一类苯并咪唑类衍生物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及磷酸二酯酶10型(pde10)抑制剂技术领域，更具体地，涉及一类具有pde10抑制活性的新型苯并咪唑类化合物或其药学上可接受的盐，以及其在pde10的相关疾病(例如，肺动脉高压，精神分裂症)和荧光探针方面的应用。

背景技术：

环磷酸腺苷(camp)和环磷酸鸟苷(cgmp)是细胞内参与调节物质代谢和生物学功能的重要物质，是生命信息传递的“第二信使”。第二信使在细胞内普遍存在且广泛地参与调节细胞内的各种功能，如细胞增殖、分化、迁移和凋亡等。磷酸二酯酶(pdes)具有水解camp和cgmp的功能，通过降解细胞内的camp或cgmp，调节其在细胞内的含量和存在时间，从而维持其在细胞内的平衡。这决定了pde存在的广泛性和功能的重要性。

pde10主要分布于大脑纹状体的中型多棘神经元(msns)，可以降解多巴胺信号传导所触发的细胞内第二信使，是治疗精神分裂症和亨廷顿症等疾病的潜在靶点，目前已有多个药物正处于临床ii期研究。然而pde10在大多数外周组织缺乏，主要分布在睾丸、附睾和肠神经节。但是近年来，pde10被发现在pah患者标本中含量升高，表明其在一定程度上参与了肺动脉高压的发病过程。与此同时，近期已有文章报道pde10对pah的具体疗效。肺动脉高压(pah)是一类常见的恶性心血管疾病，病理状态下表现为肺动脉压力过高，临床症状包括呼吸困难、乏力、晕厥、心绞痛、咯血等。pah病因复杂，左心疾病、缺氧、肺部疾病、慢性血栓栓塞均有可能导致发病，并且该病多发于结缔组织病者、待发性肺动脉高压家族史者。pah由于早期临床症状不典型，预后差、病死率高等原因，被认为是心血管疾病中的癌症。目前病理学研究认为主要有三条细胞信号通路涉及了pah的形成和发展，分别为no/sgc/cgmp信号通路，pgi2/camp信号通路和et-1信号通路。

精神分裂症(scz)是一组病因未明的重性精神病，临床上表现为症状各异的综合征，涉及感知觉、思维、情感和行为等多方面的障碍以及精神活动的不协调。精神分裂症发病机制未知，且有10％-30％的精神分裂症患者治疗无效。而近年来越来越多的证据表明磷酸二酯酶(pde)在精神疾病中扮演重要角色。精神分裂症与细胞内环磷酸腺苷(camp)和环磷酸鸟苷(cgmp)水平过低有密切的联系，所以抑制camp和cgmp的水解使之达到正常水平可能达到治疗精神分裂的效果。

荧光探针是在紫外-可见-近红外有特征荧光，并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏的改变的一类分子。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中苯并咪唑类化合物的应用不足，提供一类能用于治疗磷酸二酯酶10(pde10)相关疾病以及具有荧光探针作用的苯并咪唑类化合物。

本发明的另一个目的是提供一类苯并咪唑类化合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供一类苯并咪唑类化合物制备治疗pde10相关疾病的药物的应用。

本发明的还一目的在于提供一类苯并咪唑类化合物作为荧光探针的应用。

本发明的上述目的是通过以下方案予以实现的：

一类苯并咪唑类化合物，具有式(i)所示的结构或其药学上可接受的盐：

其中，r¹、r²、r³和r⁴各自独立地为氢、卤素、羟基、氧、c1-3烷基、c1-3卤代烷基c1-3烷氧基或c1-3卤代烷氧基；

x和y各自独立地为c或n；

z选自c1-3取代或非取代烷基、c1-3取代或非取代烯烃、取代或非取代苯环、甲基硫基、甲基亚磺酰基；取代烷基、取代烯烃、取代苯中的取代基为卤素或c1-4烷基；

a选自取代或非取代c5～12单环或稠合芳香基团，其中c5～12单环或稠合芳香基团为-n-吡啶、a中的取代基为卤素、硝基、胺基、c1-4烷基、c1-4卤代烷基或c1-4烷氧基；

b选自氢、c1-4烷基、c1-4取代烷基、吡啶、苯环、取代苯环、苄基、取代苄基，吗啉、甲基吗啉基、噻唑、甲基噻唑基；其中c1-5取代烷基、取代苯环和取代苄基中的取代基为卤素、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、吗啉、c1-4烷基吗啉基、c1-4烷氧基吗啉基、n-哌嗪、c1-4烷基哌嗪哌嗪、c1-4烷氧基哌嗪基或磺酸哌嗪基。

优选地，所述a选自其中的r⁵为氢、卤素、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基或硝基。

优选地，r⁵为氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或硝基。

优选地，所述b选自氢、c1-4烷基、c1-4取代烷基、吡啶、苯基、苄基、取代苯基或取代苄基；

其中c1-4取代烷基中的取代基团为吗啉基或噻唑；

取代苯基或取代苄基中的取代基为卤素、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基、c1-4卤代烷氧基、其中n为1～3的整数；r⁶为c1-4烷基或c1-4卤代烷基。

优选地，所述b选自氢、苯基、n-吡啶、r⁶为甲基、亚丙基或环丙基。

优选地，所述的苯并咪唑类化合物选自下面任意一种化合物：

优选地，所述苯并咪唑类化合物药学上可接受的盐为式(i)化合物与酸反应得到的产物，所述酸包括但不限于盐酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水杨酸、三氟乙酸、三氟甲磺酸、萘磺酸、马来酸、富马酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸或谷氨酸。

本发明同时还保护所述苯并咪唑类化合物的制备方法，在碱和缩合剂的作用下，化合物m与化合物n溶于有机溶剂中，在20～30℃下搅拌过反应，然后去除溶剂，并萃取和分离，得到中间体产物，并与冰醋酸混合，在90～95℃下反应，即可得到式(i)化合物；其中化合物m和n的结构式如下所示：

所述苯并咪唑类化合物在制备治疗和/或预防由磷酸二酯酶10型相关疾病药物中的应用也在本发明的保护范围之内。

所述苯并咪唑类化合物在制备磷酸二酯酶10抑制剂中的应用也在本发明的保护范围之内。

优选地，所述磷酸二酯酶10型相关疾病为肺动脉高压、肺纤维化或精神分裂症。

优选地，所述药物可以按照常规工艺加入常规辅料制成临床接受的剂型。

更优选地，所述药物的剂型为口服型片剂、丸剂、胶囊、注射用注射液、粉针、经皮或皮下吸收的剂型。

所述苯并咪唑类化合物作为荧光探针的应用也在本发明的保护范围之内。

优选地，所述苯并咪唑类化合物作为荧光探针在细胞成像、组织成像或活体成像中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明所述苯并咪唑类化合物或其药学上可接受的盐结构新颖，对于磷酸二酯酶10型均表现出优异的抑制作用，且可选择性地抑制磷酸二酯酶10型，而对其他的亚型磷酸二酯酶没有或具有极其微弱的抑制作用，即本发明所述化合物可以作为磷酸二酯酶10型抑制剂进行使用，制备成为药物，治疗和/或预防由磷酸二酯酶10型引发的相关疾病，例如肺动脉高压、肺纤维化、精神分裂症等疾病；

同时，本发明所述也苯并咪唑类化合物或其药学上可接受的盐可以作为荧光探针进行使用，例如在细胞成像、组织成像、活体成像等方面的应用。

附图说明

图1为小鼠肺动脉压力柱状图。

图2为小鼠肺病理切片he染色观察。

图3为使用化合物对不同细胞进行染色后，所拍摄的荧光成像照片。

图4为利用化合物与溶酶体染料lysotrackerred及细胞核染料hoechst33342共染，对不同pde10表达水平的细胞进行荧光成像分析的实验结果。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。

实施例1.化合物p1的合成

化合物3-(1-氧代异喹啉-2(1h)-基)丙酸(m1)的合成：

将异喹诺酮(16.3mmol)和丙烯酸甲酯(19.6mmol)溶于33ml甲醇中，加入甲醇钠(1.63mmol)，反应回流2.5h，随后再次加入丙烯酸甲酯(19.6mmol)，继续反应1.5h，向反应后的产物中加入1n盐酸(33ml)，回流1h，室温搅拌16h，过滤可得中间体m1。

化合物4-甲基-n¹-(吡啶-4-基)邻苯二胺(m2)的合成：

将4-甲基-2-硝基-苯胺(2.58mmol)和4-溴吡啶盐酸盐(5.16mmol)溶于甲苯(9.0ml)，随后加入叔丁醇钠(7.74mmol)、binap(0.1mmol)和pd2(dba)3(0.05mmol)，在氩气保护下100℃反应过夜.(ii)向反应i的产物中加入乙醇(10ml)，加入pd/c(10％)，在氢气条件下室温搅拌过夜可得中间体m2。

将m1(108mg,0.5mmol)和m2(100mg,0.5mmol)溶于二氯甲烷(5.0ml)中，室温反应过夜。反应结束后后处理得粗产物，再加入冰醋酸(2.0ml)在90℃下反应过夜，反应完毕后冷却至室温，分离纯化得产物p1，淡黄色固体。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(dd,j＝4.6,1.6hz,2h),8.30(d,j＝8.1hz,1h),7.63-7.59(m,2h),7.47(t,j＝8.4hz,2h),7.13(dd,j＝4.5,1.6hz,2h),7.08-7.02(m,3h),6.36(d,j＝7.4hz,1h),4.54(t,j＝6.6hz,2h),3.38(t,j＝6.6hz,2h),2.50(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ161.39,151.95,151.77,143.18,143.01,137.43,133.57,133.34,132.74,132.37,127.32,127.04,126.52,125.75,124.92,121.52,119.32,110.12,105.49,47.42,27.17,21.55.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc24h20n4o381.1710,found381.1700.

实施例2.化合物p2的合成

化合物3-(喹啉-8-基)丙酸(m3)的合成；

(i)将8-溴喹啉(35.4mmol)和丙烯酸甲酯(42.5mmol)加入无水dmf中(27ml)，随后加入三乙胺(35.4mmol)和(pph3)2pdcl2(3.54mmol)，氮气保护下120℃反应过夜；

(ii)将(i)的产物加入无水乙醇(0.2mmol/ml)中，加入pd/c(10％)，氢气条件下室温搅拌过夜；

(iii)将(ii)的产物加入无水乙醇(0.3mmol/ml)和6n氢氧化钠溶液(1.5mmol/ml)中，室温搅拌过夜可得中间体m3。

化合物4-甲基-n1-苯基邻苯二胺(m4)的合成；

(i)向圆底烧瓶中加入4-甲基-2-硝基-苯胺(20.2mmol)、溴苯(20.2mmol)、碳酸钾(20.2mmol)和碘化亚铜(2.02mmol)，随后在200℃下搅拌2h.(ii)向反应i的产物中加入乙醇(0.15mmol/ml)，加入pd/c(10％)，在氢气条件下室温搅拌过夜可得中间体m4。

将原料替换成m3和m4，按照实施例1的方法得到产物p2，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.81(dd,j＝4.1,1.8hz,1h),8.32(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),7.80(dd,j＝6.5,3.1hz,1h),7.54-7.40(m,7h),7.26(dd,j＝7.8,1.7hz,2h),7.00(d,j＝8.2hz,1h),6.93(d,j＝8.2hz,1h),3.62(t,j＝7.7hz,2h),3.20(d,j＝8.0hz,2h),2.42(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ154.76,150.03,146.50,143.18,139.37,136.86,135.86,134.58,131.40,130.22,129.41,128.95,128.46,127.36,127.15,126.72,124.12,121.74,118.97,109.83,30.15,28.73,21.62.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc25h21n3364.1808,found364.1805.

实施例3.化合物p3的合成

化合物(e)-3-(喹啉-8-基)丙烯酸(m5)的合成；

(i)参照中间体m3的合成步骤，省去还原的步骤(ii)。

将原料替换成m4和m5，按照实施例1方法得到化合物p3，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.18(d,j＝16.6hz,1h),8.98(d,j＝4.1hz,1h),8.50(d,j＝8.3hz,1h),8.15(dd,j＝7.6,2.8hz,2h),7.80(s,5h),7.74(s,1h),7.71-7.67(m,2h),7.55(d,j＝16.6hz,1h),7.40(d,j＝8.2hz,1h),7.32(d,j＝8.4hz,1h),2.56(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ151.18,145.64,137.67,132.81,132.11,132.01,131.83,131.33,130.96,130.54,128.77,128.28,128.10,127.22,122.76,114.08,112.62,111.62,21.64.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc25h19n3362.1652,found362.1641.

实施例4.化合物p4的合成

化合物邻苯二胺(m6)的来源于商业；

将原料替换成m5和m6，按照实施例1方法得到化合物p4，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.17(d,j＝16.8hz,1h),9.09(dd,j＝4.2,1.7hz,1h),8.53(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),8.31(d,j＝7.2hz,1h),8.18(d,j＝8.2hz,1h),7.91(d,j＝16.8hz,1h),7.84(d,j＝3.1hz,1h),7.82(t,j＝2.9hz,1h),7.80-7.78(m,1h),7.71(dd,j＝8.3,4.2hz,1h),7.57(dd,j＝6.1,3.1hz,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ151.22,148.63,145.57,139.51,137.73,131.92,131.89,131.77,129.84,128.82,127.29,126.58,122.79,114.24,112.50.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc18h13n3272.1182,found272.1180.

实施例5.化合物p5的合成

化合物n¹-苯基-邻苯二胺(m7)的合成；参照m4的合成；

将原料替换成m5和m7，按实施例1方法得到化合物p5，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.09(d,j＝16.2hz,1h),8.99(d,j＝2.5hz,1h),8.42(d,j＝8.3hz,1h),8.04(d,j＝7.2hz,1h),8.00(d,j＝8.0hz,1h),7.79(d,j＝8.0hz,1h),7.75-7.71(m,2h),7.64(dt,j＝14.7,7.3hz,5h),7.34(dd,j＝15.5,6.1hz,2h),7.27-7.23(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ151.16,150.74,145.66,143.36,137.11,136.67,135.48,133.65,133.05,130.65,129.68,129.50,128.69,127.94,127.30,127.05,123.60,123.43,122.36,119.52,116.35,110.69.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc24h17n3348.1495,found348.1486.

实施例6.化合物p6的合成

化合物4-氟-n¹-苯基-邻苯二胺(m8)的合成；参照m4的合成；

将原料替换成m5和m8，按实施例1方法得到化合物p6，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.07(d,j＝16.2hz,1h),8.93(dd,j＝4.1,1.8hz,1h),8.16(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),7.88(d,j＝6.8hz,1h),7.79(d,j＝8.1hz,1h),7.69-7.63(m,2h),7.60(dd,j＝8.0,2.1hz,1h),7.58-7.55(m,1h),7.53(dd,j＝7.3,5.8hz,3h),7.48-7.41(m,2h),7.14(dd,j＝8.8,4.7hz,1h),7.00(td,j＝9.1,2.4hz,1h).¹³cnmr(126mhz,cdcl3)δ160.92,159.03,152.84,149.94,146.27,143.89,143.78,136.16,135.62,134.67,134.48,133.21,129.96,128.97,128.83,128.50,127.65,127.60,126.26,121.44,116.77,111.33,111.12,110.47,110.39,105.28,105.09.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc24h16n3f366.1401,found366.1391.

实施例7.化合物p7的合成

化合物3-甲基-n¹-苯基邻苯二胺(m9)的合成；

(i)将3-甲基-2硝基-苯胺(6.0mmol)溶于甲苯(12ml)，随后加入溴苯(6.0mmol)、碳酸铯(12.0mmol)、binap(0.9mmol)和pd2(dba)3(0.6mmol)，在氮气保护下，110℃搅拌过夜，待反应完全后，降至室温，加入乙酸乙酯和生理盐水进行萃取，随后过柱(pe/ea，5：1)可得m9。

将原料替换成m5和m9，按实施例1方法得到化合物p7，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.05(d,j＝16.3hz,1h),8.99(dd,j＝4.2,1.8hz,1h),8.41(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),8.02(d,j＝6.9hz,1h),7.98(d,j＝8.2hz,1h),7.72(dd,j＝10.1,4.7hz,2h),7.65(m,1h),7.63(d,j＝4.2hz,1h),7.63-7.59(m,2h),7.59(d,j＝2.0hz,1h),7.31(d,j＝16.2hz,1h),7.16-7.12(m,2h),7.02-7.00(m,1h),2.68(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ150.69,150.27,145.62,142.66,137.13,136.30,135.69,133.78,132.48,130.62,129.59,129.45,129.19,128.70,127.95,127.07,123.56,122.37,116.54,108.20,17.19.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc25h19n3362.1652,found362.1642.

实施例8.化合物p8的合成

化合物5-甲基-n¹-苯基邻苯二胺(m10)的合成；参照m9的合成；

将原料替换成m5和m10，按实施例1方法得到化合物p8，白色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.02(d,j＝16.3hz,1h),8.95(dd,j＝4.1,1.8hz,1h),8.39(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),7.96(d,j＝7.2hz,1h),7.89(d,j＝7.3hz,1h),7.71-7.55(m,8h),7.19-7.17(m,1h),7.05(d,j＝16.2hz,1h),6.97(d,j＝7.2hz,1h),1.89(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ151.74,150.68,137.08,133.67,132.55,130.15,129.88,129.85,129.58,128.68,127.04,126.99,125.48,123.06,122.36,121.80,117.57,116.28,18.10.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc25h19n3362.1652,found362.1652.

实施例9.化合物p9的合成

化合物6-甲基-n¹-苯基邻苯二胺(m11)的合成；参照m9的合成；

将原料替换成m5和m11，按实施例1方法得到化合物p9，白色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.03(d,j＝16.3hz,1h),8.96(dd,j＝4.1,1.8hz,1h),8.39(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),7.97(dd,j＝10.7,7.8hz,2h),7.71(t,j＝7.4hz,2h),7.64(m,2h),7.60(m,2h),7.58(dd,j＝4.4,3.3hz,2h),7.29(d,j＝16.2hz,1h),7.13(dd,j＝8.2,1.1hz,1h),6.99(s,1h),2.39(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ150.69,145.64,141.50,137.07,136.89,135.59,133.77,133.18,132.47,130.62,129.52,129.41,128.67,127.97,127.11,127.03,124.98,122.32,119.14,116.45,110.37,21.83.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc25h19n3362.1652,found362.1657.

实施例10.化合物p10的合成

化合物4-甲基-n1-(3-甲氧基苯基)邻苯二胺(m12)的合成；参照m9的合成；

将原料替换成m5和m12，按实施例1方法得到化合物p10，灰白色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.05(d,j＝16.3hz,1h),8.98(dd,j＝4.1,1.8hz,1h),8.41(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),8.04(d,j＝7.1hz,1h),7.98(d,j＝8.1hz,1h),7.62(dt,j＝11.2,5.0hz,3h),7.56(s,1h),7.36(d,j＝16.2hz,1h),7.18(m,4h),7.08(dd,j＝8.2,1.1hz,1h),3.85(s,3h),2.46(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ160.82,150.99,150.69,145.67,143.71,137.10,136.76,134.82,133.77,132.62,132.53,131.35,129.56,128.70,127.24,127.08,125.01,122.35,119.90,119.14,116.58,115.29,113.32,110.39,56.06,21.72.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc26h21n3o392.1757,found392.1750.

实施例11.化合物p11的合成

化合物4-甲基-n¹-(3((4-甲基哌嗪1-基)磺酸基)苯基)邻苯二胺(m13)的合成；

(i)将3-溴苯甲酰氯(13.9mmol)加入二氯甲烷(28ml)中，随后在冰浴下加入n-甲基哌嗪(27.8mmol)，室温反应3h.(ii)参照m9的合成；

将原料替换成m5和m13，按实施例1方法得到化合物p11，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.98(m,2h),8.41(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),8.08(d,j＝7.2hz,1h),8.01(m,4h),7.88(s,1h),7.60(m,3h),7.37(d,j＝16.2hz,1h),7.13(m,2h),2.98(s,4h),2.47(s,3h),2.27(s,4h),2.11(s,3h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ151.14,150.80,145.65,137.19,137.10,136.62,134.68,133.61,133.13,132.90,132.66,132.03,129.69,128.70,128.29,127.34,126.94,126.74,125.30,122.35,119.35,116.49,110.02,53.88,46.26,45.70,21.70.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc30h29n5o2s524.2115,found524.2108.

实施例12.化合物p12的合成

化合物4-甲基-n1-(3((4-甲基哌嗪1-基)甲基)苯基)邻苯二胺(m14)合成；

(i)将3-溴苯甲醛(13.2mmol)加入二氯甲烷(132ml)，随后冰浴下加入n-甲基哌嗪(19.8mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(39.6mmol)，室温搅拌过夜.(ii)参照m9的合成；

将原料替换成m5和m14，按实施例1方法得到化合物p12，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.99(d,j＝16.2hz,1h),8.91(dd,j＝4.1,1.7hz,1h),8.15(dd,j＝8.3,1.7hz,1h),7.86(d,j＝7.2hz,1h),7.78(d,j＝7.3hz,1h),7.68(s,1h),7.57(t,j＝7.7hz,1h),7.51(t,j＝7.7hz,2h),7.45(dd,j＝11.1,6.8hz,3h),7.41(d,j＝8.0hz,1h),7.09(m,2h),3.66(s,2h),2.61(s,4h),2.53(s,3h),2.50(s,4h),2.29(s,3h).¹³cnmr(126mhz,cdcl3)δ151.20,149.87,146.21,143.60,140.26,136.20,136.14,134.82,134.61,133.73,132.84,129.71,129.07,128.61,128.50,127.80,127.34,126.32,126.10,124.60,121.45,119.38,117.38,109.62,61.88,54.52,51.93,45.11,21.67.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc31h31n5474.2652,found474.2634.

实施例13.化合物p13的合成

化合物4-甲基-n1-(3-(3-吗啉丙氧基)苯基)邻苯二胺(m15)的合成；

(i)将3-溴苯酚(25mmol)加入dmf(10ml)中，随后加入1，3-二溴丙烷(50mmol)、碳酸钾(37.5mmol)和dmf(25ml)，室温搅拌2h，70℃下继续搅拌2h.(ii)将(i)的产物溶于乙腈(1.6mmol/ml)，随后加入吗啉(2eq)和碳酸钾(2eq)，80℃下反应3h.(iii)参照m9的合成；

将原料替换成m5和m15，按实施例1方法得到化合物p13，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,meod)δ9.14(m,2h),8.89(d,j＝8.0hz,1h),8.34(s,1h),8.30(d,j＝7.6hz,1h),7.95(dd,j＝7.8,4.5hz,1h),7.88(s,1h),7.77(s,1h),7.73(t,j＝7.4hz,1h),7.44(m,6h),4.28(s,2h),4.06(d,j＝12.6hz,2h),3.86(t,j＝12.0hz,2h),3.57(d,j＝11.3hz,2h),3.43(s,2h),3.20(s,2h),2.62(s,3h),2.35(s,2h).¹³cnmr(126mhz,meod)δ160.13,147.51,147.40,144.30,138.83,138.41,133.05,132.53,131.87,131.69,131.43,130.84,129.46,128.71,128.65,122.34,119.69,117.57,113.63,113.24,112.99,112.34,65.46,63.67,54.66,52.00,23.38,20.35.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc32h32n4o2505.2598,found505.2591.

实施例14.化合物p14的合成

化合物4-甲基-n1-(3-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)苯基)邻苯二胺(m16)的合成；

(i)将3-溴苯酚(25mmol)加入dmf(10ml)中，随后加入1，3-二溴丙烷(50mmol)、碳酸钾(37.5mmol)和dmf(25ml)，室温搅拌2h，70℃下继续搅拌2h.(ii)将(i)的产物溶于乙腈(1.3mmol/ml)，加入n-甲基哌嗪(2eq)和碳酸钾(2eq)，80℃反应3h.(iii)参照m9的合成；

将原料替换成m5和m16，按照实施例1方法得到化合物p14，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,meod)δ9.12(d,j＝16.3hz,1h),8.99(d,j＝3.1hz,1h),8.47(d,j＝8.1hz,1h),8.17(d,j＝6.2hz,1h),8.11(d,j＝7.9hz,1h),7.68(m,5h),7.41(m,5h),4.29(s,2h),3.76(s,8h),3.54(s,2h),3.03(s,3h),2.61(s,3h),2.39(s,2h).¹³cnmr(126mhz,meod)δ160.12,149.96,148.24,144.68,140.72,138.50,138.11,133.23,131.81,131.61,131.41,131.02,130.93,130.19,128.87,128.31,126.78,122.02,119.72,117.49,113.62,113.08,112.20,110.47,65.27,23.67,20.35.hrms(esi-tof)m/z[m+h]⁺calcdforc33h35n5o518.2914,found518.2895.

实施例15.化合物p15合成

化合物4-(2-氧代吡啶-1-(2h)-基)苯甲酸(m17)的合成；

(i)将吡啶酮(1eq)与4-碘苯甲酸(0.8eq)溶于n,n-二甲基甲酰胺，加入碳酸钾(2eq)和碘化亚铜(0.1eq)，氩气保护下120℃反应过夜。

化合物4-甲基-n1-(2-吗啉乙基)邻苯二胺(m18)的合成；

(i)向圆底烧瓶中加入4-甲基-2-硝基苯胺(5.17mmol)、1，2-二溴乙烷(15.51mmol)、4-二甲氨基吡啶(2.5mmol)和n,n-二异丙基乙胺(20.68mmol)，130℃反应过夜。

将原料替换成m17和m18，按照实施例1方法得到化合物p15，白色固体。

实施例16.化合物p16的合成

将原料替换成m16和m17，按照实施例1方法得到化合物p16，黄色固体。

实施例17.化合物p17的合成

化合物4-(4-乙酰氨基-1，3-二氧代异吲哚-2-基)苯甲酸(m19)的合成；

(i)将n-(1，3-二氧代-1，3-二氢异苯并呋喃-4-基)乙酰胺(1eq)和4-氨基-苯甲酸(1eq)溶于醋酸(0.5mmol/ml)，在150℃下反应过夜。

将原料替换成m16和m19，按照实施例1方法得到化合物p17，淡黄色固体。

实施例18.化合物p18的合成

化合物3-甲基-4-(2-氧代吡啶-1-(2h)-基)苯甲酸(m20)的合成；

(i)将2-氧代吡啶(5.4mmol)和4-碘-3-甲基-苯甲酸甲酯(5.4mmol)溶于dmso(11ml)中，随后加入碳酸钾(16.2mmol)、碘化亚铜(5.4mmol)和1，10-菲罗啉(5.4mmol)，在氮气保护下140℃反应过夜。

将原料替换成m20和m18，按照实施例1方法得到化合物p18，灰白色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.26–8.14(m,1h),7.73(dd,j＝11.0,4.5hz,2h),7.67–7.62(m,2h),7.34(d,j＝8.2hz,1h),7.21(d,j＝8.3hz,1h),7.16(d,j＝8.2hz,1h),7.04(dd,j＝7.1,5.0hz,1h),6.95(d,j＝8.3hz,1h),4.41(t,j＝6.8hz,2h),3.66–3.58(m,4h),2.78(t,j＝6.8hz,2h),2.53(s,3h),2.43–2.37(m,4h),2.30(s,3h).

实施例19.化合物p19的合成

将原料替换成m20和m4，按照实施例1方法得到化合物p19，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.20(d,j＝4.7hz,1h),7.70(d,j＝8.9hz,3h),7.51(d,j＝14.3,7.1hz,3h),7.37(d,j＝7.6hz,2h),7.28(d,j＝4.0hz,1h),7.14–7.07(m,2h),7.03–6.98(m,1h),6.93(d,j＝8.5hz,1h),6.86(d,j＝8.3hz,1h),2.53(s,3h),2.17(s,3h).

实施例20.化合物p20的合成

化合物3-甲基-4-(4-乙酰氨基-1，3-二氧代异吲哚-2-基)苯甲酸(m21)的合成；

(i)将原料替换成n-(1，3-二氧代-1，3-二氢异苯并呋喃-4-基)乙酰胺和3-甲基-苯甲酸，参照m19的合成；

将原料替换成m21和m18，按照实施例1方法得到化合物p20，黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.60(s,1h),8.90(d,j＝8.2hz,1h),7.87(s,1h),7.79(t,j＝8.0hz,2h),7.65(d,j＝8.6hz,2h),7.41–7.33(m,2h),4.42(t,j＝6.4hz,2h),3.61(s,4h),2.78(t,j＝6.3hz,2h),2.53(s,3h),2.38(s,4h),2.33(s,3h),2.30(s,3h).

实施例21.化合物p21的合成

化合物3-甲基-4-(1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)苯甲酸(m22)的合成；

(i)将原料替换成7-氮杂吲哚(3mmol)和4-碘-3-甲基-苯甲酸甲酯(1mmol)，参照m20的合成；

将原料替换成m22和和m18，按照实施例1方法得到化合物p21，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.36(s,1h),8.03(d,j＝6.9hz,1h),7.89(s,1h),7.80(d,j＝7.7hz,1h),7.65(s,1h),7.55–7.49(m,1h),7.37(dd,j＝16.3,8.1hz,2h),7.18(d,j＝8.6hz,2h),6.69(d,1h),4.44(d,j＝6.1hz,2h),3.66(s,4h),2.83(d,j＝7.3hz,2h),2.54(s,3h),2.45(s,4h),2.24(s,3h).

实施例22.化合物p22的合成

化合物3-氟-4-(4-乙酰氨基-1，3-二氧代异吲哚-2-基)苯甲酸(m23)的合成；

(i)将原料替换成n-(1，3-二氧代-1，3-二氢异苯并呋喃-4-基)乙酰胺和3-氟-4-氨基-苯甲酸，按照m19的合成；

将原料替换成m23和m18，按照实施例1方法得到化合物p22，淡黄色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.58(s,1h),8.91(d,j＝8.4hz,1h),7.93(dt,j＝17.6,8.8hz,1h),7.86–7.75(m,2h),7.72–7.62(m,2h),7.58–7.50(m,1h),7.36(d,j＝8.2hz,1h),7.21(d,j＝8.3hz,1h),4.42(t,j＝6.3hz,2h),3.68–3.57(m,4h),2.82(dd,j＝8.5,4.0hz,2h),2.54(s,3h),2.43–2.38(m,4h),2.31(s,3h).

实施例23.化合物p23的合成

中间体4-甲基邻苯二胺(m24)的合成；

(i)将4-甲基-2-硝基-苯胺溶于乙醇中，加入pd/c(10％)，在氢气条件下搅拌过夜.

将原料替换成m23和m24，按照实施例1方法得到化合物p23，白色固体.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ11.78(s,1h),10.85(d,j＝15.1hz,1h),9.58(s,1h),8.89(d,j＝8.4hz,1h),8.51(s,1h),8.27(d,j＝10.2hz,1h),7.72(ddd,j＝31.0,17.7,7.4hz,3h),7.53(d,j＝7.0hz,1h),2.40(d,j＝17.8hz,3h),2.30(s,3h).

实施例24.化合物p24的合成

化合物3-溴甲基色原酮m25的合成；

(i)向圆底烧瓶中加入甲酰色酮(5.6mmol,974mg)和三氧化二铝al2o3(20g)，加入异丙醇(200ml)，置于75℃油浴，搅拌4h.反应完毕，将反应体系用硅藻土抽滤，得到滤液，将滤液旋干。过柱得到白色固体产物(808mg)；(ii)向圆底烧瓶中加入四溴化碳(592mg,1.7mmol)和(i)的产物(246mg,1.4mmol)，加入二氯甲烷，缓慢将三苯基膦(469mg,1.7mmol)的二氯甲烷溶液滴入到上述体系中，氩气保护，于室温下搅拌4小时。反应完毕后，旋干溶剂得到粗产物，然后过柱得到白色固体(294mg)。

将原料2-巯基-5-甲基苯并咪唑(656mg,4.0mmol)置于圆底烧瓶中，加入dmf(10ml),三乙胺(836μl,6.0mmol)和m25(1434mg,6.0mmol)。于80℃下搅拌反应过夜，反应完毕后，加入水稀释，然后用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，过柱得到p24,白色固体(978mg)。产率:76％；纯度:99.9％；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ12.41(d,j＝6.2hz,1h),8.54(d,j＝2.0hz,1h),8.10(dd,j＝8.0,1.5hz,1h),7.81(ddd,j＝8.6,7.2,1.6hz,1h),7.62(d,j＝8.5hz,1h),7.54–7.48(m,1h),7.46–7.36(m,1h),7.24–7.13(m,1h),6.95(d,j＝8.2hz,1h),4.29(s,2h),2.38(d,j＝2.0hz,3h)。

实施例25.化合物p25的合成

向圆底烧瓶中加入p24(322mg,1.0mmol)加入乙酸乙酯(5ml)。搅拌下加入oxone，然后置于室温搅拌24小时。反应完毕后，加入10ml的水淬灭。用乙酸乙酯萃取三次，干燥得到p25,白色固体.产率:58％；纯度:99.4％；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ13.38(s,1h),8.29(d,j＝11.9hz,1h),8.01(d,j＝7.9hz,1h),7.88–7.83(m,1h),7.69(d,j＝8.4hz,1h),7.60–7.49(m,2h),7.42–7.31(m,1h),7.13(dd,j＝18.5,8.2hz,1h),4.48(d,j＝12.7hz,1h),4.29(d,j＝12.8hz,1h),2.44(s,3h)。

实施例26.化合物p26的合成

化合物4-甲氧基邻苯二胺(m26)来自商业；

化合物3-(色原酮-3-基)丙酸(m27)的合成；

(i)向圆底烧瓶中加入原料，米氏酸(1.0mmol)和三乙胺甲酸(1:1)5ml，100℃回流2h，直到原料反应完全。将体系冷却至室温然后倒入冰水中，所得溶液用6nhcl调ph至3，析出浅黄色固体，抽滤，水洗，过柱得到纯的产物。产率:93％；

将原料替换成m26和m27，按照实施例1得到化合物p26.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.15(d,j＝8.0hz,1h),7.89(s,1h),7.62(t,j＝7.7hz,1h),7.40(dd,j＝13.9,8.5hz,2h),7.34(t,j＝7.5hz,1h),7.01(s,1h),6.83(d,j＝8.7hz,1h),3.81(s,3h),3.24(t,j＝7.2hz,2h),3.02(t,j＝7.2hz,2h)；

实施例.27化合物p27的合成

化合物m28的合成；参照m27；

¹hnmr(400mhz,meod)δ8.14(s,1h),8.06(d,j＝2.5hz,1h),7.72(dd,j＝9.0,2.6hz,1h),7.56(d,j＝9.0hz,1h),2.74(t,j＝7.2hz,2h),2.62(t,j＝7.2hz,2h).

将原料替换成m28和m24，按实施例1得到化合物p27.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(s,1h),7.93(s,1h),7.59–7.55(m,1h),7.43(d,j＝8.2hz,1h),7.36(d,j＝8.9hz,1h),7.32(s,1h),7.04(d,j＝8.2hz,1h),3.29(t,j＝7.1hz,2h),3.03(t,j＝7.0hz,2h),2.45(s,3h).

实施例28.化合物p28的合成

化合物4-三氟甲基邻苯二胺(m29)来自商业；

将原料替换成m29和m27，按照实施例1得到化合物p28.¹hnmr(400mhz,acetone-d6)δ8.14(d,j＝10.7hz,2h),7.90(s,1h),7.76(t,j＝7.8hz,2h),7.61(d,j＝7.5hz,1h),7.50(d,j＝8.5hz,1h),7.49–7.44(m,2h),3.28(t,j＝7.3hz,2h),3.04(t,j＝7.3hz,2h).

实施例29.化合物p29的合成

化合物n¹-苯基甲基-4-甲基-邻苯二胺(m30)的合成；

(i)将4-甲基-2-硝基-苯胺(2.58mmol)和4-溴吡啶盐酸盐(5.16mmol)溶于甲苯(9ml)，随后加入叔丁醇钠(7.74mmol)、binap(0.1mmol)和pd2(dba)3(0.05mmol)，在氩气保护下100℃反应过夜.(ii)向反应i的产物中加入sncl2·2h2o，加入乙酸乙酯回流两个小时。反应完毕，用饱和的碳酸氢钠水溶液淬灭，加入乙酸乙酯稀释，分离出有机层，水层用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用饱和食盐水洗涤，干燥浓缩得到产m30。

将原料替换成m30和m27，按照实施例1得到化合物p29.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.17(d,j＝7.8hz,1h),7.88(s,1h),7.63(t,j＝7.7hz,1h),7.55(s,1h),7.37(t,j＝8.1hz,2h),7.14(dd,j＝15.7,8.4hz,3h),7.09(d,j＝8.3hz,1h),7.00(dd,j＝13.2,7.8hz,3h),5.36(s,2h),3.18(t,j＝7.3hz,2h),3.03(t,j＝7.3hz,2h),2.47(s,3h).

实施例30.化合物p30的合成

化合物n¹-(4-氟苯基)甲基-4-甲基-邻苯二胺(m31)的合成；参照化合物m30的合成；

将原料替换成m31和m27，按照实施例1得到化合物p30.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.15(d,j＝8.0hz,1h),7.88(s,1h),7.63(t,j＝7.8hz,1h),7.55(s,1h),7.38(d,j＝7.9hz,2h),7.04(dd,j＝22.5,8.0hz,2h),6.97(d,j＝14.7hz,2h),6.80(t,j＝7.9hz,2h),5.33(s,2h),3.18(t,j＝7.2hz,2h),3.02(t,j＝7.1hz,2h),2.45(d,j＝20.6hz,3h).

实施例31.化合物p31的合成

化合物n¹-(3-氟苯基)甲基-4-甲基-邻苯二胺(m32)的合成；参照化合物m30的合成；

将原料替换成m32和m27，按照实施例1得到化合物p31.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(d,j＝7.9hz,1h),7.89(s,1h),7.64(t,j＝7.8hz,1h),7.56(s,1h),7.38(t,j＝8.1hz,2h),7.14–7.02(m,3h),6.79(dd,j＝16.6,8.0hz,2h),6.69(d,j＝9.4hz,1h),5.37(s,2h),3.18(t,j＝7.3hz,2h),3.02(t,j＝7.2hz,2h),2.48(s,3h).

实施例32.化合物p32的合成

将原料替换成m27和m4，按照实施例1得到化合物p32.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.12(dd,j＝8.0,1.5hz,1h),7.82(s,1h),7.64–7.60(m,1h),7.58(s,1h),7.44–7.33(m,5h),7.24–7.19(m,2h),7.01(t,j＝9.2hz,1h),6.97(d,j＝8.2hz,1h),3.14(t,j＝7.1hz,2h),3.02(t,j＝6.9hz,2h),2.49(s,3h).

实施例33.化合物p33的合成

将原料替换成m27和m2，按照实施例1得到化合物p33.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(d,j＝5.0hz,2h),8.13(d,j＝7.8hz,1h),7.86(s,1h),7.64(t,j＝7.5hz,1h),7.59(s,1h),7.38(t,j＝7.6hz,2h),7.26(s,2h),7.07(s,2h),3.21(t,j＝7.1hz,2h),3.05(t,j＝7.1hz,2h),2.50(s,3h).

实施例34.化合物p34的合成

化合物n¹-苯基-4-氯邻苯二胺(m33)的合成；参照m30的合成；

将原料替换成m27和m33，按照实施例1得到化合物p34.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.14(dd,j＝8.0,1.3hz,1h),7.86(s,1h),7.78(d,j＝1.7hz,1h),7.67–7.63(m,1h),7.49–7.45(m,3h),7.43–7.37(m,2h),7.24(dd,j＝6.5,2.9hz,2h),7.17(dd,j＝8.6,1.8hz,1h),7.01(d,j＝8.6hz,1h),3.15(t,j＝7.0hz,2h),3.04(t,j＝7.1hz,2h)；

实施例35.化合物p35的合成

化合物1-(6-氟-色原酮-3-基)丙酸(m34)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m34和m4，按照实施例1得到化合物p35.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.84(s,1h),7.74(dd,j＝8.3,2.6hz,1h),7.57(s,1h),7.44(d,j＝6.8hz,3h),7.41–7.33(m,2h),7.22(d,j＝7.4hz,2h),7.02(d,j＝8.2hz,1h),6.97(d,j＝8.2hz,1h),3.13(t,j＝7.0hz,2h),3.01(t,j＝7.0hz,2h),2.49(s,3h).

实施例36.化合物p36的合成

化合物1-(6-氯-色原酮-3-基)丙酸(m35)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m35和m4，按照实施例1得到化合物p36.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.06(d,j＝2.1hz,1h),7.83(s,1h),7.58–7.53(m,2h),7.43(d,j＝6.9hz,3h),7.33(d,j＝8.9hz,1h),7.22(d,j＝6.5hz,2h),7.01(d,j＝8.2hz,1h),6.97(d,j＝8.2hz,1h),3.12(t,j＝7.0hz,2h),3.01(t,j＝7.0hz,2h),2.48(s,3h).

实施例37.化合物p37的合成

化合物1-(6-溴-色原酮-3-基)丙酸(m36)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m36和m4，按照实施例1得到化合物p37.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.22(d,j＝2.3hz,1h),7.83(s,1h),7.70–7.67(m,1h),7.57(s,1h),7.47–7.41(m,3h),7.29–7.26(m,1h),7.22(dd,j＝7.5,1.6hz,2h),6.99(dd,j＝22.8,8.2hz,2h),3.12(t,j＝7.1hz,2h),3.00(t,j＝7.0hz,2h),2.48(s,3h).

实施例38.化合物p38的合成

化合物1-(6-碘-色原酮-3-基)丙酸(m37)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m37和m4，按照实施例1得到化合物p38.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.46–8.39(m,1h),7.90–7.79(m,2h),7.55(d,j＝17.1hz,1h),7.43(s,3h),7.29–7.24(m,1h),7.21(d,j＝3.1hz,2h),7.17–7.10(m,1h),7.04–6.95(m,2h),3.13(d,j＝3.6hz,2h),3.00(d,j＝3.5hz,2h),2.48(d,j＝3.5hz,3h).

实施例39.化合物p39的合成

化合物1-(6-甲氧基-色原酮-3-基)丙酸(m38)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m38和m4，按照实施例1得到化合物p39.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.81(s,1h),7.58(s,1h),7.48–7.39(m,4h),7.31(d,j＝9.1hz,1h),7.22(t,j＝8.0hz,3h),7.01(d,j＝8.2hz,1h),6.97(d,j＝8.2hz,1h),3.87(s,3h),3.13(t,j＝7.1hz,2h),3.02(t,j＝7.1hz,2h),2.49(s,3h).

实施例40.化合物p40的合成

化合物n¹-(噻唑-2-基)甲基-4-甲基邻苯二胺(m39)的合成；参照m30的合成；

将原料替换成m39和m27，按照实施例1得到化合物p40.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝0.9hz,1h),8.23(d,j＝8.3hz,1h),7.93(s,1h),7.84(s,1h),7.66(t,j＝7.8hz,1h),7.53(s,1h),7.42(dd,j＝11.9,4.0hz,2h),7.20(d,j＝7.6hz,1h),7.08(d,j＝8.2hz,1h),5.65(s,2h),3.25(t,j＝7.3hz,2h),3.01(t,j＝7.5hz,2h),2.48(s,3h).

实施例41.化合物p41的合成

化合物1-(6-甲基-色原酮-3-基)丙酸(m40)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m40和m4，按照实施例1得到化合物p41.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.92(s,1h),7.82(s,1h),7.60(s,1h),7.48–7.40(m,4h),7.25(ddd,j＝10.6,6.6,2.7hz,3h),7.00(q,j＝8.2hz,2h),3.14(t,j＝6.9hz,2h),3.03(t,j＝7.1hz,2h),2.50(s,3h),2.44(s,3h).

实施例42.化合物p42的合成

化合物1-(6-硝基-色原酮-3-基)丙酸(m41)的合成；参照m27的合成；

将原料替换成m41和m4，按照实施例1得到化合物p42.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.97(s,1h),8.43(dd,j＝9.0,2.2hz,1h),7.94(s,1h),7.57–7.43(m,5h),7.25(d,j＝6.3hz,2h),7.00(dd,j＝16.1,8.1hz,2h),3.14(t,j＝6.5hz,2h),3.04(d,j＝6.5hz,2h),2.47(s,3h).

实施例43.化合物p43的合成

将原料替换成羧酸和m33，按照实施例1得到化合物p43.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.07(s,1h),7.86(s,1h),7.75(s,1h),7.56(d,j＝8.9hz,1h),7.47(d,j＝5.0hz,3h),7.35(d,j＝8.9hz,1h),7.22(d,j＝6.9hz,2h),7.14(t,j＝9.7hz,1h),6.99(d,j＝8.5hz,1h),3.12(t,j＝7.0hz,2h),3.01(t,j＝7.0hz,2h).

实施例44.化合物p44的合成

将原料替换成羧酸和m4，按照实施例1得到化合物p44.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.24–8.13(m,2h),7.99(d,j＝15.7hz,1h),7.62(ddt,j＝22.0,14.8,7.5hz,6h),7.51–7.41(m,3h),7.13(d,j＝8.2hz,1h),7.07(d,j＝8.3hz,1h),2.52(s,3h).

实施例45.化合物p45的合成

将原料替换成羧酸和m33，按照实施例1得到化合物p45.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.14(t,j＝18.4hz,2h),7.98(t,j＝15.8hz,1h),7.76(d,j＝17.2hz,1h),7.63(d,j＝16.1hz,5h),7.45(d,j＝8.5hz,3h),7.21–7.07(m,2h).

实施例46.化合物p46的合成

化合物1-(色原酮3-基)-烯丙酸(m42)的合成；

(i)向圆底烧瓶中加入原料4-oxo-4h-chromene-3-carbaldehyde(174mg,1.0mmol)和丙二酸(208mg,2.0mmol)，加入吡啶(5ml)，然后回流搅拌45分钟.反应完毕，将体系冷却至室温，用浓盐酸调ph至1.0,继续搅拌30分钟.析出大量黄色固体，抽滤，用1mhcl(2×20ml)洗涤,干燥，用甲醇重结晶得到白色固体。

将原料替换成m42和m4，按照实施例1得到化合物p46.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.22(d,j＝7.9hz,1h),8.14(s,1h),8.00(d,j＝15.6hz,1h),7.69–7.60(m,5h),7.55(t,j＝7.3hz,1h),7.47(t,j＝7.3hz,3h),7.41(t,j＝7.6hz,1h),7.11(d,j＝8.3hz,1h),7.05(d,j＝8.2hz,1h),2.50(s,3h).

实施例47.化合物p47的合成

将原料替换成m42和m33，按照实施例1得到化合物p47.¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.22(d,j＝8.0hz,1h),8.15(s,1h),8.00(d,j＝15.6hz,1h),7.78(s,1h),7.70–7.63(m,4h),7.59(d,j＝7.2hz,1h),7.46(dd,j＝13.8,8.2hz,3h),7.41(t,j＝7.6hz,1h),7.18(d,j＝8.6hz,1h),7.12(d,j＝8.6hz,1h).

实施例48.化合物p48的合成

化合物1-(6-氟-色原酮-3-基)-烯丙酸(m43)的合成；参照m42的合成；

将原料替换成m43和m33，按照实施例1得到化合物p48.¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.92(s,1h),7.85(d,j＝15.5hz,2h),7.78–7.68(m,7h),7.58(d,j＝7.1hz,2h),7.25(d,j＝8.4hz,1h),7.18(d,j＝8.4hz,1h).

实施例49.化合物p49的合成

化合物m44的合成；参照m30的合成；

将原料替换成m44和m42，按照实施例1得到化合物p49.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.20(s,1h),8.12(d,j＝10.7hz,2h),7.99(d,j＝14.4hz,2h),7.64(d,j＝37.4hz,4h),7.52(s,1h),7.44(d,j＝6.8hz,3h),7.35(s,1h).

实施例50.化合物p50的合成

将原料替换成m42和胺，按照实施例1得到化合物p50.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.24(dd,j＝8.0,1.3hz,1h),8.16(s,1h),8.02(d,j＝15.6hz,1h),7.73–7.64(m,4h),7.60(t,j＝7.4hz,1h),7.49(dd,j＝9.5,5.4hz,4h),7.44(t,j＝7.5hz,1h),7.15(dd,j＝8.8,4.6hz,1h),7.00(td,j＝9.1,2.4hz,1h).

实施例51.化合物p51的合成

将原料替换成m42和胺，按照实施例1得到化合物p51.¹hnmr(400mhz,meod)δ8.57(d,j＝4.7hz,1h),8.27–8.18(m,3h),7.84(t,j＝7.8hz,1h),7.77(dd,j＝10.2,2.7hz,1h),7.69–7.63(m,2h),7.56(t,j＝7.6hz,1h),7.53–7.45(m,2h),6.67(dd,j＝10.6,2.7hz,1h),6.47(td,j＝8.4,2.6hz,1h).

实施例52.化合物p52的合成

将原料替换成m43和m44，按照实施例1得到化合物p52.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.21(s,1h),8.17(s,1h),8.06(d,j＝15.6hz,1h),7.92–7.86(m,2h),7.73–7.64(m,3h),7.59(d,j＝7.4hz,1h),7.57–7.49(m,3h),7.45–7.39(m,1h),2.52(s,3h).

实施例53.化合物p53的合成

将原料替换成m4和m33，按照实施例1得到化合物p53.¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.24–8.13(m,2h),7.99(d,j＝15.7hz,1h),7.62(ddt,j＝22.0,14.8,7.5hz,6h),7.51–7.41(m,3h),7.13(d,j＝8.2hz,1h),7.07(d,j＝8.3hz,1h),2.52(s,3h).

实施例54.化合物p54的合成

化合物m45的合成；参照m5的合成；

将原料替换成m45和m8，按照实施例1得到化合物p54；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.16–9.08(m,2h),9.00(d,j＝16.1hz,1h),8.44(d,j＝8.2hz,1h),8.08(d,j＝8.2hz,1h),7.94(d,j＝16.1hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,4.2hz,1h),7.64(s,1h),7.34–7.26(d,j＝8hz，1h),7.16(d,j＝7.6hz,1h),4.46(t,j＝6.8hz,2h),3.73–3.58(m,4h),2.82(t,j＝6.8hz,2h),2.55(dd,j＝8.9,4.2hz,7h).

实施例55.化合物p55的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p55；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.20(d,j＝16.3hz,1h),9.03(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),9.00(dd,j＝4.1,1.6hz,1h),8.32(d,j＝8.2hz,1h),7.92(d,j＝5.8hz,1h),7.88(d,j＝8.2hz,1h),7.66(dd,j＝8.8,4.1hz,1h),7.44–7.34(m,3h),7.15(t,j＝6.1hz,2h),6.77(d,j＝5.8hz,1h),4.33–4.16(m,5h),3.84–3.70(m,4h),2.90(t,j＝5.6hz,2h),2.69–2.56(m,4h).

实施例56.化合物p56的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p56；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ12.72(s,1h),9.23(d,j＝15.8hz,1h),9.15–8.89(m,2h),8.30(d,j＝8.0hz,1h),7.85(d,j＝8.0hz,1h),7.69–7.58(m,1h),7.38(d,j＝7.2hz,3h),7.30(s,1h),7.15(d,j＝7.7hz,2h),6.26(d,j＝6.4hz,1h),4.23(s,2h),3.77(s,4h),2.90(s,2h),2.64(s,4h).

实施例57.化合物p57的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p57；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.09(d,j＝16.2hz,1h),9.02(dd,j＝8.8,1.7hz,1h),9.00(dd,j＝4.1,1.7hz,1h),8.35(d,j＝8.2hz,1h),8.06(d,j＝8.6hz,2h),7.98(d,j＝5.8hz,1h),7.92(d,j＝8.2hz,1h),7.72–7.64(m,3h),7.50(d,j＝16.2hz,1h),6.81(d,j＝5.8hz,1h),4.24(s,3h),3.19(s,4h),2.64–2.52(m,4h),2.33(s,3h).

实施例58.化合物p58的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p58；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.12(d,j＝16.3hz,1h),9.07–9.01(m,2h),8.37–8.31(m,1h),7.91(d,j＝8.3hz,1h),7.66(dd,j＝8.7,4.2hz,2h),7.42–7.37(m,3h),7.37–7.33(m,1h),7.30–7.27(m,1h),7.10(d,j＝0.9hz,2h),5.30(s,2h),3.57(s,3h),2.52(s,3h).

实施例59.化合物p59的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p59；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.03(s,1h),9.20–9.06(m,2h),8.94(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),8.43(d,j＝8.2hz,1h),8.22(d,j＝8.3hz,1h),7.89(dd,j＝8.8,4.1hz,1h),7.57(s,1h),7.37(dd,j＝12.5,10.3hz,3h),7.09(d,j＝1.9hz,1h),7.04(d,j＝8.7hz,2h),2.46(s,3h).

实施例60.化合物p60的合成

将原料替换成羧酸和胺，按照实施例1得到化合物p60；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.19–9.08(m,2h),8.94(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),8.43(d,j＝8.3hz,1h),8.23(d,j＝8.3hz,1h),7.90(dd,j＝8.8,4.1hz,1h),7.59(s,1h),7.51(d,j＝8.8hz,2h),7.37(d,j＝16.2hz,1h),7.22(d,j＝8.9hz,2h),7.14–7.06(m,2h),4.14(t,j＝6.3hz,2h),2.68(s,1h),2.54–2.45(m,14h),2.33(s,2h),1.99–1.93(m,2h),1.93(d,j＝10.1hz,3h).

实施例61.化合物p61的合成

将原料替换成m45和胺，按照实施例1得到化合物p61；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.12(d,j＝16.3hz,1h),9.04(d,j＝8.8hz,2h),8.33(d,j＝8.2hz,1h),7.90(d,j＝8.2hz,1h),7.66(dd,j＝8.6,4.2hz,2h),7.36(dd,j＝12.4,10.0hz,3h),7.14–7.06(m,4h),4.14(t,j＝6.2hz,2h),3.64(s,1h),2.97–2.57(m,14h),2.52(s,3h),2.11(dd,j＝14.1,6.6hz,2h).

实施例62.化合物p62的合成

将原料替换成m45和胺，按照实施例1得到化合物p62；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.16–8.98(m,3h),8.35(d,j＝8.2hz,1h),7.91(d,j＝8.3hz,1h),7.79(d,j＝8.8hz,1h),7.67(dd,j＝8.8,4.1hz,1h),7.40(d,j＝8.8hz,2h),7.33(d,j＝16.3hz,1h),7.16(d,j＝8.8hz,2h),7.00(dd,j＝8.9,2.4hz,1h),6.64(d,j＝2.3hz,1h),4.17(t,j＝6.3hz,2h),3.82(s,3h),2.61(dd,j＝23.9,16.4hz,10h),2.35(s,3h),2.15–2.05(m,2h).

实施例63.化合物p63的合成

将原料替换成m45和胺，按照实施例1得到化合物p63；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.47(s,1h),9.14(d,j＝2.8hz,1h),9.02(d,j＝16.2hz,1h),8.94(d,j＝8.6hz,1h),8.41(d,j＝8.3hz,1h),8.19(d,j＝8.3hz,1h),7.88(dd,j＝8.7,4.1hz,1h),7.59(d,j＝8.7hz,1h),7.49(d,j＝8.6hz,2h),7.31(d,j＝16.2hz,1h),7.21(d,j＝8.7hz,2h),6.82(dd,j＝8.7,1.7hz,1h),6.50(s,1h),4.13(t,j＝6.1hz,2h),2.50–2.23(m,10h),2.16(s,3h),1.93(dd,j＝12.5,5.7hz,2h).

实施例64.化合物p64的合成

将原料替换成m16和m45，按照实施例1得到化合物p64；¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.04(s,1h),8.77(d,j＝6.0hz,1h),8.59(d,j＝15.7hz,1h),8.28(d,j＝8.1hz,1h),8.18(t,j＝5.4hz,1h),7.88(d,j＝8.1hz,1h),7.66(s,1h),7.53(t,j＝8.1hz,1h),7.12(dd,j＝19.3,9.9hz,4h),7.02(dd,j＝10.8,4.8hz,2h),4.08(t,j＝6.3hz,2h),2.67–2.39(m,13h),2.31(s,3h),2.07–1.96(m,2h).

实施例65.制备盐酸盐

以p14为例，阐述制备盐酸盐的过程；

将p14溶于适量的二氯甲烷中(0.3mmol/ml)，缓慢滴加6mmol/ml盐酸二氧六环溶液或通入hcl气体，待有大量析出后，过滤所得固体为p14的盐酸盐。

将p14与其他常用的酸进行反应时，同样可得到p14的成盐化合物。

实施例66.化合物对pde10酶的抑制活性测试

待测分子与含有重组pde10a蛋白，20mmtris-hcl，ph7.5，4mm二硫苏糖醇(dithiothreitol)，10mmmgcl2以及20,000-30,000cpm的³h-camp在室温下孵育15分钟，然后分别用0.2mznso4和ba(oh)2中止反应，然后利用perkinelmer2910计数仪测量上清液中未反应的³h-camp，每个分子至少测量三次。对pde10a蛋白活性抑制的ic50值通过浓度测试及非线性回归，计算获得。

本发明化合物对pde10酶的抑制活性测试数据如表1所示(同等条件下，阳性对照物罂粟碱对pde10酶的抑制活性ic50为50-100nm)。

表1化合物对pde10酶的抑制活性的测试结果

实施例67.化合物对pdes家族的选择性测试

以化合物p14为代表，测试其对pdes家族的选择性指数，测得结果如表2所示。

表2代表性化合物p14对pdes家族的选择性指数测试结果

由上述结果可看出，本发明所述的苯并咪唑类衍生物对磷酸二酯酶10型具有良好的抑制活性，且优于阳性药罂粟碱；而且所述化合物对磷酸二酯酶家族其他亚型具有良好的选择性，对磷酸二酯酶10型表现出优异的抑制作用，但对其他亚型的磷酸二酯酶没有抑制作用或者抑制作用及其微弱。可见本发明所述苯并咪唑类衍生物作为磷酸二酯酶10型抑制剂具有广阔的应用空间。

实施例68.pde10抑制剂治疗肺动脉高压的验证性实验

实验内容：受试样品p14，实验共分为6组(2.5、5、10mg/kg各一组，阳性对照他达那非10mg/kg组，正常对照组，模型组)，每组10只大鼠。除正常对照组给予生理盐水外，其余各组大鼠一次性腹腔注射2％野百合碱60mg/kg复制肺动脉高压模型。第二天开始给药：(1)正常对照组和模型组每天给予空白溶剂灌胃；(2)受试药组每天口服给予p14(2.5、5、10mg/kg)。所有动物持续给药三周，给药体积为0.4ml/100g。实验期间每三天测大鼠体重，观察大鼠一般状态(呼吸、活动等)。末次给药1h后，用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉动物，采用右心导管法测定大鼠肺动脉压力。实验结果见图1，图2。

测定大鼠肺动脉压力(mpap)：大鼠腹腔麻醉后，将大鼠仰卧固定，从颈部右侧锁骨处作一纵行切口，钝性分离周围组织，用蚊式止血钳仔细剥离出右颈外静脉，游离约1cm静脉血管，在其下方引过两根线，远心线结扎静脉，近心线打一个松结备用。用止血钳分别将近远心线固定在大鼠胸部及颈部皮肤上，使静脉充分暴露和充盈。调整校对生理记录仪，同时保持传感器与大鼠心脏位置平行。用眼科剪在近心端剪一个v形切口，将右心导管的弯端插入血管切口，用近心线活结套住插进血管的导管，稍作固定，缓慢推进导管，插入1-2cm即可达到上腔静脉，2-3cm即可到达右心房，轻轻旋转并向前推进，约插入3.5-4cm左右即可进入右心室，可测得右心室收缩压(rvsp)，此时略作停顿，再轻推导管便可进入肺动脉。在插管过程中，应根据监视器上所显示的压力曲线波形的移行变化来判断导管尖端的位置。

右心肥厚指数(rvhi)：肺血液动力学指标测定完毕后，剪开颈胸部皮肤，暴露气管，迅速解剖胸腔，暴露心、肺，用止血钳钳住气管，剪开后一并取出心脏、胸腺、肺，取出心脏，去掉血管、心房，游离右心室(rv)，剩下左心室和室间隔(lv+s)，生理盐水洗净血液后用滤纸吸去水分，称取右心室(rv)和左心室加室间隔(lv+s)的重量，并以rv/(lv+s)比值作为右心肥厚指数。

测得结果如图1和图2所示。

从图1和图2可知，与正常组相比，模型组大鼠肺小动脉血管壁显著增生，肥厚，动脉腔狭窄；与模型组大鼠相比，各给药组大鼠肺小动脉血管血管壁增生、肥厚的情况显著减轻，动脉腔扩大。

从上述结果可以看出，本次实验中，研究人员利用野百合碱成功复制了大鼠肺动脉高压模型并用于受试药p14改善肺动脉高压的药效学研究；本次研究中，受试药p14显著降低了模型大鼠的肺动脉压力，同时减轻了模型大鼠肺小动脉血管的病理改变，并且其作用在一定程度上优于上市药物西地那非。由此表明，受试药p14具有一定的降低肺动脉压力的药理学作用，值得进一步研究开发成为治疗肺动脉压力的新药。

实施例69.pde10抑制剂作为荧光探针的验证性实验

使用荧光倒置显微镜、激光共聚焦显微镜测试化合物在不同细胞中的成像效果，分别使用化合物单染，化合物与市售荧光染料共染，化合物与荧光抗体共染等实验方法，验证其可视化监测pde10的能力，并与westernblotting、qpcr等实验结果进行对比，进一步验证化合物能否区分pde10在不同细胞株中的表达水平。结果如图3，图4所示，描述表现出很好的成像效果。

化合物单染时，荧光成像分析步骤大致如下所述：将不同pde10表达水平的细胞(hepg2、a549、hpasmc、hela等)分别接种于玻璃底细胞培养皿中(每皿约10000个细胞)，在37℃下，用含10％(v/v)胎牛血清(fetalbovineserum，fbs)的培养基(培养基种类依据细胞株而定)孵育24h。待细胞贴壁后，除去培养基，以温育至37℃的pbs(1x，ph7.4)洗涤两次，加入以生理盐水配制的化合物溶液(10μm，1ml)。于37℃继续孵育20min左右，直接使用倒置荧光显微镜或激光共聚焦显微镜成像。

测得结果如图3所示，为使用化合物对不同细胞进行染色后，所拍摄的荧光成像照片。

化合物与市售荧光染料共染时，荧光成像分析步骤大致如下所述：细胞准备过程与前述步骤大致相同；待细胞贴壁后，除去培养基，以温育至37℃的pbs(1x，ph7.4)洗涤两次，加入以生理盐水(或无血清培养基)配制的化合物及市售的荧光染料(如溶酶体染料，线粒体染料、核染料等)染色工作液(10μm，1ml)。于37℃继续孵育20-30min左右，弃掉工作液，以温育至37℃的pbs(1x，ph7.4)洗涤三次，再加入少量培养基，使用激光共聚焦显微镜成像。

化合物与荧光抗体共染时，荧光成像分析步骤大致如下所述：细胞准备过程与前述步骤大致相同；待细胞贴壁后，除去培养基，以温育至37℃的pbs(1x，ph7.4)洗涤两次，加入以生理盐水配制的化合物溶液(10μm，1ml)，并于37℃继续孵育30min左右；吸去化合物溶液，加入新鲜配制的4％多聚甲醛溶液，置于4℃约10min，使细胞固定；随后，用pbs(1x，ph7.4)洗涤三次，加入0.1％tritonx-100溶液对细胞透化处理10min；以2％山羊血清封闭30-60min后，以pbs(1x，ph7.4)洗涤两次，再加入pde10抗体(一抗)稀释液于4℃孵育过夜；避光，用pbs(1x，ph7.4)洗涤三次，加入抗pde10抗体(带有荧光标记的二抗)稀释液，于室温(20-35℃)孵育45-60min；避光，以pbs(1x，ph7.4)洗涤三次，使用激光共聚焦显微镜成像。

结果如图4所示，利用化合物与溶酶体染料lysotrackerred及细胞核染料hoechst33342共染，对不同pde10表达水平的细胞进行荧光成像分析的实验结果。其中，hpasmc为人源肺动脉平滑肌细胞系，pasmc为正常sd大鼠的肺动脉平滑肌原代细胞，pah-pasmc为mct-pah模型大鼠的肺动脉平滑肌原代细胞。

本次实验成功地利用在多种细胞(hepg2、a549、hpasmc、hela等)中进行了荧光成像研究。结果表明，本发明所述化合物可清晰地标识pde10在亚细胞器中的分布情况、并证明了pde10在肺组织中的表达情况，为pde10作为抗pah靶点的有效性提供直接证据。因此，该类化合物可以作为工具应用于免疫荧光染色，在pde10相关疾病(包括但不限于肺部疾病)中极具应用价值，具有很好的研究开发前景。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。