1.一种大规模生产重组exendin-4多肽的发酵方法,采用pet32a(+)-exendin-4/bl21(de3)发酵培养,其特征在于,在发酵中,以乳糖作为发酵培养的诱导剂。
2.根据权利要求1所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,诱导的条件为,加入乳糖的终浓度为5g/l-20g/l;可选的为5g/l。
3.根据权利要求1或2所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,所述的诱导的条件为,诱导温度为25℃-40℃,诱导时间为4-6小时;
可选的,所述的诱导温度为25℃-30℃或30℃-40℃;
可选的,所述的诱导时间为4-6小时,可选的为6小时。
4.根据权利要求1-3任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,发酵过程还包括加入补料培养基的步骤;
可选的,在开始诱导时加入补料培养基;
可选的,发酵使用的发酵培养基为tb培养基;
可选的,所述tb培养基含有8ml/l甘油。
5.根据权利要求1-4任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,菌体od600值为8~12时,加入诱导剂。
6.根据权利要求1-5任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,发酵培养基的体积为50l-500l;可选的,为200l。
7.根据权利要求1-6任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,
诱导剂分1-6次加入;可选的为诱导剂分2-6次加入;可选的,将开始诱导时记为第0小时,于第0、1、2、3、4小时各加1/5体积诱导剂。
8.根据权利要求1-7任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,发酵之前还包括:1)一级种子制备和2)二级种子制备的步骤。
9.根据权利要求1-8任一所述的生产重组exendin-4多肽的发酵方法,其特征在于,补料培养基由mgso4·7h2o、胰蛋白胨、酵母提取物和甘油组成,mgso4·7h2o的浓度为11-12g/lg/l,胰蛋白胨的浓度为98g/l-102g/l、酵母提取物的浓度为98g/l-102g/l,甘油的体积百分数为20%。