1.本发明涉及食品生物技术领域，具体地，涉及一种保湿性鱼肉蛋白肽及其制备方法与应用。
背景技术：
2.皮肤作为人体重要的器官，保护体内器官和组织免受损伤，同时可形成天然的保湿系统。角质层是保持皮肤水分的重要部分，具有很强的吸水能力和屏障功能。角质层含有10％～20％的水分，当水分含量低于10％时，皮肤就会干燥粗糙，失去弹性，逐渐老化，主要原因是外界环境干燥或者皮肤吸收和保持水分的能力受到损伤，因此，保湿性是要求护肤化妆品具有的关键性能之一。
3.胶原蛋白是所有动物体内含量丰富的一种常见的蛋白质。胶原蛋白是所有动物细胞，组织以及器官的重要组成部分，其作为重要的纤维组成部分主要分布在皮肤、骨、肌腱、角膜、内脏细胞间质、结缔组织、韧带、血管、牙齿、巩膜等组织、器官中。胶原蛋白是组成所有动物细胞细胞骨架的重要元素，起着支撑器官、保护肌体的作用。胶原蛋白作为真皮的主要成分之一，含有大量的甘氨酸、羟脯氨酸、天冬氨酸等天然保湿因子，能够保持皮肤中的水分，胶原纤维的网状架构能够维持皮肤的张力和承受拉力，保持皮肤的弹性。
4.肽的可溶性强，容易被吸收，生物效价和营养价值比游离氨基酸高，许多活性肽不仅能提供人体生长、发育所需的营养物质与能量还具有防治疾病、调节人体生理机能的重要功能。这些功能是原料食品蛋白质或其组成氨基酸所不具备的，这也是目前活性肽引起广泛重视的重要原因之一。酶解法水解天然蛋白是目前制备肽的最广泛应用的一种方法，该法条件温和，产品安全度高。因此，由胶原蛋白制备的胶原蛋白肽一直备受关注，因其具有良好的生物相容性、易降解性、保湿吸湿性以及抗氧化等特点，已广泛应用于医药、食品、化妆品、功能材料等领域。
5.关于胶原蛋白肽的保湿作用的专利申请有很多，如公布号为cn 106191189 a的中国专利公开了一种金枪鱼皮高保湿活性肽的制备方法及其应用；公布号为cn101608203a的中国专利公开了一种具有保湿效果的鱼皮胶原肽及其制备工艺和用途；公布号为cn 111012692 a的中国专利公开了一种基于鱼鳔低聚肽的保湿修复面膜，现有技术公开的蛋白肽多是以鱼皮或者鱼鳔等胶原蛋白含量高的作为原料，不同鱼皮或者鱼鳔，鱼肉是鱼体中占比最大的组织，鱼肉蛋白质必须氨基酸种类、数量平衡，营养价值良好且优于鱼皮与鱼鳔。因此，从鱼肉中提取的高质量蛋白质肽具有更加广阔的应用前景。
技术实现要素：
6.本发明的目的在于提供一种保湿性鱼肉蛋白肽的制备方法。
7.本发明的第二个目的在于提供一种保湿性鱼肉蛋白肽。
8.本发明的第三个目的在于提供一种保湿性鱼肉蛋白肽的应用。
9.本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：
10.一种保湿性鱼肉蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
11.s1.将新鲜罗非鱼去内脏、去鳃、清洗、切块，采肉机采肉得到罗非鱼肉糜；
12.s2.将步骤s1的罗非鱼肉糜与水混合均匀，加入蛋白酶进行酶解，升温对蛋白酶进行灭活处理，经离心、微滤膜过滤而得的鱼蛋白肽水解物。
13.利用罗非鱼肉糜为原料，通过酶解技术制备鱼肉蛋白肽，由上述方法得到多肽粗蛋白干基含量在90.0％以上，分子量在3000道尔顿以下的占95％以上，1000道尔顿以下的占75％以上。
14.优选地，步骤s2所述罗非鱼肉糜与水的质量比为1：(1～3)。
15.更优选地，步骤s2所述罗非鱼肉糜与水的质量比为1：(2～2.5)。
16.优选地，步骤s2所述蛋白酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰酶、动物蛋白水解酶中的任意一种或多种。
17.优选地，步骤s2所述蛋白酶按照肉糜重量计为500iu/g～1600iu/g。
18.更优选地，步骤s2所述蛋白酶按照肉糜重量计为1000iu/g。
19.优选地，步骤s2所述酶解时间为3～5h。
20.更优选地，步骤s2所述酶解时间为4h。
21.步骤s2所述酶解温度为45～55℃。
22.优选地，步骤s2所述蛋白酶灭活的温度为85～90℃。
23.优选地，步骤s2所述蛋白酶灭活时间为10～30min。
24.更优选地，步骤s2所述蛋白酶灭活时间为15min。
25.优选地，步骤s2所述为微滤膜的孔径为50～200nm。
26.上述制备方法得到的鱼肉蛋白肽在制备化妆品和/或药品中的应用。
27.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
28.本发明提供的一种保湿性鱼肉蛋白肽，制备工艺过程简单，操作容易，利于实现产业化生产。本发明提供的鱼肉蛋白肽的保湿性能良好，要达到相同的保湿性能，鱼肉蛋白肽的用量显著低于甘油，即质量百分比低至1％的鱼肉蛋白肽与质量百分比为10％的甘油的保湿性能相差不大，因此鱼肉蛋白肽的保湿性能显著优于甘油。
具体实施方式
29.以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
30.除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
31.实施例1鱼肉蛋白肽的制备
32.将新鲜罗非鱼去内脏、去鳃、清洗、切块，采肉机采肉得到罗非鱼肉糜；取4.5kg罗非鱼肉糜放入30l酶解罐中，按质量比为1:2加入自来水，搅拌均匀，待物料水溶液温度达到50℃，同时加入中性蛋白酶(500iu/g肉糜)和木瓜蛋白酶(425iu/g肉糜)，酶解5小时后，升温至90℃灭酶15分钟，酶解液冷却后，采用三足式离心机离心(内衬300目滤袋)去渣，采用膜孔径为200nm的无机管式陶瓷膜对离心后的酶解液进行循环式微滤，当残留液体积约为进料液的10％时，停止操作，得到透过液，透过液经真空浓缩至固形物含量20％以上，经喷雾干燥制备成干粉即为鱼蛋白肽粉，得率为肉糜的8.3％。蛋白肽的粗蛋白干基含量为
92％，灰分4.53％，脂肪0.7％；分子量在3000道尔顿以下的多肽占98.64％，1000道尔顿以下的占76.37％。
33.实施例2鱼肉蛋白肽的制备
34.将新鲜罗非鱼去内脏、去鳃、清洗、切块，采肉机采肉得到罗非鱼肉糜，取5.5kg罗非鱼肉糜放入30l酶解罐中，按质量比为1:2.5加入自来水，搅拌均匀，待物料水溶液温度达到50℃，同时加入中性蛋白酶(500iu/g)和木瓜蛋白酶(425iu/g)，酶解4小时后，升温至85℃灭酶20分钟，酶解液冷却后，采用三足式离心机离心(内衬200目滤袋)去渣，采用膜孔径为100nm的无机管式陶瓷膜对离心后的酶解液进行循环式微滤，当残留液体积约为进料液的10％时，停止操作，得到透过液，透过液经真空浓缩至固形物含量20％以上，经喷雾干燥制备成干粉即为鱼蛋白肽粉，得率为肉糜的7.6％。蛋白肽的粗蛋白干基含量为91.8％，灰分4.62％，脂肪0.65％；分子量在3000道尔顿以下的多肽占98.1％，1000道尔顿以下的占75.52％。
35.实施例3鱼肉蛋白肽的制备
36.将新鲜罗非鱼去内脏、去鳃、清洗、切块，采肉机采肉得到罗非鱼肉糜；取5.0kg罗非鱼肉糜放入30l酶解罐中，按质量比为1:3加入自来水，搅拌均匀，待物料水溶液温度达到50℃，同时加入中性蛋白酶(500iu/g肉糜)和木瓜蛋白酶(425iu/g肉糜)，酶解5小时后，升温至85℃灭酶30分钟，酶解液冷却后，采用三足式离心机离心(内衬300目滤袋)去渣，采用膜孔径为150nm的无机管式陶瓷膜对离心后的酶解液进行循环式微滤，当残留液体积约为进料液的10％时，停止操作，得到透过液，透过液经真空浓缩至固形物含量20％以上，经喷雾干燥制备成干粉即为鱼蛋白肽粉，得率为肉糜的9.0％。蛋白肽的粗蛋白干基含量为91.2％，灰分4.70％，脂肪0.68％；分子量在3000道尔顿以下的多肽占98.20％，1000道尔顿以下的占77.2％。
37.测试例1鱼肉蛋白肽的体表保湿性能测试实验
38.将罗非鱼肉肽配置成质量百分比为1％的水溶液，随机挑选10位20～25年龄段的皮肤健康受试者，选取他们的前臂内侧相同区域4cm
×
4cm处为接受测试的部位，均匀涂抹0.1ml的1％的样品水溶液，对照组的受试者在相同部位抹等量的质量百分比为10％的甘油溶液，空白组的受试者在相同部位抹等量的蒸馏水。用皮肤水分测试仪分别测定10min、30min、60min后涂抹区域的皮肤含水率，在同一区域内选取3～4个不同的点进行检测，然后取平均值为测定值，将测定的皮肤含水率减去未涂抹样品或甘油前的皮肤含水率得到该时段的测定值。
39.本实验要求受试部位实验前2～3天不能使用任何护肤品，另外，受试者需要提前进入测试环境，稍作休息后再开始进行实验。
40.体表保湿效果评价的计算公式：
41.相对保湿率(％)＝(p
样t＝x
﹣p
空白
)
×
100％
42.结果分析：鱼肉蛋白肽的体表保湿性测试结果如表1所示。表1的数据显示，质量百分比仅为1％的罗非鱼肉肽水溶液的保湿性与质量百分比为10％的甘油基本一致，即罗非鱼肉肽的保湿性能与甘油的保湿性能相当。
43.表1鱼肉蛋白肽的体表保湿性测试结果
44.名称10min30min60min
实验组18.5％16.8％16.5％对照组18.8％18.7％17.2％
45.上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。