一种细胞培养实验装置的制作方法

本发明涉及生物医药研究技术领域，特别是涉及一种细胞培养实验装置。

背景技术：

牙本质敏感症是一种以发作迅速、时间短暂、疼痛尖锐为特点的临床常见疾病，长期的敏感刺激会引起牙髓炎症、坏死等更严重的并发症。近年来，牙本质敏感的发生率仍呈现明显上升趋势，已严重影响人们的生活质量，逐渐成为危害我国成人口腔健康的主要疾病之一；目前已从理论上证实了外界刺激下牙本质小管的变形导致小管液快速流动产生的流体剪切力诱发的细胞应激反应是过敏症状产生及修复的主要诱因；但是目前无法知道流体剪切力是通过影响细胞突还是影响细胞本体来达到影响细胞反应的，也无法知道药物对牙本质细胞的影响机制到底是通过作用在细胞突来实现还是通过作用于细胞本体来实现；究其原因，当前研究多以二维平层细胞为研究对象，在构建成牙本质细胞在体外生长模型方面存在明显技术缺陷，无法实现细胞本体与细胞突的分层培养，从而无法通过单独对细胞本体或是细胞突施加外界刺激然后观察细胞反应来实现对细胞局部施加外界刺激。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种细胞培养实验装置，以解决上述现有技术存在的问题，能够实现对细胞局部施加外界刺激。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种细胞培养实验装置，包括上层腔体、上层支架、细胞培养膜、下层支架与下层腔体自上而下依次固定连接；所述细胞培养膜表面培养有细胞，所述细胞培养膜上密布有细胞突通孔，细胞突能够穿过所述细胞突通孔，使得细胞本体与细胞突分别位于所述细胞培养膜上下两侧，所述上层腔体与所述下层腔体内部用于流通细胞培养液，所述上层支架与所述下层支架分别设置有上镂空区域与下镂空区域，所述上层支架与所述下层支架之间夹持有细胞培养膜，所述上层腔体内的细胞培养液能够流过所述上层支架的上镂空区域内露出的细胞培养膜上表面，所述下层腔体内的细胞培养液能够流过所述下层支架的下镂空区域内露出的细胞培养膜下表面。

优选地，所述上层腔体上表面设置有上层进液口与上层出液口，所述上层进液口与所述上层出液口都与所述上层腔体连通。

优选地，所述上层腔体内底部设置有上层间隙进液口与上层间隙出液口，所述上层间隙进液口与所述上层间隙出液口都与所述上层支架的上镂空区域相连通。

优选地，所述下层腔体下表面设置有下层进液口与下层出液口，所述下层进液口与所述下层出液口都与所述下层腔体连通。

优选地，所述下层腔体上表面贯通设置有下层间隙进液口与下层间隙出液口，所述下层间隙进液口与所述下层间隙出液口都与所述下层支架的下镂空区域相连通。

优选地，所述上层腔体、所述上层支架、所述下层支架与所述下层腔体上分别设置有第一装配孔、第二装配孔、第三装配孔与第四装配孔，通过连接件与所述第一装配孔、所述第二装配孔、所述第三装配孔与所述第四装配孔之间的配合能够实现所述上层腔体、所述上层支架、所述下层支架之间的固定连接。

优选地，所述细胞培养膜为聚对苯二甲酸乙二醇酯膜、硝酸-乙酸混合纤维滤膜或透明聚碳酸脂膜。

本发明相对于现有技术取得了以下技术效果：单独在上层腔体内流通细胞培养液，细胞培养液在上层腔体内单向流动，能够通过上层腔体内底面的上层间隙进液口流到细胞培养膜上表面，并且从上层间隙出液口流回上层腔体，细胞培养膜上表面为细胞本体，通过设置上层腔体内不同的细胞培养液流速能够达到对细胞本体施加不同的流体剪切力的目的，通过观察细胞实验前后细胞反应差异能够判断流体剪切力这一外界刺激是否通过影响细胞本体这一途径来对细胞发挥作用的；从培养皿中取出新的培植有细胞的细胞培养膜，完成原细胞培养膜的更换，然后单独在下层腔体中流通细胞培养液，细胞培养液在下层腔体内单向流动，细胞培养液在下层腔体中始终处于充盈状态，下层腔体中的细胞培养液能够通过下层腔体上表面的下层间隙进液口流经细胞培养膜下表面，并且能够从下层间隙出液口流回下层腔体，细胞培养膜下表面为细胞突通过设置下层腔体内不同的细胞培养液流速能够达到对细胞突施加不同的流体剪切力的目的，通过观察细胞实验前后细胞反应差异能够判断流体剪切力这一外界刺激是否通过影响细胞突这一途径来对细胞发挥作用；综合两组实验结果能够得到流体剪切力这一外界刺激对细胞的影响途径；此外可通过分别单独在上层腔体内或者在下层腔体内通入不同的药物来研究不同药物对细胞的影响途径；本发明能够实现对细胞局部施加外界刺激。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明提供的细胞培养实验装置示意图；

图2为本发明提供的细胞培养实验装置上层腔体下底面示意图；

图3为本发明提供的细胞培养实验装置下层腔体上表面示意图；

图4为本发明提供的细胞培养实验装置上层支架示意图；

图5为本发明提供的细胞培养实验装置下层支架示意图。

图中：1-上层腔体、11-上层进液口、12-上层出液口、13-上层间隙进液口、14-上层间隙出液口、2-上层支架、21-上镂空区域、3-多孔膜、4-下层支架、41-下镂空区域、5-下层腔体、51-下层进液口、52-下层出液口、53-下层间隙进液口、54-下层间隙出液口。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明的目的是提供一种细胞培养实验装置，以解决上述现有技术存在的问题，能够实现对细胞局部施加外界刺激。

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

如图1、图4及图5所示，本发明提供一种细胞培养实验装置，包括上层腔体1、上层支架2、细胞培养膜3、下层支架4、下层腔体5自上而下依次固定连接；细胞培养膜3表面培养有细胞，细胞培养膜3上密布有细胞突通孔，细胞突能够穿过细胞突通孔，使得细胞本体与细胞突分别位于细胞培养膜3上下两侧，上层腔体1与下层腔体5内部用于流通细胞培养液，上层支架2与下层支架4分别设置有上镂空区域21与下镂空区域41，上层支架2与下层支架4之间夹持有细胞培养膜3，上层腔体1内的细胞培养液能够流过上层支架2的上镂空区域21内露出的细胞培养膜3上表面，下层腔体5内的细胞培养液能够流过下层支架4的下镂空区域41内露出的细胞培养膜3下表面；

单独在上层腔体1内流通细胞培养液，细胞培养液在上层腔体1内单向流动，能够通过上层腔体1内底面的上层间隙进液口13流到细胞培养膜3上表面，并且从上层间隙出液口14流回上层腔体1，细胞培养膜3上表面为细胞本体，通过设置上层腔体1内不同的细胞培养液流速能够达到对细胞本体施加不同的流体剪切力的目的，通过观察细胞实验前后细胞反应差异能够判断流体剪切力这一外界刺激是否通过影响细胞本体这一途径来对细胞发挥作用的；从培养皿中取出新的培植有细胞的细胞培养膜3，完成原细胞培养膜3的更换，然后单独在下层腔体5内流通细胞培养液，细胞培养液在下层腔体5内单向流动，细胞培养液在下层腔体5中始终处于充盈状态，下层腔体5中的细胞培养液能够通过下层腔体5上表面的下层间隙进液口53流经细胞培养膜3下表面，并且能够从下层间隙出液口54流回下层腔体5，细胞培养膜3下表面为细胞突，通过设置下层腔体5内不同的细胞培养液流速能够达到对细胞突施加不同的流体剪切力的目的，通过观察细胞实验前后细胞反应差异能够判断流体剪切力这一外界刺激是否通过影响细胞突这一途径来对细胞发挥作用；综合两组实验结果能够得到流体剪切力这一外界刺激对细胞的影响途径；同时可单独在上层腔体1内以及单独在下层腔体5内通入不同的药物来研究不同药物对细胞的影响途径；本发明能够实现对细胞局部施加外界刺激。

如图1所示，在本实施例中，上层腔体1上表面设置有上层进液口11与上层出液口12，上层进液口11与上层出液口12都与上层腔体连通；用于细胞培养液在上层腔体1的流通。

如图1、图2及图4所示，在本实施例中，上层腔体1内底部设置有上层间隙进液口13与上层间隙出液口14，上层间隙进液口13与上层间隙出液口14都与上层支架2的上镂空区域21相连通；上层间隙进液口13与上层间隙出液口14用于上层腔体1内部的细胞培养液在细胞培养膜3上表面的单向流通，从而在实验过程中细胞本体提供所需的流体剪切力。

如图1所示，在本实施例中，下层腔体5下表面设置有下层进液口51与下层出液口52，下层进液口51与下层出液口52都与下层腔体5连通，用于外界细胞培养液在下层腔体5内的通入与流出。

如图1、图3及图5所示，在本实施例中，下层腔体5上表面贯通设置有下层间隙进液口53与下层间隙出液口54，下层间隙进液口53与下层间隙出液口54都与下层支架4的下镂空区域41相连通；下层间隙进液口53与下层间隙出液口54用于下层腔体5内部的细胞培养液在多孔膜3下表面的单向流通，从而在实验过程中为细胞突提供所需的流体剪切力。

如图1所示，在本实施例中，上层腔体1、上层支架2、下层支架4与下层腔体5上分别设置有第一装配孔、第二装配孔、第三装配孔与第四装配孔，通过螺栓穿过第一装配孔、第二装配孔、第三装配孔与第四装配孔形成螺栓连接，连接牢固，拆装方便。

在本实施例中，细胞培养膜3为聚对苯二甲酸乙二醇酯膜、硝酸-乙酸混合纤维滤膜或透明聚碳酸脂膜，无毒无害、亲水性以及生物相容性好。

本发明中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。