微生物培养试剂盒的制作方法

1.本发明涉及一种微生物培养试剂盒，能够只用其构成微生物培养装置。


背景技术：

2.对于一直在使用的琼脂平板表面涂抹法，认为其中能够培养的微生物为环境中的微生物的约1％。其原因被认为如下。
3.(a)由于培养环境是封闭的，因此，无法将来自微生物的过量的生成物排出到体系外。其结果，微生物的代谢产物和环境成分蓄积，阻碍微生物的增殖。
4.(b)在固体培养基中，难以维持目标微生物的培育所要求的营养素浓度。
5.因此，例如提出了一种如专利文献1、2所示的培养技术。专利文献1中，一边连续地供给液体培养基一边进行培养。专利文献2中，将含有微生物的固体培养基放置在自然环境中进行培养。
6.现有技术文献
7.专利文献
8.专利文献1：日本特开2016－86654号公报
9.专利文献2：美国专利第7011957号说明书


技术实现要素：

10.然而，专利文献1的方法中，由于仅控制培养基成分，因此，无法实现多种培养条件。另外，专利文献2的方法中，由于供给了自然环境中的环境成分，因此，无法实现稳定的培养条件。
11.而且，专利文献1、2的培养装置难以说具有精简的构成。因此，专利文献1、2的培养装置中，培养作业也并不简单。
12.本发明的目的在于提供一种微生物培养试剂盒，其能够实现多种培养条件，使各种难培养微生物的获得成为可能，且能够仅由其简单地构成具有精简的构成的微生物培养装置。
13.本发明的微生物培养试剂盒的特征在于，
14.具有2个框体，
15.上述2个框体均为第1模框体，或者为第1模框体和第2模框体，
16.上述第1模框体具备包含第1内部空间的第1框主体，在上述第1框主体设置有用于向上述第1内部空间流入流体的流入路和用于从上述第1内部空间流出流体的流出路，上述流入路和流出路均能够开闭，
17.上述第2模框体具备包围第2内部空间的第2框主体，
18.上述2个框体能够相互层叠。
19.根据本发明，能够构成精简的构成的微生物培养装置。而且，所构成的微生物培养装置能够以简单的作业来培养微生物，因此，能够实现多种培养条件，使各种难培养微生物
的获得成为可能。
附图说明
20.图1是表示本发明的第1实施方式的微生物培养试剂盒的立体图。
21.图2是表示微生物培养试剂盒的第1模框体的平面图。
22.图3是表示图2的iii－iii截面图。
23.图4是表示第1模框体彼此的连接作业的截面图。
24.图5是表示管的局部截面侧面图。
25.图6图5的vi向视图。
26.图7是表示由第1实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的截面简图。
27.图8是基座的立体图。
28.图9是图8的ix向视图。
29.图10是图9的x－x截面图。
30.图11是盖体的底面图。
31.图12是图11的xii－xii截面图。
32.图13是表示由第1实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第1变形例的截面简图。
33.图14是表示由第1实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第2变形例的截面简图。
34.图15是表示由第1实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第3变形例的截面简图。
35.图16是表示本发明的第2实施方式的微生物培养试剂盒的立体图。
36.图17是表示微生物培养试剂盒的第2模框体的平面图。
37.图18是图17的xviii－xviii截面图。
38.图19是表示第1模框体与第2模框体的连接作业的截面图。
39.图20是表示由第2实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第1变形例的截面简图。
40.图21是表示由第2实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第2变形例的截面简图。
41.图22是表示由第2实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第3变形例的截面简图。
42.图23是表示由第2实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第4变形例的截面简图。
43.图24是表示本发明的第3实施方式的微生物培养试剂盒的一个例子的立体图。
44.图25是表示本发明的第3实施方式的微生物培养试剂盒的另一个例子的立体图。
45.图26是表示由图24的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的截面简图。
46.图27是表示由图24的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第1变形例的截面简图。
47.图28是表示由图25的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的截面简图。
48.图29是表示由图25的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的第1变形例的截面简图。
49.图30是表示本发明的第5实施方式的微生物培养试剂盒的一个例子的立体图。
50.图31是图30的xxxi向视图。
51.图32是图30的xxxii向视图(平面图)。
52.图33是图32的xxxiii－xxxiii截面图。
53.图34是图32所示的截面的立体图。
54.图35是表示由第5实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置的截面简图。
55.图36是表示第2模框体的变形例的立体图。
56.图37是图36的xxxvii向视图。
57.图38是图37的xxxviii－xxxviii截面图。
58.图39是图36的第2模框体的截面立体放大图。
59.图40是表示实施例中使用的微生物培养装置的截面简图。
60.图41是表示实施例的结果的图。
具体实施方式
61.参照附图对本发明的微生物培养试剂盒的实施方式进行说明。
62.[第1实施方式]
[0063]
本实施方式的微生物培养试剂盒具有能够相互层叠的2个框体。而且，如图1所示，本实施方式的微生物培养试剂盒10a中，2个框体均为第1模框体1。
[0064]
图2是第1模框体1的平面图。图3是图2的iii－iii截面图。第1模框体1具备包围第1内部空间11的环状的第1框主体12。第1框主体12如图3所示在下部具备具有内螺纹121的环状的外嵌部122，在上部具备具有外螺纹123的环状的内嵌部124。外嵌部122具有能够外嵌于内嵌部124的尺寸。内嵌部124具有能够内嵌于外嵌部122的尺寸。第1内部空间11具有由外嵌部122包围的内部空间111和除其以外的内部空间112。内嵌部124在上表面具有o形环125。
[0065]
2个第1模框体1如图4所示通过使位于上方的第1模框体1的内螺纹121与位于下方的第1模框体1的外螺纹123螺合，由此层叠且连接。所连接的2个第1模框体1由o形环125密封。
[0066]
进而，第1框主体12具有用于向内部空间11流入流体的流入路13和用于从内部空间11流出流体的流出路14。优选在流入路13和流出路14分别连接如图5所示的管15、16并朝向外部在径向突出。应予说明，图5是管15的局部截面侧面图，图6是图5的vi向视图。流入路13和流出路14可以通过塞入塞子17(图7)代替管15、16而关闭。由此，流入路13和流出路14能够开闭。
[0067]
第1模框体1在流入路13和流出路14打开的状态时，能够使流体流通到第1内部空间11。流体是指含有营养素的气体或含有营养素的液体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体。另外，第1模框体1在流入路13和流出路14关闭的状态时，能够在第1内部空间
11保持含有微生物的培养基或含有营养素的材料或含有环境成分的材料。
[0068]
本实施方式的微生物培养试剂盒10a可如下使用。即，如图7所示，通过层叠2个第1模框体1而能够构成二层层叠结构体，可以使用该二层层叠结构体作为微生物培养装置100a。该二层层叠结构体中，流入路13和流出路14关闭的状态的第1模框体1配置于下层，流入路13和流出路14打开的状态的第1模框体1配置于上层。应予说明，优选在上层的第1模框体1与下层的第1模框体1之间配置膜滤器(未图示)。而且，微生物培养装置100a中，下层的第1模框体1在第1内部空间11保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1使含有营养素的液体流通到第1内部空间11。即，微生物培养装置100a具有由层状的培养部a和层状的营养素供给部b构成的二层层叠结构，该层状的培养部a由保持有含有微生物的培养基的下层的第1模框体1构成，该层状的营养素供给部b由配置于培养部a的第1表面a11的上层的第1模框体1构成且向培养部a供给营养素。
[0069]
应予说明，下层的第1模框体1优选层叠在基座8上。图8～图10表示基座8。图8是基座8的立体图。图9是图8的ix向视图。图10是图9的x－x截面图。基座8是平面视圆形的板体、在上部具备具有外螺纹81的内嵌部82。内嵌部82具有能内嵌于第1框主体1的外嵌部122的尺寸。
[0070]
另外，上层的第1模框体1优选以覆盖第1内部空间11的方式用盖体7盖住。图11和图12表示盖体7。图11是盖体7的底面图。图12是图11的xii－xii截面图。盖体7是平面视圆形的板体，在下部具备具有内螺纹71的环状的外嵌部72。外嵌部72具有能够外嵌于第1框主体12的内嵌部124的尺寸。
[0071]
根据上述构成的微生物培养装置100a，通过使含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11，能够从上侧向下层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给营养素，因此，能够培养微生物。
[0072]
应予说明，也可以使含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体代替含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有环境成分的气体或含有环境成分的液体时，能够从上侧向下层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0073]
如此，根据微生物培养装置100a，能够以简单的作业培养微生物，而且能够容易地变更供给的营养素或环境成分的种类或浓度等。因此，能够实现多种培养条件，使各种难培养微生物的获得成为可能。
[0074]
本实施方式的微生物培养试剂盒10a能够发挥如下所述的作用效果。
[0075]
(a)能够构成如图7所示的二层层叠结构的微生物培养装置100a。
[0076]
(b)由于仅具备2个第1模框体1，因此，能够实现精简的构成的微生物培养装置。
[0077]
(c)由于利用使用内螺纹和外螺纹的螺合机构仅连接2个第1模框体1即能够构成微生物培养装置100a，因此，能够提高装置的生产率，因此，能够容易地着手于微生物的培养作业。
[0078]
(d)第1模框体1由于由包围第1内部空间11的环状的第1框主体12构成，因此，具有精简的构成。即，本实施方式的微生物培养试剂盒10a由精简的构成部件构成。
[0079]
[第1实施方式的变形例]
[0080]
(1)如图13所示，与图7的装置相比，上层和下层可以相反。此时，由于能够从下侧
向上层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给营养素或环境成分，因此，能够培养微生物。
[0081]
(2)一方的第1模框体1优选具备1种以上的检知培养状态的传感器。传感器选自温度传感器、ph传感器和气体浓度传感器。另外，优选在相同一方的第1模框体1附设从外部对含有微生物的培养基赋予物理刺激的1种以上的刺激赋予部。应予说明，“一方的第1模框体1”用于保持含有微生物的培养基。
[0082]
例如，图14所示的微生物培养装置100a中，下层的第1模框体1具备温度传感器51、ph传感器52和超声波发振器53。此时，能够利用温度传感器51和ph传感器52检知微生物的培养状态，利用外部设备(未图示)监测，因此，能够迅速且准确地判断培养状态。而且，基于监测结果，能够变更流通到上层的第1模框体1的含有营养素的液体或含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体的种类和浓度中的至少一者，因此，即使在培养的中途，也能够容易地实现适于微生物的培养条件。
[0083]
(3)可以将2个第1模框体1均以流入路13和流出路14关闭的状态使用。图15所示的微生物培养装置100a中，流入路13和流出路14关闭的状态的第1模框体1配置于上层和下层。此时，一方(例如下层)的第1模框体1保持含有微生物的培养基，另一方(例如上层)的第1模框体1保持含有营养素的材料或含有环境成分的材料。由此，也能够从另一方的第1模框体1向一方的第1模框体1的第1内部空间1内的微生物供给营养素或环境成分，因此，能够培养微生物。
[0084]
[第2实施方式]
[0085]
本实施方式的微生物培养试剂盒具备能够相互层叠的2个框体。而且，如图16所示，本实施方式的微生物培养试剂盒10b中，2个框体为第1模框体1和第2模框体2。
[0086]
图17是第2模框体2的平面图。图18是图17的xviii－xviii截面图。第2模框体2具备包围第2内部空间21的环状的第2框主体22。第2框主体22如图18所示，在下部具备具有内螺纹221的环状的外嵌部222，在上部具备具有外螺纹223的环状的内嵌部224。外嵌部222具有能够外嵌于内嵌部224和第1模框体1的内嵌部124的尺寸。内嵌部224具有能够内嵌于外嵌部222和第1模框体1的外嵌部122的尺寸。第2内部空间21具有由外嵌部222包围的内部空间211和除其以外的内部空间212。内嵌部224在上表面具有o形环225。
[0087]
第1模框体1与第1实施方式的第1模框体1相同。应予说明，第1模框体1的外嵌部122具有能够外嵌于第2模框体2的内嵌部224的尺寸，第1模框体1的内嵌部124具有能够内嵌于第2模框体2的外嵌部222的尺寸。
[0088]
第1模框体1和第2模框体例如如图19所示，通过使位于上方的第1模框体1的内螺纹121与位于下方的第2模框体2的外螺纹223螺合而层叠且连接。此时，所连接的第1模框体1和第2模框体2由o形环225密封。
[0089]
而且，第2模框体2能够在第2内部空间21保持含有微生物的培养基或含有营养素的材料或含有环境成分的材料。
[0090]
本实施方式的微生物培养试剂盒10b可如下使用。即，如图20所示，通过将第1模框体1层叠于第2模框体2而能够构成二层层叠结构体，可以使用该二层层叠结构体作为微生物培养装置100b。该二层层叠结构体中，第2模框体2配置于下层，流入路13和流出路14打开的状态的第1模框体1配置于上层。应予说明，优选在上层的第1模框体1与下层的第2模框体
2之间配置膜滤器(未图示)。而且，微生物培养装置100b中，下层的第2模框体2在第2内部空间21保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1使含有营养素的液体流通到第1内部空间11。即，微生物培养装置100b具有由层状的培养部a和层状的营养素供给部b构成的二层层叠结构，该层状的培养部a由保持有含有微生物的培养基的下层的第2模框体2构成，该层状的营养素供给部b由配置于培养部a的第1表面a11的上层的第1模框体1构成且向培养部a供给营养素。
[0091]
应予说明，下层的第2模框体2优选层叠在基座8上。另外，上层的第1模框体1优选用盖体7盖住。盖体7和基座8与第1实施方式中使用的盖体7和基座8相同。应予说明，盖体7的外嵌部72具有外嵌于第2模框体2的内嵌部224的尺寸，基座8的内嵌部82具有内嵌于第2模框体2的外嵌部222的尺寸。
[0092]
根据上述构成的微生物培养装置100b，通过使含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11，能够从上侧向下层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给营养素，因此，能够培养微生物。
[0093]
应予说明，也可以使含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体代替含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有环境成分的气体或含有环境成分的液体流通时，能够从上侧向下层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0094]
如此，根据微生物培养装置100b，能够以简单的作业培养微生物，而且能够容易地变更供给的营养素或环境成分的种类或浓度等。因此，能够实现多种培养条件，使各种难培养微生物的获得成为可能。
[0095]
本实施方式的微生物培养试剂盒10b能够发挥如下所述的作用效果。
[0096]
(a)能够构成如图20所示的二层层叠结构的微生物培养装置100b。
[0097]
(b)由于仅具备第1模框体1和第2模框体2，因此，能够实现精简的构成的微生物培养装置。
[0098]
(c)由于利用使用内螺纹和外螺纹的螺合机构仅连接第1模框体1和第2模框体2即能够构成微生物培养装置100b，因此，能够提高装置的生产率，因此，能够容易地着手于微生物的培养作业。
[0099]
(d)第1模框体1和第2模框体2由包围内部空间的环状的框主体构成，因此，具有精简的构成。即，本实施方式的微生物培养试剂盒10b由精简的构成部件构成。
[0100]
[第2实施方式的变形例]
[0101]
(1)如图21所示，与图20的装置相比，上层和下层可以相反。此时，能够从下侧向上层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给营养素或环境成分，因此，能够培养微生物。
[0102]
(2)第2模框体2优选具备1种以上的检知培养状态的传感器。传感器选自温度传感器、ph传感器和气体浓度传感器。另外，优选在第2模框体2附设从外部对含有微生物的培养基赋予物理刺激的1种以上的刺激赋予部。应予说明，第2模框体2用于保持含有微生物的培养基。
[0103]
例如，图22所示的微生物培养装置100b中，下层的第2模框体2具备温度传感器51、ph传感器52和超声波发振器53。此时，能够利用温度传感器51和ph传感器52检知微生物的
培养状态，利用外部设备(未图示)进行监测，因此，能够迅速且准确地判断培养状态。而且，基于监测结果，能够变更流通到上层的第1模框体1的含有营养素的液体或含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体的种类和浓度中的至少一者，因此，即使为培养的中途，也能够容易地实现适于微生物的培养条件。
[0104]
应予说明，如图23所示，以流入路13和流出路14关闭的状态使用第1模框体1，可以第1模框体1或第2模框体2的一方保持含有微生物的培养基，第1模框体1或第2模框体2的另一方保持含有营养素的材料或含有环境成分的材料。第1模框体1保持含有微生物的培养基时，第1模框体1可以具备温度传感器51、ph传感器52和超声波发振器53。
[0105]
[第3实施方式]
[0106]
本实施方式的微生物培养试剂盒向第1实施方式的微生物培养试剂盒10a进一步追加了1个框体。而且，追加的1个框体为第1模框体1或第2模框体2。即，本实施方式的微生物培养试剂盒包含如图24所示具备3个第1模框体1的微生物培养试剂盒10c和如图25所示具备2个第1模框体1和1个第2模框体2的微生物培养试剂盒10d。应予说明，第1模框体1与第1实施方式的第1模框体1相同，第2模框体2与第2实施方式的第2模框体2相同。
[0107]
(微生物培养试剂盒10c)
[0108]
本实施方式的微生物培养试剂盒10c可如下使用。即，如图26所示，通过层叠3个第1模框体1而能够构成三层层叠结构体，可以使用该三层层叠结构体作为微生物培养装置100c。该三层层叠结构体中，流入路13和流出路14打开的状态的第1模框体1配置于上层和下层，流入路13和流出路14关闭的状态的第1模框体1配置于中层。应予说明，优选在各层之间配置膜滤器(未图示)。而且，微生物培养装置100c中，中层的第1模框体1在第1内部空间11保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1使含有营养素的液体流通到第1内部空间11，下层的第1模框体1使含有环境成分的液体流通到第1内部空间11。即，微生物培养装置100c具有由层状的培养部a、层状的营养素供给部b和层状的环境成分供给部c构成的三层层叠结构，该层状的培养部a由保持有含有微生物的培养基的中层的第1模框体1构成，该层状的营养素供给部b由配置于培养部a的第1表面a11的上层的第1模框体1构成且向培养部a供给营养素，该层状的环境成分供给部c由配置于培养部a的第2表面a12的下层的第1模框体1构成且向培养部a供给环境成分。
[0109]
3个第1模框体1的层叠和连接能够通过使位于上方的第1模框体1的内螺纹121与位于下方的第1模框体1的外螺纹123螺合而执行。所连接的第1模框体1彼此由o形环125密封。
[0110]
应予说明，下层的第1模框体1优选层叠在基座8上。另外，上层的第1模框体1优选用盖体7盖住。盖体7和基座8与第1实施方式和第2实施方式中使用的盖体7和基座8相同。
[0111]
根据上述构成的微生物培养装置100c，通过使含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11，并且使含有环境成分的液体流通到下层的第1模框体1的第1内部空间11，能够从上侧向中层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给营养素，并且从下侧供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0112]
应予说明，也可以使含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体代替含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有环境成分的气体或含有环境成分的液体流通时，也能够从上侧向中层的第1模框体1的第1内部空间
11内的微生物供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0113]
另外，也可以使含有环境成分的气体或含有营养素的气体或含有营养素的液体代替含有环境成分的液体流通到下层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有营养素的气体或含有营养素的液体流通时，也能够从下侧向中层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给营养素，因此，能够培养微生物。
[0114]
本实施方式的微生物培养试剂盒10c能够发挥如下所述的作用效果。
[0115]
(a)能够构成如图26所示的三层层叠结构的微生物培养装置100c。
[0116]
(b)由于仅具备3个第1模框体1，因此，能够实现精简的构成的微生物培养装置。
[0117]
(c)由于利用使用内螺纹和外螺纹的螺合机构仅连接3个第1模框体1即能够构成微生物培养装置100c，因此，能够提高装置的生产率，因此，能够容易地着手于微生物的培养作业。
[0118]
(d)第1模框体1由于为包围内部空间的环状的框主体，因此，具有精简的构成。即，本实施方式的微生物培养试剂盒10c由精简的构成部件构成。
[0119]
应予说明，微生物培养装置100c中，并不仅限于配置于中层的第1模框体1，也可以以流入路13和流出路14关闭的状态使用位于上层和下层的至少一方的第1模框体1。图27所示的微生物培养装置100c中，下层的第1模框体1也以流入路13和流出路14关闭的状态使用。而且，中层的第1模框体1保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1使含有营养素的液体或含有营养素的气体流通，下层的第1模框体1保持含有环境成分的材料。由此，也能够从上侧向中层的第1模框体1的第1内部空间11内的微生物供给营养素，并且从下侧供给环境成分，因此，能够培养微生物。应予说明，在图27的情况下，上层的第1模框体1使含有环境成分的液体或含有环境成分的气体流通，下层的第1模框体1可以保持含有营养素的材料。
[0120]
(微生物培养试剂盒10d)
[0121]
本实施方式的微生物培养试剂盒10d可如下使用。即，如图28所示，通过在第2模框体2的上下层叠第1模框体1而能够构成三层层叠结构体，可以使用该三层层叠结构体作为微生物培养装置100d。该三层层叠结构体中，流入路13和流出路14打开的状态的第1模框体1配置于上层和下层，第2模框体2配置于中层。应予说明，优选在各层之间配置膜滤器(未图示)。而且，微生物培养装置100d中，中层的第2模框体2在第2内部空间21保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1使含有营养素的液体流通到第1内部空间11，下层的第1模框体1使含有环境成分的液体流通到第1内部空间11。即，微生物培养装置100d具有由层状的培养部a、层状的营养素供给部b和层状的环境成分供给部c构成的三层层叠结构，该层状的培养部a由保持有含有微生物的培养基的中层的第2模框体2构成，该层状的营养素供给部b由配置于培养部a的第1表面a11的上层的第1模框体1构成且向培养部a供给营养素，该层状的环境成分供给部c由配置于培养部a的第2表面a12的下层的第1模框体1构成且向培养部a供给环境成分。
[0122]
第1模框体1与第2模框体2的层叠和连接能够通过使位于上方的第1模框体1的内螺纹121与位于下方的第2模框体2的外螺纹223螺合而执行，两者由o形环225密封，另外，第2模框体2与第1模框体1的层叠和连接能够通过使位于上方的第2模框体2的内螺纹221与位于下方的第1模框体1的外螺纹123螺合而执行，两者由o形环125密封。
[0123]
应予说明，下层的第1模框体1优选层叠在基座8上。另外，上层的第1模框体1优选
用盖体7盖住。盖体7和基座8与第1实施方式和第2实施方式中使用的盖体7和基座8相同。
[0124]
根据上述构成的微生物培养装置100d，通过使含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11，并且使含有环境成分的液体流通到下层的第1模框体1的第1内部空间11，能够从上侧向中层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给营养素，并且从下侧供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0125]
应予说明，也可以使含有营养素的气体或含有环境成分的气体或含有环境成分的液体代替含有营养素的液体流通到上层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有环境成分的气体或含有环境成分的液体流通时，也能够从上侧向中层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给环境成分，因此，能够培养微生物。
[0126]
另外，也可以使含有环境成分的气体或含有营养素的气体或含有营养素的液体代替含有环境成分的液体流通到下层的第1模框体1的第1内部空间11。使含有营养素的气体或含有营养素的液体流通时，也能够从下侧向中层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给营养素，因此，能够培养微生物。
[0127]
本实施方式的微生物培养试剂盒10d能够发挥如下所述的作用效果。
[0128]
(a)能够构成如图28所示的三层层叠结构的微生物培养装置100d。
[0129]
(b)由于仅具有2个第1模框体1和1个第2模框体2，因此，能够实现精简的构成的微生物培养装置。
[0130]
(c)由于利用使用内螺纹和外螺纹的螺合机构仅将2个第1模框体1和1个第2模框体2连接即能够构成微生物培养装置100d，因此，能够提高装置的生产率，因此，能够容易地着手于微生物的培养作业。
[0131]
(d)第1模框体1和第2模框体2由于为包围内部空间的环状的框主体，因此，具有精简的构成。即、本实施方式的微生物培养试剂盒10d由精简的构成部件构成。
[0132]
应予说明，微生物培养装置100d中，可以以流入路13和流出路14关闭的状态使用配置于上层和下层的至少一方的第1模框体1。图29所示的微生物培养装置100d中，以流入路13和流出路14关闭的状态使用上层和下层的第1模框体1。而且，中层的第2模框体2保持含有微生物的培养基，上层的第1模框体1保持含有营养素的材料，下层的第1模框体1保持含有环境成分的材料。由此，也能够从上侧向中层的第2模框体2的第2内部空间21内的微生物供给营养素，并且从下侧供给环境成分，因此，能够培养微生物。应予说明，在图29的情况下，上层的第1模框体1可以保持含有环境成分的材料，下层的第1模框体1可以保持含有营养素的材料。
[0133]
[第4实施方式]
[0134]
本实施方式的微生物培养试剂盒向第2实施方式的微生物培养试剂盒10b进一步追加了1个框体。而且，追加的1个框体为第1模框体1。即，本实施方式的微生物培养试剂盒具备2个第1模框体1和1个第2模框体2。因此，本实施方式的微生物培养试剂盒与第3实施方式的微生物培养试剂盒10d相同。
[0135]
[第5实施方式]
[0136]
本实施方式的微生物培养试剂盒从第1实施方式～第4实施方式的微生物培养试剂盒10a～10d中任意地选择多个而包含。由此，通过层叠4个以上的框体而能够构成多层层叠结构体，可以使用该多层层叠结构体作为微生物培养装置。图30是表示由层叠有7个框体
的七层层叠结构体构成的微生物培养装置100e的立体图。图31是图30的xxxi向视图。图32是图30的xxxii向视图(平面图)。图33是图32的xxxiii－xxxiii截面图。图34是图32所示的截面的立体图。
[0137]
该七层层叠结构体中，最下层(第1层)为第1模框体1，第2层～第6层为第2模框体2，最上层(第7层)为第1模框体1应予说明，第1层的第1模框体1层叠在基座8上，第7层的第1模框体1由盖体7盖住。
[0138]
而且，微生物培养装置100e中，第1层的第1模框体1使含有环境成分的液体或含有环境成分的气体流通，第2层～第4层和第6层的第2模框体2保持含有微生物的培养基，第5层的第2模框体2保持含有营养素的材料，第7层的第1模框体1使含有营养素的液体或含有营养素的气体流通。
[0139]
即，微生物培养装置100e如作为截面简图的图35所示，具有由4个培养部a、向培养部a供给营养素的第5层和第7层的2个营养素供给部b和向培养部a供给环境成分的第1层的1个环境成分供给部c构成的七层层叠结构，该培养部a由保持有含有微生物的培养基的第2层～第4层和第6层的第2模框体2构成。应予说明，在第2层～第4层和第6层的第2模框体2分别设置有温度传感器51、ph传感器52和超声波发振器53。另外，在各层之间配置有膜滤器55。
[0140]
这样的微生物培养装置100e能够发挥如下所述的作用效果。
[0141]
(a)通过使含有环境成分的液体或含有环境成分的气体流通到第1层的第1模框体1，能够从下侧向第2层～第4层的第2模框体2内的微生物供给环境成分，从上侧供给营养素，因此，能够在第2层～第4层的第2模框体2内培养微生物。另外，通过使含有营养素的液体或含有营养素的气体流通到第7层的第1模框体1，能够从下侧和上侧向第6层的第2模框体2内的微生物供给营养素，因此，能够在第6层的第2模框体2内培养微生物。
[0142]
(b)由于第1层～第5层的层叠结构体与第5层～第7层的层叠结构体的培养条件不同，因此，能够执行2种培养条件。因此，能够提高培养条件的选定作业的效率，因此，能够提高难培养微生物的获得的可能性。
[0143]
(c)第2层～第4层中，由于培养部a为三层结构，因此，各层的培养条件不同。例如，对于所供给的环境成分的浓度，第2层最高，第4层最低。另外，对于所供给的营养素的浓度，第4层最高，第2层最低。因此，能够提高培养条件的选定作业的效率，因此，能够提高难培养微生物的获得的可能性。
[0144]
(d)仅使含有环境成分的液体或含有环境成分的气体流通到第1层，并且使含有营养素的液体或含有营养素的气体流通到第7层即能够培养微生物因此，能够简单地执行微生物的培养。因此，能够提高难培养微生物的获得的可能性。
[0145]
(e)仅将第1模框体1和第2模框体2相互连接即能够组装，因此，能够提高装置的生产率。
[0146]
(f)第1模框体1和第2模框体2能够通过解除连接而容易地取下，能够重新连接替代其它第1模框体1或第2模框体2。即，各层能够容易地更换。因此，能够容易地变更培养条件，能够提高培养条件的选定作业的效率，因此，能够提高难培养微生物的获得的可能性。例如，能够将作为营养素供给部的第5层和/或第7层更换为其它作为营养素供给部的第1模框体1或第2模框体2，或者能够更换为作为环境成分供给部的第1模框体1或第2模框体2。另
外，能够将作为环境成分供给部的第1层更换为其它作为环境成分供给部的第1模框体1或第2模框体2，或者更换为作为营养素供给部的第1模框体1或第2模框体2。
[0147]
(g)通过增加层的数量，能够增加在培养部a的两面具有营养素供给部b和/或环境成分供给部c的三层层叠结构体的数量。而且，能够使这些三层层叠结构体每个的培养条件不同。因此，能够提高培养条件的选定作业的效率，因此，能够提高难培养微生物的获得的可能性。
[0148]
(h)能够变更流通到第5层和/或第7层的含有营养素的液体或含有营养素的气体的种类和浓度中的至少一者。另外，能够变更流通到第1层的含有环境成分的液体或含有环境成分的气体的种类和浓度中的至少一者。因此，能够容易地实现多种培养条件，能够容易地进行适于微生物的培养条件的选定作业。
[0149]
(i)能够利用温度传感器41和/或ph传感器42检知并监测第2层～第4层和第6层内的微生物的培养状态。因此，能够迅速且准确地判断各层的培养状态。
[0150]
(j)基于监测结果，能够变更流通到第5层和/或第7层的含有营养素的液体或含有营养素的气体的种类和浓度中的至少一者，另外，能够变更流通到第1层的含有环境成分的液体或含有环境成分的气体的种类和浓度中的至少一者。因此，即使为培养的中途，也能够容易地实现适于微生物的培养条件。
[0151]
(k)通过利用超声波发振器43对第2层～第4层和第6层内的微生物赋予振动，能够使培养活化。因此，能够提高培养效率。
[0152]
[其它实施方式]
[0153]
(1)第1模框体1和第2模框体2不限于环状，也可以平面视具有三角形、四边形、其它多边形或楕圆形等外形。
[0154]
(2)第1模框体1彼此的连接和第1模框体1与第2模框体2的连接不限于使用内螺纹和外螺纹的螺合机构，例如能够通过滑动嵌合机构、凹凸嵌合机构或外部连接构件而执行。
[0155]
(3)图36～图38表示其它第2模框体2a。该第2模框体2a中，第2内部空间21由多个贯通孔210构成。图36是第2模框体2a的立体图。图37是图36的xxxvii向视图。图38是图37的xxxviii－xxxviii截面图。第2模框体2a在下部具备具有内螺纹221的环状的外嵌部222，在上部具备具有外螺纹223的内嵌部224a。第2内部空间21具有由外嵌部222包围的内部空间211和除其以外的内部空间，“除其以外的内部空间”由多个贯通孔210构成。该第2模框体2a中，在全部贯通孔210中填充有含有微生物的培养基。
[0156]
(4)如图39所示，第2模框体2a可以具备温度传感器41、ph传感器42和超声波发振器43。它们被设置于一个个贯通孔210中。温度传感器41和ph传感器42以检知填充于贯通孔210的含有微生物的培养基的温度和ph的方式配置于第2模框体2a的内部，与外部设备(未图示)连接。外部设备能够介由两传感器41、42监测含有微生物的培养基的温度和ph。超声波发振器43以能够对填充于贯通孔210的含有微生物的培养基赋予振动的方式配置于第2模框体2a的内部。
[0157]
(5)构成培养部a的第2模框体2的内部空间212(图18)可以为在横向任意地分隔的空间，或者也可以为上下方向任意地分隔的空间。
[0158]
(6)以流入路13和流出路14关闭的状态使用第1模框体1作为培养部a时，第1内部空间11可以为在横向任意地分隔的空间，或者也可以为在上下方向任意地分隔的空间。
[0159]
(7)流入路13和流出路14的开闭机构不限于使用塞子17的机构，也可以为使用开闭盖的机构、使用止回阀的机构等。
[0160]
[实施例]
[0161]
使用利用第5实施方式的微生物培养试剂盒构成的微生物培养装置100e。其中，如图40所示，作为第5层，使用第1模框体1而不是第2模框体2。
[0162]
(各部的构成)
[0163]
·
营养素供给部(第7层)
[0164]
底物a液
[0165]
·
r2a培养基(日本制药株式会社制)0.32g/100ml
[0166]
纯水100ml
[0167]
·
营养素供给部(第5层)
[0168]
·
底物b液
[0169]
·
r2a培养基(日本制药株式会社制)0.032g/100ml
[0170]
纯水100ml
[0171]
·
环境成分供给部(第1层)
[0172]
·
土壤萃取液
[0173]
·
对土壌5g以纯水15g的比例制作。
[0174]
·
培养部(第2层～第4层和第6层)
[0175]
·
琼脂末(nacalai tesque co.,ltd.制)1.5g/100ml
[0176]
纯水95ml
[0177]
·
对上述的琼脂水溶液进行高压釜(121℃/20分钟)处理，达到60℃附近后添加土壤萃取稀释液5ml，在搅拌后填充于作为培养部的夹套的内部空间。应予说明，土壤萃取稀释液是对土壌5g加入纯水15ml并搅拌，将放置1小时后的上清液通过逐次稀释而稀释成10000倍而制作的。
[0178]
·
在各部之间配置有膜滤器vcwp(merck millipore株式会社制0.1μm)。
[0179]
(培养作业)
[0180]
使底物a液在营养素供给部(第7层)、使底物b液在营养素供给部(第5层)以及使土壌萃取液环境成分供给部(第1层)连续地流通1周，进行培养。
[0181]
(解析作业)
[0182]
培养后，回收在培养部生成的菌落，在techno suruga labo株式会社进行基因解析。对16srdna的v1～v4区域的约600个碱基实施同源性解析，制作简易分子系统树，进行种的鉴定。同源率表示碱基序列的一致度，同源率低于98％时，判断为新种。
[0183]
·
dna萃取无色肽酶(富士胶片和光纯药株式会社制)
[0184]
·
pcr扩增primestar hs dna polymerase(takara bio inc.制)
[0185]
·
cycle sequence bigdye terminator v3.1cycle sequencing kit(applied biosystems制)
[0186]
·
碱基序列决定chromaspro1.7(technelysium制)
[0187]
·
数据库db
‑
ba12.0(techno suruga labo株式会社制)
[0188]
国际碱基序列数据库
[0189]
检索日：2018年3月15日
[0190]
(比较例)
[0191]
通过琼脂平板表面涂抹法生成菌落，实施同样的基因解析。
[0192]
(解析结果)
[0193]
图41表示基因解析的结果。图41中，a表示已知种100～98％，b表示新种98～94％，c表示新属94～91％，d表示新目小于91％。根据本实施例，所获得的微生物的约40％相当于新种，也能够获得新目和新属水平的新的微生物。因此，能够确认对难培养微生物的获得非常有效。
[0194]
产业上的可利用性
[0195]
本发明的微生物培养试剂盒能够构成精简的构成的微生物培养装置，因此，产业上的利用价格大。
[0196]
符号说明
[0197]1ꢀꢀ
第1模框体
[0198]
11
ꢀꢀ
第1内部空间
[0199]
12
ꢀꢀ
第1框主体
[0200]
121
ꢀꢀ
内螺纹
[0201]
123
ꢀꢀ
外螺纹
[0202]
13
ꢀꢀ
流入路
[0203]
14
ꢀꢀ
流出路
[0204]
15、16
ꢀꢀ
管
[0205]2ꢀꢀ
第2模框体
[0206]
21
ꢀꢀ
第2内部空间
[0207]
22
ꢀꢀ
第2框主体
[0208]
221
ꢀꢀ
内螺纹
[0209]
223
ꢀꢀ
外螺纹
[0210]7ꢀꢀ
盖体
[0211]8ꢀꢀ
基座