本发明属于植物成分提取
技术领域：
，尤其涉及一种原花青素含量高的葡萄籽提取物提取方法。
背景技术：
：原花青素，简称pc，是植物中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称，其低聚物：低聚原花青素(opc)是目前国际上公认的清除人体内自由基有效的天然抗氧化剂。一般为葡萄籽提取物或法国海岸松树皮提取物。原花青素(葡萄籽提取物)是一种新型高效抗氧化剂，具有很强的体内活性。实验证明，低聚原花青素opc的抗自由基氧化能力是维生素e的50倍，维生素c的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。但是目前的葡萄籽提取方法中，提取效率低，提取剩余物中还有部分原花青素，造成一定的浪费。技术实现要素：基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种原花青素含量高的葡萄籽提取物提取方法，其先采用乙醇压榨，压榨后再通过超声波和微波的辅助进行浸提，最后通过将浸提液和葡萄油合并提纯，通过两次的提取，提高了提取效率，同时通过双源头的超声波处理，加强了第二次提取的提取能力，进一步提升提取效率，本发明提供的葡萄籽提取物提取方法具有提取效率高的优点。本发明通过以下详细技术方案达到上述目的：一种原花青素含量高的葡萄籽提取物提取方法，其包括如下步骤：步骤s10：选取新鲜葡萄，通过人工或者硬毛刷除去葡萄皮和葡萄肉，保留葡萄籽，再采用风力和软毛刷清除葡萄籽表面残留物及其余杂质，采用风力去除杂质除的同时还能利用风力带走葡萄籽表面的水分，降低对后续步骤的影响；步骤s20：向步骤s10中获得的葡萄籽中加入乙醇至完全浸没葡萄籽，对葡萄籽进行研磨2-5min，再进行压榨并保存压榨出的葡萄油，将压榨后的葡萄籽取出并用蒸馏水冲洗过滤，将滤液和葡萄油合并，再储存在-20°环境中备用；步骤s30：将步骤s20中过滤完后的葡萄籽进行真空干燥，然后用粉碎机粉碎后过60目筛；步骤s40：按固液质量比1：15-25的比例称取过筛后的葡萄籽粉和石油醚，将葡萄籽粉和石油醚混合搅拌均匀后测定ph值，使用低浓度盐酸将混合物的ph值调节至弱酸环境，氮气环境浸提1-2h；步骤s50：步骤s40浸提过程中，进行200w、30min的超声波处理，再进行350w、5min的微波处理，剩余浸提时间为静置浸提，取浸提液，备用；步骤s60：将步骤s20中制得的葡萄油取出解冻至常温，将葡萄油和浸提液混合均匀，再通过ab-8树脂层析柱提纯，即得葡萄籽提取物。其中，所述的步骤s10中选取的新鲜葡萄的种类为玫瑰香或者维多利亚，玫瑰香或者维多利亚品种的葡萄梓中的原花青素含量相对较高。其中，所述的步骤s40中的固液质量比1：22，足够的提取液体能让葡萄籽中的原花青素析出到提取液中。其中，所述的步骤s40中的弱酸环境是ph值为4-6，弱酸性的环境有利于保持原花青素的稳定性。其中，所述的步骤s50中的超声波处理中采用两个超声波源，一个从顶部向下发射超声波，一个从底部向上发射超声波，两个超声波源的波形相差1/2∏，波形相差1/2∏能避免两个声源之间的超声波相互抵消影响，同时从两个方向提供超声波能达到相同的强度下具有更均匀的处理效果的目的。其中，所述的步骤s60还包括步骤s61，将层析液进行冷冻干燥，得到固态提取物。本发明具有的有益效果：1、对葡萄籽先后进行压榨提取和浸提提取，同时配合超声波和微波辅助浸提，具有更好的浸提效果，实现从相同重量的葡萄籽中获取更多的原花青素。2、采用超声波为主，微波为辅的处理，同时设置有双向的超声波源头，两个源头的超声波的波形相差1/2∏，能进一步提升提取能力，增加二次提取的原花青素得率。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述。实施例一：从葡萄籽提取葡萄籽提取物。一种原花青素含量高的葡萄籽提取物提取方法，其包括如下步骤：步骤s10：选取新鲜的玫瑰香品种葡萄，通过人工除去葡萄皮和葡萄肉，并保留葡萄籽，再采用软毛刷和清水结合清除葡萄籽表面残留物及其余杂质，最后采用风机对葡萄籽进行风干并吹走其他杂质；步骤s20：向步骤s10中获得的葡萄籽中加入无水乙醇至完全浸没葡萄籽，对葡萄籽进行研磨4min，研磨后将葡萄籽连同研磨产生的液体倒入榨油机中进行压榨并保存压榨出的葡萄油，即榨油机中压榨出的液体，将压榨后的葡萄籽取出并用蒸馏水冲洗过滤，将滤液和葡萄油合并，再储存在-20°环境中备用；步骤s30：将步骤s20中过滤完后的葡萄籽进行真空干燥，然后用粉碎机粉碎后过60目筛；步骤s40：按固液质量比1：22的比例称取过筛后的葡萄籽粉和石油醚，将葡萄籽粉和石油醚混合搅拌均匀后测定ph值，使用低浓度盐酸将混合物的ph值调节至ph值为5.2，氮气环境浸提1-2h；步骤s50：步骤s40浸提过程中，进行200w、30min的超声波处理，再进行350w、5min的微波处理，剩余浸提时间为静置浸提，取浸提液，备用；步骤s60：将步骤s20中制得的葡萄油取出解冻至常温，将葡萄油和浸提液混合均匀，再通过ab-8树脂层析柱提纯，即得葡萄籽提取物；步骤s61，将层析液进行冷冻干燥，得到固态提取物。作为优选实施例，所述的步骤s50中的超声波处理中采用两个超声波源，一个从顶部向下发射超声波，一个从底部向上发射超声波，两个超声波源的波形相差1/2∏。实施例二：提取方法的提取效率测试。将实施例一中的葡萄籽提取物(步骤s60中得到的提取液)作为实验组1，再按表1的条件制作对照组和其他实验组，再检测各组获得的葡萄籽提取物的原花青素含量。表1，各对照组和实验组的处理参数差异表。实验组1实验组2实验组3对照组4对照组5超声波辅助处理++---微波辅助处理+----压榨处理+++-+浸提处理++++-原花青素含量检测方法：准确称取一定质量的原花青素标准品，用石油醚溶解并定容于100ml容量瓶中，配制质量浓度分别为1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5mg/ml的原花青素标准溶液。利用香草醛一盐酸法测定其吸光度，绘制标准曲线，得到标准曲线方程：y＝0.4782x-0.032，r＝0.097。葡萄籽中原花青素得率＝vcn/(1000*w)*100％，式中：v为步骤s60中得到的提取液体积，单位ml；c为稀释后提取液中原花青素质量浓度，单位mg/ml；n为提取液稀释倍数；w为葡萄籽粉质量，单位g，测定结果如表2。表2，原花青素测定结果表实验组1实验组2实验组3对照组4对照组5获得率(％)8.236.185.324.214.81从表2中看出，浸提处理和压榨处理均具有一定的提取效率，但简单的将浸提处理和压榨处理同时使用，对原花青素的提取效率的提升影响不大，结合超声波和微波处理能显著提升提取效率。以上所述实施例仅表达了本发明的一种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。当前第1页12