1.一种微生物土壤修复剂的制备方法,其特征在于:包括如下工艺步骤:
(1)选取由重金属污染的土壤中分离出的高耐镉菌株qn-3,经扩大培养制成种子液;
(2)在无菌条件下,将种子液按10%的接种量接种于液体发酵培养基中,在28-32℃进行液体种子扩大发酵培养3-5天制成液体菌液;
(3)称取0.05%-0.3%w/v的吐温-20、0.1%-0.5%w/v的黄原胶、1%-5%w/v的甘油、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和硫酸镁,混合均匀后再加入无菌水定容,制得保护剂;
(4)在高耐镉菌株qn-3的液体菌液中按照液体菌液:保护剂的体积比=0.5-1:1的比例加入保护剂,混匀后制成微生物土壤修复剂,所述微生物土壤修复剂中高耐镉菌株qn-3有效活菌含量不低于2亿个/毫升。
2.根据权利要求1所述的一种微生物土壤修复剂的制备方法,其特征在于:所述高耐镉菌株qn-3的筛选方法为:选取多种重金属污染土壤样品制成土壤悬液,取其上清液均匀涂布到含100mg/l氯化镉的固体pda培养基,分别挑取单个菌落,采用平板划线分离法将菌落分别种到镉浓度为100、150、200mg/l的固体培养基,然后从中筛选出耐镉性较强的高耐镉菌株,对其单菌落连续4次采用平板划线分离法进行纯化,将纯化所得菌株依次接种到含镉浓度分别为250-24000mg/l的系列浓度梯度的同种筛选培养基上,室温下进行培养,挑选出抗高浓度镉的菌株,得到高耐镉菌株qn-3。。
3.根据权利要求1或2所述的一种微生物土壤修复剂的制备方法,其特征在于:所述高耐镉菌株qn-3于2018年05月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),菌种保藏号为gdmccno:60378。
4.根据权利要求1所述的一种微生物土壤修复剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中液体培养基为:蛋白胨27-33g,酵母粉9-11g,葡萄糖27-33g,吐温-800.9-1.1ml,柠檬酸三铵1.8-2.2g,七水硫酸镁0.6-0.8g,一水硫酸锰0.045-0.055g,碳酸钙9.0-11.0g;ph调至6.9-7.3。
5.根据权利要求1所述的一种微生物土壤修复剂的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中保护剂各组分的重量份数为:吐温-20200-240份、黄原胶1-8份、甘油4-10份、磷酸氢二钠0.2-0.8份和磷酸二氢钾和硫酸镁0.1-0.5份,余量为无菌水。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种微生物土壤修复剂制备方法及其应用,其特征在于:所述微生物土壤修复剂应用包括以下应用方法:
a.用旋耕机翻耕镉污染土壤表层厚10-18cm的土壤,保持土壤透气性;
b.加水灌溉保持土壤水分在60%—80%,选择环境温度在10-30℃,做好遮阳措施,将微生物土壤修复剂与水按1:100的质量比进行稀释,将稀释后的微生物土壤修复剂按30-60l/亩的用量均匀喷施到土壤中;
c.放置30天后,重复步骤b的操作进行二次喷药,微生物土壤修复剂的用量和用法均与步骤b相同,再放置30天。
7.根据权利要求6所述的一种微生物土壤修复剂制备方法及其应用,其特征在于:在进行所述步骤a的翻耕之前,先采用网格多点法进行土壤样品采集,然后对所采集的土壤样品的镉含量进行测定。