一种细胞培养液存储瓶的制作方法

本实用新型涉及生命科学中细胞生物学技术领域，尤其涉及一种细胞培养液存储瓶。

背景技术：

细胞培养技术已成为当今生命科学各研究领域的基础技术和基本技能，它又是细胞工程、基因工程和生物医学工程的重要研究手段。细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。与传统的平面细胞培养相比较，在灌流式细胞培养过程中，系统由存储瓶、细胞培养皿、废液瓶三部分组成，各部分用乳胶导管相联结，并用一个控制流速的蠕动泵驱动培养液从存储瓶经细胞培养皿流出至废液瓶。与培养液处于静态的平面细胞培养相比较，灌流式细胞培养通过对培养液的单向连续灌注，保证持续新鲜的营养液供应细胞，确保代谢废物从细胞培养皿中及时流走，进而完成细胞的高效增殖。但对于现有灌流式细胞培养中，很多情况下，需要在适当的时机增添生长因子或药品，以调节细胞增殖，诱导细胞分化或研究药品对细胞生长的影响。现阶段，当需要增添生长因子或药品时，通常是直接打开存储瓶的瓶盖，加注生长因子或药品于存储瓶中，这种操作很容易受外界环境的污染，导致细菌进入存储瓶，而影响细胞培养的结果。另外，生长因子或药品加入存储瓶后，需要和细胞培养液进行混匀，一般情况下，都是采用人为手持存储瓶用力摇匀，因在灌流式细胞培养过程中，培养液不能断流，也不能出现气泡，而手持存储瓶进行摇匀的过程中，混合液在存储瓶中做离心运动，容易导致取液管无法抽吸其到细胞培养皿中，且混合液在摇匀过程中产生的气泡，使生长因子或药品不能与细胞发生充分接触，对细胞培养产生负面影响，导致实验结果失效或失真。

技术实现要素：

有鉴于此，本实用新型提出了一种细胞培养液存储瓶，在增添生长因子或药品过程中，保证存储瓶全程密封的状态，细胞培养不受外界环境的影响，同时可以实现细胞培养液与生长因子或药品充分混匀且避免气泡的产生。

本实用新型的技术方案是这样实现的：本实用新型提供了一种细胞培养液存储瓶，包括：

瓶体；

瓶盖，所述瓶盖与瓶体的瓶口处螺纹连接；

取液管，所述取液管的一端插入瓶体内底部，另一端穿过瓶盖顶部一侧并与瓶盖密封连接，且取液管的上端部连接有单向阀；

换气装置，包括换气管、第一细菌滤膜及防护盖，所述换气管底端与瓶盖的内表面相连通，第一细菌滤膜固定设置在换气管的顶端，防护盖与换气管的顶部活动连接，且防护盖上设置有通气孔；

加液装置，包括加液管、锥形口、第二细菌滤膜及密封盖，所述加液管设置在瓶盖的一侧，且加液管的底端穿过瓶盖并延伸至瓶体内，所述锥形口固定连接在加液管的顶端，所述第二细菌滤膜固定设置在锥形口的端面，密封盖活动设置在锥形口上；及，

搅拌装置，设置在瓶盖内，用于对瓶体内的液体进行搅拌。

在上述技术方案的基础上，优选的，所述瓶盖内表面中心处固定设置有筒体，所述筒体的下端面活动设置有连接盖，所述搅拌装置包括旋转本体、旋转杆、弹性件、搅拌轴及搅拌杆，所述旋转本体呈圆盘状，旋转本体设置在筒体内，旋转杆的一端与旋转本体固定连接，另一端穿过瓶盖顶部，搅拌轴的一端与旋转本体的底部端面固定连接，另一端穿过连接盖并延伸至瓶体内底部，搅拌杆活动连接在搅拌轴的底端，旋转本体的顶部端面设置有第一齿牙，瓶盖的内表面设置有与第一齿牙啮合连接的第二齿牙，弹性件套设在旋转本体与连接盖之间的搅拌轴上。

进一步的，所述搅拌轴与连接盖之间设置有第一密封圈。

进一步，优选的，所述搅拌杆设置有一条或多条，搅拌轴的底端设置有用于对搅拌杆进行限位的限位件，所述限位件与搅拌轴的轴线垂直，所述限位件的顶面设置有u型槽，搅拌杆设置在u型槽内，其一端与搅拌轴的底端铰连接，另一端延伸出u型槽。

更进一步，优选的，所述搅拌杆延伸出u型槽的一端底面设置有搅拌叶片。

优选的，所述搅拌杆到瓶体内底面的距离小于取液管到瓶体内底面的距离。

优选的，所述限位件的长度小于瓶体的瓶口内径。

优选的，所述取液管与瓶盖之间通过第二密封圈进行密封连接。

本实用新型相对于现有技术具有以下有益效果：

(1)本实用新型公开的细胞培养液存储瓶，通过在换气装置上设置第一细菌滤膜及防护盖，第一细菌滤膜可以保证瓶体内外气压相同，并阻止细菌进入到瓶体内，从而保证取液管顺利地从瓶体内抽吸洁净的细胞培养液。当需要向瓶体内增添生长因子或药品时，通过打开密封盖，将装有生长因子或药品的试剂管经第二细菌滤膜，通过加液管加入到瓶体内，在添加过程中，通过换气装置保持瓶体内外气压相同的同时，第二细菌滤膜可以阻止细菌通过加液管进入到瓶体内部，从而保证了加液过程中全程密封的状态，使细胞培养免受外界环境污染。在进行加液过程中，通过搅拌装置可以对瓶体内的生长因子或药品在细胞培养液中充分搅拌，此搅拌替代了手持瓶体摇晃的方式，搅拌过程中可以保持取液管持续抽吸混合液，因搅拌过程处于水平搅拌，因此避免了气泡产生，从而避免了细胞培养的实验结果失效或失真。

(2)通过在搅拌轴与连接盖之间设置第一密封圈，取液管与瓶盖之间通过第二密封圈进行密封连接，避免了外界空气通过瓶盖侵入到瓶体内部，进一步保证了细胞培养不受外界环境的影响。

(3)通过搅拌轴与搅拌杆铰接，且搅拌杆上设置限位块，同时限位块的长度小于瓶体的瓶口内径，由此，方便将搅拌装置安装到瓶体内，同时也方便进行拆卸。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本实用新型公开的细胞培养液存储瓶的立体结构示意图；

图2为本实用新型公开的细胞培养液存储瓶的分解示意图；

图3为本实用新型公开的细胞培养液存储瓶的分解示意图；

图4为本实用新型公开的细胞培养液存储瓶的平面剖视图。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施方式，对本实用新型实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式仅仅是本实用新型一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本实用新型中的实施方式，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本实用新型保护的范围。

如图1所示，结合图2-4，本实用新型公开了一种细胞培养液存储瓶，包括瓶体1、瓶盖2、取液管3、换气装置4、加液装置5及搅拌装置6。

其中，瓶体1为广口型，其瓶口外周面具有外螺纹，用来乘装培养液。瓶体1可以为塑料或玻璃材质。

瓶盖2，内周壁设置有内螺纹，与瓶体1的瓶口螺纹连接，从而来封闭瓶体1。

取液管3，用来抽吸瓶体1内的培养液，从而进行三维灌流式细胞培养操作。取液管3的一端插入瓶体1内，且延伸至瓶体1内底部，另一端穿过瓶盖2顶部一侧，取液管3的上端部连接有单向阀31，单向阀31在外界抽吸动力源的作用下，单向打开，从而培养液从瓶体1内抽出，当无抽吸动力时，单向阀31关闭，瓶体1内的培养液无法倒流，同时外界的空气也无法通过单向阀31侵入到瓶体1内。

换气装置4，使瓶体1内外气压相同，包括换气管41、第一细菌滤膜42及防护盖43，换气管41底端与瓶盖2的内表面相连通，第一细菌滤膜42固定设置在换气管41的顶端，防护盖43与换气管41的顶部活动连接，换气管41与防护盖43采用螺旋锁紧方式固定，且防护盖43上设置有通气孔431；由此，通过防护盖43可以保护第一细菌滤膜42免遭意外刺破，通过防护盖43上设置通气孔431，空气通过通气孔431、第一细菌滤膜42及换气管41进入到瓶体1内，由于第一细菌滤膜42的孔径达到0.22μm，可以滤除空气中的细菌。从而保证了瓶体1内外气压相同的同时，阻止外部细菌进入，对瓶体1内的培养液环境造成污染。

加液装置5，用来向瓶体1内增添生长因子或药品，具体的，包括加液管51、锥形口52、第二细菌滤膜53及密封盖54，加液管51设置在瓶盖2的一侧，且加液管51的底端穿过瓶盖2并延伸至瓶体1内，锥形口52固定连接在加液管51的顶端，第二细菌滤膜53固定设置在锥形口52的端面，密封盖54活动设置在锥形口52上。由此，在无需向瓶体1内添加生长因子或药品时，密封盖54与锥形口52密封，从而阻隔外界空气进入。当无需向瓶体1内添加生长因子或药品时，打开密封盖54，将装有生长因子或药品的试剂管经第二细菌滤膜53，通过锥形口52流入到加液管51中，最后进入到瓶体1内。在添加的过程中，通过换气装置4保持瓶体1内外气压相同的同时，第二细菌滤膜53可以阻止细菌通过加液管51进入到瓶体1内部，从而保证了加液过程中全程密封的状态，使细胞培养免受外界环境污染。

搅拌装置6，设置在瓶盖2内，用于对瓶体1内的液体进行搅拌。在进行加液过程中，通过搅拌装置6对瓶体1内的生长因子或药品在细胞培养液中进行搅拌，此搅拌替代了手持瓶体1摇晃的方式，搅拌过程中可以保持取液管3持续抽吸混合液，因搅拌过程处于水平搅拌，避免了气泡产生，从而避免了细胞培养的实验结果失效或失真。

具体的，本实用新型还通过如下技术方案进行实现。

为了在瓶盖2内安装搅拌装置6，在本实施例中，采用瓶盖2内表面中心处固定设置筒体21，筒体21的下端面活动设置有连接盖22，连接盖22与筒套采用螺旋锁紧固定。搅拌装置6包括旋转本体61、旋转杆62、弹性件63、搅拌轴64及搅拌杆65，旋转本体61呈圆盘状，旋转本体61设置在筒体21内，旋转杆62的一端与旋转本体61固定连接，另一端穿过瓶盖2顶部，搅拌轴64的一端与旋转本体61的底部端面固定连接，另一端穿过连接盖22并延伸至瓶体1内底部，搅拌杆65活动连接在搅拌轴64的底端，旋转本体61的顶部端面设置有第一齿牙611，瓶盖2的内表面设置有与第一齿牙611啮合连接的第二齿牙23，弹性件63套设在旋转本体61与连接盖22之间的搅拌轴64上。

采用上述技术方案，当在向瓶体1内加入生长因子或药品的同时，通过按压旋转杆62，旋转杆62驱动旋转本体61沿筒体21向下移动，从而使旋转本体61顶面的第一齿牙611与瓶盖2内的第二齿牙23脱离，然后通过转动旋转杆62，带动旋转本体61旋转，旋转本体61驱动搅拌轴64带动搅拌杆65在瓶体1内底部水平转动。从而对生长因子或药品在细胞培养液进行搅拌，从而实现混匀，因搅拌杆65处于水平面上搅拌，且瓶体1保持不动，因此，避免了在搅拌过程中产生气泡，且取液管3仍然可以持续进行抽取混合液，保证了细胞培养过程的不间断进行。当无需搅拌时，由于在弹性件63的弹性力作用，弹性件63推动旋转本体61向上移动，从而利用第一齿牙611与第二齿牙23相互啮合，从而避免搅拌装置随意被人为转动，影响存储瓶内的培养液环境。

作为一些可选实施例，为了可以使瓶体1内不同深度的细胞培养液与生长因子或药品能够充分搅拌均匀，可以适当调整旋转杆62的按压深度，从而调节搅拌杆65在瓶体1内的深度，进行不同位置的充分搅拌。

优选的，搅拌轴64与连接盖22之间设置有第一密封圈66。由此，避免了外界空气通过瓶盖2侵入到瓶体1内部，进一步保证了细胞培养不受外界环境的影响。

在本实施例中，搅拌杆65设置有一条或多条，搅拌轴64的底端设置有用于对搅拌杆65进行限位的限位件67，限位件67与搅拌轴64的轴线垂直，限位件67的顶面设置有u型槽671，搅拌杆65设置在u型槽671内，其一端与搅拌轴64的底端铰连接，另一端延伸出u型槽671。采用上述技术方案，因搅拌杆65一端与搅拌轴64铰连接，因此在将搅拌杆65插入到瓶体1内时，可以将搅拌装置6先与瓶盖2进行装配，然后旋转搅拌杆65，使搅拌杆65与搅拌轴64近乎与平行，然后将搅拌轴64与搅拌杆65插入到瓶体1内，由于搅拌杆65在自重力的作用下，另一端自然下落，并卡接在限位件67顶面的u型槽671中，从而约束搅拌杆65处于水平面上。

优选的，搅拌杆65延伸出u型槽671的一端底面设置有搅拌叶片651。由此，可以使搅拌杆65搅拌面积更大，从而加快混匀速率。

优选的，搅拌杆65到瓶体1内底面的距离小于取液管3到瓶体1内底面的距离。由此，可以避免搅拌杆65在旋转的同时对取液管3进行碰撞干涉。

优选的，限位件67的长度小于瓶体1的瓶口内径。由此以来，方便将限位件67、搅拌杆65插入到瓶体1内，同时也方便进行拆卸。

优选的，取液管3与瓶盖2之间通过第二密封圈32进行密封连接。由此，避免了外界空气中的细菌等微生物通过瓶盖2侵入到瓶体1内部，进一步保证了细胞培养免受外界环境的污染。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施方式而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。