一种蛋氨酸亚砜还原酶及其编码基因、制备方法和用途与流程

文档序号:21647401发布日期:2020-07-29 03:01阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种蛋氨酸亚砜还原酶,其特征在于,所述蛋氨酸亚砜还原酶选自如下(a1)-(a3)中的任一种:

(a1)其氨基酸序列如seqidno.1所示;

(a2)为与seqidno.1所示的氨基酸序列具有至少85%同源性的氨基酸序列;

(a3)具有(a)或(b)所示的氨基酸序列的不丧失生物活性的同系物、衍生物、片段或突变体。

2.一种蛋氨酸亚砜还原酶基因,其特征在于,所述蛋氨酸亚砜还原酶基因编码如权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶。

3.根据权利要求2所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因,其特征在于,所述蛋氨酸亚砜还原酶基因选自如下(b1)-(b2)所示的任一种:

(b1)其cdna序列如seqidno.2所示;

(b2)为与seqidno.2所示的核苷酸序列具有至少85%同源性的核苷酸序列。

4.包含权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的重组表达载体、重组细胞系或重组菌株。

5.一种药物,其特征在于,所述药物包含权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶,或权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因。

6.权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶、权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因,或者权利要求4所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的重组表达载体、重组细胞系或重组菌株在如下(c1)-(c3)中至少一种的用途:

(c1)还原蛋氨酸亚砜,或制备用于还原蛋氨酸亚砜的产品;

(c2)作为抗氧化剂,或制备用于抗氧化的产品;

(c3)制备治疗msrs相关疾病的药物。

7.一种如权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶的制备方法,其特征在于,包括:

s1,构建表达如权利要求1所述蛋氨酸亚砜还原酶的重组表达载体;

s2,以所述重组表达载体转化目标菌株,获得重组菌株;

s3,对所述重组菌株进行发酵培养,诱导蛋白表达;

s4,分离纯化所述重组菌株表达的蛋白,获得蛋氨酸亚砜还原酶。

8.一种制备权利要求3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的cdna序列的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)提取雨生红球藻的总rna并逆转录为cdna;

(2)以雨生红球藻的cdna为模板进行扩增,获得蛋氨酸亚砜还原酶基因的cdna片段;

(3)对所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cdna片段进行5’-race扩增和3’-race扩增,获得5’-race扩增片段和3’-race扩增片段;

(4)将所述5’-race扩增片段和所述3’-race扩增片段测序后,进行序列拼接,获得所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cdna序列;

优选地,所述蛋氨酸亚砜还原酶基因的cdna片段的扩增引物包括:hpmsra-f,其核苷酸序列如seqidno.3所示;hpmsra-r,其核苷酸序列如seqidno.4所示;

优选地,所述5’-race扩增片段的扩增引物包括:gsp5-1,其核苷酸序列如seqidno.5所示;gsp5-2,其核苷酸序列如seqidno.6所示;gsp5-3,其核苷酸序列如seqidno.7所示;

优选的,所述3’-race扩增片段的扩增引物包括:gsp3-1,其核苷酸序列如seqidno.8所示;gsp3-2,其核苷酸序列如seqidno.9所示;gsp3-3,其核苷酸序列如seqidno.10所示。

9.一种蛋氨酸亚砜还原酶的检测引物,其特征在于,所述检测引物基于权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因设计;

优选的,所述检测引物包括:hpmsra-qf,其核苷酸序列如seqidno.11所示;hpmsra-qr,其核苷酸序列如seqidno.12所示。

10.一种用于检测权利要求1所述的蛋氨酸亚砜还原酶,或权利要求2或3所述的蛋氨酸亚砜还原酶基因的探针、芯片或试剂盒。


技术总结
本发明公开了一种蛋氨酸亚砜还原酶,选自如下(a1)‑(a3)中的任一种:(a1)其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;(a2)为与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少85%同源性的氨基酸序列;(a3)具有(a)或(b)所示的氨基酸序列的不丧失生物活性的同系物、衍生物、片段或突变体。本发明首次提供了雨生红球藻的蛋氨酸亚砜还原酶的序列,为硒蛋白MsrA的基因工程表达奠定基础,有利于实现具有高催化活性的蛋氨酸亚砜还原酶的大规模工业生产。本发明还公开了编码上述蛋氨酸亚砜还原酶的基因,重组表达载体、重组细胞系或重组菌株,有利于实现MsrA的体外基因工程表达,降低了MsrA的获得成本。

技术研发人员:郑怡鸿;胡章立;陶明;李泽;黄观钦;薛登峰
受保护的技术使用者:深圳大学
技术研发日:2020.03.04
技术公布日:2020.07.28
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1