技术特征:
1.一种诱导造血干细胞分化为巨核系细胞的补液培养基,其特征在于,包括:基础培养基;血小板生成素;重组人干细胞因子;白介素
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3;白介素
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6;泊洛沙姆188;芳香烃受体拮抗剂;粒细胞巨噬细胞集落刺激生长因子;白介素
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11;以及氨基酸。2.根据权利要求1所述的补液培养基,其特征在于,所述血小板生成素的浓度为10~200ng/ml,优选80~120ng/ml;任选地,所述重组人干细胞因子的浓度为10~200ng/ml,优选80~120ng/ml;任选地,所述白介素
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3的浓度为5~60ng/ml,优选10~50ng/ml;任选地,所述白介素
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6的浓度为10~200ng/ml,优选80~120ng/ml;任选地,所述泊洛沙姆188的浓度为0.2~3mg/ml,优选0.5~1.5mg/ml;任选地,所述芳香烃受体拮抗剂的浓度为0.2~10μm,优选0.5~1.5μm;任选地,所述粒细胞集落刺激生物因子的浓度为10~60ng/ml,优选20~40ng/ml;任选地,所述白介素
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11的浓度为10~100ng/ml,优选40~60ng/ml;任选地,所述基础培养基选自stemspan无血清培养基。3.根据权利要求1或2所述的补液培养基,其特征在于,所述氨基酸选自半胱氨酸、天冬氨酸和丝氨酸中的至少一种;任选地,所述半胱氨酸的浓度为20~200μm,优选60~100μm;任选地,所述天冬氨酸的浓度为50~500μm,优选200~400μm;任选地,所述丝氨酸的浓度为100~1200μm,优选600~800μm。4.一种诱导造血干细胞分化为巨核系细胞的方法,其特征在于,包括:将单个核细胞接种于第一培养基中进行第一培养,其中,所述第一培养基包括:基础培养基;血小板生成素;重组人干细胞因子;白介素
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3;白介素
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6;泊洛沙姆188和芳香烃受体拮抗剂;以及将所述第一培养获得的细胞接种于权利要求1
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3任一项所述补液培养基中进行第二培养,以便得到巨核系细胞。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在所述第一培养基中,所述血小板生成素的浓度为10~200ng/ml,优选30~70ng/ml;所述重组人干细胞因子的浓度为10~200ng/ml,优选30~70ng/ml;所述白介素
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3的浓度为5~60ng/ml,优选10~30ng/ml;所述白介素
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6的浓度为10~150ng/ml,优选30~70ng/ml;所述泊洛沙姆188的浓度为0.02~3mg/ml,优选0.5~1.5mg/ml;所述芳香烃受体拮抗剂的浓度为0.2~10μm,优选0.5~1.5μm。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述第一培养是在35~39℃及3~7体积%co2下进行5~9天;任选地,所述第二培养是在35~39℃及3~7体积%co2下进行5~14天;任选地,在所述第二培养开始时将所述第一培养所得培养液中的至少部分培养基更换为所述补液培养基,然后在开始所述第二培养后的第4~6天将至少部分培养基更换所述补液培养基。7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在所述第二培养开始时采用的所述补液培养基中含有半胱氨酸;任选地,在开始所述第二培养后的第4~6天更换的所述补液培养基中含有丝氨酸或天冬氨酸和丝氨酸。8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述单个核细胞选自脐带血单个核细胞;任选地,所述脐带血单个核细胞是通过下列方式获得的:将脐带血与羟乙基淀粉混合,静置,收集上清液,将所述上清液离心,收集细胞沉淀;所述细胞沉淀重悬于生理盐水中,添加淋巴细胞分离液,离心,收集细胞沉淀,获得脐带血单个核细胞。9.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述单个核细胞的接种量为1~10
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105个/cm2。