1.一种小麦千粒重和粒长基因tags3-4a的分子标记,其特征在于,该分子标记是小麦增加千粒重和粒长优异单倍型的分子标记,由分子标记caps-4a-357/713和分子标记indel-4a-351一对成套的分子标记组成;
所述分子标记caps-4a-357/713,其上游引物caps-4a-357/713-f如seqidno:2所示、下游引物caps-4a-357/713-r如seqidno:3所示,以分子标记caps-4a-357/713的上下游引物对小麦基因组dna进行pcr扩增,将扩增产物分别用hpy188i和bsri酶切,酶切产物分别进行电泳检测,扩增产物在hpy188i酶切后获得分子量大小分别为537bp和265bp的两条目的条带或540bp和265bp的两条目的条带;且扩增产物在bsri酶切后获得分子量大小分别为181bp和621bp的两条目的条带或184bp和621bp的两条目的条带;
所述分子标记indel-4a-351,其上游引物indel-4a-351-f如seqidno:4所示、下游引物indel-4a-351-r如seqidno:5所示,以分子标记indel-4a-351的上下游引物对小麦基因组dna进行pcr扩增,将扩增产物电泳分离,获得扩增产物的分子量大小为198bp、200bp或201bp的一条目的条带。
2.根据权利要求1所述的小麦千粒重和粒长基因tags3-4a的分子标记,其特征在于,所述分子标记caps-4a-357/713和所述分子标记indel-4a-351中pcr扩增的体系均为20µl,分别包括2×taqpcrmastermix10µl、上下游引物各1µl、dna模板1µl、其余用ddh2o补足。
3.根据权利要求1所述的小麦千粒重和粒长基因tags3-4a的分子标记,其特征在于,所述分子标记caps-4a-357/713的pcr扩增的程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸1min,33个循环;72℃终延伸10min,4℃保存。
4.根据权利要求1所述的小麦千粒重和粒长基因tags3-4a的分子标记,其特征在于,所述分子标记indel-4a-351的pcr扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,33个循环;72℃终延伸10min,4℃保存。
5.一种权利要求1-4所述的分子标记在分子辅助育种中的应用。
6.根据权利要求5所述的分子标记在分子辅助育种中的应用,其特征在于,利用所述分子标记鉴定基因tags3-4a是否为增加千粒重和粒长优异单倍型的小麦品种或品系,其方法包括以下步骤:
(1)提取待鉴定小麦样品的基因组dna;
(2)以分子标记caps-4a-357/713的上、下游引物对小麦基因组dna进行pcr扩增,将扩增产物用hpy188i酶切,电泳检测,获得分子量大小分别为537bp和265bp的两条目的条带或540bp和265bp的两条目的条带,或获得分子量大小为802bp、804bp或808bp的一条目的条带;将扩增产物用bsri酶切,电泳检测,获得分子量大小为181bp和621bp的两条目的条带或184bp和621bp的两条目的条带或187bp和621bp的两条目的条带,或获得分子量大小为804bp的一条目的条带;
(3)以分子标记indel-4a-351的上、下游引物对小麦基因组dna进行pcr扩增,将扩增产物电泳分离,获得扩增产物的分子量大小为198bp、200bp、201bp或204bp的任意一条目的条带;
(4)在扩增结果中,若待测样品采用分子标记caps-4a-357/713检测,用hpy188i酶切检测后获得分子量大小为537bp和265bp的两条目的条带或540bp和265bp的两条目的条带,且用bsri酶切检测后获得分子量大小为181bp和621bp的两条目的条带或184bp和621bp的两条目的条带,以及采用分子标记indel-4a-351检测后获得扩增产物的分子量大小为198bp、200bp或201bp的一条目的条带,则该样品为基因tags3-4a增加千粒重和粒长优异单倍型的小麦品种或品系。
7.根据权利要求6所述的分子标记在分子辅助育种中的应用,其特征在于,步骤(2)所述分子标记caps-4a-357/713的上游引物caps-4a-357/713-f如seqidno:2所示、下游引物caps-4a-357/713-r如seqidno:3所示。
8.根据权利要求6或7所述的分子标记在分子辅助育种中的应用,其特征在于,步骤(3)中所述分子标记indel-4a-351的上游引物indel-4a-351-f如seqidno:4所示、下游引物indel-4a-351-r如seqidno:5所示。
9.根据权利要求8所述的分子标记在分子辅助育种中的应用,其特征在于,步骤(2)和(3)中所述分子标记caps-4a-357/713和所述分子标记indel-4a-351中pcr扩增的体系均为20µl,分别包括2×taqpcrmastermix10µl、上下游引物各1µl、dna模板1µl、其余用ddh2o补足。
10.根据权利要求8所述的分子标记在分子辅助育种中的应用,其特征在于,步骤(2)中分子标记caps-4a-357/713的pcr扩增的程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸1min,33个循环;72℃终延伸10min,4℃保存;步骤(3)中分子标记indel-4a-351的pcr扩增的程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,33个循环;72℃终延伸10min,4℃保存。