本发明涉及拉尼兰诺(lanifibranor)的氘代衍生物，特别是用于其治疗用途、尤其是用于治疗纤维化疾病用途的拉尼兰诺的氘代衍生物。
背景技术：
拉尼兰诺或4-(1-(1,3-苯并噻唑-6-基磺酰基)-5-氯-吲哚-2-基)-丁酸是ppar受体激动剂，特别适用于在系统性硬化症(ssc)和非酒精性脂肪性肝炎(nash)的治疗中使用。在专利申请wo2007/026097中特别对拉尼兰诺与其它吲哚衍生物进行了描述，特别是用于预防或治疗高甘油三酯血症、高胆固醇血症，更普遍地，用于在脂质和碳水化合物代谢被打乱的过程中重新建立正常参数，以及用于治疗内皮功能障碍、炎性疾病或神经退行性疾病的情况。
使用氘化分子的兴趣被认为是一种通过改善其代谢稳定性对其代谢进行修饰的手段，并可能改善其细胞渗透特性(maehr等，j.med.chem.2013,56,3878-3888；kerekes等，j.med.chem.2011,54,201-210；harbeson&tung,medchemnews2014,29-22；gant,j.med.chem.2014,57,3595-3611；dewitt&maryanoff,biochemistry2018,57,472-473；wo2017/136375；wo2018/039521)。氘化药物的合成也在几篇文章中进行了描述(modutwa等，j.labelcompd.radiopharm2010,53686-692；junk等，j.labelcompd.radiopharm1997,39625-630)。
然而，已经认识到氢被氘取代对化学物质代谢的影响仍然是不可预测的，并且对于许多作者来说，药物的氘化不被认为是可靠的调控手段(foster,ab,advdrugres1985,14:1-40；fisher,mb等，curropindrugdiscovdevel,2006,9:101-09；katsnelson,naturemedecine2013,196656)。
技术实现要素：
本发明涉及式(i)的拉尼兰诺的氘代衍生物：
其中，基团r1至r7中的至少一者是氘原子(d)，且r1至r7的其它基团是氢原子(h)。
本发明还涉及包含至少一种式(i)的氘代衍生物的组合物、特别是药物组合物。
本发明还涉及用于其治疗用途、特别是用于纤维化疾病的治疗用途的式(i)的氘代衍生物。
具体实施方式
本发明涉及式(i)的拉尼兰诺的氘代衍生物，及其药学上可接受的盐和溶剂化物：
其中，基团r1至r7中的至少一者是氘原子，且r1至r7的其它基团是氢原子。
根据本发明的第一实施方式，至少基团r1是d。
特别地，拉尼兰诺的氘代衍生物是4-(1-(2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-基)磺酰基)-5-氯-1h-吲哚-2-基)丁酸。
根据本发明的另一实施方式，基团r2至r7中的至少一者是d。更优选地，基团r2和r3中的至少一者和/或基团r4和r5中的至少一者和/或基团r6和r7中的至少一者是d。甚至更优选地，r2、r3、r4、r5、r6和r7是d。
特别地，拉尼兰诺的氘代衍生物是4-[1-(1,3-苯并噻唑-6-基磺酰基)-5-氯-吲哚-2-基]-2,2,3,3,4,4-六氘代丁酸。
根据本发明的氘代衍生物的药学上可接受的盐与拉尼兰诺的药学上可接受的盐相同，特别是通过将酸与药学上可接受的无毒的无机碱或有机碱结合。在无机碱中，可以使用例如钠、钾、镁或钙的氢氧化物。在有机碱中，可以使用例如胺、氨基醇、碱性氨基酸(例如赖氨酸或精氨酸)或带有季铵官能团的化合物(例如甜菜碱或胆碱)。
根据本发明的化合物是根据制备拉尼兰诺的常用方法制备的，例如专利申请wo2007/026097中所述的方法，氘代合成中间体替代了在这些常规方法中使用的相同的同位素未富集的中间体。
本发明还涉及一种组合物，所述组合物包含根据本发明的氘代衍生物或其盐或溶剂化物之一，特别是药学上可接受的盐或溶剂化物，以及适合其使用的载体。
为了在治疗中使用，根据本发明的组合物有利地是药物组合物，载体包括药典的常规赋形剂，所述赋形剂根据设想的给药方式进行选择。
此类组合物是本领域技术人员已知的，并且特别在专利申请wo2007/026097和wo2015/189401中进行描述。
对于口服给药，例如以片剂、胶囊剂、锭剂、凝胶剂、糖浆剂、口服混悬剂的形式，根据本发明的药物组合物有利地包含1mg至1000mg的式(i)的氘代衍生物，例如1mg、5mg、10mg、50mg、100mg、200mg、500mg或1000mg。
本发明还涉及用于其治疗用途的式(i)的氘代衍生物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
根据本发明的氘代衍生物的不同治疗用途是拉尼兰诺及其类似物已知的那些用途，例如专利申请wo2007/026097和wo2015/189401中所述的那些用途。
因此，本发明涉及用于对抗以下疾病的用途的式(i)的氘代衍生物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物：高胆固醇血症、高脂血症、高甘油三酯血症、血脂异常、胰岛素抵抗、糖尿病或肥胖症以及由血清脂蛋白失衡引起的心血管疾病。根据本发明的化合物也可用作药物的有效成分，所述药物旨在预防或治疗与内皮功能障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、高血压、脑血管疾病、某些炎性疾病(例如类风湿性关节炎)、神经退行性疾病(例如特别是阿尔茨海默氏病或帕金森氏病)有关的疾病。
本发明特别涉及用于治疗纤维化疾病的用途的式(i)的氘代衍生物。在一个实施方案中，纤维化疾病是影响可发展出纤维化的任何器官的病症，所述器官例如心脏、肺、肝脏、肾脏、胃肠道、皮肤、肌肉等。纤维化疾病特别选自：肝纤维化、脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、慢性肾病、诸如特发性肺纤维化的肺纤维化紊乱和系统性硬化症。
本发明还涉及在等待此类治疗的患者中对如上定义的纤维化疾病进行治疗的方法，所述方法包括向该患者给予式(i)的氘代衍生物，特别是通过药物组合物的方式，所述药物组合物包含适合于所选给药方式的形式的所述式(i)的氘代衍生物。
有利地，已通过任何适当的用于检测待治疗的纤维化疾病的诊断方法预先确定了患者治疗的需要，特别是通过分析待治疗的患者的纤维化组织中ppar受体的表达水平。
实施例
缩略语
apci＝大气压化学电离
dcm＝二氯甲烷
dmso＝二甲亚砜
eq.＝当量
etoac＝乙酸乙酯
etoh＝乙醇
h＝小时
hplc＝高效液相色谱
lcms＝液相色谱与质谱联用
meoh＝甲醇
min＝分钟
pd(pph3)4＝四(三苯基膦)钯(0)
ptsoh＝对甲苯磺酸
nmr＝核磁共振
thf＝四氢呋喃
实施例1：4-[5-氯-1-[(2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-基)磺酰基)]吲哚-2-基]丁酸
制备例1：2-氘代-1,3-苯并噻唑
将正丁基锂(37.0ml，92.5mmol，2.5当量，2.5m己烷溶液)滴加到溶于thf(80ml)的1,3-苯并噻唑(5.0g，36.9mmol，1.0当量)中，冷却至-78℃。添加完毕后，在-78℃下将d2o(4ml，222mmol，6.0当量)添加至反应混合物中，全部搅拌30分钟，然后使其升至室温。通过lcms分析监测反应。然后将反应混合物用饱和nh4cl水溶液处理，并将全部用dcm萃取3次。合并有机相，经mgso4干燥，然后过滤，减压蒸馏，得到粗产物，通过快速色谱纯化(洗脱剂：0至40％etoac的正庚烷溶液)，作为棕色油状物得到制备例1的化合物(3.22g，产率64％)。apcimsm/z137[m+h]+；hplc-ms(220-254nm)纯度：99％.1hnmr(300mhzdmso-d6):δ7.46-7.58(2h,m)；8.08-8.19(2h,m)。
制备例2：2-氘代-6-硝基-1,3-苯并噻唑
在0℃下，将2-氘代-1,3-苯并噻唑(制备例1，2.9g，21.3mmol，1.0当量)缓慢添加至硫酸溶液(13ml)中，然后滴加硝酸(6.4ml)，同时温度保持在0℃以下。然后将反应混合物升至室温并搅拌12h，随后在冰水混合物上水解。滤出黄色沉淀，用水洗涤并在乙醇中结晶，得到黄色结晶形式的所需产物(制备例2，1.4g，产率37％)。apcimsm/z182[m+h]+；hplc-ms(220-254nm)纯度>99％.1hnmr(300mhzdmso-d6):δ8.27-8.38(2h,m)；9.25(1h,d,j＝2.3hz)。
制备例3：2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-胺
将氯化锡粉末(7.3g，38.6mmol，3.5当量)加入溶解在1:1etoh-etoac混合物(60ml)中的制备例2的化合物(2.0g，11.0mmol，1.0当量)中，将溶液在室温下搅拌4小时。在反应结束时，将反应混合物通过celitetm柱过滤，并用饱和na2co3溶液萃取。合并有机相，经mgso4干燥，然后过滤并减压蒸馏，得到的粗产物，通过快速色谱纯化(洗脱剂：0至20％meoh的dcm溶液)，作为褐色结晶得到所需化合物(制备例3，970mg，产率58％)。apcimsm/z152[m+h]+；hplc-ms(220-254nm)纯度：97％.1hnmr(300mhzdmso-d6):δ5.38(2h,s)；6.8(1h,dd,j＝8.7hz以及j＝2.2hz)；7.11(1h,d,j＝2.2hz)；7.7(1h,d,j＝8.7hz)。
制备例4：2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-磺酰氯
在0℃下制备亚硫酰氯(1.1ml)的水溶液(4.5ml)，并在4℃下保存过夜。在-10℃下向该溶液中加入氯化铜(i)(0.05当量)。将制备例3的化合物(450mg，2.9mmol，1.0当量)溶解于盐酸(3.5ml)中，同时保持温度低于25℃，然后将后一溶液冷却至-10℃，在温度不超过-2℃的条件下添加亚硝酸钠溶液(3.3mmol，0.7ml，1.1当量)。将如此获得的混合物在-2℃下搅拌15分钟，然后在-5℃下滴加到亚硫酰氯第一溶液中。然后将反应混合物在-5℃下搅拌3小时，然后使反应在水中水解。过滤形成的沉淀物，然后用水洗涤以产生呈浅棕色结晶形式的所需产物(制备例4，255mg，产率37％)。该化合物无需纯化即用于下一步。hplc-ms(220-254nm)纯度：94％。
制备例5：n-(4-氯-2-碘代苯基)-2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-磺酰胺
在氩气下，将4-氯-2-碘苯胺(564mg，2.2mmol，1.0当量)溶解在无水吡啶(8ml)中，并加入制备例4的化合物(600mg，2.5mmol，1.15当量)。然后将溶液在室温搅拌2小时。蒸馏溶剂，并将反应粗产物通过快速色谱纯化(洗脱剂：0至30％etoac的正庚烷溶液)，得到呈棕色结晶形式的所需产物(制备例5，0.73g，产率73％)。apcimsm/z452[m+h]+；hplc-ms(220-254nm)纯度：94％.1hnmr(300mhzdmso-d6):δ7.01(1h,d,j＝8.5hz)；7.4(1h,dd,j＝8.5hz以及j＝2.3hz)；7.82(1h,dd,j＝8.7hz以及j＝1.8hz)；7.88(1h,d,j＝2.4hz)；8.26(1h,d,j＝8.7hz)；8.6(1h,d,j＝1.5hz)；10.03(1h,s)。
制备例6：4-[5-氯-1-[(2-氘代-1,3-苯并噻唑-6-基)磺酰基)]吲哚-2-基]丁酸
在氩气下，将制备例5的化合物(1.31g，2.9mmol，1.0当量)溶解于无水dmf(30ml)中，然后加入5-己炔酸(360mg，3.2mmol，1.1当量)、碘化铜(56mg，0.3mmol，0.1当量)、pd(pph3)4(168mg，0.15mmol，0.05当量)和三乙胺(606μl，4.4mmol，1.5当量)，并将反应混合物在80℃搅拌2小时。反应结束时，将混合物置于1n盐酸水溶液中，并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，经mgso4干燥，然后过滤并减压蒸馏，得到粗产物，通过快速色谱纯化(洗脱剂：0至5％meoh的dcm溶液)，得到呈棕色结晶形式的所需产物(实施例1，1.05g，产率83％)。apcimsm/z452[m+h]+；hplc-ms(220-254nm)纯度:94％.1hnmr(300mhzdmso-d6):δ1.86-2.01(2h,m)；2.29-2.41(2h,m)；3.08(2h,t,j＝7.2hz)；6.61(1h,s)；7.31(1h,dd,j＝8.7hz以及j＝2.0hz)；7.51(1h,d,j＝2.0hz)；7.84(1h,dd,j＝8.7hz以及j＝1.8hz)；8.08(1h,d,j＝8.7hz)；8.19(1h,d,j＝8.7hz)；8.97(1h,d,j＝1.8hz)；12.13(1h,s)。通过500mhznmr测定的氘掺入率：98％。
实施例2：4-[1-(1,3-苯并噻唑-6-基磺酰基)-5-氯-吲哚-2-基]-2,2,3,3,4,4-六氘代丁酸
制备例7：2-(1,1,2,2,3,3,4,4-八氘代-4-碘-丁氧基)四氢吡喃
在0℃下将三甲基碘硅烷(25g，125mmol，1当量)加入到thf-d8(10g，125mmol，1当量)中。在0℃下搅拌2小时后，加入乙醚(80ml)和水(20ml)。将混合物搅拌3小时，然后倒出。然后将有机相经mgso4干燥，过滤并在减压下浓缩。在0℃下，将如此获得的反应粗产物置于dcm(100ml)中，然后加入二氢吡喃(12.5ml，150mmol，1.2当量)和ptsoh(50mg，0.2mmol，0.002当量)。然后将反应混合物在0℃下搅拌过夜。该溶液依次用饱和nahco3溶液(3×15ml)洗涤，然后用盐水洗涤，然后经na2so4干燥，然后减压浓缩。将反应粗产物通过快速色谱纯化(洗脱剂：1:20至1:5的etoac:己烷)，得到无色油状物形式的所需产物(制备例7，23g，产率62％)，将其直接用于下一步。
制备例8：2-(1,1,2,2,3,3,4,4-八氘代己-5-炔氧基)四氢吡喃
在5℃下，向处于新蒸馏的dmso(60ml)中的乙炔锂(19.94g，186.3mmol，1当量)溶液中滴加处于dmso(30ml)中的制备例7的化合物(30g，102.7mmol，0.55当量)溶液。将如此获得的溶液搅拌2小时，然后在0℃下用nh4cl溶液水解。然后将该混合物用己烷萃取，依次用硫酸铜溶液(5％，20ml)和盐水(20ml)洗涤。合并有机相并经na2so4干燥，然后减压浓缩，得到黄色油状物形式的所需产物(制备例8，10.7g，产率55％)，其无需任何纯化即直接用于下一步。
制备例9：1,1,2,2,3,3,4,4-八氘代己-5-炔-1-醇
在0℃下，向处于thf(12.5ml)和meoh(350ml)的混合物中的制备例8的化合物(10.7g，56.2mmol，1当量)溶液中分批加入ptsoh(360mg，1.82mmol，0.03当量)，将如此获得的反应混合物搅拌过夜。然后将混合物用nahco3饱和溶液(3×15ml)和盐水(15ml)洗涤，然后经na2so4干燥，然后减压浓缩。将反应粗产物通过快速色谱纯化(洗脱剂：1:20至1:5的etoac:己烷)，得到无色油状物形式的所需产物(制备例9，5g，产率82％)，将其直接用于下一步。
制备例10：2,2,3,3,4,4-六氘代己-5-炔酸
在搅拌下，在0℃下历时5分钟向处于丙酮(87ml)中的制备例9的化合物(9.25g，87mmol，1当量)的溶液中加入琼斯试剂(处于10nh2so4(218ml)中的cro3(17.45g，174.5mmol，2当量))。然后将反应混合物搅拌1h，然后减压浓缩。然后立即加入乙醚(130ml)和水(4ml)。滤出获得的固体，并将滤液用乙醚(6×100ml)萃取。合并有机相并用水洗涤，然后经na2so4干燥，然后过滤并在减压下浓缩，得到橙色油状物形式的所需产物(制备例10，9.17g，产率89％)，将其直接用于下一步而无需任何纯化。
制备例11：4-[1-(1,3-苯并噻唑-6-基磺酰基)-5-氯-吲哚-2-基]-2,2,3,3,4,4-六氘代丁酸
在110℃、氮气下，将苯并噻唑-6-磺酸(4-氯-2-碘-苯基)-酰胺(16g，35.5mmol，1当量)、己-5-炔酸(制备例10，5.2g，44mmol，1.24当量)、碘化铜(335mg，1.75mmol，0.05当量)、二氯双(三苯基膦)钯(1.24g，1.72mmol，0.05当量)、三乙胺(130ml)和n,n-二甲基甲酰胺(130ml)的混合物搅拌1小时。然后将反应混合物用1mhcl溶液稀释并用乙酸乙酯萃取，滤出不溶物，并将滤液经na2so4干燥，然后减压浓缩。通过快速色谱纯化反应粗产物，然后从dcm重结晶，得到白色固体形式的所需产物(实施例2，2.3g，产率15％)。通过500mhznmr测定的氘掺入率：>99％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ6.62(1h,d,j＝0.6hz),7.32(1h,dd,j＝8.9以及2.2hz),7.57(1h,d,j＝2.1hz),7.85(1h,dd,j＝8.7以及2.1hz),8.10(1h,d,j＝8.9hz),8.20(1h,d,j＝8.7hz),8.99(1h,s),9.66(1h,s),12.15(1h,s)。
实施例3：药理活性
对本发明的化合物进行生物学测试，以评估其治疗或预防某些疾病的潜力。首先，对化合物作为ppar核受体活化剂的能力进行测量。
将反式激活试验用作主要的筛选试验。用表达鼠或人受体ppar-gal4(受体pparα-gal4或pparδ-gal4或pparγ-gal4)嵌合体的质粒和报告质粒5gal4pgl3tkluc转染cos-7细胞。使用化学试剂(jetpei)进行转染。
将转染的细胞分配到384孔板中，并静置24小时。
在24小时，更换培养基。将待测试的产物(终浓度在10-4和3.10-10m之间)添加到培养基中。孵育过夜后，根据制造商(promega)的说明，在添加“steadyglo”后对荧光素酶表达进行测量。
将10-5m的非诺贝酸(pparα激动剂)、10-8m的gw501516(pparδ激动剂)和10-6m的罗格列酮(pparγ激动剂)用作参照。
结果表示为相对于基础水平的诱导率(次数)，以适当参照(参照＝100％)的活性百分比表示。使用assayexplorer(mdl)软件计算作用-浓度曲线和ec50。
表1
从上表可以看出，拉尼兰诺的氘代衍生物激活了ppar受体的三种亚型(pparα、pparγ和pparδ)，每种亚型的ec50均小于2.5μm。还应注意，两种ppar亚型的ec50之比小于100或大于0.01。
参考文献
1.dewitt&maryanoff，biochemistry2018，57，472-473
2.fisheretal，curropindrugdiscovdevel，2006，9：101-09
3.foster，advdrugres1985，14∶1-40
4.gant，j.med.chem.2014，57，3595-3611
5.harbeson&tung，medchemnews2014，29-22
6.junk&al.，j.labelcompd.radiopharm1997，39625-630
7.katsnelson，naturemedecine2013，196656
8.kerekes&al.，j.med.chem.2011，54，201-210
9.maehr&al.，j.med.chem.2013，56，3878-3888
10.modutwa&a.，j.labelcompd.radiopharm2010，53686-692
11.wo2007/026097
12.wo2015/189401
13.wo2017/136375
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