一种用于广谱抑菌试验的培养皿分区器及其使用方法与流程

[0001]
本发明属于微生物实验工具领域，具体涉及一种用于广谱抑菌试验的培养皿分区器及其使用方法。


背景技术：

[0002]
在生产、科研中抑菌试验常用的抑菌圈法又叫扩散法，是利用待检品在琼脂培养基内扩散作用，使琼脂培养基上特定试验菌生长受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈，根据抑菌圈有无及大小判断和检测待检品抑菌性能及抑菌效价的一种方法。
[0003]
现有技术中，测定抑菌圈使用最多的主要有纸片法、牛津杯法和打孔法，常用于抗生素、细菌素产生菌的分离筛选、效价测定，中药材提取物抑菌性能等研究，进行抑菌物质的广谱抑菌性能检测。但是上述方法测定抑菌圈时，每个平板实验仅能检测抑菌物质对单一菌株的抑菌性能，导致抑菌试验周期长，工作量大，效率低下。目前尚无一次同时对多种指示菌的抑菌性能进行分析和检测的广谱抑菌试验解决方案。


技术实现要素：

[0004]
本发明为克服现有技术的不足和缺陷，提供了一种用于广谱抑菌试验的培养皿分区器，本发明还提供了上述广谱抑菌试验培养皿分区器的使用方法。
[0005]
本发明的目的一是提供一种用于广谱抑菌试验的培养皿分区器，所述培养皿分区器由中心柱和分区圈构成，具体结构如下：所述培养皿分区器包括位于圆心的中心柱和分区圈，分区圈包括外圈和至少两个其一端固定于外圈内侧、另一端可与中心柱结合和分离的、高度与外圈相同的直立辐状分区板，外圈直径小于对应的培养皿皿底内径，分区板高度小于对应的培养皿皿底深。
[0006]
作为优选，所述分区板均匀分布。
[0007]
作为优选，所述中心柱为圆管或圆柱。
[0008]
作为优选，在所述中心柱外侧与分区板内端相匹配的部位设置有与分区板配合的底部贯穿的卡槽。
[0009]
作为优选，所述分区器表面平滑。
[0010]
作为优选，所述分区板的数量为6个。
[0011]
作为优选，所述分区器采用不锈钢或耐高温塑料制成。
[0012]
本发明的目的二是提供上述广谱抑菌试验培养皿分区器的使用方法，包括如下步骤：a.制备底层培养基 无菌培养皿中注入热融的琼脂培养基，使其在培养皿内均匀摊布，底层表面平整，放置在水平台面上冷却凝固，作为底层培养基；b.制备分区菌层固体培养基 将无菌的广谱抑菌试验培养皿分区器垂直放置于底层固体培养基上，轻压分区器，使分区器与底层培养基表面紧密接触，防止出现缝隙导致漏液、混液，各个分区中分别加入等量48～52℃含不同指示菌的琼脂培养基，均匀摊布，菌层表面
平整，放置在水平台面上冷却凝固；c.加入试验抑菌物质样品 待步骤（b）培养皿各个分区中含不同指示菌琼脂培养基冷却凝固后，取出中心柱，在原中心柱位置形成的琼脂培养基孔洞中加入一定量的试验抑菌物质样品液体溶液；d.培养及判断 将步骤（c）添加完试验抑菌物质样品的培养皿，置于培养箱中培养后，观察各个分区有无抑菌扇环形成，判断试验抑菌物质广谱抑菌效果，并根据扇环半径初步判断抑菌物质样品对不同指示菌抑菌性能的高低。
[0013]
作为优选，所述步骤（d）中，培养的温度为20℃～42℃，培养时间为12 h ～24 h。
[0014]
本发明提供的一种用于广谱抑菌试验培养皿分区器及其使用方法，根据分区圈中分区板分区数目可进行相同数目不同指示菌抑菌试验，操作过程简便，可一次性同一培养皿进行对多种指示菌抑菌效果的判断和检测，特别在广谱抑菌物质生产菌株和中药材提取液及广谱抑菌物质的筛选时，极大的提高了筛选效率。实现了一次同一培养皿中进行抑菌物质对不同指示菌的抑菌性能判断和检测，有效节省操作时间，提高了广谱抑菌试验效率。适用于抗生素、细菌素、中药提取物等的广谱抑菌物质筛选和抑菌性能研究。使用方便，灭菌处理后，可重复使用。
附图说明
[0015]
图1是实施例1所述用于广谱抑菌试验的培养皿分区器的结构示意图；图2是实施例1所述中心柱结构示意图；图3是实施例1所述分区圈结构示意图；图4是实施例2所述于广谱抑菌试验的培养皿分区器的结构示意图；图5是实施例2所述中心柱结构示意图；图6是实施例2所述中心柱的剖面图；如图所示，1为中心柱，2为分区圈，21为外圈，22为分区板，11为卡槽。
具体实施方式
[0016]
下面结合具体实施实例对本发明进行详细说明。以下实施实例有助于此领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
[0017]
实施例1如图1所示为一种用于90mm培养皿的广谱抑菌试验的培养皿分区器，由中心柱1和分区圈2组成，中心柱1是一个直径8mm，高度12mm的圆管，分区圈2由外圈21和分区板22组成，外圈21为一圆环，分区板22为直立辐状板，分区板22外端与外圈21内侧固定连接，内端指向外圈21圈心，与中心柱1可连接和分离，分区圈2高度10mm。分区板22数量为6片，在分区圈2内同间隔均匀分布。分区圈外圈直径88mm，分区器采用不锈钢材料制成，分区器表面光滑平整。
[0018]
实施例2如图4是一种用于120mm培养皿的广谱抑菌试验的培养皿分区器，由中心柱1和分区圈2
组成，中心柱1是一个直径10mm，高度12mm的圆柱体，在中心柱1外侧与分区板22内端相匹配的部位设置有与分区板内端配合的底部贯穿的卡槽11，分区圈2由外圈21和分区板22组成，外圈21为一圆环，分区板22为直立辐状板，分区板22外端与外圈21内侧固定连接，内端插在卡槽11内，分区圈2高度10mm。分区板22数量为6片，在分区圈2内同间隔均匀分布。分区圈外圈直径118mm，分区器采用耐高温塑料制成，分区器表面光滑平整。
[0019]
实施例3实施例1和2中提供的一种用于广谱抑菌试验的培养皿分区器的使用方法，具体包括如下步骤：a.制备底层固体培养基 无菌培养皿中注入热融的琼脂培养基，使其在培养皿内均匀摊布，底层表面平整，放置在水平台面上冷却凝固，作为底层固体培养基；b.制备分区菌层固体培养基 将无菌的广谱抑菌试验分区器垂直放置于底层培养基上，轻压分区器，使分区器与底层培养基表面紧密接触，防止出现缝隙导致漏液、混液，各个分区中分别加入等量48～52℃含不同指示菌的琼脂培养基，均匀摊布，菌层表面平整，放置在水平台面上冷却凝固；c.加入试验抑菌物质样品 待步骤（b）培养皿各个分区中含不同指示菌琼脂培养基冷却凝固后，取出中心柱，在原中心柱位置形成的琼脂培养基孔洞中加入一定量的试验抑菌物质样品液体溶液；d.培养及判断 将步骤（c）添加完试验抑菌物质样品的培养皿，置于培养箱中培养后，观察各个分区有无抑菌扇环形成，判断试验抑菌物质广谱抑菌效果，并根据扇环半径初步判断抑菌物质样品对不同指示菌抑菌性能的高低。