检测外周血外泌体circ-LRP8的引物、试剂盒及其在胃癌肝转移中的应用的制作方法

文档序号:21929755发布日期:2020-08-21 14:53阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种外周血外泌体circ-lrp8,其特征是,所述circ-lrp8的核苷酸序列如seqidno:1所示。

2.检测权利要求1所述的外周血外泌体circ-lrp8的引物,其特征是,所述引物的核苷酸序列如seqidno:2和seqidno:3所示。

3.检测外周血外泌体circ-lrp8的试剂盒,其特征是,包括权利要求2所述的引物。

4.根据权利要求3所述的检测外周血外泌体circ-lrp8的试剂盒,其特征是,还包括外周血外泌体的rna提取试剂、去基因组dna反应体系、逆转录反应体系、qpcr反应体系。

5.根据权利要求4所述的检测外周血外泌体circ-lrp8的试剂盒,其特征是,去基因组dna反应的条件为42℃2min、4℃∞;逆转录反应条件为37℃15min、85℃5s、4℃∞;qpcr反应条件为阶段1:95℃、30s、1次循环;阶段2:95℃、5s、40次循环;60℃、31s、40次循环;阶段3:95℃、15s、1次循环;60℃、60s、1次循环;95℃、15s、1次循环。

6.检测外周血外泌体circ-lrp8的方法,其特征是,采用权利要求3-5任意一项所述的试剂盒,包括如下步骤:

获得待检外周血中外泌体;

从外泌体样本中提取rna;

从提取的rna中去除基因组dna;

对于获得的rna进行逆转录至cdna;

对于获得的cdna通过qpcr法进行检测。

7.根据权利要求6所述的检测circ-lrp8的方法,其特征是,待检外周血外泌体样本来自于胃癌病人及正常人。

8.权利要求2所述的引物或权利要求3-5任意一项所述的试剂盒作为胃癌肝转移诊断、治疗效果评估或预后情况评估的试剂的应用。


技术总结
本发明涉及检测外周血外泌体circ‑LRP8的引物、试剂盒、检测方法及其应用,试剂盒包括外周血外泌体的RNA提取试剂、引物、去基因组DNA反应体系、逆转录反应体系、qPCR操作反应体系,本发明公开了circ‑LRP8在胃癌患者及正常人外周血外泌体中的表达情况,并用荧光定量PCR检测外周血外泌体circ‑LRP8。circ‑LRP8可用于胃癌肝转移的早期诊断,判断疾病进展和预后情况,并可评价胃癌肝转移的治疗效果。

技术研发人员:邹晨;范钰;郎亚昆;吴朝晖;朱宝平
受保护的技术使用者:江苏华美健晟生物科技有限公司
技术研发日:2020.06.19
技术公布日:2020.08.21
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