g/l，柠檬酸二铵2 g/l，麸皮浸出液100 ml/l，复合氨基酸1 g/l，核苷酸0.5 g/l；改良mrs固体培养基即添加2%琼脂粉，121℃灭菌15min；改良mrs液体培养基中复合维生素b终浓度为0.5 g/l，过滤除菌。调节ph至3.5在超净工作台用过滤除菌后乳酸:乙酸=1:1调节改良mrs液体培养基ph至3.5。
[0010]
2）取1 ml变质食醋样品，加入带50 ml改良mrs液体培养基的150 ml锥形瓶中，33℃下静置培养3 d。
[0011]
3）取样涂布于改良mrs固体培养基平板上，置于厌氧罐中33℃培养一周后，形成肉眼可见的菌落，经反复分离纯化，得到菌株z-1。
[0012]
4）将乳杆菌lactobacillus sp. z-1接种于塑瓶装的高温灭菌6
°-7°
食醋中，拧紧瓶盖，培养7-14天，塑瓶膨胀，发生明显产气胀瓶现象。
[0013]
本发明提取菌株z-1的基因组dna并以此为模板采用通用引物27f和1492r扩增16s rdna，对扩增产物测序，并在ncbi上选取高相似度序列，用mega-x软件构建系统发育树。
[0014]
所述一株导致食醋胀气变质的污染菌乳杆菌lactobacillus sp.z-1的16s rdna序列为：tcgcccttgagagtttgatcctggctcaggatgaacgctggcggtgtgcctaatacatgcaagtcgcgcgcactcccgtagatgattttgatgctctgcatcaaatgattctacattcgagtgagcggcggatgggtgagtaacacgtgggtaacttgcccttgagtctgggatagcatctggaaacggatgataataccggataacaactgaaaccacatggtttcagtttgaaaggcgcgtttgcgtcgctcttggagggacccgcggtccattagttagttggtaagataaaggcctaccaagacgatgatggatagccgaactgagaggttaatcggccacattggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagcagtagggaatctttcacaatgggcgaaagcctgatgaagcaacaccgcgtgaatgaagaagggtttcggctcgtaaaattctgttgctagagaagaacgtaccaagtaggaaatggcttggtagtgacggtatctggttagaaagtcacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttatccggatttattgggcgtaaagcgagcgcaggcggttgtttaagtccgatgtgaaagccttcggcttaaccgaagaagtgcattggaaactgagcgacttgagtacagaagaggacagtagaacaccatgtgtagcggtgaaatgcgtagatatatggtagaataccagtggcgaaagcggctgtctggtctgtcactgacgctgaggctcgaaagcatgggtagcaaacaggattagataccctggtagtccatgctgtaaacgttgagtgctaggtgttagaggatttccgtcctttagtgccgaagttaacacattaagcactccgcctggggagtacgaccgcaaggttgaaactcaaaggaattgacggggacccgcacaagtggtggagcatgtggtttaattcgatgctacgcgaagaaccttaccaggccttgacatacttctgttaggctaagagattagctgttcccttcggggacagatctacaggtggtgcatggtcgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggtcaagtcccgcaacgagcacaacccttgtgactagttgccagcattcagttgggcactctagtcagactgccggtgataaaccggaggaaggtgaggatgacgtctgatcatcatgccccttatggcctgggctacacacgtgctacaatggacagtacaatgggttgcgaaaccgcgaggtcaagctaatcccataaagctgttctcagttcggactgcagtctgcaactcgactgcacgaagctggaatcactagtaatcgtggatcagcatgccacggtgaatacgttcccgggtcttgtacataccgcccgtcacaccatgagagtccgtaacacccaaagatagtgcggcaacctcttttgaggagccagctatctaaggtgggacgaatgattagggtgaagtcgtaacaaggtagccgtaaagggcgacacgcgaattcgatatcaagcttcaggtctgcagtcaatacga。
附图说明
[0015]
图1是乳杆菌lactobacillus sp. z-1的菌落形态和显微形态图。
[0016]
图2为乳杆菌lactobacillus sp. z-1的系统发育树。
具体实施方式
[0017]
以下实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。
[0018]
实施例1：菌株的分离（1）胀壶食醋样品取自四川某麸醋厂，样品编号d-2，表现出胀壶现象，醋液发粘变黄，醋香弱，伴有淡腐味。样品经低温保存后运送至实验室进行下一阶段研究工作。
[0019]
（2）取150 ml锥形瓶，洗净后加入50 ml改良mrs培养基，胶塞封口，121℃高温灭菌20min，待体系冷却至室温后，在超净工作台补加复合维生素b溶液，调节ph至3.5。取1 ml变质食醋样品，加入带50 ml改良mrs培养基的150 ml锥形瓶中，33℃下静置培养3 d；取样涂布于改良mrs固体培养基平板上，置于厌氧罐中33℃培养一周后，形成肉眼可见的菌落，经反复分离纯化，得到纯菌z-1。将纯菌z-1接种于塑瓶装经过高温灭菌的6
°-7°
食醋中，拧紧瓶盖，培养7-14天，塑瓶膨胀，发生明显产气胀瓶现象。
[0020]
实施例2：对菌株z-1进行鉴定（1）革兰氏染色、过氧化氢酶实验革兰氏染色：挑取平板上的菌落进行涂片、固定、结晶紫初染、媒染、脱色、番红复染，干燥，镜检；过氧化氢酶实验：待测菌先于空气中暴露30min，用毛细管吸取少量3% h2o2滴于平板表面所生长的菌落。如不产气泡则为过氧化氢酶阴性。
[0021]
（2）菌落形态、菌体显微形态观察及生理生化鉴定肉眼观察菌株的菌落形态特征，观察结果见图1a，该菌株呈圆形，米黄色，表面光滑湿润，边缘规则，中央微凸起。革兰氏染色后，于光学显微镜油镜下观察菌株的细胞形态特征，观察结果见图1b，其细胞形态呈杆状，革兰氏染色阳性，过氧化氢酶阴性。
[0022]
（3）16s rdna序列分析鉴定提取该菌的基因组dna并以此为模板采用通用27f，1492r引物扩增16s rdna片段，并在ncbi上选取高相似度序列，用mega-x计算出序列的系统进化距离，构建系统发育树，参见图2；将16s rdna测序结果与基因库中序列进行同源性比对，并结合形态学和生理生化指标，最终将菌株z-1鉴定为乳杆菌lactobacillus sp.。
[0023]
以上的实例仅仅是对本发明的实施方式进行描述，而并非对本发明的范围进行限定，对于本领域的技术人员来说，可以对上述说明进行改进或变形，但所有的这些改进或变形均应落入本发明的权利要求确定的保护范围。