本发明涉及植物提取技术领域，具体是一种叠鞘石斛多糖的提取方法。
背景技术：
多糖是叠鞘石斛、铁皮石斛和金钗石斛等具有增强免疫、降血糖和抗肿瘤作用的主要活性成分之。多糖类成分在石斛属植物中含量较高，近年来，分别在《三种川产人工栽培石斛的多糖含量测定》、《迭鞘石斛多糖降血糖作用研究》、《川产道地药材迭鞘石斛品质初步研究》中张西玉、罗傲霜和许莉对叠鞘石斛多糖成分的研究表明：其含量分别为16.27％、30.4％和10.1％，但是这些方法中多糖提取率低、溶剂消耗量大、操作程序复杂、能耗大、耗时。
虽然专利号为cn201510931205.6公开了一种提高叠鞘石斛中多糖成分浸出率的方法，具体是将原料新鲜叠鞘石斛条清洗干净、晾干，切条；经膨化破壁后粉碎过100～300目筛得到叠鞘石斛提取前料，提取前料中加入重量4～8倍的水于80～100℃提取3～4次，每次1～3h，合并提取液，过滤、浓缩得到相对密度为1.1～1.3的浸膏；将提取的浸膏c干燥、粉碎过筛得到目标提取物，但多糖活性不高，应用效果不理想。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种叠鞘石斛多糖的提取方法，具体如下：
一种叠鞘石斛多糖的提取方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜叠鞘石斛置于低温箱，并充入液氮保护，将温度降至-20℃～-5℃，并保温30-45min；
(2)将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎至粒度为80-100目；
(3)向叠鞘石斛粉末中加入重量10-20倍的葡萄糖溶液，然后接种酵母菌至总菌落数为(1.8-3.8)×107cfu/ml，于温度为25-35℃内发酵1-4h，再接种枯草芽孢杆菌发酵中总菌落数为(5.6-9.6)×108cfu/ml，继续发酵1.-4h，得发酵液；
(4)取发酵液进行负压超声提取，提取温度为53-61℃，超声提取时间30-45min，超声频率68-76khz，负压强度-0.04mpa至-0.07mpa，过滤，收集滤液；
(5)将滤渣置于其重量3-7倍的碱性电解水中进行浸提1-3h，过滤，收集滤液；
(6)微波干燥，即得。
所述负压超声提取的工作条件为：提取温度为58℃，超声提取时间36min，超声频率72khz，负压强度-0.05mpa。
所述碱性电解水的ph为12.0，每升含有氯化钠19-27g、氯化钾34-39g。
所述步骤(5)中浸提温度为63-73℃。
所述微波干燥是先在频率为30-42mhz条件下热处理10-20min，再升高至频率为63-77mhz条件下热处理5-9min，再降低至频率为47-55mhz条件下热处理2-7min，最后置于90-100℃条件下烘干。
与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：
采用本发明方法提取率高，多糖溶出率占提取物重量23.6％，提取的多糖生理活性高，具有良好的dpph清除能力、羟自由基的清除能力及抗氧化能力，同时本发明中还能同时提取香豆素，香豆素提取率占提取物重量的10.8％。
本发明方法未使用高浓度化学试剂，有效减少了对环境的污染，属于绿色提取，本发明对叠鞘石斛进行发酵处理，有助于降解纤维素、果胶、蛋白质等成分，进而提高了提取效率。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定，但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
实施例1
一种叠鞘石斛多糖的提取方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜叠鞘石斛置于低温箱，并充入液氮保护，将温度降至-5℃，并保温-45min；
(2)将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎至粒度为100目；
(3)向叠鞘石斛粉末中加入重量20倍的葡萄糖溶液，然后接种酵母菌至总菌落数为3.8×107cfu/ml，于温度为35℃内发酵4h，再接种枯草芽孢杆菌发酵中总菌落数为9.6×108cfu/ml，继续发酵4h，得发酵液；
(4)取发酵液进行负压超声提取，提取温度为61℃，超声提取时间45min，超声频率76khz，负压强度-0.07mpa，过滤，收集滤液；
(5)将滤渣置于其重量7倍的碱性电解水中进行浸提3h，过滤，收集滤液；
(6)微波干燥，即得；
所述碱性电解水的ph为12.0，每升含有氯化钠27g、氯化钾39g；
所述步骤(5)中浸提温度为73℃；
所述微波干燥是先在频率为42mhz条件下热处理20min，再升高至频率为77mhz条件下热处理9min，再降低至频率为55mhz条件下热处理7min，最后置于100℃条件下烘干。
实施例2
一种叠鞘石斛多糖的提取方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜叠鞘石斛置于低温箱，并充入液氮保护，将温度降至-20℃，并保温30min；
(2)将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎至粒度为80目；
(3)向叠鞘石斛粉末中加入重量10倍的葡萄糖溶液，然后接种酵母菌至总菌落数为1.8×107cfu/ml，于温度为25℃内发酵1h，再接种枯草芽孢杆菌发酵中总菌落数为5.6×108cfu/ml，继续发酵1h，得发酵液；
(4)取发酵液进行负压超声提取，提取温度为53℃，超声提取时间30min，超声频率68khz，负压强度-0.04mpa，过滤，收集滤液；
(5)将滤渣置于其重量3倍的碱性电解水中进行浸提1h，过滤，收集滤液；
(6)微波干燥，即得；
所述碱性电解水的ph为12.0，每升含有氯化钠19g、氯化钾34g；
所述步骤(5)中浸提温度为63℃；
所述微波干燥是先在频率为30mhz条件下热处理10min，再升高至频率为63mhz条件下热处理5min，再降低至频率为47mhz条件下热处理2min，最后置于90℃条件下烘干。
实施例3
一种叠鞘石斛多糖的提取方法，包括如下步骤：
(1)取新鲜叠鞘石斛置于低温箱，并充入液氮保护，将温度降至-12℃，并保温38min；
(2)将冷冻的石斛倒入破碎机进行破碎至粒度为90目；
(3)向叠鞘石斛粉末中加入重量15倍的葡萄糖溶液，然后接种酵母菌至总菌落数为2.8×107cfu/ml，于温度为30℃内发酵2.5h，再接种枯草芽孢杆菌发酵中总菌落数为7.6×108cfu/ml，继续发酵2.5h，得发酵液；
(4)取发酵液进行负压超声提取，提取温度为58℃，超声提取时间36min，超声频率72khz，负压强度-0.05mpa，过滤，收集滤液；
(5)将滤渣置于其重量5倍的碱性电解水中进行浸提1-3h，过滤，收集滤液；
(6)微波干燥，即得；
所述碱性电解水的ph为12.0，每升含有氯化钠22g、氯化钾36g；
所述步骤(5)中浸提温度为68℃；
所述微波干燥是先在频率为36mhz条件下热处理15min，再升高至频率为70mhz条件下热处理7min，再降低至频率为51mhz条件下热处理5min，最后置于95℃条件下烘干。
最后，应当指出，以上实施例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。