一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物及其制备方法与应用与流程

本发明涉及一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物，及其制备方法，以及该配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
：有机锡羧酸酯具有较高的生物活性，在杀菌、杀虫、抗癌药物制备等领域有着广泛的应用前景，因此对有机锡羧酸酯配合物的合成、结构及生物活性研究受到科学家的广泛关注。已有的研究表明，有机锡羧酸酯中的烃基r是决定化合物抗癌活性高低的主要因素，如，环己基、正丁基和苯基锡化合物的抗癌活性较强，乙基次之，甲基则几乎无抗癌活性，且，但由于已知的有机锡化合物一般都具有较强的毒性，因而在应用上受到一定限制。调节其毒性与生物活性之间的平衡，是目前人们研究的重要方向。通过将烃基或配体功能化能极大地改变锡原子的配位方式，进而影响有机锡配合物的生物活性是目前行之有效的方法之一。研究表明有机锡化合物的毒性与其相对分子质量有关，相对分子质量越小，毒性越大，而大位阻烃基锡相对分子质量较大。因此，合成新型大位阻烃基锡配合物，并对其结构和生物活性进行研究，具有重要的研究意义。中国专利cn106188128b公开了三环己基锡2-萘甲酸酯在制备治疗肺癌、乳腺癌和肝癌的药物中应用。中国专利cn103396437b公开了三环己基锡酸酯在制备治疗宫颈癌、乳腺癌、肝癌、结肠癌和肺癌的药物中应用。中国专利cn103087325b公开了含二茂铁基三环己基锡酸酯配合物的在制备治疗肝癌、鼻咽癌、乳腺癌、结肠癌和肺癌的药物中应用。水杨酸是一种脂溶性的有机羧酸，很早已被用于合成解热镇痛药(阿司匹林)的一种主要原料。最新的研究表明水杨酸对已经有心脏疾病的i型糖尿病患者的治疗具有效果，被建议当成预防并发症的药物。某些水杨酸类配体也具有很好的药物活性，如5-氨基水杨酸又叫马沙拉嗪，是治疗溃疡性结肠炎的新药。因此把具有生物活性的大位阻烃基锡化合物与具有药物活性水杨酸类配体结合合成新型大位阻烃基锡羧酸酯化合物并对其进行生物活性研究是非常有必要的。基于三环己基氢氧化锡是经实验证明具有较好生物活性的物质，且环己基具有较大空间位阻和较大分子量等特点，本发明选择三环己基氢氧化锡，与水杨酸类配体2-羟基烟酸，在一定条件下反应，合成得到了对a549（人肺癌细胞），hela（人宫颈癌细胞），hgc-27（人胃癌细胞）的抑制活性较强的配合物，为开发抗癌药物提供了新途径。技术实现要素：针对上述现有技术存在的问题，本发明的第一目的是提供了一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。本发明的第二目的是提供上述三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备方法。本发明的第三目的是提供上述三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物在制备抗癌药物中的应用。作为本发明第一方面的一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物，其为如下结构式(i)的配合物：(i)。本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物经元素分析、红外光谱分析、核磁共振谱及x-射线单晶结构分析，结果如下：元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物为晶体结构，其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的结构特点是：分子中的中心锡与配位原子形成扭曲三角双锥构型。作为本发明第二方面的一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备方法，在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次三环己基氢氧化锡、2-羟基烟酸及溶剂甲苯，装上dean-stark分水器，112~120℃加热回流反应6~12h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。在本发明的一个优选实施例中，所述三环己基氢氧化锡、2-羟基烟酸两者的物质的量比为1:(1~1.1)。在本发明的一个优选实施例中，所述溶剂甲苯用量为每毫摩尔三环己基氢氧化锡加25~35毫升。作为本发明第三方面的一种三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物在制备抗癌药物中的应用。申请人对上述配合物进行了体外抗肿瘤活性确认研究，确认该配合物具有一定的抗肿瘤生物活性，也就是说上述配合物的用途是在制备抗肿瘤药物中的应用，具体地说就是在制备抗人肺癌药物、人宫颈癌药物、人胃癌药物中的应用中的应用。本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物对人肺癌细胞、人宫颈癌细胞、人胃癌细胞等显示出良好的抗癌活性，可以其为原料制备抗肺癌、抗宫颈癌、抗胃癌药物。与目前普遍使用的铂类抗癌药物相比，本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物具有抗癌活性高、成本低、制备方法简单等特点，为开发抗癌药物提供了新途径。附图说明图1为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的晶体分子结构图。图2为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的ir谱图。图3为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的1hnmr谱图。图4为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的13cnmr谱图。图5为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的119snnmr谱图。具体实施方式通过以下实施例进一步详细说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。实施例1：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡0.385g(1mmol)、2-羟基烟酸0.1392g(1mmol)、溶剂甲苯25ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应6h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。实施例2：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡0.385g(1.0mmol)、2-羟基烟酸0.1526g(1.1mmol)、溶剂甲苯25ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应8h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。实施例4：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡0.7705g(2.0mmol)、2-羟基烟酸0.2918g(2.1mmol)、溶剂甲苯50ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应8h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。实施例5：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡0.7706g(2.0mmol)、2-羟基烟酸0.2915g(2.0mmol)、溶剂甲苯60ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应12h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。实施例6：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡1.155g(3.0mmol)、2-羟基烟酸0.4176g(3.0mmol)、溶剂甲苯75ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应12h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。实施例7：三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物的制备：在250ml圆底烧瓶中，按顺序依次加入三环己基氢氧化锡1.1552g(3.0mmol)、2-羟基烟酸0.4589g(3.3mmol)、溶剂甲苯90ml，装上dean-stark分水器，112-120℃加热回流反应6h。反应结束后，趁热过滤，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂，得白色固体，用甲醇重结晶，即为三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物。产率：69%，熔点：67-69℃。元素分析(c25h41no4sn)：理论值：c，55.78；h，7.68；n，2.60。测定值：c，55.72；h，7.65；n，2.65。ir(kbr,v/cm-1):2918.30(s),2846.93(s),1678.07(s),1658.78(s),1629.85(s),1595.13(s),1571.99(s),1467.83(s),1444.68(s),1388.78(s),1355.96(s),1307.74(m),1255.66(m),1151.50(m),1087.85(w),1022.27(m),991.41(m),879.54(w),819.75(m),781.17(m),653.87(w),588.29(w),532.35(w),462.92(m),416.62(m)。1hnmr(cdcl3,500mhz),δ(ppm):8.23(s,3h),6.76(s,1h),3.47(s,3h),2.03-1.93(m,9h),1.74-1.66,(m,15h),1.37-1.31(m,9h)。13cnmr(cdcl3,125mhz),δ(ppm):172.23，165.46,148.57,141.43,112.53,34.61,31.08,28.89(t,j=31.5hz),26.82。119snnmr(cdcl3,186mhz),δ(ppm):44.05。其晶体学数据：晶体属单斜晶系，空间群p21/n，a=1.60782(9)nm，b=1.0128(6)nm，c=1.6627(10)nm，α=90°，β=102°，γ=90°，z=4，v=2.6453(8)nm3，dc=1.352mg·m-3，μ(moka)=0.994mm-1，f(000)=1120，1.60°＜θ＜25.01°，晶体尺寸：0.28×0.23×0.22mm，r=0.0395，wr=0.1143。试验例：本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物，其体外抗癌活性测定是通过mtt实验方法实现的。mtt析法：以代谢还原3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diarenyltetrazoliumbromide为基础。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性mtt还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(dmso)能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪测定特征波长的光密度，可间接反映活细胞数量。采用mtt法来测定实施例1制备的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物对人肺癌细胞（a549），人宫颈癌细胞（hela），人胃癌细胞（hgc-27）的抑制活性。细胞株及培养体系：a549，hela和hgc-27细胞株取自美国组织培养库(atcc)。用含10%胎牛血清的rpmi1640(gibico公司)培养基，在5%(体积分数)co2、37℃饱和湿度培养箱内进行体外培养。测试过程：将测试药液(0.0625μmol/l~0.5μmol/l)按照浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设3个平行孔。实验分为药物试验组(分别加入不同浓度的测试药)、对照组(只加培养液和细胞，不加测试药)和空白组(只加培养液，不加细胞和测试药)。将加药后的孔板置于37℃，5%co2培养箱中培养24h。对照药物的活性按照测试样品的方法测定。在培养了48h后的孔板中，每孔加mtt20ul(用pbs溶液配制成5g/l)。在37℃放置4h后，移去上清液。每孔加150uldmso，振荡10min，使formazan结晶溶解。最后，利用biotek多功能酶标仪在570nm波长测各孔的吸光度值。数据处理：数据处理使用graarpadprismversion5.0程序，配合物ic50通过程序中具有s形剂量响应的非线性回归模型进行拟合得到。以mtt分析法对人肺癌细胞（a549）细胞株、人宫颈癌细胞（hela）细胞株、人胃癌细胞（hgc-27）细胞株进行分析，测定其ic50值，结果如表1所示，结论为：由表中数据可知，本发明的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物作为抗癌药物，对人肺癌、人宫颈癌、人胃癌抗癌活性较高，可作为抗癌药物的候选配合物。表1三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物抗癌药物体外活性测试数据。人肺癌细胞人宫颈癌细胞人胃癌细胞细胞株a549helahgc-27ic50μm0.40620.34340.3454其余实施例制备的三环己基锡2-羟基烟酸酯配合物以mtt法对人肺癌细胞（a549）、人宫颈癌细胞（hela）和人胃癌细胞（hgc-27）的抗癌活性测试方法同试验例，测试结果与表1基本相同。当前第1页12