本发明涉及生物技术领域，更具体地说是涉及一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法。
背景技术：
as病变几乎全部累及双侧骶髂关节(sacroiliacjoint，sij)。以往研究认为其基础病理特点为sij附着点炎。随着附着点的炎症侵蚀，进而导致炎症修复过程中新骨形成及非特异性软骨内骨化，最终导致关节强直。早期sij炎病理改变以滑膜炎为主要特点，其主要表现为滑膜衬里细胞层增厚，疏松结缔组织少量淋巴细胞、浆细胞及大量巨噬细胞浸润，血管翳形成。
在健康状态下，巨噬细胞
然而，现有技术中，关于cd68受体的检测主要是通过有创手段获取局部标本后，在体外进行免疫组织化学法进行检测，看不到滑膜内
因此，如何提供一种可以对cd68受体进行检测且可实现对滑膜内巨噬细胞定位的化合物本领域技术人员亟需解决的技术问题。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物，该聚合物使得滑膜内巨噬细胞浸润影像可视化成为可能。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法，包括如下步骤：
1)向装有二甲亚砜溶液的容器中边搅拌边加入1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸-n-羟基琥珀酰亚胺酯，反应20-25h，得树状大分子溶液；
2)将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中，随后逐滴加入所述树状大分子溶液，反应64-76h，得溶液a；
3)向所述溶液a中加入羧基化聚乙二醇，反应64-78h，得溶液b；
4)向所述溶液b中加入氯金酸溶液，室温搅拌反应25-35min，得溶液c；
5)向所述溶液c中加入nabh4溶液，室温搅拌反应1-4h，然后逐滴加入gd(no3)3溶液反应20-26h，得溶液d；
6)向所述溶液d中加入三乙胺，搅拌混合22-32min，随后加入乙酸酐，室温搅拌反应18-28h，得反应产物；
7)将反应产物进行透析，并将透析的产物冷冻干燥得到聚合物gd-peg-g5.0-cd68抗体聚合物。
作为本发明优选的技术方案，步骤2)中，将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中后，加入edc进行活化。
作为本发明优选的技术方案，步骤3)中，加入羧基化聚乙二醇后，加入edc进行活化。
作为本发明优选的技术方案，步骤7)中，将反应产物用透析膜在磷酸盐缓冲液和蒸馏水中透析。
作为本发明优选的技术方案，所述透析膜为mwco10000。
上述制备方法制备得到的钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物在制备检测滑膜内cd68受体试剂中的应用。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一向装有二甲亚砜溶液的容器中边搅拌边加入1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸-n-羟基琥珀酰亚胺酯，反应20h，得树状大分子溶液；
步骤二将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中，随后逐滴加入所述树状大分子溶液，并加入edc进行活化，反应64h，得溶液a；
步骤三向所述溶液a中加入羧基化聚乙二醇，并加入edc进行活化，反应64h，得溶液b；
步骤四向所述溶液b中加入氯金酸溶液，室温搅拌反应25min，得溶液c；
步骤五向所述溶液c中加入nabh4溶液，室温搅拌反应1h，然后逐滴加入gd(no3)3溶液反应20h，得溶液d；
步骤六向所述溶液d中加入三乙胺，搅拌混合22min，随后加入乙酸酐，室温搅拌反应18h，得反应产物；
步骤七将反应产物用透析膜在磷酸盐缓冲液和蒸馏水中透析，所述透析膜为mwco10000，并将透析的产物冷冻干燥得到聚合物gd-peg-g5.0-cd68抗体聚合物。
实施例2
一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一向装有二甲亚砜溶液的容器中边搅拌边加入1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸-n-羟基琥珀酰亚胺酯，反应25h，得树状大分子溶液；
步骤二将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中，随后逐滴加入所述树状大分子溶液，并加入edc进行活化，反应76h，得溶液a；
步骤三向所述溶液a中加入羧基化聚乙二醇，并加入edc进行活化，反应78h，得溶液b；
步骤四向所述溶液b中加入氯金酸溶液，室温搅拌反应35min，得溶液c；
步骤五向所述溶液c中加入nabh4溶液，室温搅拌反应4h，然后逐滴加入gd(no3)3溶液反应26h，得溶液d；
步骤六向所述溶液d中加入三乙胺，搅拌混合32min，随后加入乙酸酐，室温搅拌反应18-28h，得反应产物；
步骤七将反应产物用透析膜在磷酸盐缓冲液和蒸馏水中透析，所述透析膜为mwco10000，并将透析的产物冷冻干燥得到聚合物gd-peg-g5.0-cd68抗体聚合物。
实施例3
一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一向装有二甲亚砜溶液的容器中边搅拌边加入1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸-n-羟基琥珀酰亚胺酯，反应22h，得树状大分子溶液；
步骤二将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中，随后逐滴加入所述树状大分子溶液，并加入edc进行活化，反应70h，得溶液a；
步骤三向所述溶液a中加入羧基化聚乙二醇，并加入edc进行活化，反应70h，得溶液b；
步骤四向所述溶液b中加入氯金酸溶液，室温搅拌反应30min，得溶液c；
步骤五向所述溶液c中加入nabh4溶液，室温搅拌反应3h，然后逐滴加入gd(no3)3溶液反应22h，得溶液d；
步骤六向所述溶液d中加入三乙胺，搅拌混合25min，随后加入乙酸酐，室温搅拌反应25h，得反应产物；
步骤七将反应产物用透析膜在磷酸盐缓冲液和蒸馏水中透析，所述透析膜为mwco10000，并将透析的产物冷冻干燥得到聚合物gd-peg-g5.0-cd68抗体聚合物。
实施例4
一种钆离子-聚乙二醇-树状大分子-cd68抗体聚合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一向装有二甲亚砜溶液的容器中边搅拌边加入1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸-n-羟基琥珀酰亚胺酯，反应23h，得树状大分子溶液；
步骤二将cd68-peg-cooh溶解在二甲亚砜溶液中，随后逐滴加入所述树状大分子溶液，并加入edc进行活化，反应72h，得溶液a；
步骤三向所述溶液a中加入羧基化聚乙二醇，并加入edc进行活化，反应68h，得溶液b；
步骤四向所述溶液b中加入氯金酸溶液，室温搅拌反应28min，得溶液c；
步骤五向所述溶液c中加入nabh4溶液，室温搅拌反应2h，然后逐滴加入gd(no3)3溶液反应24h，得溶液d；
步骤六向所述溶液d中加入三乙胺，搅拌混合27min，随后加入乙酸酐，室温搅拌反应22h，得反应产物；
步骤七将反应产物用透析膜在磷酸盐缓冲液和蒸馏水中透析，所述透析膜为mwco10000，并将透析的产物冷冻干燥得到聚合物gd-peg-g5.0-cd68抗体聚合物。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。