1.一种磁珠法hcmv核酸提取用裂解液,其特征在于,所述裂解液至少含有以下组分,其中,以裂解液的总量为基准计,各组分的含量为:
2.如权利要求1所述的磁珠法hcmv核酸提取用裂解液,其特征在于,所述裂解液至少含有以下组分,其中,以裂解液的总量为基准计,各组分的含量为:
3.如权利要求3所述的磁珠法hcmv核酸提取用裂解液,其特征在于,所述裂解液用于提取的hcmv的核酸来源于羊水样本。
4.如权利要求1-3任一所述磁珠法hcmv核酸提取用裂解液的制备方法,至少包含以下步骤:
将异硫氰酸胍、十二烷基硫酸钠、np40、tris-hcl、edta和水混合,调节所述裂解液的ph值,加入β-巯基乙醇,获得所述裂解液。
5.如权利要求1-3任一所述的磁珠法hcmv核酸提取用裂解液用于制备羊水hcmv核酸提取产品或用于羊水中hcmv核酸提取的用途。
6.如权利要求5所述的用途,其特征在于,所述提取样本中hcmv核酸时,所需样本用量至少为200μl。
7.一种磁珠法hcmv核酸提取的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利要求1~3任意一项所述的裂解液,所述试剂盒还包括磁珠、洗涤液、洗脱液、rna助沉剂和蛋白酶k中的一项或多项。
8.如权利要求7所述的磁珠法hcmv核酸提取的试剂盒,其特征在于,还包括以下特征中的一项或多项:
(1)所述磁珠使用浓度为50-100mg/ml;
(2)所述洗涤液包括第一洗涤液,所述第一洗涤液中至少含有以下组分,以第一洗涤液的总量为基准计,各组分的含量为:异硫氰酸胍:0.5-2mol/l,氯化钠:0.1-0.5mol/l,曲拉通x-100:0.5-1%(w/v),无水乙醇:体积百分比为30-50%,tris-hcl:2-8mmol/l,溶剂为水;
(3)所述洗涤液还包括第二洗涤液,所述第二洗涤液至少含有以下组分,其中,以第二洗涤液的总量为基准计,各组分的含量为:无水乙醇:体积百分比为75%,溶剂为水;
(4)所述洗脱液至少含有以下组分,其中,以洗脱液的总量为基准计,各组分的含量为:tris-hcl:10-80mmol/l,edta0.5-25mmol/l,溶剂为水;
(5)使用时,裂解液与磁珠的体积比为(300-600)μl:20μl;
(6)所述裂解液与磁珠混合后预装在96孔板中;
(7)所述第一洗涤液、第二洗涤液、洗脱液分别预装在96孔板中;
(8)所述试剂盒用于提取羊水样本中的hcmv核酸。
9.一种hcmv核酸提取的方法,至少包括以下步骤:
(1)将裂解液与磁珠混合液中加入样本,混匀,加入rna助沉剂和蛋白酶k,在外部磁场的作用下形成磁珠-核酸复合物;
(2)将所述磁珠-核酸复合物中加入第一洗涤液,混匀,在外部磁场作用下进行磁分离,弃掉废液,得到第一混合物;
(3)将第一混合物中加入第二洗涤液,混匀,在外部磁场作用下进行磁分离,得到第二混合物;
(4)将第二沉淀物中加入洗脱液,混匀,在外部磁场作用下进行磁分离,所述上清液即为核酸溶液。
10.如权利要求9所述的hcmv核酸提取的方法,其特征在于,所述样本为羊水样本。