一种鉴定样本库中细胞系交叉污染的方法与流程

文档序号:22798729发布日期:2020-11-04 03:54阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种鉴定样本库中细胞系交叉污染的方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤一:提取细胞样品基因组并准备阳性对照样本和阴性对照样本待用,其中,细胞样品基因组是通过磁珠法或chelex-100法提取后定量至0.1ng/μl-2ng/μl待用;

步骤二:

通过带有荧光基团标记的引物对步骤一当中的细胞样品基因组、阳性对照样本和阴性对照样本进行pcr扩增处理,其中,所述pcr的循环参数如表一所示:

表一

将扩增产物里的若干str位点标记上不同颜色的荧光后待用;其中,所述带有荧光基团标记的引物为中德美联的agcuex25荧光检测试剂盒中的引物;

步骤三:

通过毛细管电泳分离后的到大小不同的片段,将片段大小转换为等位基因峰图,通过峰图与参考图谱进行对比后分析是否存在细胞交叉污染。

2.如权利要求1所述的一种鉴定样本库中细胞系交叉污染的方法,其特征在于,所述是否存在细胞交叉污染的判断的标准是阴性对照结果中不应有特异信号,allelicladder与controldna9948的基因分型正确。


技术总结
本发明公开了一种鉴定样本库中细胞系交叉污染的方法,包括如下步骤:步骤一:提取细胞样品基因组并准备阳性对照样本和阴性对照样本待用;步骤二:通过带有荧光基团标记的引物对步骤一当中的细胞样品基因组、阳性对照样本和阴性对照样本进行PCR扩增处理;将扩增产物里的若干STR位点标记上不同颜色的荧光后待用;步骤三:通过毛细管电泳分离后的到大小不同的片段,将片段大小转换为等位基因峰图,通过峰图与参考图谱进行对比后分析是否存在细胞交叉污染。本发明的方法通过短串联重复序列基因(STR)分型法在样本库中鉴定细胞交叉污染,相比现有方法更加快速便捷和直观。

技术研发人员:王瑛;雷颖;胡晓婷
受保护的技术使用者:赛济检验认证中心有限责任公司
技术研发日:2020.07.23
技术公布日:2020.11.03
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