本发明属于药物化学领域，涉及嘧啶类衍生物，具体涉及抗肿瘤活性的含酰基脲结构的2,4,6-取代嘧啶类衍生物及其制备方法和用途。
背景技术：
据美国癌症协会统计，2010年全球有超过800万人死于癌症，占因病死亡人数的21.6％，癌症已取代心血管病，成为全球死亡人数最多的疾病。因此，研究并开发高效的抗肿瘤药物已迫在眉睫。嘧啶类化合物是一类很重要的六元杂环化合物，其拥有低毒、高效、广谱的作用方式，始终是新药分子设计、合成与生物活性研究中的一个非常重要的领域。将嘧啶和酰基脲类化合物结合在一起的报道较少，因此研究酰基脲片段的2,4,6-取代嘧啶类衍生物具有非常重要的研究价值，有利于我国自主产权药物的开发。
技术实现要素：
为开发利用现有的临床药物资源，本发明目的在于提供一类含酰基脲片段的2，4，6-取代嘧啶类衍生物，从而为寻找新的抗肿瘤活性化合物开辟一条新途径；本发明另一目的在于提供其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用。
本发明所述含酰基脲片段的4-取代2，4，6-取代嘧啶类衍生物的结构通式如下：
通式ⅰ中：r为氯原子、苯胺基、2-氯苯胺基、3-氯苯胺基、4-氯苯胺基、2-氟苯胺基、3-氟苯胺基、4-氟苯胺基、2-甲基苯胺基、3-甲基苯胺基、4-甲基苯胺基、3,4,5-三甲氧基苯胺基、3-氯-4-氟苯胺基、3,4-二氯苯胺基、2-乙氧基苯胺基、3-乙基苯胺基、4-乙氧基苯胺基、2-甲氧基苯胺基、3-甲氧基苯胺基、4-甲氧基苯胺基、苯酚基、2-氯苯酚基、3-氟苯酚基、4-溴苯酚基、4-硝基苯酚基、3-硝基苯酚基、4-乙基苯酚基、4-甲氧基乙基苯酚基、3,4,5-三甲氧基苯酚基、3-甲基苯酚基、4-甲基苯酚基、4-甲氧基苯酚基、4-乙氧基苯酚基，2,6-二甲基苯酚基。
优选以下化合物：4g:2-((4-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4–乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
5a:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-(苯基氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5c:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5d:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5e:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5g:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5i:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-甲基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5j:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-甲基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5k:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5l:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5m:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯-4-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5o:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-乙基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5p:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-乙氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5r:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
5s:n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺；
6c:2-((4-(3-氟苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6d:2-((4-(4-溴苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6f:2-((4-(3-硝基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6g:2-((4-(4-乙基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6j:2-((4-(3-甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6k:2-((4-(4-甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6l:2-((4-(4-甲氧基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6m:2-((4-(4-乙氧基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺；
6n:2-((4-(2,6-二甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺。
本发明所述含酰基脲片段的2，4，6-取代嘧啶类衍生物的制备方法包含以下合成步骤：a.将草酰氯、氯乙酰和4-乙基苯胺在1,2-二氯乙烷溶液中发生取代反应，生成化合物1a；b.化合物2与1a在水和氢氧化钾水溶液反应生成化合物3a；c.4位为羟基的含酰基脲基片段的嘧啶衍生物3a与三氯氧磷反应，生成4位为氯原子的含酰基脲基片段的嘧啶衍生物4g；d.4位为氯原子的含脲基片段的喹唑啉衍生物4g与苯胺类化合物在dmf溶液中反应生成含酰基脲基片段的嘧啶衍生物5a-5s；e.4位为氯原子的含脲基片段的喹唑啉衍生物4g与苯酚类化合物在乙腈和三乙胺中反应生成含酰基脲基片段的嘧啶衍生物6a-6o.
合成路线如下：
步骤(d)所述的苯胺类化合物为：苯胺、2-氯苯胺、3-氯苯胺、4-氯苯胺、2-氟苯胺、3-氟苯胺、4-氟苯胺、2-甲基苯胺、3-甲基苯胺、4-甲基苯胺、3,4,5-三甲氧基苯胺、3-氯-4-氟苯胺、3,4-二氯苯胺、2-乙氧基苯胺、3-乙基苯胺、4-乙氧基苯胺、2-甲氧基苯胺、3-甲氧基苯胺、4-甲氧基苯胺；
步骤(e)所述的所述的苯酚类化合物为：苯酚、2-氯苯酚、3-氟苯酚、4-溴苯酚、4-硝基苯酚、3-硝基苯酚、4-乙基苯酚、4-甲氧基乙基苯酚、3,4,5-三甲氧基苯酚、3-甲基苯酚、4-甲基苯酚、4-甲氧基苯酚、4-乙氧基苯酚，2,6-二甲基苯酚。
经体外抗肿瘤活性评价，本发明所述含酰基脲片段的2，4，6-取代嘧啶类衍生物对人胃癌细胞(mgc-803)、人结肠癌细胞(sw620)、人前列腺癌细胞(pc-3)和人肺癌细胞(a549)有很好的抑制作用。其中有些化合物的ic50值小于10(μmol/l)，与临床上已使用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶作对照，优于其活性。因此，本发明提供的此类含酰基脲片段的2，4，6-取代嘧啶类衍生物为开发新型抗肿瘤药物和药物的联合用药开辟了新途径。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明要求保护的范围。
合成化合物表征使用的仪器：nmr谱使用瑞典brukerdpx-400型超导核磁共振仪测定，tms为内标；高分辨质谱使用waters-micromass公司q-tof质谱仪测定。
实施例12-((4-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4–乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(4g)
冰浴条件下，将氯乙酰(2.00g，0.21mmol)溶于50ml1,2-二氯乙烷溶液中，缓慢加入草酰氯(3.62ml,0.42mmol)，升温至90℃，反应4h；转移至冰浴中，缓慢加入4-乙基苯胺(0.21mmol)，tlc检测反应完成，抽滤，干燥，得到化合物1a(2-氯-n-(4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺)；
室温条件下，将6-三氟甲基-4-羟基-2-巯基嘧啶(2.00g,10.20mmol)溶于50ml氢氧化钾(1.14g,20.40mmol)的水溶液中，升温至90℃，然后将化合物1g(2.45,10.20mmol)的丙酮溶液(10ml)滴加到上述反应溶液中，滴加完毕后回流反应0.5h，tlc检测反应完成，将反应液冷至室温，抽滤，滤饼分别用水和丙酮各洗三次(3×10ml),得到白色的纯品化合物产物3g2-((4-羟基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺。
冰浴条件下，将8ml三氯氧磷缓慢滴加到上述合成的2-((4-羟基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺的1,4-二氧六环溶液中，缓慢梯度升温至90℃，继续反应4h，然后停止反应，将反应液冷至室温，然后将反应液缓慢滴加到剧烈搅拌的碎冰水混合物中，保持反应体系在0℃，滴加完毕后继续搅拌10min，抽滤并用水洗涤三次，常温干燥，炒样进行柱层析(v石油醚：v乙酸乙酯＝5：1)，浓缩洗脱剂得产物4g。
白色固体粉末，收率71.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.11(s,1h),10.25(s,1h),8.02(s,1h),7.88(d,j＝7.8hz,1h),7.25–7.18(m,2h),7.07(t,j＝7.0hz,1h),4.24(d,j＝10.9hz,2h),2.51(d,j＝1.8hz,2h),1.10(t,j＝7.5hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ172.37,169.89,162.74,155.60,155.24,150.32,138.27,137.39,128.76,128.63,124.38,121.00,120.03,118.26,116.67,114.29,35.62,21.01.calcdforc16h17lf3n4o3[m+h3o]+:437.0662found:437.2000.
实施例2n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-(苯基氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5a)
将合成的2-((4-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4–乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(200mg,0.48mmol)和苯胺(87.20μl，0.96mmol)加入到4mln，n-二甲基甲酰胺中，升温至90℃反应1h，tlc(v石油醚:v乙酸乙酯＝3:1)检测。待反应完全，用水和乙酸乙酯萃取，炒样，柱层析分离得纯品n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-(苯基氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺。
白色固体粉末，收率73.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.91(s,1h),10.20(s,2h),7.59(d,j＝7.8hz,2h),7.38(dd,j＝15.8,8.1hz,4h),7.18–7.07(m,3h),6.85(s,1h),4.13(s,2h),2.55(dd,j＝15.2,7.7hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.98,169.87,162.42,160.23,154.53,154.28,150.47,148.57,139.12,128.92,128.11,124.63,119.73,35.18,27.49,15.62.calcdforc22h20f3n5nao2s[m+h]+：476.1368,found:476.1369.
实施例3n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5b)
用2-氯苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率75.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.89(s,1h),10.39(s,1h),10.18(d,j＝22.8hz,1h),7.72(dd,j＝5.7,2.3hz,1h),7.60–7.55(m,1h),7.37(d,j＝8.8hz,3h),7.14(dd,j＝8.8,2.1hz,3h),6.86(s,1h),4.13(s,2h),2.55–2.51(m,2h),1.13(d,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ173.26,170.98,170.37,160.06,159.98,150.45,139.75,139.20,135.04,133.17,130.56,130.52,128.10,123.37,119.74,118.70,117.52,46.13,27.48,15.57.calcdforc22h20clf3n5o2s[m+h]+：510.0978,found:510.0977.
实施例4n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5c)
用3-氯苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率77.1％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.97(d,j＝49.8hz,1h),10.40(s,1h),10.22(s,1h),7.75(d,j＝12.5hz,1h),7.59(d,j＝8.2hz,1h),7.44–7.33(m,3h),7.15(dd,j＝8.0,3.1hz,3h),6.88(s,1h),4.15(d,j＝4.5hz,2h),2.55(dd,j＝15.2,7.7hz,2h),1.17(t,j＝22.3,14.7hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ171.22,170.35,160.09,150.45,139.81,139.12,135.13,133.16,130.56,128.10,123.36,119.72,118.76,118.20,35.03,27.49,15.61.calcdforc22h19clf3n5o2s[m+h]+：510.0978,found:510.0974.
实施例5n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5d)
用4-氯苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率70.9％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.92(s,1h),10.33(s,1h),10.19(s,1h),7.63(t,j＝8.0hz,2h),7.45–7.37(m,4h),7.15(d,j＝8.3hz,2h),6.85(s,1h),4.15(s,2h),2.55(dd,j＝15.1,7.6hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ171.05,170.18,160.06,159.68,150.46,139.14,137.22,135.11,128.80,128.73,128.09,121.83,120.67,119.74,32.70,19.95,15.27.calcdforc22h19clf3n5nao2s[m+na]+：532.0798,found:532.0809.
实施例6n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5e)
用2-氟苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率65.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.80(s,1h),10.20(s,1h),10.01(s,1h),7.83(s,1h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.32–7.25(m,1h),7.25–7.19(m,2h),7.16(d,j＝8.3hz,2h),6.99(s,1h),4.07(s,2h),2.57–2.52(m,2h),1.16(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.91,170.16,160.92,159.96,150.43,139.10,135.17,128.08,126.29,125.19,124.42,122.72,121.85,119.71,119.12,115.87,115.68,35.09,27.49,15.56.calcdforc22h20n5o2s[m+h]+：494.1274,found:494.1275.
实施例7n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5f)
用3-氟苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率64.9％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.92(s,1h),10.42(s,2h),8.31(d,j＝1.6hz,1h),7.58(dt,j＝19.0,6.0hz,2h),7.42(s,2h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),6.90(d,j＝6.2hz,2h),4.15(s,2h),2.55(d,j＝7.5hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ171.00,170.33,162.90,159.57,150.69,140.19,138.72,134.89,130.16,127.96,119.79,114.84,110.26,106.18,35.03,27.10,15.84.calcdforc22h19f4n5nao2scalcdforc22h20n5o2s[m+h]+：494.1274,found:494.1277.
实施例8n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5g)
用4-氟苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率65.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.90(s,1h),10.24(s,1h),10.20(s,1h),7.61(d,j＝7.9hz,2h),7.40(d,j＝8.4hz,2h),7.24–7.12(m,4h),6.82(s,1h),4.12(s,2h),2.55(dd,j＝15.2,7.6hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.98,170.23,150.46,139.13,137.98,135.11,134.72,134.51,128.10,124.12,122.51,121.94,119.73,115.66,115.43,34.77,27.10,15.60.calcdforc22h19f4n5nao2s[m+na]+：516.1093,found:516.1047.
实施例9n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-甲基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5h)
用2-甲基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率66.7％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.89(s,1h),10.22(s,1h),10.15(s,1h),7.49(d,j＝7.2hz,1h),7.40(d,j＝8.4hz,2h),7.33(s,1h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),6.93(d,j＝7.5hz,1h),6.84(s,1h),4.13(s,2h),2.55(dd,j＝15.1,7.6hz,2h),2.30(s,3h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.92,170.80,167.13,164.87,159.69,145.94,138.93,138.25,138.03,136.79,131.84,128.28,126.95,124.50,124.47,120.77,35.02,27.49,21.04,15.61.calcdforc23h22f3n5nao2s[m+na]+：512.1344,found:512.1362.
实施例10n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-甲基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5i)
用3-甲基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率57.4％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.75(s,1h),10.24(s,1h),9.68(s,1h),7.41(t,j＝9.3hz,3h),7.26(d,j＝7.2hz,1h),7.21(d,j＝6.7hz,1h),7.16(d,j＝8.4hz,4h),3.99(s,2h),2.56(q,j＝7.6hz,2h),2.20(s,3h),1.16(t,j＝7.5hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.82,170.69,170.33,161.38,150.57,150.42,139.06,135.50,135.21,130.65,128.11,126.26,123.76,121.92,119.66,119.21,34.97,27.50,17.72,15.59.calcdforc23h22f3n5nao2s[m+na]+：512.1344,found:512.1362.
实施例11n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-甲基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5j)
用4-甲基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率61.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.88(s,1h),10.21(s,1h),10.12(s,1h),7.46(d,j＝5.2hz,2h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.16(t,j＝7.8hz,4h),6.81(s,1h),4.13(s,2h),2.55(q,j＝7.6hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.95,170.26,159.98,150.47,139.09,135.55,135.18,132.77,129.32,128.09,121.88,120.54,119.67,119.16,35.20,27.49,20.44,15.60.calcdforc23h22f3n5nao2s[m+na]+：512.1344,found:512.1367.
实施例12n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5k)
用3,4,5-三甲氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率65.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.88(s,1h),10.24(s,1h),10.18(s,1h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),7.00(s,2h),6.82(s,1h),4.13(s,2h),2.56(q,j＝7.6hz,2h),1.16(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.78,170.63,152.86,150.42,139.10,135.14,134.14,128.08,121.85,119.69,119.12,60.09,55.76,34.95,27.49,15.59.calcdforc25h26f3n5nao5s[m+na]+：588.1504,found:588.1533.
实施例13n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯-4-氟苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5l)
用3-氯-4-氟苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率55.4％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.88(s,1h),10.37(s,1h),10.21(s,1h),7.82(dd,j＝6.7,2.2hz,1h),7.62–7.56(m,1h),7.39(d,j＝8.6hz,3h),7.15(d,j＝8.3hz,2h),6.83(s,1h),4.13(s,2h),2.55(dd,j＝15.3,7.7hz,2h),1.14(d,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.98,170.31,160.06,159.83,154.70,152.25,150.67,150.43,139.12,135.44,135.11,128.09,120.58,119.72,119.44,117.15,116.93,35.04,27.49,15.60.calcdforc22h19lf4n5o2s[m+h]+：528.0884；found:528.0885.
实施例14n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-氯-4-氯苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5m)
用3-氯-4-氯苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率56.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.91(s,1h),10.45(s,1h),10.19(s,1h),7.89(d,j＝1.9hz,1h),7.62(dd,j＝6.3,3.3hz,2h),7.39(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),6.86(s,1h),4.15(s,2h),2.55(q,j＝7.6hz,2h),1.15(dd,j＝9.8,5.4hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ171.05,170.27,160.00,150.44,139.13,138.46,135.10,131.09,130.76,128.10,121.51,120.34,119.73,35.09,27.49,15.61.calcdforc22h19l2f3n5o2s[m+h]+：544.0589,found:544.0588.
实施例15n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-乙氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5n)
用2-乙氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率75.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.83(s,1h),10.23(s,1h),9.50(s,1h),7.73(s,1h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝8.4hz,3h),7.07(d,j＝8.0hz,1h),7.02(t,j＝3.4hz,1h),6.95(t,j＝8.1hz,1h),4.11(d,j＝7.0hz,2h),2.56(q,j＝7.6hz,2h),1.38(dd,j＝13.9,7.0hz,2h),1.30(d,j＝6.7hz,3h),1.14(d,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.56,170.38,160.10,150.44,147.59,139.09,135.17,128.10,127.11,123.99,120.25,119.69,116.18,112.69,112.00,63.81,27.50,15.61,14.58,14.47.calcdforc24h253n5o3s[m+h]+：520.1630,found:520.1630.
实施例16n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-乙基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5o)
用3-乙基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率70.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.90(s,1h),10.22(s,1h),10.17(s,1h),7.49(s,1h),7.40(d,j＝8.4hz,2h),7.35(s,1h),7.28(t,j＝7.8hz,1h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),6.96(d,j＝7.5hz,1h),6.83(s,1h),4.12(s,2h),2.57(dd,j＝17.5,7.6hz,4h),1.18–1.12(m,6h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.82,170.42,154.52,150.44,144.49,139.11,138.23,137.57,135.14,128.82,128.11,125.84,124.50,123.23,119.70,118.68,112.40,34.98,28.10,27.49,15.62,15.39.calcdforc24h24f3n5nao2s[m+na]+：526.1501,found:526.1528.
实施例17n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-乙氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5p)
用4-乙氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率69.7％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ1hnmr(400mhz,dmso)δ10.89(s,1h),10.23(s,1h),10.07(s,1h),7.47(s,2h),7.41(d,j＝8.4hz,3h),7.15(d,j＝8.4hz,2h),6.91(d,j＝8.8hz,3h),6.78(s,1h),4.12(s,2h),3.98–3.92(m,2h),2.55(q,j＝7.6hz,2h),1.33–1.29(m,3h),1.16(d,j＝7.6hz,3h).
13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.94,170.26,150.50,149.87,142.11,139.12,135.17,128.09,121.91,119.68,115.25,114.99,114.54,63.26,27.50,15.61,14.84,14.61.calcdforc24h25f3n5o3s[m+h]+：520.1630,found:520.1632.
实施例18n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((2-甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5q)
用2-甲氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率68.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.83(s,1h),10.22(s,1h),9.60(s,1h),7.80(s,1h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝8.4hz,3h),7.08(d,j＝7.9hz,2h),6.96(t,j＝7.6hz,1h),4.06(s,2h),3.83(s,3h),2.56(q,j＝7.6hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.58,170.35,150.44,139.09,135.17,128.11,125.84,124.37,121.53,120.24,119.70,117.45,113.14,111.65,55.63,35.04,27.49,15.62.calcdforc23h22f3n5nao3s[m+na]+：528.1293,found:528.1325.
实施19n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((3-甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5r)
用3-甲氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率65.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.84(s,1h),10.22(s,1h),9.60(s,1h),7.79(s,1h),7.41(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝8.4hz,4h),7.09(s,1h),6.96(t,j＝7.6hz,1h),4.07(s,2h),3.83(s,3h),2.58–2.53(m,2h),1.14(d,j＝7.5hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.62,170.35,150.44,139.09,135.17,128.10,124.50,121.95,120.24,119.70,111.65,70.51,69.75,69.64,55.62,35.04,27.49,15.61.calcdforc23h23f3n5o3s[m+h]+：506.1474,found:506.1475.
实施例20n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-((4-甲氧基苯基)氨基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(5s)
用4-甲氧基苯胺替代苯胺，制备方法同实施例2。
白色固体粉末，收率55.3％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.89(s,1h),10.23(s,1h),10.06(s,1h),7.48(s,2h),7.40(d,j＝8.5hz,2h),7.15(d,j＝8.5hz,2h),6.93(d,j＝8.9hz,2h),6.77(s,1h),4.10(s,2h),3.72(s,3h),2.55(q,j＝7.6hz,2h),1.15(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ170.92,170.26,150.49,142.25,139.12,135.15,134.05,128.11,121.90,119.70,119.18,116.73,114.91,114.45,114.06,55.24,35.15,27.49,15.62.calcdforc23h23f3n5o3s[m+h]+：506.1474,found:506.1475.
实施例21n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-苯氧基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺(6a)
将合成的2-((4-氯-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-(4–乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(200mg,0.48mmol)和苯酚(89.88mg,0.96mmol)加入到4ml乙腈中与三乙胺(1.44mmol)，升温至80℃，tlc(v石油醚:v乙酸乙酯＝5：1)检测。待反应完全，用水和乙酸乙酯萃取，炒样，柱层析分离，干燥，得到化合物n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)-2-((4-苯氧基-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)乙酰胺。
白色固体粉末，收率73.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.78(s,1h),10.20(s,1h),7.48(dd,j＝8.6,6.7hz,5h),7.36(d,j＝7.3hz,1h),7.32(dd,j＝6.6,5.5hz,2h),7.24(d,j＝8.4hz,2h),4.05(s,2h),2.64(q,j＝7.6hz,2h),1.23(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.41,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,124.04,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc21h19f3n4o3s[m-h]-：475.3175,found:475.3175.
实施例222-((4-(2-氯苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6b)
用2-氯苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率73.8％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.63(s,1h),10.13(s,1h),7.60(s,1h),7.50(dd,j＝7.9,1.4hz,1h),7.43(d,j＝8.3hz,3h),7.40–7.36(m,1h),7.33(dd,j＝10.6,4.5hz,1h),7.18(d,j＝8.4hz,2h),3.92(s,2h),2.57(q,j＝7.6hz,2h),1.17(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.61,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.98,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc22h18clf3n4nao3s[m+na]+：533.0683,found:533.0683.
实施例232-((4-(3-氟苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6c)
用3-氟苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率87.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.73(d,j＝14.1hz,1h),10.12(s,1h),7.45(d,j＝2.0hz,1h),7.43(d,j＝2.6hz,1h),7.40(s,1h),7.35(d,j＝8.4hz,1h),7.26–7.22(m,1h),7.17(s,1h),7.15(s,1h),7.13(d,j＝1.9hz,1h),7.11(d,j＝2.3hz,1h),3.99(s,2h),2.57(dd,j＝12.9,5.3hz,2h),1.16(t,j＝4.1hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.43,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.73,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc22h18f4n4nao3s[m+na]+：527.1341,found:527.1339.
实施例242-((4-(4-溴苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6d)
用4-溴苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率75.8％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.79(s,1h),10.18(s,1h),7.81(d,j＝8.4hz,1h),7.65(d,j＝8.7hz,2h),7.48(d,j＝10.2hz,2h),7.29(d,j＝8.7hz,2h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),4.06(s,2h),2.61(d,j＝7.7hz,3h),1.23–1.20(m,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.36,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,124.09,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc22h18brf3n4nao3s[m+na]+：577.0133,found:577.0132.
实施例252-((4-(4-硝基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6e)
用4-硝基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
淡黄色固体粉末，收率79.5％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.67(s,1h),10.17(s,1h),8.41–8.36(m,2h),7.69–7.64(m,3h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.28(d,j＝8.5hz,2h),4.06(s,2h),2.69(dd,j＝7.5,4.5hz,2h),1.28(dd,j＝7.6,6.1hz,4h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.38,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.75,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc22h18f3n5nao5s[m+na]+：544.0878,found:544.0876.
实施例262-((4-(3-硝基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6f)
用3-硝基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
淡黄色固体粉末，收率81.1％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.55(s,1h),10.03(s,1h),8.21(d,j＝2.1hz,1h),8.14(d,j＝8.2hz,1h),7.78–7.72(m,1h),7.66(t,j＝8.2hz,1h),7.55(s,1h),7.39(d,j＝8.3hz,2h),7.17(d,j＝8.3hz,2h),3.93(s,2h),2.57(q,j＝7.6hz,2h),1.17(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.38,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.73,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc22h19f3n5o5s[m+h]+：522.1059,found:522.1060.
实施例272-((4-(4-乙基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6g)
用4-乙基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率83.8％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.74(d,j＝9.9hz,1h),10.16(s,1h),7.43(d,j＝8.4hz,2h),7.37–7.33(m,1h),7.23(d,j＝8.6hz,2h),7.19–7.11(m,4h),3.99(s,2h),2.63–2.55(m,4h),1.16(ddd,j＝7.6,4.5,2.8hz,6h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.32,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.78,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc24h23f3n4nao3s[m+na]+：527.1341,found:527.1339.
实施例282-((4-(4-甲氧基乙基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6h)
用4-甲氧基乙基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率81.9％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.73(s,1h),10.16(s,1h),7.43(d,j＝8.5hz,2h),7.36(s,1h),7.26(d,j＝8.6hz,2h),7.21–7.12(m,4h),4.00(s,2h),3.58–3.50(m,2h),3.23(s,3h),2.81(t,j＝6.8hz,2h),2.57(q,j＝7.6hz,2h),1.16(t,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.45,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.81,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc25h26f3n4o4s[m+h]+：507.1314,found:507.1313.
实施例292-((4-(3,4,5-三甲氧基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6i)
用3,4,5-三甲氧基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率78.4％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.82(s,1h),10.17(s,1h),9.21(s,2h),7.40(d,j＝8.4hz,2h),7.29(s,1h),7.16(d,j＝8.4hz,2h),4.07(s,2h),3.71(s,3h),3.55(s,6h),2.56(d,j＝7.6hz,2h),1.16(t,j＝7.5hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.61,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.67,106.94,40.52,32.75,20.86.calcdforc25h25f3n4nao6s[m+na]+：589.1345,found:589.1343.
实施例302-((4-(3-甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6j)
用3-甲基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率86.2％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.79(d,j＝13.4hz,1h),10.19(s,1h),7.48(d,j＝8.4hz,2h),7.43(s,1h),7.35(t,j＝7.8hz,1h),7.23(d,j＝8.4hz,2h),7.15(d,j＝7.6hz,1h),7.13–7.07(m,2h),4.06(s,2h),2.65–2.60(m,2h),2.35(s,3h),1.22(d,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.36,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.59,106.94,40.52,32.75,20.86.c23h21f3n4nao3s[m+na]+：513.1184,found:513.1182.
实施例312-((4-(4-甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6k)
用4-甲基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率89.1％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.70(s,1h),10.14(s,1h),7.43(d,j＝8.5hz,2h),7.36(s,1h),7.18(t,j＝7.7hz,4h),7.10(d,j＝8.5hz,2h),3.98(s,2h),2.60–2.54(m,2h),2.29(s,3h),1.18–1.15(m,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.41,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,124.04,106.94,40.52,32.75,20.86.c23h22f3n4o3s[m+h]+：491.1365,found:491.1365.
实施例322-((4-(4-甲氧基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6l)
用4-甲氧基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率81.9％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.74(s,1h),10.15(s,1h),7.43(d,j＝8.4hz,2h),7.33(s,1h),7.19–7.13(m,4h),6.97–6.91(m,2h),3.99(s,2h),3.75(s,3h),2.56(dd,j＝15.3,7.7hz,2h),1.15(d,j＝7.6hz,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.38,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.86,106.94,40.52,32.75,20.86.c23h22f3n4o4s[m+h]+：507.1314,found:507.1313.
实施例332-((4-(4-乙氧基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6m)
用4-乙氧基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率71.6％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.75(s,1h),10.14(s,1h),7.42(d,j＝8.5hz,2h),7.33(s,1h),7.19–7.12(m,4h),6.94–6.90(m,2h),3.99(s,2h),2.55(dd,j＝9.7,5.5hz,2h),2.52–2.49(dd,2h),1.31(t,j＝7.1hz,3h),1.18(t,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.72,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.86,106.94,40.52,32.75,20.86.c23h22f3n4o4s[m+h]+：521.1470,found:521.1472.
实施例342-((4-(2,6-二甲基苯氧基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)硫基)-n-((4-乙基苯基)氨基甲酰基)乙酰胺(6n)
用2,6-二甲基苯酚替代苯酚，制备方法同实施例21。
白色固体粉末，收率65.9％；1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.77(s,1h),10.35(s,1h),7.96(d,j＝8.4hz,1h),7.67–7.63(m,2h),7.38(d,j＝8.4hz,2h),7.25(s,3h),4.06(s,2h),2.80–2.75(m,2h),2.20(s,6h),1.39–1.35(m,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ176.94,174.94,174.71,160.97,160.55,156.54,155.57,144.35,140.42,135.00,133.39,131.49,126.59,124.94,123.83,106.94,40.52,32.75,20.86.c24h23f3n4nao3s[m+na]+：527.1341,found:527.1343.
应用实例
体外抗肿瘤活性测试：以mtt法采用四种细胞系，分别为mgc-803(人胃癌细胞)、pc-3(人前列腺癌细胞)、sw620(人结肠癌细胞)、a549(人肺癌细胞)。
收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100μl，铺板调整待测细胞密度，(边缘孔用pbs填充)。体积百分比5％co2下37℃孵育24h，至细胞单层铺满孔底(96孔板)，加入浓度梯度本发明合成的药物，一般设9个浓度，每孔200μl，设3个复孔。体积百分比5％co2下37℃孵育72h，倒置显微镜下观察，每孔加入20μlmtt溶液(5mg/ml，即0.5％mtt)，继续培养4h。终止培养，小心吸去孔内培养液，每孔加入150μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪od490nm处测量各孔的吸光值。用spss软件对实验结果进行统计并计算ic50(μmol/l)值，结果如下：
表1体外抗肿瘤活性测试表