9.73(s,1h),6.59(s,1h),6.29(s,1h),3.77(s,2h),3.43(s,1h),1.87(s,1h),1.19(s,3h),0.67-0.57(m,4h))。
步骤g-1：将化合物h-1(60.6g，0.237mol)、化合物i-1(1-叔丁氧羰基-3-(1-哌嗪基)氮杂环丁烷，57.2g，0.237mol)和n,n-二异丙基乙胺(126ml，0.711mol)溶于无水甲基四氢呋喃(1.5l)，降温至-20～-10℃，然后慢慢加入50％t3p/乙酸乙酯溶液(180ml，284.4mmol)，-20～-10℃反应1h，tlc监控原料消失。控制反应温度<-10℃下，慢慢加入水(1.5l)，加完升至室温，分离出有机相，水相用dcm/meoh(10:1，1.5l×2)萃取，合并有机相干燥后过滤，浓缩得黄色固体粗品，柱层析(dcm/meoh＝40:1)纯化得到黄色纯品固体化合物j-1(96.5g，收率：85％，1h-nmr(400mhz，cdcl3)δ：8.01(s,1h),6.74(s,1h),6.54(s,1h),5.30(s,1h),3.98-3.88(m,4h),3.84-3.79(m,2h),3.71(s,2h),3.52(m,2h),3.09(m,1h),2.46-2.31(m,4h),1.44(s,9h),1.29(s,3h),0.75(m,2h),0.68(m,2h))。
步骤h-1：室温条件下，将化合物j-1(71.5g，0.149mol)加入到盐酸乙醇溶液(4m，1l)中，升温至45℃反应16小时，lcms显示原料消失，浓缩反应液得到白色粗品化合物k-1的盐酸盐(86g，esi-ms:m/z＝379.3(m+h)+)。
步骤i-1：将步骤h-1所得的粗品化合物k-1(86g，0.149mol)溶于四氢呋喃(4l)和水(800ml)，加入nah2po4/naoh缓冲液(ph＝8.05)调节反应液ph至7.14，加完后搅拌5～10分钟，加入三乙胺(18.06g，178.8mmol)，加完后反应液ph＝7.37，然后加入丙烯酰氯(13.41g，149mmol)，加完后反应液ph＝7.14，在室温下，反应2小时后，tlc监控原料消失。向反应液中加入水(5l)后用ea/meoh(10:1，5l×3)萃取，干燥后，有机相浓缩得黄色固体粗品，快速刷柱(淋洗液梯度meoh/dcm＝0～1:20)得淡黄色固体(52g)，将此粗品乙酸乙酯室温打浆两次得白色固体纯品化合物m-1(48.38g，两步收率：75％，整个制备流程总收率达到40.8％，1h-nmr(400mhz，dmso)δ：9.7(s,1h),6.63(s,1h),6.50(s,1h),6.32(m,1h),6.13(m,1h),5.69(m,1h),5.12(m,1h),4.24(m,1h),4.09-3.89(m,4h),3.77(m,1h),3.53(m,4h),3.17(m,1h),2.39-2.30(m,4h),1.25(s,3h),0.72-0.66(m,4h))。
实施例2-11
实施例2参考实施例1中步骤a-1的制备方法，其区别在于步骤a-1中，冰浴条件下，将三溴化硼(224ml，2.33mol)的二氯甲烷溶液(2l)滴加至化合物a-1(300g，1.164mol)的甲苯(12l)溶液中，逐渐升至室温，反应至tlc监控反应原料全部消失。参照实施例1步骤a-1的后处理方法二氯甲烷打浆制得纯品白色固体化合物b-1(223.2g，收率：85％)。
实施例3参考实施例1中步骤a-1的制备方法，其区别在于步骤a-1中，将氢溴酸/醋酸溶液(33％，38g，155.21mmol)滴加至化合物a-1(10g，38.8mmol)的乙酸(100ml)溶液中，滴加过程中控制反应温度小于5℃，滴加完毕后升至室温，反应至tlc监控反应原料全部消失。参照实施例1步骤a-1的后处理方法二氯甲烷打浆制得纯品白色固体化合物b-1(7.53g，收率：86％)。
实施例4参考实施例1步骤b-1的制备方法，其区别在于步骤b-1中，将化合物b-1(22.5g，0.1mmol)溶解于二氯甲烷和四氢呋喃的混合溶液中(1:1，2l)，加入三乙胺(30.35g，0.3mol)和叔丁基二甲基氯硅烷(37.68g，0.25mol)，室温条件下反应过夜，反应结束后，参照实施例1步骤b-1的后处理方法纯化得到化合物c-1(31.53g，93％)。
实施例5参考实施例1步骤c-1的制备方法，其区别在于，步骤c-1中将二乙基锌(25ml，2m)分散于二氯甲烷(100ml)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入三氟乙酸(1.8ml，25mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，滴加完毕后继续搅拌10分钟。缓慢加入二溴甲烷(3.5ml，50mmol)的二氯甲烷(400ml)溶液，滴加完毕后，继续搅拌半小时。缓慢加入化合物c-1(17g，50mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，加完后升至室温反应过夜。tlc监测原料消失，参照实施例1步骤c-1的后处理方法得到白色固体纯品化合物d-1(16.28g，收率92％)。
实施例6参考实施例1中步骤d-1的制备方法，其区别在于，将化合物d-1(17.7g，50mmol)溶于甲醇(150ml)，通入盐酸气至饱和后反应6h后升至50℃至tlc监控原料消失。参考实施例1步骤d-1的后处理方法制备得到白色固体纯品化合物e-1(9.3g，收率：94％)。
实施例7参考自实施例1中步骤e-1的制备方法，其区别在于，将化合物e-1(200g，1.01mol)溶于二氯甲烷和甲醇的混合物溶液(1:1，3l)，然后加入醋酸(70ml)和乙醛酸乙酯(206.22g，2.02mol)，反应在室温下搅拌6小时，加入三乙酰氧基硼氢化钠(856.24g，4.04mol)，继续反应至tlc监控反应原料消失。参考步骤e-1的后处理方法得到粗品化合物g-1(310g)。
实施例8参考自实施例1步骤f-1的制备方法，其区别在于，所使用的碱替换为氢氧化钠(52g，1.3mol)，后续操作同步骤f-1，得到白色固体化合物h-1(222.1g，两步收率：86％)。
实施例9参考自实施例1步骤g-1，其区别在于所述偶联试剂替换为卡特缩合剂(125g，0.284mol)，将反应溶剂替换为dmf(2l)，-20～-5℃反应至tlc监控原料消失。后续操作同步骤g-1，得到黄色纯品固体化合物j-1(89.68g，收率：79％)。
实施例10参考自实施例1步骤h-1，其区别在于，室温条件下，将化合物j-1(35.75g，74.5mmol)溶于甲醇(1l)中通入盐酸气至饱和后，升温至40℃反应至原料消失，浓缩反应液，得到白色粗品化合物k-1的盐酸盐(32g)。
实施例11参考自实施例1步骤h-1，其区别在于，将化合物j-1(3.5g，7.4mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中加入三氟乙酸(3ml，40.4mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，后续操作同步骤h-1得到白色粗品化合物k-1的三氟乙酸盐(4g)。
实施例121-(4-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(化合物m-2)的制备
制备流程如上式所示，包含以下步骤：
步骤b-2：将化合物b-1(225g，1mol)溶解于二氯甲烷(2l)，加入diea(193.86g，1.5mol)和三甲基氯硅烷(108.64g，1mol)，室温条件下反应过夜，后续参照实施例1步骤b-1的方法得到化合物c-2(268g，90％，esi-ms:m/z＝298.3(m+h)+)。
步骤c-2：将二乙基锌(479ml，1m)分散于二氯甲烷(400ml)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入三氟乙酸(72ml，958mmol)的二氯甲烷(400ml)溶液，滴加完毕后继续搅拌30分钟。缓慢加入二碘甲烷(37.5ml，479mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴加完毕后，继续搅拌0.5小时。缓慢加入化合物c-2(32.6g，95.8mmol)的二氯甲烷(150ml)溶液，加完后升至室温反应过夜。tlc监测原料反应完全，参考实施例1步骤c-1的后处理方法打浆得到白色固体纯品化合物d-2(25.4g，收率85％，esi-ms:m/z＝312.4(m+h)+)。
步骤d-2：将化合物d-2(10g，32.06mmol)溶于甲醇(150ml)，冰浴条件下慢慢加入二氯亚砜(14ml，0.193mol)，加入完毕后升温至50℃，反应至tlc监控原料消失，后续操作同实施例1步骤d-1，制得白色固体化合物e-1(5.83g，收率：92％)。
步骤e-2：将化合物e-1(2g，10.1mmol)溶于甲醇(50ml)，然后加入醋酸(1ml)和乙醛酸甲酯(889mg，10.1mmol)，反应在室温下搅拌2小时后加入硼氢化钠(382mg，10.1mol)，将反应液升温至50℃，后续操作同实施例1步骤e-1，得粗品化合物g-2(3.1g)。
步骤f-2：将上步所得化合物g-2参考实施例1步骤f-1的方法制备得到白色粗品固体化合物h-1(2.3g)。
步骤g-2：将化合物h-1(2.3g，9mmol)、化合物i-2(4-哌嗪-1-基哌啶-1-羧酸叔丁酯，市售可得，2.4g，9mmol)和n,n-二异丙基乙胺(4.5ml，27mmol)溶于无水甲基四氢呋喃(50ml)，降温至-20～-10℃，然后慢慢加入50％t3p/乙酸乙酯溶液(8ml，13.5mmol)，-20～-10℃反应1h，tlc监控原料消失。控制反应温度<-10℃下，慢慢加入水(50ml)，加完升至室温，分离出有机相，水相用dcm/meoh(10:1，50ml×2)萃取，合并有机相干燥后过滤，浓缩得黄色固体粗品，柱层析(dcm/meoh＝40:1)纯化得到黄色纯品固体化合物j-2(4g，自步骤e-2三步反应总收率：78.2％，esi-ms:m/z＝507.6(m+h)+)。
步骤h-2：室温条件下，将化合物j-2(5.07g，10mmol)溶于甲醇(5ml)加入盐酸甲醇溶液(4m，4ml)，升温至45℃反应至lcms显示原料消失，浓缩反应液后，加入二氯甲烷(20ml)，加入饱和碳酸钠调节ph为9左右，分液，水相用二氯甲烷(10ml×2)萃取，合并有机相，干燥浓缩得到白色粗品化合物k-2(4g，esi-ms:m/z＝407.5(m+h)+)。
步骤i-2：将步骤h-2所得的粗品化合物k-2(4g)溶于甲基四氢呋喃(32ml)、dmf(10ml)和水(7ml)，加入nah2po4/naoh缓冲液控制反应液ph为7.10，加完后搅拌5～10分钟，之后依次加入三乙胺(3ml，22mmol)和丙烯酰氯(905mg，10mmol)，反应液ph为7.45，室温条件下反应至tlc监控原料消失。参照实施例1步骤h-1的后处理方法，快速刷柱(淋洗液梯度meoh/dcm＝0～1:20)得淡黄色固体(3.8g)，将此粗品溶于二甲基亚砜中，加入水析出白色固体，过滤干燥后得到纯品化合物m-2(3.41g，两步收率：74％，整个制备流程总收率达到40.7％，esi-ms:m/z＝461.5(m+h)+))。
实施例131-(4-(2-((4-乙基-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙基-2-烯-1-酮(化合物m-3)的制备
制备流程如上式所示，包含以下步骤：
步骤a-3-4：将化合物a-3-4(参考自wo2017048950中的方法制备得到，2.92kg,12.84mol)溶于甲醇中(30l),氮气保护下，降温至-20℃后快速加入30％naome溶液(2540g，14.12mol)，加完，有大量固体析出，在0℃下继续搅拌1h，tlc监控反应，原料消失。将反应液过滤，所得固体加入甲醇(8l×2)和水(8l×2)洗涤，过滤后50℃烘干得到白色固体纯品化合物a-3-3(2.77kg，收率：90％，esi-ms:m/z＝239.8(m+h)+)。
步骤a-3-3:将铁粉(318g，5.69mol)加入到乙酸(5l)中，升温至80℃,然后分批次加入化合物a-3-3(543g，2.27mol)，加完后维持80℃反应1h，tlc监控反应原料消失，将所得反应液直接用于下一步反应。
步骤a-3-2：将醋酸酐(231g，2.27mol)滴加至步骤a-3-3所得的反应液中，加完后80℃下继续搅拌2h，tlc监控反应结束。将反应液将至室温，加入硅藻土过滤，用乙酸(1l×2)洗涤，滤液分散于水(20l)，大量固体析出，继续搅拌1小时过滤，滤饼用乙醇(500ml×2)洗涤，然后50℃烘干得产物白色固体化合物a-3-1(456g，两步收率：80％，esi-ms:m/z＝252.0(m+h)+)。
步骤a-3-1：将化合物a-3-1(623g，2.48mol)溶于无水四氢呋喃(6l)中，氮气保护下，降温至0℃后滴加入ch3mgbr(1m四氢呋喃溶液，8l)，加完后升至室温搅拌过夜，tlc监控反应原料消失。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(5l)和水(5l)，用乙酸乙酯(5l×3)萃取，合并有机相，干燥、减压浓缩得淡白色固体(680g)。加入mtbe(1l)打浆，室温搅拌一小时后过滤，50℃烘干得到白色纯品化合物a-3(499g，收率：80％)。
步骤a-3：将化合物a-3(97.5g，388mmol)溶解于二氯甲烷(5l)中，降温至0℃后氮气保护下，慢慢加入三溴化硼(112.2ml，1.164mol)的二氯甲烷溶液(800ml)后升至室温，反应至tlc监控反应原料全部消失。后续操作参照实施例1步骤a-1的后处理方法，用二氯甲烷打浆后得白色固体化合物b-3(78.3g，收率：92％，esi-ms:m/z＝219.9(m+h)+)。
步骤b-3：将化合物b-3(21.9g，0.1mol)溶解于二氯甲烷中(250ml)，加入吡啶(16ml，0.2mol)和叔丁基二甲基氯硅烷(30.2g，0.2mol)，室温条件下反应过夜，反应结束后，参照实施例1步骤b-1的后处理方法得到粗品化合物c-3(33g，纯度96％，收率：95％，esi-ms:m/z＝334.2(m+h)+)。
步骤c-3：将二乙基锌(100ml，2m)分散于二氯甲烷(250ml)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入三氟乙酸(14.8ml，0.1mol)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴加完毕后继续搅拌15分钟。缓慢加入二碘甲烷(15.7ml，0.2mol)的二氯甲烷(50ml)溶液，滴加完毕后，继续搅拌1小时。缓慢加入化合物c-3(35g，96％，0.1mol)的二氯甲烷(200ml)溶液，加完后升至室温反应过夜。tlc监测原料消失，冰浴条件下，向反应液中慢慢加入盐酸溶液(0.1m，800ml)，分离出有机相，水相用乙酸乙酯(500ml×3)萃取，合并有机相，浓缩得粗品化合物d-3，快速刷柱(ea/pe＝0～1/15)后浓缩，将得到固体使用乙醇(80ml)打浆得到白色固体纯品化合物d-3(32.67g，收率94％，esi-ms:m/z＝348.1(m+h)+)。
步骤d-3：将化合物d-3(26g，75mmol)溶于甲醇(350ml)，冰浴条件下慢慢加入二氯亚砜(11ml，0.15mol)，加入完毕后升温至60℃，反应至tlc监控原料消失。后续参照实施例1步骤d-1的后处理方法制得白色固体纯品化合物e-3(13.9g，收率：97％，esi-ms:m/z＝191.9(m+h)+)。
步骤e-3：将化合物e-3(9.95g，52mmol)溶于甲醇(150ml)，然后加入醋酸(4ml)和乙醛酸乙酯(7.96g，78mmol)，反应在室温下搅拌4小时后加入氰基硼氢化钠(8.22g，104mmol)，tlc监控反应原料消失。减压旋蒸除去溶剂后加入水(30ml)，加入hcl(1n)调节ph至4～5，用乙酸乙酯(100ml×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品化合物g-3(15g，esi-ms:m/z＝278.0(m+h)+)。
步骤f-3：将上步所得化合物g-3(15g)溶于四氢呋喃(100ml)和水(50ml)中，加入氢氧化钾(4.2g，75mmol)，室温反应8h，tlc监控原料消失，减压旋蒸除去溶剂后加入水(100ml)，加入盐酸(1n)调节ph至3-4后，用乙酸乙酯(150ml×3)萃取，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩得白色固体化合物h-3(10.76g，两步收率：83％，esi-ms:m/z＝249.9(m+h)+)。
步骤g-3：将化合物h-3(5g，0.02mol)、化合物i-3(cas#143238-38-4,市售可得，4.47g，0.024mol)和三乙胺(7ml，0.05mol)溶于无水四氢呋喃(150ml)，降温至-10℃，然后慢慢加入50％t3p/乙酸乙酯溶液(18ml，0.03mol)，-10～0℃反应1h，tlc监控原料消失。后续参照实施例1步骤g-1的后处理方法得到黄色纯品固体化合物j-3(6.93g，收率：83％，esi-ms:m/z＝418.1(m+h)+)。
步骤h-3：室温条件下，将化合物j-3(5g，0.012mol)加入到盐酸甲醇溶液(4m，50ml)中，升温至40℃反应10小时，lcms显示原料消失，浓缩反应液得到白色粗品化合物k-3的盐酸盐(4.3g，esi-ms:m/z＝317.9(m+h)+)。
步骤i-3：将步骤h-3所得的粗品化合物k-3盐酸盐(4.3g，0.012mmol)溶于四氢呋喃(200ml)和水(40ml)，加入nah2po4/naoh缓冲液(ph＝8.05)调节反应液ph至7.6，加完后搅拌5～10分钟，加入吡啶(0.95g，0.012mmol)，然后加入丙烯酰氯(1.08g，0.012mmol)，反应液ph约为7.56，在室温下反应1小时后，tlc监控原料消失。向反应液中加入水(5l)后用ea/meoh(10:1，200ml×3)萃取，干燥后，有机相浓缩得黄色固体粗品，快速刷柱(淋洗液梯度meoh/dcm＝0～1:20)得淡黄色固体(4g)，将此粗品乙酸乙酯室温打浆两次得白色固体纯品化合物m-3(3.4g，两步收率：75％，由化合物a-3至最终产物的总收率达到约41.2％，esi-ms:m/z＝372.1(m+h)+)。
实施例141-(4-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-4-(二甲氨基)丁基-2-烯-1-酮(化合物m-4)的制备
将化合物k-2(4g，9.83mmol)溶于甲基四氢呋喃(40ml)和水(8ml)，加入nah2po4/naoh缓冲液控制反应液ph为7.25，加完后搅拌5～10分钟，之后依次加入三乙胺(2ml，15mmol)和化合物l-4(合成源自cn105949176，1.74g，11.8mmol)，反应液ph为7.17，在室温下搅拌反应至tlc监控原料消失。参照实施例1步骤h-1的后处理方法，快速刷柱和乙酸乙酯打浆得到纯品化合物m-4(4.43g，87％，esi-ms:m/z＝518.6(m+h)+)。
对比例11-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(化合物m-1，ars-853)的制备
将化合物k-1(190mg，0.5mmol)溶于二氯甲烷(15ml)中，加入三乙胺(0.3ml)和丙烯酰氯(54mg，0.6mmol)，室温搅拌1小时后，有10％原料剩余，约28％芳环氨基取代副产物，25％的目标产品，以及18％分子量多54的二取代的副产物。发明人将粗品进行纯化，得到产物m-1的收率<5％。
对比例21-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(化合物m-1，ars-853)的制备
将化合物k-1(860mg，1.49mmol)溶于四氢呋喃(40ml)和水(8ml)，加入nah2po4/naoh缓冲液(ph＝8.05)调节反应液ph至7.14，加完后搅拌5～10分钟，加入丙烯酰氯(13.41g，149mmol)，在室温下，反应2小时后，lcms显示有29％原料剩余，18％芳环氨基取代副产物，20％的目标产品以及33％的二取代的副产物。
对比例32-氨基-5-氯-4-(1-甲基环丙基)苯酚(化合物e-1)的制备
将化合物n(参照wo2016044772中方法制备得到，1g，4.7mmol)溶于二氯甲烷中(10ml)，降温至-20℃，加入三溴化硼(2.5mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，搅拌15分钟后，tlc监控反应杂，过柱纯化(得到约600mg产品)，核磁显示仅50％为所需产品化合物e-1，另50％为三元环开环副产物。尝试进一步过柱分离，交叉严重。进一步地，发明人尝试将反应温度降低至-60～-78℃，但仍是得到大量的三元环开环副产物。
对比例42-氨基-5-氯-4-(1-甲基环丙基)苯酚(化合物e-1)的制备
将化合物n(1g，4.7mmol)溶于二氯甲烷中(10ml)，冰浴条件下，加入氢溴酸/醋酸溶液(33％，0.5ml)溶液，室温搅拌1小时，lcms和tlc监测未有产品生产。将反应液升温至50℃，仍无产品生成，大部分仍为原料。进一步地，将反应温度升至100℃，仍未检测所需产品。
对比例5n-(2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)-4-氯-5-(1-甲基环丙基)苯基)乙酰胺(化合物d-1)的制备
将二乙基锌(50ml，2m)分散于二氯甲烷(100ml)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入二碘甲烷(8ml，0.1mol)的二氯甲烷(20ml)溶液，滴加完毕后，继续搅拌1小时。缓慢加入化合物c-1(6.8g，0.02mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，加完后升至室温反应过夜。加完后升至室温反应过夜。tlc监测大量原料剩余。将二乙基锌(50ml，2m)分散于二氯甲烷(100ml)中，冰浴和氮气保护条件下，缓慢加入二碘甲烷(8ml，0.1mol)的二氯甲烷(20ml)溶液，搅拌一小时后，将此溶液缓慢加入到反应液中，继续搅拌16小时。tlc监测仍有大量原料剩余，且原料与产品极性非常接近，参照实施例1步骤c-1的后处理方法，柱层析纯化难以分离，损失较大。进一步地，取10g分离后混合物进行制备分离，仅制备得到3g目标产品化合物d-1。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。