本发明涉及烟草赤星病鉴定
技术领域：
：，具体为一种烟草赤星病人工接种鉴定方法。
背景技术：
：：烟草赤星病是由链格孢菌引起的一种叶部真菌病害，属半知菌亚门。该病发生于烟叶成熟期，从烟株下部叶片开始发生，随着叶片成熟，病斑从下而上逐步发展。斑点大致呈圆形，有坏死的中心和同心圆环，通常被黄色的晕包围，斑点大小从小雀斑症状(约1mm)到大的病灶直径1至3厘米不等。该病具有潜育期短、流行速度快的特点，在适宜的环境条件下，短时间内即可造成大流行，给烟叶生产带来巨大损失。烟草赤星病已是为害烟草生产的主要真菌病害，因此，科学的控制赤星病是生产上亟待解决的问题。利用抗病品种是防治烟草赤星病最为有效的措施，那么准确、简便、有效的人工接种方法显得尤为关键，因为依靠田间自然发病鉴定，调查困难，费时费力，周期长，而人工接种法可节省菌液、劳力、试材和设备，且环境条件可控、稳定，不受干扰，接种简单、发病快速、结果更为准确可靠。接种是证病过程的重要环节，是研究赤星病病原致病性、发病规律、侵染途径、品种的抗性鉴定及控制病害等方面的有效保障，特别是在品种对烟草赤星病的抗性研究中，对所鉴定品种进行人工接菌诱发病害发生是品种抗性筛选研究不可缺少的手段和方法。目前，已报道的赤星病菌人工接种方法主要有菌丝块接种法、菌丝悬滴接种法、孢子悬滴法、孢子液棉球法及喷雾法；但在试验中发现，利用上述几种不同方法进行赤星病病菌接种时，对赤星病的发病程度影响差异很大，且出现了接菌不发病或发病不理想的问题，接种方法的不成熟会限制了病原菌与寄主互作研究工作的开展。技术实现要素：(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本发明提供了一种烟草赤星病人工接种鉴定方法，解决了现有几种不同方法进行赤星病病菌接种时，对赤星病的发病程度影响差异很大，且出现了接菌不发病或发病不理想的问题的问题。(二)技术方案为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种烟草赤星病人工接种鉴定方法，包括以下方法：s1：赤星病菌培养：将活化的供试菌株打取菌饼，转接到pda平板上，分别于28℃恒温培养5d、10d、15d，备用；s2：接种体的制备：制备菌丝块接种体、菌丝接种体、孢子液接种体，孢子液浓度分别为105、106、107孢子/ml浓度；s3：叶片伤口注射：包括以下步骤：t1：选取烟株下部叶脚叶，经75％酒精棉球擦拭和无菌水清洗后，置于干净的育苗托盘中，每个叶片取6～10个接种点，针头刺破接种点部位叶片的表皮，即制造伤口准备接种；t2：用注射器且去掉针头吸取不同供试浓度的分生孢子悬浮液，然后通过手指抵住带有伤口的接种点叶片背面，同时从叶片正面的接种点处缓慢注入叶片叶肉组织内，接种量为10μl，对照叶片接种点注射等量无菌水，每次处理2个叶片，3次重复；t3：接种后的叶片叶基处用浸泡无菌水的脱脂棉球保湿，托盘覆盖保鲜膜保湿并置于28～30℃的人工气候室中，黑暗培养8h后，以日光灯照明，日照时数为每日12h，3天后观察并跟踪调查接种后发病情况，接种后10d，跟踪记录各处理的发病率，调查病情指数和病斑大小。进一步地，所述s1中菌饼φ＝0.5cm，所述t1中页脚叶为烟株下部倒数第3片烟叶。进一步地，还包括叶片接种器，所述叶片接种器安装板，所述安装板的一侧设置有夹取组件，所述安装板的正面且位于夹取组件的一侧通过球形连接件设置有限位组件，所述安装板上设置有传动组件。进一步地，所述夹取组件包括基板，所述基板固定于所述安装板正面的一侧，所述基板的一侧对称固定连接有两组定位杆，所述定位杆的表面滑动连接有u形夹板。进一步地，所述定位杆的端部固定连接有挡块，所述定位杆的表面且位于所述挡块和u形夹板之间套设有第一弹性件，所述u形夹板和基板相对的一侧均粘接有胶垫，所述u形夹板的一侧固定连接有提升杆，所述提升杆的一侧固定连接有拉块，所述拉块通过条形槽延伸至安装板的背面。通过设置夹取组件，可以通过手指拉动拉块，带动u形夹板压缩第一弹性件，与基板分离，然后将待接种的叶子夹起，通过第一弹性件的作用将叶子夹紧，且通过设置胶垫，可以防止损坏叶子。进一步地，所述限位组件包括u形固定件，所述u形固定件通过球形连接件固定于所述安装板的正面，所述u形固定件的两侧均贯穿有支撑杆，所述支撑杆的端部且位于u形固定件的内部固定连接有弧形限位件。进一步地，所述定位杆的表面且位于弧形限位件与u形固定件之间套设有第二弹性件，所述弧形限位件的内侧粘接有橡胶垫。然后将注射器放置到两个弧形限位件之间，通过第二弹性件将其夹紧，由于u形固定件通过球形连接件与安装板固定，在注射时，可以调整注射器的角度，对不同的接种位置进行注射。进一步地，所述传动组件包括两个滑杆、带动块和矩形槽，两个所述滑杆分别通过连接块固定于所述安装板的两侧，所述矩形槽开设于所述安装板上且位于限位组件的一侧，所述带动块贯穿于矩形槽的内部。进一步地，所述滑杆的表面滑动连接有滑块，所述滑块的正面转动连接有转动杆，所述转动杆的一端转动连接有连接块，所述连接块的一侧贯穿u形固定件且延伸至u形固定件的内部，所述连接块与所述弧形限位件的一侧固定连接。进一步地，所述滑块的底部转动连接有传动杆，所述传动杆的一端与所述带动块的一侧转动连接，所述带动块的一侧且位于所述安装板的背面固定连接有提耳。在对叶子进行接种时，按压注射器的推柄时，可以通过手指向上拉动提耳，提耳向上推动滑块，滑块向上移动并带动转动杆推动连接块，连接块推动弧形限位件将注射器表面夹紧，防止在推动推柄时，使注射器相对弧形限位件移动。(三)有益效果本发明具有以下有益效果：该烟草赤星病人工接种鉴定方法，通过利用赤星病菌分生孢子直接进入叶肉组织，利用其营养萌发、扩繁，向细胞间扩展，引致局部组织死亡并形成病斑的原理，采用孢子悬浮液经叶片伤口注射接种法。接种的最佳条件是：选择生长10～15d菌龄、浓度为106孢子/ml的赤星病菌以及脚叶或下二棚部位叶片进行致病性测定，该接种方法具有操作简便、接种率高、发病时效期短、发病程度适中且结果准确可靠的接种效果，这为鉴定我国烟草赤星病或作物叶部真菌病害病原菌致病性、生理小种分化及可在温室筛选抗病品种的替代接种方法。当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。附图说明图1为本发明不同接种方法接种效果比较图；图2为本发明不同接种浓度接种效果的比较图；图3为本发明不同菌龄接种效果的比较图；图4为本发明不同叶龄对接种效果的比较图；图5为本发明的流程框图；图6为本发明叶片接种器的结构示意图；图7为本发明图1所示叶片接种器的侧视图；图8为本发明图1所示叶片接种器的后视图。图中，1-基板、2-夹取组件、21-基板、22-u形夹板、23-定位杆、24-第一弹性件、25-胶垫、26-提升杆、27、拉块，3-限位组件、31-u形固定件、32-支撑杆、33-弧形限位件、34-橡胶垫、35-第二弹性件、4-传动组件、41-滑杆、42-带动块、43-矩形槽、44-滑块、45-传动杆、46-转动杆、47-连接块、48-提耳，5-条形槽。具体实施方式下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。在本发明的描述中，需要理解的是，术语“开孔”、“上”、“下”、“厚度”、“顶”、“中”、“长度”、“内”、“四周”等指示方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的组件或元件必须具有特定的方位，以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。第一实施例请参阅图1-5，本发明实施例提供一种技术方案：一种烟草赤星病人工接种鉴定方法，包括以下方法：s1：赤星病菌培养：将活化的供试菌株打取菌饼，转接到pda平板上，分别于28℃恒温培养5d、10d、15d，备用；s2：接种体的制备：制备菌丝块接种体、菌丝接种体、孢子液接种体，孢子液浓度分别为105、106、107孢子/ml浓度；s3：叶片伤口注射：包括以下步骤：t1：选取烟株下部叶脚叶，经75％酒精棉球擦拭和无菌水清洗后，置于干净的育苗托盘中，每个叶片取6～10个接种点，针头刺破接种点部位叶片的表皮，即制造伤口准备接种；t2：用注射器且去掉针头吸取不同供试浓度的分生孢子悬浮液，然后通过手指抵住带有伤口的接种点叶片背面，同时从叶片正面的接种点处缓慢注入叶片叶肉组织内，接种量为10μl，对照叶片接种点注射等量无菌水，每次处理2个叶片，3次重复；t3：接种后的叶片叶基处用浸泡无菌水的脱脂棉球保湿，托盘覆盖保鲜膜保湿并置于28～30℃的人工气候室中，黑暗培养8h后，以日光灯照明，日照时数为每日12h，3天后观察并跟踪调查接种后发病情况，接种后10d，跟踪记录各处理的发病率，调查病情指数和病斑大小。所述s1中菌饼φ＝0.5cm，所述t1中页脚叶为烟株下部倒数第3片烟叶。伤口注射法与其它接种方法的比较菌饼接种、孢子喷雾接种、孢子液棉球接种、孢子液悬滴接种及菌丝悬滴接种5种方法对烟草离体叶片进行接种，接种浓度为1×106孢子/ml，供试叶片为烟株下二棚叶(下部倒数第4～5片叶)，每个处理接种3个叶片，每片叶6～10个接种点(依据叶片大小)，3次重复，同时进行三个烟草品种叶片伤口注射接种；接种后第10d观察不同接种方法的接种效果及发病情况。不同接种浓度对接种效果的影响试验中采取的接种浓度，根据三个烟草品种叶片鉴定的特点，试验设置3个浓度处理，分别为1×105，1×106，1×107孢子/ml，接种方法同1.2.3.1，每个处理接种2个叶片，每个叶片接种点为6～10个(依据叶片大小)，3次重复；接种后第10d调查赤星病发病情况。跟踪记录各处理的发病率，调查病情指数和病斑大小。每个处理调查全部叶片接种点病斑，用游标卡尺直接测量病斑直径，每个接种点用十字交叉法垂直测量直径各一次，取平均值。按照调查的分级数计算病情指数。根据离体叶片人工接种的特点，根据病斑直径(φ)将赤星病分级如下：0级，无病症；1级<0.2cm；0.2cm≤3级；4级<0.5cm；0.5cm≤5级<1.0cm；1.0cm≤7级<2.0cm；9级≥2.0cm以上。dsi＝[∑(各级病斑数×该病级数)/(最高级数×调查总病斑数)]×100[19]不同菌龄对接种效果的影响赤星病菌培养同1.2.1，分别选取培养时间为5d，10d和15d的病菌进行三个烟草品种叶片伤口注射法接种。接种体制备同1.2.2，浓度均调整为1×106孢子/ml，接种方法同1.2.3.1，每个处理接种2个叶片，每个叶片接种点为6～10个，接种后第10d调查赤星病发病情况。不同叶龄对接种效果的影响分别选取三个烟草品种叶片下二棚叶、中部叶与上部叶作为接种叶片，孢子悬浮液浓度为1×106孢子/ml，接种方法同1.2.3.1，每处理接种2个叶片，每个叶片6～10个接种点(依据叶片大小)，接种后第10d调查记录接种效果。结果与分析：不同接种方法对接种效果的影响：本试验采用喷雾法、孢子棉球法、菌丝悬滴法、孢子悬滴法、菌饼接种法和孢子注射法比较不同接种方法的接种效果，试验结果表明，喷雾法和孢子棉球法均未引致发病，其它4种接种方法均可致使叶片发病，但发病严重度也有明显差别：首先，上述4种接种方法引致供试三个品种发病的强弱顺序均为云烟87>g28>净叶黄，与品种实际抗感表现相当；第二，对于感病品种云烟87，本试验提供的伤口注射法和菌饼接种法的接种发病率均为100％(图1,f和a)，但伤口注射法发病时间短且发病快，三个部位的叶片均可以发病，其病斑平均直径为1.00cm(图1,f)，菌饼接种法的病斑平均直径为0.83cm(图1,a)；而菌丝悬滴法和孢子液悬滴法的病斑平均直径分别为0.47cm(图1,b)和0.37cm(图1,c)，处理间差异显著，说明伤口注射法操作简便，发病周期短、接种发病率高且发病程度适中，可使感病品种云烟87叶片产生典型的赤星病病斑，病级均为5～7级范围，发病情况与品种实际抗感表现相符，云烟87伤口注射法的发病率和病指分别为100％和88.89％，而其它3种接种方法的接种发病率较低，表现为叶片发病程度轻或未发病，处理间的接种发病率差异达到显著水平(表1)。因此，本研究提供的伤口注射法具有操作简单、接种效率高且准确性好的特点，是适宜推广的赤星病简易接种技术。如图1不同接种方法接种效果的比较；注：(a)～(f)：净叶黄；(g)～(l)：g28；(g)～(h)：云烟87；(a),(g),(m)：菌丝块法；(b),(h),(n)：菌丝悬滴法；(c),(i),(o)：孢子悬滴法；(d),(j),(p)：孢子液棉球法；(e),(k),(q)：喷雾法；(f),(l),(n)：伤口注射法fig.1comparisonoftheeffectofdifferentinoculationmethodsnote：(a)～(f)：jingyehuang；(g)～(l)：g28；(g)～(h)：yunyan87；(a),(g),(m)：hyphaetabletsofthetestimony；(b),(h),(n)：myceliumsuspension；(c),(i),(o)：sporesuspension；(d),(j),(p)：sporeliquidcottonballmethod；(e),(k),(q)：thespraymethod；(f),(l),(n)：woundinjection表1不同接种方法接种效果的比较table1comparisonoftheeffectofdifferentinoculationmethods注：同列数据后字母不同代表差异显著(p＜0.05)不同接种浓度对接种效果的影响：供试的3个接种浓度105，106，107孢子/ml的孢子悬液接种净叶黄、g28和云烟87叶片后，三个品种表现出不同的发病程度(图2)，净叶黄的接种发病率分别为10.00％(图2,a)、30.00％(图2,b)和100.00％(图2,c)，dsi分别为1.11、1.85和7.40(表1)；g28的接种发病率分别为20.00％(图2,d)、30.00％(图2,e)、50.00％(图2,f)，dsi分别为2.22、3.33、16.67；云烟87接种发病率均为100.00％(图2,g～i)，dsi分别为40.00、51.51、51.51。但浓度为105孢子/ml的病指dsi较低，而其它两种浓度病指dsi较高，且发病较迅速，能准确的区分病原菌对不同抗感品种的致病性，说明该方法符合试验需要；107孢子/ml浓度接种发病率最高，但病斑扩展过快，相比之下，接种浓度106孢子/ml的发病率、发病时效和病斑扩展符合试验需求，为最佳接种浓度。如图2不同接种浓度接种效果的比较(接种后第8d)：注：(a)～(c)：净叶黄；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：云烟87；(a),(d),(g)：105孢子/ml；(b),(e),(h)：106孢子/ml；(c),(f),(i)：107孢子/mlfig.2comparisonoftheeffectofdifferentinoculationconcentration(onthe8thdafterinoculation)note：(a)～(c)：jingyehuang；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：yunyan87；(a),(d),(g)：105spore/ml；(b),(e),(h)：106spore/ml；(c),(f),(i)：107spore/ml表2不同接种浓度接种效果的比较：table2comparisonoftheeffectofdifferentinoculationconcentration注：同列数据后字母不同代表差异显著(p＜0.05)不同培养时间对接种效果的影响：选取菌龄为5d、10d和15d的供试菌株、浓度均为1×106孢子/ml伤口注射接种三个烟草品种，第10d观察的接种效果显示，培养5d菌龄的接种物致病力较弱，均小于10d和15d的接种物的发病程度，10d和15d菌龄接种物接种三个供试品种后发病程度适中，抗感表现较分明，三个供试品种净叶黄、g28和云烟87的发病率分别为16.67％(图3,b)、66.7％(图3,c)和90％(图3,e)及33.3％(图3,f)、50.0％(图3,h)和100％(图3,i)；病情指数分别为9.26、24.07和53.70及9.63、15.85和57.41。因此，综合发病程度表现，最佳培养时间为10d菌龄的接种物制备孢子悬浮液接种易于致病性测定的研究。如图3不同菌龄接种效果的比较；注：(a)～(c)：净叶黄；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：云烟87；(a),(d),(g)：5d；(c),(e),(h)：10d；(c),(f),(i)：15dfig.3comparisonoftheeffectofdifferentfungalagenote：(a)～(c)：jingyehuang；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：yunyan87；(a),(d),(g)：5d；(c),(e),(h)：10d；(c),(f),(i)：15d。表3不同菌龄接种效果的比较table3comparisonoftheeffectofdifferentfungalage注：同列数据后字母不同代表差异显著(p＜0.05)不同叶龄对接种效果的影响：于接种后第8d调查各部位叶片的发病情况(图4)，试验结果表明，三个品种发病程度的强弱顺序为云烟87>g28>净叶黄，发病时间随着叶龄的增加而缩短。接种后5d时，下二棚部位叶片接种点开始出现病斑，随接种时间增加，病斑扩大迅速，至第8d时，病斑发展为圆形、褐色坏死斑且周围的褪绿晕圈明显，且三个品种均发病。发病率和病情指数分别为66.67％(图4,c)、50％(图4,f)和100％(图4,i)及7.4、20.37和47.47；中部叶片接种后第7d，接种点周围出现明显坏死斑，但病斑扩展缓慢，有褪绿晕圈，云烟87发病最快、最明显，发病率和病指分别为100％(图4,h)和41.11，其次是g28，其发病率和病指分别为16.67％(图4,e)和6.67，净叶黄未发病(图4,b)；上部叶片的所有接种点部位除云烟87发病明显，发病率和病指分别为100％(图4,g)和14.44，净叶黄和g28均无坏死斑出现，个别接种点周围有褪绿的晕圈，发病不明显。因此，赤星病人工注射接种最佳接种效果需选择下二棚叶片。如图4不同叶龄对接种效果的比较；注：(a)～(c)：净叶黄；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：云烟87；(a),(d),(g)：5d；(b),(e),(h)：10d；(c),(f),(i)：15dfig.4comparisonoftheeffectofdifferentleafagenote：(a)～(c)：jingyehuang；(d)～(f)：g28；(g)～(h)：yunyan87；(a),(d),(g)：5d；(b),(e),(h)：10d；(c),(f),(i)：15d。表4不同叶龄对接种效果的比较table4comparisonoftheeffectofdifferentleafage注：同列数据后字母不同代表差异显著(p＜0.05)工作原理，s1：赤星病菌培养：将活化的供试菌株打取菌饼，转接到pda平板上，分别于28℃恒温培养5d、10d、15d，备用；s2：接种体的制备：制备菌丝块接种体、菌丝接种体、孢子液接种体，孢子液浓度分别为105、106、107孢子/ml浓度；s3：叶片伤口注射：包括以下步骤：t1：选取烟株下部叶脚叶，经75％酒精棉球擦拭和无菌水清洗后，置于干净的育苗托盘中，每个叶片取6～10个接种点，针头刺破接种点部位叶片的表皮，即制造伤口准备接种；t2：用注射器且去掉针头吸取不同供试浓度的分生孢子悬浮液，然后通过手指抵住带有伤口的接种点叶片背面，同时从叶片正面的接种点处缓慢注入叶片叶肉组织内，接种量为10μl，对照叶片接种点注射等量无菌水，每次处理2个叶片，3次重复；t3：接种后的叶片叶基处用浸泡无菌水的脱脂棉球保湿，托盘覆盖保鲜膜保湿并置于28～30℃的人工气候室中，黑暗培养8h后，以日光灯照明，日照时数为每日12h，3天后观察并跟踪调查接种后发病情况，接种后10d，跟踪记录各处理的发病率，调查病情指数和病斑大小。第二实施例请结合参阅图6、图7和图8，基于本申请的第一实施例提供的烟草赤星病人工接种鉴定方法，本申请的第二实施例提出另一种烟草赤星病人工接种鉴定方法。第二实施例仅仅是第一实施例优选的方式，第二实施例的实施对第一实施例的单独实施不会造成影响。具体的，本申请的第二实施例提供的烟草赤星病人工接种鉴定方法的不同之处在于，烟草赤星病人工接种鉴定方法，还包括叶片接种器，所述叶片接种器安装板1，所述安装板1的一侧设置有夹取组件2，所述安装板1的正面且位于夹取组件2的一侧通过球形连接件设置有限位组件3，所述安装板1上设置有传动组件4。所述夹取组件2包括基板21，所述基板21固定于所述安装板1正面的一侧，所述基板21的一侧对称固定连接有两组定位杆23，所述定位杆23的表面滑动连接有u形夹板22。每组定位杆23数量设置有两个。所述定位杆23的端部固定连接有挡块，所述定位杆23的表面且位于所述挡块和u形夹板22之间套设有第一弹性件24，所述u形夹板22和基板21相对的一侧均粘接有胶垫25，所述u形夹板22的一侧固定连接有提升杆26，所述提升杆26的一侧固定连接有拉块27，所述拉块27通过条形槽5延伸至安装板1的背面。胶垫25为硅胶材质，条形槽5开设于安装板1中间位于u形夹板22的一侧。所述限位组件3包括u形固定件31，所述u形固定件31通过球形连接件固定于所述安装板1的正面，所述u形固定件31的两侧均贯穿有支撑杆32，所述支撑杆32的端部且位于u形固定件31的内部固定连接有弧形限位件33。球形连接件包括安装块，安装块的一侧开设有球形槽，球形槽内部设置球形件，u形固定件31的一侧与球形件固定连接。所述定位杆23的表面且位于弧形限位件33与u形固定件31之间套设有第二弹性件35，所述弧形限位件33的内侧粘接有橡胶垫34。所述传动组件4包括两个滑杆41、带动块42和矩形槽43，两个所述滑杆41分别通过连接块固定于所述安装板1的两侧，所述矩形槽43开设于所述安装板1上且位于限位组件3的一侧，所述带动块42贯穿于矩形槽43的内部。所述滑杆41的表面滑动连接有滑块44，所述滑块44的正面转动连接有转动杆46，所述转动杆46的一端转动连接有连接块47，所述连接块47的一侧贯穿u形固定件31且延伸至u形固定件31的内部，所述连接块47与所述弧形限位件33的一侧固定连接。转动杆46的两端分别通过球形转动件与滑块44的正面与连接块47的端部固定连接。所述滑块44的底部转动连接有传动杆45，所述传动杆45的一端与所述带动块42的一侧转动连接，所述带动块42的一侧且位于所述安装板1的背面固定连接有提耳48。在接种时，首先对叶片接种器进行消毒清洗，然后通过手指拉动拉块27，带动u形夹板22压缩第一弹性件24，与基板21分离，然后使待接种的叶子位于基板21与u形夹板22之间，松开拉块，通过第一弹性件24的作用将叶子夹紧，且通过设置胶垫，可以防止损坏叶子；然后将注射器放置到两个弧形限位件33之间，通过第二弹性件35将其夹紧，由于u形固定件31通过球形连接件与安装板1固定，在注射时，可以调整注射器的角度，对不同的接种位置进行注射，使用方便；在对叶子进行接种时，按压注射器的推柄时，可以通过手指向上拉动提耳48，提耳48向上推动滑块44，滑块44向上移动并带动转动杆46推动连接块47，连接块47推动弧形限位件33将注射器表面夹紧，防止在推动推柄时，使注射器相对弧形限位件33移动；通过设置叶片接种器，在接种时，不需要通过手部拿取叶子，极大减少叶子受到污染的几率，且使用方便。需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属
技术领域：
：技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。当前第1页12当前第1页12