诱导毁灭炭疽菌产孢培养基、制备方法及诱导产孢的方法与流程

文档序号:23542017发布日期:2021-01-05 20:51阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种诱导毁灭炭疽菌产孢培养基,其特征在于,1l培养基中包括下述质量分数的组分:

2.根据权利要求1所述的一种诱导毁灭炭疽菌产孢培养基,其特征在于,1l培养基中包括下述质量分数的组分:

3.根据权利要求1-2任一所述的一种诱导毁灭炭疽菌产孢培养基的制备方法,其特征在于,包括下述步骤:

1)称量:按照质量称取莜麦、葡萄糖、牛肉浸膏、琼脂、红心莲多肉叶片和水,备用;

2)研磨、过滤:取多肉叶片,并研磨成匀浆,过滤,取滤液;

3)将步骤2)所得滤液与步骤1)所得莜麦、葡萄糖、牛肉浸膏和琼脂混合,加水溶解,得溶液;

4)将步骤3)所得溶液在115-125℃下灭菌20-30min,冷却至45-55℃,每升培养基添加100μl浓度为50μg/ml的利福平,混合均匀,倒入培养皿中凝固,制得产孢培养基,备用。

4.一种诱导毁灭炭疽菌产孢的方法,其特征在于,以权利要求3制备得到的产孢培养基进行诱导,包括下述步骤:

1)菌株活化:将分离得到的毁灭炭疽菌菌株接种到pda培养基平板上,置于25-30℃恒温培养箱中光照培养2-3d,得活化菌株;

2)菌丝体培养:将步骤1)所得活化菌株转接种到所述产孢培养基中,在25-30℃恒温培养箱中光照培养4-6d,至菌丝体直径长至5-8cm;

3)分生孢子培养:将步骤2)所得菌丝体中直径为3-5cm的气生菌丝去除,露出黑褐色的分生孢子盘,并对分生孢子盘冲洗2-3次,然后将培养基倒扣自然晾干,在25-30℃的恒温培养箱中,光周期l:d=12:12的条件下培养3-5d,得分生孢子;

4)分生孢子附着孢诱导:取1cm2步骤3)中获得的菌块,将菌块上的分生孢子盘洗下并在水中捣破,用水定容至100ml,在25-30℃培养箱内黑暗培养24-48h,诱导分生孢子附着孢形成。

5.根据权利要求4所述的一种诱导毁灭炭疽菌产孢的方法,其特征在于,步骤1)中,所述pda培养基包括:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g和水1l。

6.根据权利要求1所述的一种诱导毁灭炭疽菌产孢的方法,其特征在于,步骤1)中,所述毁灭炭疽菌由福建省农科院植物保护研究所提供,其在ncbi/genbank的登录号为mn151373。


技术总结
本发明公开了一种诱导毁灭炭疽菌产孢培养基,1L培养基包括莜麦60‑80g、葡萄糖20‑30g、牛肉浸膏10‑15g、琼脂15‑20g、红心莲多肉叶片80‑100g和水1L;制备过程包括:称取、过滤、混合、灭菌;诱导过程包括:菌株活化、菌丝体培养、分生孢子培养和分生孢子附着孢诱导。

技术研发人员:姚锦爱;黄鹏;余德亿
受保护的技术使用者:福建省农业科学院植物保护研究所
技术研发日:2020.09.19
技术公布日:2021.01.05
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