IL1RAP抗体的制作方法

il1rap抗体
1.相关申请的交叉引用
2.本技术案要求于2019年8月12日提交的美国申请案第62/885,724号的优先权，其公开内容通过引用整体并入本文。
3.对以ascii文件提交的“序列表”、表格或计算机程序列表附录的引用
4.序列表写入文件048440-720001wo_sequence listing_st25.txt，创建于2020年8月7日，70,043字节，机器格式ibm-pc，ms windows操作系统，通过引用并入本文。


背景技术：

5.急性髓性白血病(aml)是一种破坏性的造血系统恶性肿瘤，可导致造血功能衰竭和死亡。尽管对这种疾病的了解越来越多，但目前的治疗选择只对少数aml患者有益。治疗的有限成功被认为至少部分是因为化学疗法和/或其它分子靶向疗法无法消除所谓的白血病干细胞(lsc)。因此，本领域需要特异性消除lsc同时保留正常的造血干细胞的治疗方法。
6.免疫治疗方法有望成为治疗aml患者的有效手段。然而，为了成功，免疫疗法必须允许选择性靶向和破坏lsc。本文提供了解决本领域的这种需求和其它需求的组合物和方法。


技术实现要素：

7.在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
8.在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
9.在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
10.在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
11.在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:34
所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
12.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3。
13.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
14.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3。
15.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
16.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
17.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
18.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3。
19.在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
20.在一个方面，提供了编码本文提供的抗体的分离的核酸，包括其实施例。
21.在另一方面，提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的本文提供的抗体(包括其实施例)和药学上可接受的赋形剂。
22.在另一方面，提供了一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文提供的抗体，包括其实施例，从而治疗受试者所患癌症。
23.在一个方面，提供了一种重组蛋白，其包括(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
24.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
25.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其
包括如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
26.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
27.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
28.在一个方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
29.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
30.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
31.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
32.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
33.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
34.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
35.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3；(ii)跨膜结构域。
36.在另一方面，提供了编码本文提供的重组蛋白的分离的核酸，包括其实施例。
37.在另一方面，提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的本文提供的重组蛋白(包括其实施例)和药学上可接受的赋形剂。
38.在另一方面，提供了一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法。该方法包括向
受试者施用治疗有效量的本文提供的重组蛋白，包括其实施例，从而治疗受试者所患癌症。
39.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
40.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
41.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
42.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
43.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
44.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、seq id no:38所示的cdr l2和seq id no:39所示的cdr l3。
45.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
46.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3。
47.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
48.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、
如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
49.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
50.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3。
51.在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
52.在另一方面，提供了编码本文提供的重组蛋白的分离的核酸，包括其实施例。
53.在另一方面，提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的本文提供的重组蛋白(包括其实施例)和药学上可接受的赋形剂。
54.在另一方面，提供了一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文提供的重组蛋白，包括其实施例，从而治疗受试者所患癌症。
附图说明
55.图1示出了用于确定具有seq id no:46的cdr l1序列、seq id no:47的cdr l2序列和seq id no:48的cdr l3序列的人抗il1rap单克隆抗体克隆1a1(左上)，具有seq id no:49的cdr l1序列、seq id no:50的cdr l2序列和seq id no:51的cdr l3序列的1a4(右上)，具有seq id no:40的cdr l1序列、seq id no:41的cdr l2序列和seq id no:42的cdr l3序列的1a5(左下)，以及具有seq id no:43的cdr l1序列、seq id no:44的cdr l2序列和seq id no:45的cdr l3序列的1a6(右下)的ec
50
的曲线图。ec
50
通过elisa测定。
56.图2示出了用于确定具有seq id no:37的cdr l1序列、seq id no:38的cdr l2序列和seq id no:39的cdr l3序列的人抗il1rap单克隆抗体克隆1a11、1a12(右上)，具有seq id no:31的cdr h1序列、seq id no:32的cdr h2序列和seq id no:33的cdr h3序列、seq id no:34的cdr l1序列、seq id no:35的cdr l2序列和seq id no:36的cdr l3序列的1b8(左下)，以及具有seq id no:55的cdr l1序列、seq id no:56的cdr l2序列和seq id no:57的cdr l3序列的1e12(右下)的ec
50
的曲线图。ec
50
通过elisa测定。
57.图3示出了用于确定具有seq id no:19的cdr h1序列、seq id no:20的cdr h2序列和seq id no:21的cdr h3序列、seq id no:22的cdr l1序列、seq id no:23的cdr l2序列和seq id no:24的cdr l3序列的人抗il1rap单克隆抗体克隆2e12(左上)，具有seq id no:1的cdr h1序列、seq id no:2的cdr h2序列和seq id no:3的cdr h3序列、seq id no:4的cdr l1序列、seq id no:5的cdr l2序列和seq id no:6的cdr l3序列的d1a4(右上)，以及具有seq id no:58的cdr l1序列、seq id no:59的cdr l2序列和seq id no:60的cdr l3序列的d1f6(左下)的ec
50
的曲线图。右下：示出了所示的12个克隆的人抗il1rap单克隆抗体ec
50
。测试的克隆是1a1、1a4、1a5、1a6、1a11、1a12、1b8、1e12、2e、12、d1a4、d1f6和1d5，具有seq id no:13的cdr h1序列、seq id no:14的cdr h2序列、seq id no:15的cdr h3序列、seq id no:16的cdr l1序列、seq id no:17的cdr l2序列和seq id no:18的cdr l3序列。
通过elisa测定抗体的ec
50
。
58.图4本文提供的示范性抗il1rap抗体的抗体依赖性细胞毒性(adcc)分析。由十二个克隆诱导的特异性裂解百分比通过adcc测定法确定。
具体实施方式
59.虽然在本文中示出和描述了本发明的各种实施例和方面，但对于本领域技术人员显而易见的是，仅借助于实例提供此类实施例和方面。在不脱离本发明的情况下，本领域技术人员能够进行无数次变更、更改和替换。应当理解，在实施本发明时可以采用本文所述的本发明实施例的各种替代方案。
60.本文中使用的章节标题仅用作组织的目的，不应以任何方式解释为限制所描述的主题。本技术中所引用的所有文献或文献的部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、手册以及论文，在此出于任何目的明确地以全文引用的方式并入本文中。
61.定义
62.除非另有定义，否则本文所用的技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常所理解相同的含义。参见，例如singleton等,微生物学和分子生物学词典(dictionary of microbiology and molecular biology)第2版,j.wiley&sons(new york,ny1994)；sambrook，等，分子克隆-实验手册(molecular cloning,a laboratory manual),(cold springs harbor press)冷泉港出版社(cold springs harbor,ny 1989)。类似于或等同于本文描述的那些的任何方法、装置和材料都可以用于实施本发明。提供以下定义以便于理解本文中频繁使用的某些术语，且不意味着限制本公开的范围。
[0063]“核酸”是指单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其聚合物，及其补体。术语“多核苷酸”是指核苷酸的线性序列。术语“核苷酸”通常是指多核苷酸的单个单元，即单体。核苷酸可以是核糖核苷酸、脱氧核糖核苷酸或其修饰形式。本文考虑的多核苷酸的实例包括单链和双链dna、单链和双链rna(包括sirna)，以及具有单链和双链dna和rna的混合物的杂合分子。如本文所用的核酸还指具有与天然存在的核酸相同的基本化学结构的核酸。这样的类似物具有修饰的糖和/或修饰的环取代基，但是保留了与天然存在的核酸相同的基本化学结构。核酸模拟物是指具有与核酸的一般化学结构不同的结构但以与天然存在的核酸相似的方式起作用的化合物。此类类似物的实例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性甲基膦酸酯、2-o-甲基核糖核苷酸和肽核酸(pnas)。
[0064]
术语"氨基酸"是指天然存在的氨基酸和合成氨基酸，以及以与天然存在的氨基酸类似的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸以及后来被修饰的那些氨基酸，例如羟基脯氨酸、γ-羧基谷氨酸以及o-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指基本化学结构与天然存在的氨基酸相同(即，α碳与氢、羧基、氨基以及r基团结合)的化合物，例如高丝氨酸、正亮氨酸、蛋氨酸亚砜、蛋氨酸甲基锍。所述类似物具有被修饰的r基团(例如，正亮氨酸)或被修饰的肽主链，但基本化学结构保持与天然存在的氨基酸相同。氨基酸模拟物是指具有与氨基酸的一般化学结构不同的结构但以与天然存在的氨基酸相似的方式起作用的化合物。
[0065]
氨基酸在本文中可以由其通常已知的三字母符号或由iupac-iub生物化学命名法委员会(biochemical nomenclature commission)所推荐的单字母符号来指代。同样，核苷
酸可以通过其普遍接受的单字母代码来表示。
[0066]
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用以指氨基酸残基的聚合物。这些术语适用于其中一个或多个氨基酸残基是对应天然存在的氨基酸的人工化学模拟物的氨基酸聚合物，以及适用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。
[0067]
氨基酸或核苷酸碱基的“位置”由数字表示，该数字基于其相对于n-末端(或5'-端)的位置顺序地标识参考序列中的每个氨基酸(或核苷酸碱基)。由于在确定最佳比对时可能会考虑的缺失、插入、截短、融合等，因此，通常仅通过从n端进行计数而确定的测试序列中的氨基酸残基数目不一定与参考序列中其对应位置的数目相同。例如，在其中变体相对于比对的参考序列具有缺失的情况下，变体中将不存在与参考序列中缺失位点的位置相对应的氨基酸。在比对的参考序列中有插入的情况下，该插入将不对应于参考序列中的编号的氨基酸位置。在截短或融合的情况下，参考序列或比对序列中可能存在不对应于相应序列中任何氨基酸的氨基酸段。
[0068]
当在对给定氨基酸或多核苷酸序列进行编号的情形中使用时，术语“相对于
……
进行编号”或“对应于”是指在将给定氨基酸或多核苷酸序列与参考序列相比较时，对指定参考序列的残基进行编号。当蛋白质中的氨基酸残基在蛋白质中与给定残基占据相同的基本结构位置时，它“对应”于给定残基。例如，当所选残基与kabat位置40处的轻链苏氨酸具有相同的基本空间或其它结构关系时，所选抗体(或fab结构域)中的所选残基对应于kabat位置40处的轻链苏氨酸。在将所选蛋白质与抗体(或fab结构域)的轻链进行最大同源性比对的一些实施例中，所比对的所选蛋白质中与苏氨酸40对齐的位置称为对应于苏氨酸40。代替一级序列比对，也可以使用三维结构比对，例如，其中将所选蛋白质的结构与kabat位置40处的轻链苏氨酸进行最大限度的对应性比对，并且对整体结构进行比较。在这种情况下，在结构模型中占据与苏氨酸40相同的基本位置的氨基酸被称为对应于苏氨酸40残基。
[0069]“保守修饰的变体”适用于氨基酸序列和核酸序列两者。关于特定的核酸序列，“保守修饰的变体”是指编码相同或基本相同的氨基酸序列的那些核酸。由于遗传密码的简并性，许多核酸序列将编码任何给定的蛋白质。例如，密码子gca、gcc、gcg和gcu均对氨基酸丙氨酸进行编码。因此，在由密码子指定丙氨酸的每个位置，可以将密码子改变为所描述的任何相应密码子，而无需改变编码的多肽。此类核酸变化为“沉默变化”，所述沉默变化为经过保守修饰的变化的一个物种。本文中编码多肽的每个核酸序列还描述核酸的每种可能的沉默变化。技术人员将认识到，核酸中的每个密码子(除通常为甲硫氨酸的唯一密码子的aug和通常为色氨酸的唯一密码子tgg外)均可以进行修饰以得到功能上相同的分子。因此，编码多肽的核酸的每种沉默变异均隐含在每个描述的序列中。
[0070]
关于氨基酸序列，本领域技术人员将认识到，改变、添加或缺失所编码的序列中的单个氨基酸或较小百分比的氨基酸的核酸、肽、多肽或蛋白质序列的个别取代、缺失或添加是该改变会引起氨基酸被化学上类似的氨基酸取代的“保守修饰的变体”。提供功能上类似的氨基酸的保守取代表在本领域中是众所周知的。此类保守修饰的变体是对本发明的多态性变体、种间同源物和等位基因的补充，并且不排除本发明的多态性变体、种间同源物和等位基因。
[0071]
以下八个组各自含有作为彼此的保守取代的氨基酸：
[0072]
1)丙氨酸(a)、甘氨酸(g)；
[0073]
2)天冬氨酸(d)、谷氨酸(e)；
[0074]
3)天冬酰胺(n)、谷氨酰胺(q)；
[0075]
4)精氨酸(r)、赖氨酸(k)；
[0076]
5)异亮氨酸(i)、亮氨酸(l)、甲硫氨酸(m)、缬氨酸(v)；
[0077]
6)苯丙氨酸(f)、酪氨酸(y)、色氨酸(w)；
[0078]
7)丝氨酸(s)、苏氨酸(t)；以及
[0079]
8)半胱氨酸(c)、甲硫氨酸(m)
[0080]
(参见，例如creighton,蛋白质(proteins)(1984))。
[0081]
术语“相同”或“同一性”百分比在两个或更多个核酸或多肽序列的情形下是指当使用下列序列比较算法之一或通过手工比对和目测在比较窗口或指定区域内进行比较和比对以获得最大的对应性时，具有相同的氨基酸残基或核苷酸或具有指定百分比的相同氨基酸残基或核苷酸(即在例如本发明的整个多肽序列或本发明的多肽的单个结构域的特定区域上，具有60％同一性，任选地65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性)的两个或更多个序列或子序列。此类序列随后被称为“基本上相同”。这一定义也是指测试序列的互补序列。任选地，同一性存在于长度至少约50个核苷酸的区域上，或更优选地存在于长度为100-500个或1000个或更多个核苷酸的区域上。
[0082]“序列同一性百分比”通过在比较窗口中比较两个最佳比对的序列确定，其中多核苷酸或多肽序列在比较窗口中的部分相较于参考序列(其不包含添加或缺失)可以包含添加或缺失(即，空位)以实现两个序列的最佳比对。通过确定两个序列中出现相同核酸碱基或氨基酸残基的位置数以产生匹配位置数，将匹配位置数除以比较窗口中的位置总数，并将结果乘以100以得出序列同一性的百分比，来计算百分比。
[0083]
对于序列比较，通常一个序列充当测试序列所比较的参考序列。当使用序列比较算法时，将测试和参考序列输入计算机中，必要时指定子序列坐标，并指定序列算法程序参数。可以使用默认程序参数，或者可以指定可选参数。然后，序列比较算法基于程序参数计算测试序列相对于参考序列的序列同一性百分比。
[0084]
如本文所用，“比较窗口”包括提及多个连续位置中的任一个的区段，其选自由以下组成的组：例如全长序列或20至600、约50至约200、或约100至约150个氨基酸或核苷酸，其中在两个序列最佳比对之后，可以将一种序列与具有相同数量连续位置的参考序列进行比较。用于比较的序列比对方法在本领域是众所周知的。用于比较的最佳序列比对可以通过以下方法进行：smith和waterman(1970)《应用数学进展(adv.appl.math.)》2:482c的局部同源算法，needleman和wunsch(1970)《分子生物学杂志(j.mol.biol.)》48:443的同源比对算法，pearson和lipman(1988)《美国国家科学院院刊(proc.nat'l.acad.sci.usa)》85:2444的关于类似性方法的探索，通过这些算法(威斯康星遗传软件包(wisconsin genetics software package)gap、bestfit、fasta和tfasta,遗传学计算机组(genetics computer group)，威斯康星州麦迪逊科学大道575号(575 science dr.,madison,wi))的电脑化实施，或通过手动比对和目测(参见，例如，ausubel等人,《最新分子生物学实验方法汇编(current protocols in molecular biology)》(1995年副刊))进行。
[0085]
适用于确定序列同一性百分比和序列相似性的算法的实例是blast和blast 2.0算法，其分别描述于altschul等人(1977)《核酸研究(nuc.acids res.)》25:3389-3402和
altschul等人(1990)《分子生物学杂志》215:403-410中。用于进行blast分析的软件可通过美国国家生物技术信息中心(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)公开获得。此算法涉及通过识别查询序列中长度为w的短字来首先识别高评分序列对(hsp)，所述短字当与数据库序列中相同长度的字比对时匹配或满足某些正值阈值分数t。t称作临近字分数阈值(altschul et al.，同上)。这些初始邻近字命中点充当启动检索以找到含有其的更长hsp的种子。字命中点沿每一序列在两个方向上延伸，直到可以增加累积比对评分为止。对于核苷酸序列来说，累积评分使用参数m(一对匹配残基的奖励评分；始终》0)和n(失配残基的惩罚评分；始终《0)来计算。对于氨基酸序列，使用计分矩阵计算累积评分。当累积比对评分从其达到的最大值降低量x；累积评分因一次或多次负分残基比对的累积而变成零或低于零；或到达任一序列的末端时，中断字命中点在各方向上的延伸。blast算法参数w、t和x确定比对的灵敏度和速度。blastn程序(对于核苷酸序列)默认使用的字长(w)为11，期望值(e)或10，m＝5，n＝-4以及两条链的比较。对于氨基酸序列，blastp程序默认使用3的字长和10的期望值(e)，以及blosum62评分矩阵(参见henikoff和henikoff(1989)美国科学院院刊(proc.natl.acad.sci.usa)89:10915)，比对(b)为50，期望值(e)为10，m＝5，n＝-4，以及两条链的比较。
[0086]
blast算法还对两个序列之间的相似性进行统计分析(参见例如，karlin和altschul(1993)《美国国家科学院院刊》90:5873-5787)。由blast算法提供的一种类似性度量是最小和概率(p(n))，其提供对两个核苷酸或氨基酸序列之间将偶然发生匹配的概率的指示。举例来说，如果测试核酸与参考核酸的比较中最小和概率约低于0.2，更优选地约低于0.01，并且最优选地约低于0.001，则认为核酸类似于参考序列。
[0087]
两个核酸序列或多肽基本上相同的指示是由第一核酸编码的多肽与针对由第二核酸编码的多肽产生的抗体具有免疫交叉反应性，如下文所述。因此，多肽通常与第二多肽基本上相同，例如，其中两种肽仅通过保守取代而不同。两个核酸序列基本上一致的另一个指示是，两个分子或其互补序列在严格条件下彼此杂交，如下文所述。两个核酸序列基本相同的又一个指示是，相同引物可以用于扩增序列。
[0088]
抗体是具有复杂内部结构的大而复杂的分子(分子量为～150,000或约1320个氨基酸)。天然抗体分子包括两对相同的多肽链，每对具有一条轻链和一条重链。每条轻链和重链依次由两个区域组成：可变(“v”)区，参与结合靶标抗原，和恒定(“c”)区，其与免疫系统的其他组分相互作用。轻链和重链可变区(在本文中分别也称为轻链可变(vl)结构域和重链可变(vh)结构域)在3维空间中结合在一起以形成结合抗原(例如，细胞表面上的受体)的可变区。在每个轻链或重链可变区内，有三个短链段(平均长度为10个氨基酸)，称为互补决定区(“cdrs”)。抗体可变域中的六个cdrs(三个来自轻链，且三个来自重链)在3维空间中折叠在一起，以形成对接在靶抗原上的实际抗体结合位点。cdr的位置和长度已由kabat,e.et al.,sequences of proteins of immunological interest,u.s.department of health and human services,1983,1987.精确定义。cdr中未包含的可变区部分称为框架(“fr”)，它形成了cdrs的环境。
[0089]
如本文所提供的“抗体变体”是指能够结合抗原并且包括抗体或其片段的一个或多个结构域(例如，轻链可变域、重链可变域)的多肽。抗体变体的非限制性实例包括单结构域抗体或纳米抗体、单特异性fab2、双特异性fab
2、
三特异性fab
3、
单价igg、scfv、双特异性抗
体、双特异性双抗体、三特异性三抗体、scfv-fc、小抗体、ignar、v-nar、hcigg、vhh或肽体。如本文提供的“肽体”是指(通过共价或非共价接头)附接至抗体的fc结构域的肽部分。本领域已知的抗体变体的其他非限制性实例包括由软骨鱼或骆驼科动物产生的抗体。骆驼科动物的抗体及其可变区及它们的产生、分离和使用方法的一般描述可在参考文献wo97/49805和wo 97/49805中找到，通过引用将其整体并入本文中，并用于所有目的。同样，软骨鱼的抗体及其可变区及它们的产生、分离和使用的方法可在wo2005/118629中找到，通过引用将其整体并入本文中，并用于所有目的。
[0090]
如本文所提供的术语“cdr l1”、“cdr l2”和“cdr l3”是指抗体可变轻链(l)的互补决定区(cdr)1、2和3。在实施例中，本文提供的可变轻链在n-末端至c-末端的方向上包括cdr l1、cdr l2和cdr l3。本文提供的术语“cdr h1”、“cdr h2”和“cdr h3”是指抗体可变重链(h)的互补性决定区(cdr)1、2和3。在实施例中，本文提供的可变重链在n端至c端的方向上包括cdr h1、cdr h2和cdr h3。
[0091]
如本文所提供的术语“fr l1”、“fr l2”、“fr l3”和“fr l4”根据其在本领域中的常见含义使用，并指抗体的可变轻(l)链的框架区(fr)1、2、3和4。在实施例中，本文提供的可变轻链在n端到c端的方向上包括fr l1、fr l2、fr l3和fr l4。同样，本文所提供的术语“fr h1”、“fr h2”、“fr h3”和“fr h4”是根据其在本领域中的常见含义使用的，并是指抗体的可变重(h)链的框架区(fr)1、2、3和4。在实施例中，本文提供的可变重链在n端到c端的方向上包括fr h1、fr h2、fr h3和fr h4。
[0092]
示范性免疫球蛋白(抗体)结构单元包含四聚体。每个四聚体由两对相同的多肽链组成，每对多肽链有一个“轻”(约25kd)链和一个“重”链(约50-70kd)。每条链的n端定义了约100-110个或更多个氨基酸的可变区，其主要负责抗原识别。术语可变轻链(vl)、可变轻链(vl)结构域或轻链可变区和可变重链(vh)、可变重链(vh)结构域或重链可变区分别是指这些轻链和重链区域。本文所称的术语可变轻链(vl)、可变轻链(vl)结构域和轻链可变区可以互换使用。本文所称的术语可变重链(vh)、可变重链(vh)结构域和重链可变区可以互换使用。fc(即，可结晶片段区域)是免疫球蛋白的"基础"或"尾部"，且通常由两条重链组成，所述两条重链根据抗体的种类贡献两个或三个恒定结构域。通过与特定蛋白质结合，fc区域可确保每种抗体针对给定的抗原产生适当的免疫应答。fc区域还与各种细胞受体(比如fc受体)和其他免疫分子(比如补体蛋白)结合。
[0093]
根据其在本领域中通常已知的含义使用术语“抗体”。抗体例如以完整的免疫球蛋白形式存在或以各种肽酶消化产生的许多充分表征的片段形式存在。因此，例如，胃蛋白酶消化铰链区中二硫键下方的抗体以产生f(ab)'2，其为fab的二聚体，本身是通过二硫键与连接的轻链。f(ab)'2可以在温和的条件下还原以破坏铰链区中的二硫键，从而将f(ab)'2二聚体转化为fab'单体。fab'单体基本上为具有铰链区的一部分的fab(参见《基础免疫学(fundamental immunology)》(paul编辑，第3版，1993)。尽管就完整抗体的消化而言定义了各种抗体片段，但是本领域技术人员将理解，可以化学方式或通过使用重组dna方法从头合成此类片段。因此，如本文所用，术语抗体还包括通过修饰完整抗体产生的抗体片段，或使用重组dna方法从头合成的那些(例如单链fv)或使用噬菌体展示文库鉴定的那些(参见例如，mccafferty等自然(nature)348:552-554(1990))。如本文所指的术语“抗体”还包括抗体变体，如单域抗体。因此，在实施例中，抗体包括单个单体可变抗体结构域。因此，
在实施例中，抗体包括可变轻链(vl)域或可变重链(vh)域。在实施例中，抗体是可变轻链(vl)域或可变重链(vh)域。
[0094]
为了制备单克隆或多克隆抗体，可以使用本领域已知的任何技术(参见，例如，kohler和milstein，《自然(nature)》256:495-497(1975年)；kozbor等人，《今日免疫学(immunology today)》4:72(1983年)；cole等人，《单克隆抗体和癌症治疗(monoclonal antibodies and cancer therapy)》第77-96页(1985年))。“单克隆”抗体(mab)是指来源于单个克隆的抗体。产生单链抗体的技术(第4,946,778号美国专利)可适于产生针对本发明多肽的抗体。同样，转基因小鼠或其他生物(比如其他哺乳动物)也可用于表达人源化抗体。可选地，噬菌体展示技术可以用于鉴定特异性结合所选抗原的抗体和异源fab片段(参见，例如，mccafferty等人，《自然(nature)》348:552-554(1990年)；marks等人，《生物技术(biotechnology)》10:779-783(1992年)。
[0095]
mab的表位是mab与其抗原结合的区域。如果两种抗体中的每种竞争性地抑制(阻断)另一种抗体与抗原的结合，则两种抗体会结合到相同或重叠的表位上。也就是说，如在竞争性结合测定中测量的，1x、5x、10x、20x或100x过量的一种抗体将另一种抗体的结合抑制至少30％，但优选50％、75％、90％或甚至99％(参见例如，junghans等,癌症研究(cancer res.)50:1495,1990)。可选地，如果抗原中基本上所有减少或消除一种抗体的结合的氨基酸突变都减少或消除了另一种抗体的结合，则两种抗体具有相同的表位。如果减少或消除一种抗体的结合的一些氨基酸突变减少或消除了另一种抗体的结合，则两种抗体具有重叠的表位。
[0096]
单链可变片段(scfv)通常是利用10至约25个氨基酸的短连接肽连接的免疫球蛋白的重链(vh)和轻链(vl)可变区的融合蛋白。所述接头通常可富含甘氨酸以提高柔韧性，以及丝氨酸或苏氨酸以提高溶解度。接头可以将vh的n-末端与vl的c-末端相连，反之亦然。
[0097]
为了制备本发明的合适抗体并且为了根据本发明使用，例如重组、单克隆或多克隆抗体，可以使用本领域已知的许多技术(参见，例如，kohler和milstein，《自然》256:495-497(1975)；kozbor等人，《今日免疫学(immunology today)》4:72(1983)；cole等人，《单克隆抗体与癌症疗法(antibodies and cancer therapy)》第77-96页，alan r.liss公司(alan r.liss,inc.)(1985)；coligan，《当代免疫学实验手册(current protocols in immunology)》(1991)；harlow和lane，《抗体，实验室手册(antibodies,a laboratory manual)》(1988)；以及goding，《单克隆抗体：原理和实践(monoclonal antibodies:principles and practice)》(第2版，1986))。编码所关注的抗体的重链和轻链的基因可以从细胞中克隆，例如，编码单克隆抗体的基因可以从杂交瘤中克隆，并且用于产生重组单克隆抗体。编码单克隆抗体重链和轻链的基因文库也可以从杂交瘤或浆细胞中制备。重链和轻链基因产物的随机组合生成具有不同抗原特异性的大量抗体(参见，例如，kuby,《免疫学(immunology)》(第3版，1997))。用于产生单链抗体或重组抗体的技术(第4,946,778号美国专利、第4,816,567号美国专利)可适于产生针对本发明多肽的抗体。同样，转基因小鼠或如其它哺乳动物等其它生物体可以用于表达人源化抗体或人抗体(参见，例如，美国专利第5,545,807号；第5,545,806号；第5,569,825号；第5,625,126号；第5,633,425号；第5,661,016号，marks等人，《生物技术(bio/technology)》10:779-783(1992)；lonberg等人，《自然》368:856-859(1994)；morrison，《自然》368:812-13(1994)；fishwild等人，《自然生物技术
(nature biotechnology)》14:845-51(1996)；neuberger，《自然生物技术》14:826(1996)；以及lonberg和huszar，《国际免疫学评论(intern.rev.immunol.)》13:65-93(1995))。可选地，噬菌体展示技术可以用于鉴定特异性结合所选抗原的抗体和异源fab片段(参见，例如，mccafferty et al.,自然(nature)348:552-554(1990)；marks等,生物技术10:779-783(1992))。还可以将抗体制备成双特异性的，即，能够识别两种不同的抗原(参见，例如，wo 93/08829，traunecker等人，《欧洲分子生物学学会杂志(embo j.)》10:3655-3659(1991)；以及suresh等人，《酶学方法(methods in enzymology)》121:210(1986))。抗体也可以是异源缀合物，例如两种共价连接的抗体或免疫毒素(参见，例如，美国专利第4,676,980号、wo 91/00360；wo 92/200373和ep 03089)。
[0098]
用于人源化或灵长类动物源化非人类抗体的方法是本领域众所周知的(例如，美国专利第4,816,567号；第5,530,101号；第5,859,205号；第5,585,089号；第5,693,761号；第5,693,762号；第5,777,085号；第6,180,370号；第6,210,671号；和第6,329,511；wo 87/02671；ep专利申请0173494；jones等人(1986)《自然》321:522；和verhoyen等人(1988)《科学(science)》239:1534)。人源化的抗体在例如winter和milstein(1991)nature 349:293中有进一步的描述。通常，人源化的抗体具有从非人来源引入其中的一个或多个氨基酸残基。这些非人氨基酸残基通常被称为输入残基，其通常取自输入可变域。人源化基本上可以按照winter和其同事的方法进行(参见，例如，morrison等人，《美国科学院院刊(pnas usa)》，81:6851-6855(1984)，jones等人，《自然》321:522-525(1986)；riechmann等人，《自然》332:323-327(1988)；morrison和oi，《免疫学进展》44:65-92(1988)，verhoeyen等人，《科学》239:1534-1536(1988)和presta，《结构生物学的当代观点(curr.op.struct.biol.)》2:593-596(1992)，padlan，《分子免疫学(molec.immun.)》，28:489-498(1991)；padlan，《分子免疫学》31(3):169-217(1994))，通过用啮齿动物cdr或cdr序列置换人抗体的对应序列来执行。因此，这样的人源化抗体是嵌合抗体(第4,816,567号美国专利)，其中大幅少于完整的人可变域已被来自非人物种的相应序列取代。在实践中，人源化抗体通常是人抗体，其中一些cdr残基和可能的一些fr残基被来自啮齿动物抗体中类似位点的残基取代。例如，可以合成地或通过组合适当的cdna和基因组dna区段来产生包含编码人源化免疫球蛋白框架区的第一序列和编码所需免疫球蛋白互补性决定区的第二序列集的多核苷酸。可以根据众所周知的方法从各种人细胞中分离人恒定区dna序列。
[0099]“嵌合抗体”是一种抗体分子，其中(a)恒定区或其一部分被改变、置换或交换，使得抗原结合位点(可变区)与不同或改变类别、效应子功能和/或物种或赋予嵌合抗体新特性的完全不同的分子，例如，酶、毒素、激素、生长因子、药物连接；(b)可变区或其一部分被具有不同或改变的抗原特异性的可变区改变、置换或交换。根据本发明的或用于根据本发明的用途的优选抗体包括人源化的和/或嵌合的单克隆抗体。
[0100]
用于将治疗剂与抗体缀合的技术是众所周知的(参见，例如，arnon等人，《用于癌症治疗中药物免疫靶向的单克隆抗体》，在《单克隆抗体和癌症治疗》中，reisfeld等人(编辑)，第243至56页(alan r.liss公司，1985)；hellstrom等人，《用于药物递送的抗体(antibodies for drug delivery)》，在《药物控制递送(controlled drug delivery)》(第2版)中，robinson等人(编辑)，第623至53页(marcel dekker公司，1987)；thorpe，《癌症治疗中细胞毒剂的抗体载体：综述》，在《单克隆抗体'84：生物学和临床应用》中，pinchera等
人(编辑)，第475至506页(1985)；和thorpe等人，《抗体-毒素偶联物的制备和细胞毒特性》，《免疫学综述(immunol.rev.)》62:119-58(1982))。如本文所用，术语“抗体-药物偶联物”或“adc”是指与抗体偶联或以其它方式共价结合的治疗剂。
[0101]
如本文所指，“治疗剂”是用于治疗或预防如癌症等疾病(例如，白血病)的组合物。在实施例中，治疗剂为抗癌剂。“抗癌剂”按照其简单的普通含义使用，并且是指具有抗肿瘤性质或抑制细胞生长或增殖能力的组合物(例如化合物、药物、拮抗剂、抑制剂、调节剂)。在实施方案中，抗癌剂是化疗剂。在实施方案中，抗癌剂是本文中鉴定的在治疗癌症的方法中具有效用的试剂。在实施方案中，抗癌剂是由fda或美国以外的国家的类似监管机构批准的用于治疗癌症的试剂。
[0102]
当涉及蛋白质或肽时，短语“特异性(或选择性)结合”至抗体或“与
……
特异性(或选择性)免疫反应”，是指通常在蛋白质和其它生物制剂的异质群体中确定蛋白质存在的结合反应。因此，在指定的免疫测定条件下，指定的抗体与特定蛋白质的结合是本底的至少两倍，并且更通常是本底的10至100倍以上。在这种条件下与抗体的特异性结合需要选择对特定蛋白质具有特异性的抗体。例如，可选择多克隆抗体以仅获得与所选抗原而不与其它蛋白质发生特异性免疫反应的抗体的子集。这一选择可以通过减去与其它分子交叉反应的抗体来实现。可以使用多种免疫测定形式来选择与特定蛋白质发生特异性免疫反应的抗体。例如，常规使用固相elisa免疫测定来选择与蛋白质发生特异性免疫反应的抗体(关于可用于确定特异性免疫反应的免疫测定形式和条件的描述，参见例如harlow和lane，《使用抗体-实验室手册(using antibodies,a laboratory manual)》(1998))。
[0103]“配体”是指能够结合受体或抗体、抗体变体、抗体区域或其片段的试剂，例如多肽或其它分子。
[0104]
本文所用的术语“il1rap”是指维持il1rap活性(例如与il1rap相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的任何重组体或天然存在形式的白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)或其变体或同源物。在一些方面，与天然存在的il1rap多肽相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，10、20、50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，il1rap与由uniprot参考编号q9nph3识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0105]“标记”或“可检测部分”是可通过光谱、光化学、生物化学、免疫化学、化学或其它物理方式检测的组合物。例如，有用的标记包括32p、荧光染料、电子致密试剂、酶(例如，通常用于elisa中的酶)、生物素、地高辛(digoxigenin)或半抗原和蛋白质或可检测的其它实体，例如通过将放射性标记并入与目标肽发生特异性反应的肽或抗体中。可以使用本领域已知的用于使抗体与标记缀合的任何适当方法，例如使用hermanson，《生物结合物技术(bioconjugate techniques)》1996，圣地亚哥学术出版社有限公司(academic press,inc.)中描述的方法。
[0106]“接触”根据其简单的普通含义使用，并且是指使至少两种不同物种(例如抗体和抗原)变得足够接近以进行反应、相互作用或物理触摸的过程。然而，应理解，所得反应产物可以直接由所添加试剂之间的反应或者由来自一种或多种所添加试剂的可以在反应混合物中产生的中间物来制备。
[0107]
术语“接触”可以包括允许两种物种反应、相互作用或物理接触，其中两种物种可以为例如本文提供的药物组合物和细胞。在实施例中，接触包括，例如，允许本文描述的药物组合物与细胞相互作用。
[0108]
如本文所用，“细胞”是指执行足以保存或复制其基因组dna的代谢或其它功能的细胞。细胞可以通过本领域的公知方法来识别，所述方法包含：例如，存在完整膜、利用特定染料染色、繁殖后代的能力，或者如有配子，与第二配子结合产生可存活子代的能力。细胞可以包含原核细胞和真核细胞。原核细胞包含但不限于细菌。真核细胞包括但不限于酵母细胞和源自植物和动物的细胞，例如哺乳动物、昆虫(例如，夜蛾)和人类细胞。
[0109]
本文提供的“干细胞”是指具有通过有丝分裂进行自我更新的能力和分化成组织或器官的潜力的细胞。在哺乳动物干细胞之中，可以区分胚胎干细胞(es细胞)和体干细胞(例如，hsc)。胚胎干细胞存留在胚泡中并产生胚胎组织，而体干细胞存留在成体组织中以用于组织再生和修复的目的。在实施李中，干细胞是白血病干细胞(lsc)。本文提供的“白血病干细胞或“lsc”是指在移植到免疫缺陷动物中时能够引发疾病(白血病)并且可以通过在连续移植中引起白血病而自我更新并且还可以部分分化成类似于原始疾病但不能自我更新的非lsc体细胞的细胞。lsc可能携带基因突变并能够通过有丝分裂细胞分裂自我更新和分化成携带所述基因突变体或lsc的造血谱系可保留为未成熟祖细胞，也称为胚细胞。在实施例中，lsc表达cd34。
[0110]
本文提及的“cd34”包括维持cd34活性(例如与cd34相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的分化34蛋白簇，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的cd34蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，cd34蛋白与由uniprot参考编号p28906识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0111]
当参考例如细胞、核酸、蛋白质或载体使用时，术语“重组”表示细胞、核酸、蛋白质或载体已通过引入异源核酸或蛋白质或改变天然核酸或蛋白质而被修饰，或细胞来源于如此修饰的细胞。因此，例如，重组细胞表达在细胞的天然(非重组)形式中不存在的基因或表达以其它方式异常表达、表达不足或根本不表达的天然基因。转基因细胞和植物是那些表达异源基因或编码序列的细胞和植物，通常是重组方法的结果。
[0112]
术语“异源”当用于提及核酸的部分时，表示核酸包含两个或多个在自然界中彼此不存在相同关系的子序列。例如，核酸通常是重组产生的，具有来自不相关基因的两个或更多个序列，这些序列被排列成产生新的功能性核酸，例如来自一个来源的启动子和来自另一个来源的编码区。类似地，异源蛋白质表明该蛋白质包含两个或更多个在自然界中彼此不存在相同关系的子序列(例如，融合蛋白)。
[0113]
术语“外源的”是指源自给定细胞或生物体外部的分子或物质(例如，化合物、核酸或蛋白质)。例如，本文所指的“外源启动子”是不来源于其表达的细胞或生物体的启动子。相反，术语“内源的”或“内源启动子”是指给定细胞或生物体原生的或源于给定细胞或生物体内的分子或物质。
[0114]
如本文所定义，关于细胞增殖(例如，癌细胞增殖)的术语“抑制(inhibition)”、“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibiting)”等是指负面影响(例如，降低增殖)或杀死细胞。在一些实施例中，抑制是指减轻疾病或疾病的症状(如癌症、癌细胞增殖)。因此，抑制至少部分地包含部分或完全阻断刺激、降低、预防或延迟激活、脱敏或下调信号转导或酶活性或蛋白质的量。类似地，“抑制剂”是例如通过结合、部分或完全阻断、降低、预防、延迟、失活、脱敏或下调活性(例如，受体活性或蛋白质活性)来抑制受体或另一蛋白质的化合物或蛋白质。
[0115]“生物样品”或“样品”是指获自或来源于受试者或患者的材料。生物样品包含组织切片，如活检和尸检样品，以及用于组织学目的的冷冻切片。此类样品包括体液，如血液和血液部分或产物(例如，血清、血浆、血小板、红细胞等)、痰、组织、培养的细胞(例如，原代培养物、外植体以及转化的细胞)、粪便、尿液、滑液、关节组织、滑膜组织、滑膜细胞、成纤维细胞样滑膜细胞、巨噬细胞样滑膜细胞、免疫细胞、造血细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、t细胞等。生物样品通常获自真核生物体，如哺乳动物，如灵长类动物，例如黑猩猩或人类；牛；犬；猫；啮齿动物，例如豚鼠、大鼠、小鼠；兔；或鸟；爬行动物；或鱼。
[0116]“对照”或“标准对照”是指用作参考的样品、测量或数值，通常是已知的参考，用于与测试样品、测量或数值进行比较。例如，测试样品可以从疑似患有给定疾病(例如癌症)的患者采集，并与已知的正常(非疾病)个体(例如标准对照受试者)进行比较。标准对照还可以代表从没有给定疾病的相似个体(例如标准对照受试者)群体(即标准对照群体)，例如，具有相似医学背景、相同年龄、体重等的健康个体中收集的平均测量值或数值。标准对照值也可以从同一个体获得，例如在疾病发作之前从患者获得的早期样品。例如，可以设计对照，以基于药理学数据(例如，半衰期)或治疗措施(例如，副作用的比较)比较治疗益处。对照对于确定数据的显著性也很有价值。例如，如果给定参数的值在对照中变化很大，则测试样品中的变化将不被认为是显著的。技术人员将认识到，可以设计标准对照以评估任何数量的参数(例如，rna水平、蛋白质水平、特定细胞类型、特定体液、特定组织、滑膜细胞、滑液、滑膜组织、成纤维细胞样滑膜细胞、巨噬细胞样滑膜细胞等)。
[0117]
本领域技术人员将理解，在给定情形下哪种标准对照是最适合的，且能够基于与标准对照值的比较来分析数据。标准对照对于确定数据的显著性(例如统计显著性)也很有价值。例如，如果标准对照中给定参数的值广泛变化，那么测试样品的变化将不被视为显著的。
[0118]“患者”或“有需要的受试者”是指患有或易患疾病或病况的活生物体，其可以通过施用本文提供的组合物或药物组合物来治疗。非-限制性实例包含人、其它哺乳动物、牛科动物、大鼠、小鼠、狗、猴、山羊、绵羊、牛、鹿和其它非-哺乳动物。在一些实施例中，患者是人。
[0119]
术语“疾病”或“病况”是指能够用本文提供的化合物或方法治疗的患者或受试者的存在状态或健康状态。疾病可以是癌症。在一些其它示例中，“癌症”是指人癌症和癌瘤、肉瘤、腺癌、淋巴瘤、白血病等，包括实体癌和淋巴癌、肾癌、乳癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、脑癌、头颈癌、皮肤癌、子宫癌、睾丸癌、神经胶质瘤、食道癌和肝癌(包括肝癌瘤)、淋巴瘤(包括b型急性淋巴母细胞淋巴瘤)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-hodgkin's lymphomas)(例如，伯基特氏(burkitt's)淋巴瘤、小细胞淋巴瘤和大细胞淋巴瘤)、霍奇金氏淋巴瘤、白血病(包括急性髓性白血病(aml)、all和cml)或多发性骨髓瘤。
[0120]
如本文所用，术语“癌症”是指发现于哺乳动物(例如，人类)中的所有类型的癌症、赘瘤或恶性肿瘤，包括白血病、癌瘤和肉瘤。可用本文提供的化合物或方法治疗的示范性癌症包括乳腺癌、结肠癌、肾癌、白血病、肺癌、黑色素瘤、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、脑癌、肝癌、胃癌或肉瘤。
[0121]
术语“白血病”泛指造血器官的进行性恶性疾病，并且总体上以血液和骨髓中的白细胞及其前体的畸形增殖和发展为特征。白血病通常在临床上基于以下进行分类：(1)急性病或慢性病的持续时间和特性；(2)所涉及的细胞的类型；髓样(骨髓性的)、淋巴样(淋巴性的)或单核细胞的；以及(3)异常细胞在血液中的数量的增加或非增加-白血病性或非白血病性(亚白血病性)。可以用本文提供的化合物或方法治疗的示范性白血病包括例如急性髓性白血病、急性非淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、急性前髓细胞性白血病、成人t细胞白血病、非白血性白血病、白血病性白血病、嗜碱性粒细胞白血病、母细胞白血病、牛白血病、慢性髓细胞性白血病、皮肤白血病、胚胎性白血病、嗜酸性粒细胞白血病、格罗斯氏白血病(gross'leukemia)、毛细胞白血病、成血细胞性白血病(hemoblastic leukemia)、血胚细胞白血病、组织细胞性白血病、干细胞白血病、急性单核细胞性白血病、白细胞减少性白血病、淋巴性白血病、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、淋巴性白血病、淋巴样白血病、淋巴肉瘤细胞白血病、肥大细胞白血病、巨核细胞白血病、小原粒细胞性白血病、单核细胞性白血病、成骨髓细胞性白血病、骨髓细胞性白血病、骨髓粒细胞性白血病、骨髓单核细胞性白血病、内格利氏白血病(naegeli leukemia)、浆细胞白血病、多发性骨髓瘤、浆细胞性白血病、早幼粒细胞性白血病、李德尔氏细胞白血病(rieder cell leukemia)、希林氏白血病(schilling's leukemia)、干细胞白血病、亚白血性白血病或未分化型细胞白血病。
[0122]
术语“肉瘤”通常是指由类似于胚胎结缔组织的物质组成的肿瘤，并且通常由包埋在纤维状或均质物质中的紧密堆积的细胞构成的肿瘤。可以用本文所提供的化合物或方法治疗的肉瘤包括软骨肉瘤、纤维肉瘤、淋巴肉瘤、黑色素肉瘤、粘液肉瘤、骨肉瘤、阿贝西氏肉瘤(abemethy's sarcoma)、脂肉瘤、脂肪肉瘤、腺泡状软部分肉瘤、成釉细胞肉瘤、葡萄样肉瘤、绿色癌肉瘤、绒毛膜癌、胚胎肉瘤、威尔姆斯氏瘤肉瘤(wilms'tumor sarcoma)、子宫内膜肉瘤、间质肉瘤、尤文氏肉瘤(ewing's sarcoma)、筋膜肉瘤、成纤维细胞肉瘤、巨细胞肉瘤、粒细胞肉瘤、霍奇金肉瘤、特发性多发性色素沉着出血性肉瘤、b细胞的免疫母细胞肉瘤、淋巴瘤、t细胞的免疫母细胞肉瘤、詹森氏肉瘤(jensen's sarcoma)、卡波西氏肉瘤(kaposi's sarcoma)、库普弗细胞肉瘤(kupffer cell sarcoma)、血管肉瘤、白血病性肉瘤(leukosarcoma)、恶性间皮瘤肉瘤、骨膜外肉瘤、网状细胞肉瘤、劳斯氏肉瘤(rous sarcoma)、浆液性囊肿肉瘤(serocystic sarcoma)、滑膜肉瘤或毛细血管扩张性肉瘤(telangiectaltic sarcoma)。
[0123]
术语“黑色素瘤”应理解为由皮肤和其它器官的黑色素细胞系统产生的肿瘤。可以用本文所提供的化合物或方法治疗的黑色素瘤包含例如肢端雀斑样痣黑色素瘤、无黑色素性黑色素瘤、良性幼年黑色素瘤、克劳德曼氏黑色素瘤(cloudman's melanoma)、s91黑色素瘤、哈丁-帕西氏黑色素瘤(harding-passey melanoma)、少年黑色素瘤、恶性雀斑样痣、恶性黑色素瘤、结节性黑色素瘤、甲下黑色素瘤或浅表扩散性黑色素瘤。
[0124]
术语“癌瘤”是指由上皮细胞组成的恶性新生长，倾向于浸润周围组织并引起转
移。可以用本文所提供的化合物或方法治疗的示例性癌瘤包括例如甲状腺髓样癌、家族性甲状腺髓样癌、腺泡癌、腺泡状癌、腺样囊性癌(adenocystic carcinoma)、腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma)、腺癌、肾上腺皮质癌、肺泡癌、肺泡细胞癌、基底细胞癌、基底样细胞瘤、基底细胞样癌、基底鳞状细胞癌、细支气管肺泡癌、细支气管癌、支气管癌、脑状癌、胆管细胞癌、绒毛膜癌、胶样癌、粉刺癌、子宫体癌、筛状癌、铠甲状癌、皮肤癌、柱状癌、柱状细胞癌、管癌、硬癌、胚胎癌、髓样癌、表皮样癌、腺样上皮细胞癌、外植癌、溃疡性癌(carcinoma ex ulcere)、纤维癌、胶样癌(gelatiniforni carcinoma)、胶状癌、巨大细胞癌、巨细胞癌、腺癌、粒层细胞癌、毛母质癌(hair-matrix carcinoma)、血样癌(hematoid carcinoma)、肝细胞癌、贺氏细胞腺癌(hurthle cell carcinoma)、玻质状癌(hyaline carcinoma)、肾上腺样癌、幼稚型胚胎性癌、原位癌、表皮内癌、上皮内癌、克龙派切尔氏癌(krompecher's carcinoma)、库尔奇茨基细胞癌(kulchitzky-cell carcinoma)、大细胞癌、豆状癌(lenticular carcinoma)、豆状癌(carcinoma lenticulare)、脂瘤样癌、淋巴上皮癌、髓质癌、髓性癌、黑色素癌、软癌、粘液癌、粘液性癌、粘液细胞癌、粘液表皮样癌、粘液质癌、粘液样癌、粘液瘤样癌、鼻咽癌、燕麦细胞癌、骨化性癌(carcinoma ossificans)、骨样癌(osteoid carcinoma)、乳头状癌、门静脉周癌、浸润前癌、棘细胞癌、软糊状癌(pultaceous carcinoma)、肾脏肾细胞癌、储备细胞癌、肉瘤样癌、施奈德癌(schneiderian carcinoma)、硬癌、阴囊癌、印戒细胞癌、单纯癌、小细胞癌、马铃薯状癌、球状细胞癌、梭形细胞癌、髓状癌(carcinoma spongiosum)、鳞状癌、鳞状细胞癌、string癌(string carcinoma)、血管扩张性癌(carcinoma telangiectaticum)、血管扩张性癌(carcinoma telangiectodes)、移行细胞癌、结节性皮癌(carcinoma tuberosum)、结节性皮癌(tuberous carcinoma)、疣状癌或绒毛状癌。
[0125]
如本文所用，术语“转移”、“转移性”和“转移性癌症”可以互换使用，并且指增殖性疾病或病症(例如癌症)从一个器官或另一个不相邻的器官或身体部分的扩散。癌症出现在起始部位(例如乳房)，这一部位被称为原发性肿瘤，例如原发性乳腺癌。原发性肿瘤或起始部位的一些癌细胞获得了穿透和渗透局部区域周围正常组织的能力和/或穿透通过系统循环到体内的其它部位和组织的淋巴系统或血管系统壁的能力。由原发性肿瘤的癌细胞形成的第二种临床可检测肿瘤被称为转移性或继发性肿瘤。当癌细胞转移时，推测转移性肿瘤及其细胞与原发性肿瘤相似。因此，如果肺癌转移到乳腺，则乳腺部位的继发性肿瘤由异常的肺细胞而非异常的乳腺细胞组成。乳房中的继发性肿瘤是指转移性肺癌。因此，短语转移性癌症是指其中受试者患有或曾经患有原发性肿瘤并患有一种或多种继发性肿瘤的疾病。短语非转移性癌症或患有非转移性癌症的个体是指其中个体患有原发性肿瘤但不患有一种或多种继发性肿瘤的疾病。例如，转移性肺癌是指患有原发性肺肿瘤或具有原发性肺肿瘤史并且在第二个位置或多个位置(例如，在乳房中)含有一种或多种继发性肿瘤的个体中的疾病。
[0126]
在与疾病(例如，癌症(例如白血病、急性髓性白血病))相关的物质或物质活性或功能的上下文中，术语“相关”或“与
……
相关”意指该疾病(例如，癌症(例如白血病、急性髓性白血病))是由(全部或部分)物质或物质活动或功能引起的，或者该疾病的症状是由(全部或部分)物质或物质活动或功能引起的。替代地，物质(例如，il1rap)可以是疾病(例如，癌症(例如，白血病、急性髓性白血病))的指标。因此，相关物质可用作靶向疾病组织(例如，
癌细胞(例如，白血病干细胞、急性髓性白血病细胞))的手段。
[0127]
如本文所用，“治疗(treating)”或“治疗(treatment of)”病况、疾病或病症或与病况、疾病或病症相关的症状是指用于获得有益或期望结果，包括临床结果的方法。有益或期望的临床结果可以包括但不限于减轻或改善一种或多种症状或病况，减轻病况、病症或疾病的程度，稳定病况、病症或疾病的状态，预防病况、病症或疾病，预防病况、病症或疾病的传播，延迟或减缓病况、病症或疾病进展，延迟或减慢病况、病症或疾病发作，改善或减轻病况、病症或疾病状态，以及缓解，无论是部分还是全部。“治疗”还可以意指将受试者的存活时间延长至超出未进行治疗时预期的存活时间。“治疗”还可以意指抑制病况、病症或疾病的进展，暂时减缓病况、病症或疾病的进展，尽管在某些情况下，它涉及永久地停止病况、病症或疾病的进展。如本文所用，术语“治疗(treatment)”、“治疗(treat)”或“治疗(treating)”是指降低以蛋白酶表达为特征的疾病或病况的一种或多种症状或者以蛋白酶表达为特征的疾病或病况的症状的影响的方法。因此，在所公开的方法中，治疗可以指已确定疾病、病况或者疾病或病况的症状的严重性降低10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。例如，如果与对照相比，对象中的一种或多种疾病症状减少了10％，则认为疾病的治疗方法为治疗。因此，相比天然或对照水平，减少可以是10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％，或者10％至100％之间的任何减少百分比。应当理解，治疗不一定是指疾病、病况或者疾病或病况的症状的治愈或完全消融。此外，如本文所用，提及降低、减少或抑制包括相比对照水平，10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更大的变化，并且这样的术语可以包括但不一定包括完全消融。
[0128]
术语“剂量(dose)”和“剂量(dosage)”在本文中可互换使用。剂量是指在每次施用时给予个体的活性成分的量。剂量将根据许多因素而有所不同，包括给定疗法的正常剂量范围、施用频率；个体的大小和容忍度；病情的严重程度；副作用的风险；以及施用途径。本领域技术人员将认识到可以根据上述因素或基于治疗进展来修改剂量。术语“剂型”是指药物或药物组合物的特定形式，并且取决于施用途径。例如，剂型可以是用于雾化的液体形式，例如用于吸入剂，以片剂或液体形式，例如用于口服递送，或盐水溶液，例如用于注射。
[0129]
如本文所用，“治疗有效剂量或量”是指产生其施用效果(例如治疗或预防疾病)的剂量。确切剂量和配方可以取决于治疗目的，且可以由本领域技术人员使用已知技术确定(参见例如，lieberman，《医药学剂量形式(pharmaceutical dosage forms)》(第1-3卷，1992)；lloyd，《医药学混配的艺术、科学和技术(the art,science and technology of pharmaceutical compounding)》(1999)；《雷明顿：医药科学和实践(remington:the science and practice of pharmacy)》，第20版gennaro，编辑(2003)和pickar，《剂量计算(dosage calculations)》(1999))。例如，对于给定参数，治疗有效量将显示增加或降低至少5％、10％、15％、20％、25％、40％、50％、60％、75％、80％、90％或至少100％。治疗功效也可以表示为“倍数”增加或减少。例如，治疗有效量相对于对照可以具有至少1.2倍、1.5倍、2倍、5倍或更多倍的作用。治疗有效剂量或量可以改善疾病的一种或多种症状。当施用的效果是治疗有患病风险的人时，治疗有效剂量或量可以预防或延迟疾病或疾病的一种或多种症状的发作。
[0130]
如本文所用，术语“施用”意指向受试者口服施用、以栓剂形式施用、局部接触、静脉内、腹膜内、肌肉内、病灶内、鞘内、鼻内或皮下施用，或植入缓慢释放装置(例如，微型渗
透泵)。通过任何途径进行施用，包含肠胃外和经粘膜(例如，颊、舌下、腭、牙龈、鼻、阴道、直肠或经皮)。肠胃外施用包括例如静脉内、肌内、小动脉内、皮内、皮下、腹膜内、心室内和颅内。其它递送模式包括但不限于使用脂质体制剂、静脉内输注、透皮贴片等。“联合施用”是指本文描述的组合物在一种或多种额外疗法，例如癌症疗法，如化学疗法、荷尔蒙疗法、放疗或免疫疗法的同时、刚开始或刚结束时施用。本发明的化合物可以单独施用或可以联合施用于患者。共施用意图包括化合物单独地或以组合形式(多于一种化合物)同时或依序施用。因此，当需要时，制剂还可以与其他活性物质结合(例如以减少代谢降解)。本发明的组合物可以通过局部途径，配制成涂抹棒、溶液、悬浮液、乳剂、凝胶、乳膏、软膏、糊剂、果冻、油漆、粉末和气雾剂，经皮递送。
[0131]
本发明的组合物可以另外地包括提供持续释放和/或舒适性的组分。此类组分包含高分子量、阴离子类粘液状聚合物、胶凝多糖、和精细分散的药物载体底物。这些组分在美国专利第4,911,920号；第5,403,841号；第5,212,162号；和第4,861,760号中更详细地讨论。这些专利的全部内容出于所有目以其全文通过引用并入本文中。本发明的组合物也可以以微球的形式递送以在体内缓慢释放。例如，可以通过皮内注射含药物的微球来施用微球，所述含药物的微球在皮下缓慢释放(参见rao,《生物材料科学杂志聚合物版(j.biomater sci.polym.)》编者7:623-645,(1995)；以可生物降解和可注射凝胶配制物的形式(参加例如，gao《药学研究(pharm.res.)》12:857-863,1995)；或以微球的形式以供口服施用(参见例如，eyles,《药学和药理学杂志(j.pharm.pharmacol.)》49:669-674,1997)。在实施方案中，本发明的组合物的制剂可以通过使用与细胞膜融合或被内吞的脂质体，即，通过采用与脂质体结合的受体配体来递送，所述脂质体与表面膜蛋白受体结合而导致内吞作用。通过使用脂质体，特别是在脂质体表面携带对靶细胞具有特异性或以其它方式优先针对特定器官的受体配体的情况下，可以集中本发明的组合物在体内递送到靶细胞中。(参见例如，al-muhammed,《微包封期刊(j.microencapsul.)》13:293-306,(1996)；chonn,《生物技术当前述评(curr.opin.biotechnol.)》6:698-708,1995；ostro,《美国医院药学杂志(am.j.hosp.pharm.)》46:1576-1587,1989)。本发明的组合物也可以作为纳米粒子递送。
[0132]
如本文所用，术语“药学上可接受的”与“生理学上可接受的”和“药学上可接受的”同义使用。药物组合物通常包含用于缓冲和保存在储存中的试剂，并且可以包括用于适当递送的缓冲剂和载体，这取决于施用途径。
[0133]“药学上可接受的赋形剂”和“药学上可接受的载体”是指有助于向受试者施用活性剂并且有助于受试者吸收的物质，并且该物质可以包括在本发明的组合物中而不会对患者造成显著不良的毒理学作用。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括水、nacl、生理盐水溶液、乳酸林格氏液、生理蔗糖、生理葡萄糖、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣、甜味剂、调味剂、盐溶液(如林格氏溶液)、醇、油、明胶、碳水化合物，如乳糖、直链淀粉或淀粉、脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷和色素等。此类制剂可以进行灭菌，并且如果需要，可以与不与本发明的化合物有害地反应的助剂混合，所述助剂如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、用于影响渗透压的盐、缓冲液、着色物质和/或芳香物质等。本领域技术人员将认识到其他药物赋形剂可用于本发明。
[0134]
术语“药学上可接受的盐”是指来源于本领域众所周知的各种有机和无机抗衡离子的盐，并且仅作为实例包括钠、钾、钙、镁、铵、四烷基铵等；并且当分子含有碱性官能团
时，有机或无机酸的盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、马来酸盐、草酸盐等。
[0135]
术语“制剂”旨在包括活性化合物与作为提供胶囊的载体的封装材料的配方，在胶囊中，具有或不具有其它载体的活性组分被载体包围，活性组分由此与载体缔合。类似地，包含了扁囊剂和锭剂。片剂、粉剂、胶囊、丸剂、扁囊剂以及锭剂可以用作适用于口服施用的固体剂型。
[0136]
药物制剂任选地为单位剂型。以这种形式，将制剂细分为包含适当量的活性成分的单位剂量。单位剂型可以是包装制剂，所述包装件含有离散量的制剂，比如，小瓶或安瓿中的包装片剂、胶囊和粉末。同样，单位剂型本身可以是胶囊剂、片剂、扁囊剂或锭剂，或者其可以是包装形式的适当数量的任何这些剂型。单位剂型可以是冷冻分散剂。
[0137]
抗体组合物
[0138]
本文特别提供了能够结合白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)的抗体和抗体变体(例如，单域抗体)。本文提供的抗体包括新的轻链和重链序列，并以高效率和特异性结合il1rap，从而有效靶向表达il1rap的细胞。本文提供的抗体和抗体变体(例如，单域抗体)的轻链和重链可以形成重组蛋白(例如，嵌合抗原受体或双特异性抗体)的一部分。通过募集效应细胞，本文提供的抗ilrap1抗体和抗体变体(例如，单域抗体)能够诱导il1rap表达细胞的细胞杀伤。il1rap在多种细胞类型上表达，例如在候选白血病干细胞急性髓性白血病(aml)患者上表达，但在正常造血干细胞上不表达。因此，本文提供的抗il1rap抗体和抗体变体(例如，单域抗体)尤其可用于治疗表达il1rap的癌症，如aml。
[0139]
在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
[0140]
在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
[0141]
在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
[0142]
在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
[0143]
在一个方面，提供了一种包括重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中重链可变域包括：如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；并且其中轻链可变域包括：如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
[0144]
如上所述，本文提供的“轻链可变(vl)域”是指抗体、抗体变体或其片段的轻链可变区。同样地，如本文提供的“重链可变(vh)域”是指抗体、抗体变体或其片段的重链可变区。轻链可变域和重链可变域一起形成结合抗原(表位)的互补位。互补位或抗原结合位点形成于抗体、抗体变体或其片段的n端。在实施例中，轻链可变(vl)域包括抗体轻链的cdr l1、cdr l2、cdr l3和fr l1、fr l2、fr l3和fr l4(框架区)。在实施例中，重链可变(vh)域包括抗体重链的cdr h1、cdr h2、cdr h3和fr h1、fr h2、fr h3和fr h4(框架区)。在实施例中，轻链可变(vl)域和轻链恒定(cl)域形成抗体轻链的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域和重链恒定(ch1)域形成抗体重链的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域和一个或多个重链恒定(ch1、ch2或ch3)域形成抗体重链的一部分。因此，在实施例中，轻链可变(vl)域形成抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成抗体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成治疗性抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成治疗性抗体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成人源性抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成人源性抗体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成人源化抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成人源化抗体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成嵌合抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成嵌合抗体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成抗体片段的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成抗体片段的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成抗体变体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成抗体变体的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成fab的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成fab的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成scfv的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成scfv的一部分。在实施例中，轻链可变(vl)域形成单域抗体的一部分。在实施例中，重链可变(vh)域形成单域抗体的一部分。
[0145]
在实施例中，重链可变域包括seq id no:61的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:61的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:62的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:62的序列。在实施例中，重链可变域包括seq id no:63的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:63的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:64的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:64的序列。在实施例中，重链可变域包括seq id no:67的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:67的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:68的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:68的序列。在实施例中，重链可变域包括seq id no:69的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:69的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:70的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:70的序列。在实施例中，重链可变域包括seq id no:71的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:71的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:72的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:72的序列。
[0146]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。
[0147]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:89所示的fr h1、如seq id no:90所示的fr h2、如seq id no:91所示的fr h3和如seq id no:92所示的fr h4。在实施例中，轻链
可变域包括如seq id no:93所示的fr l1、如seq id no:94所示的fr l2、如seq id no:95所示的fr l3和如seq id no:96所示的fr l4。
[0148]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:105所示的fr h1、如seq id no:106所示的fr h2、如seq id no:107所示的fr h3和如seq id no:108所示的fr h4。在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:109所示的fr l1、如seq id no:110所示的fr l2、如seq id no:111所示的fr l3和如seq id no:112所示的fr l4。
[0149]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:113所示的fr h1、如seq id no:114所示的fr h2、如seq id no:115所示的fr h3和如seq id no:116所示的fr h4。在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:117所示的fr l1、如seq id no:118所示的fr l2、如seq id no:119所示的fr l3和如seq id no:120所示的fr l4。
[0150]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:121所示的fr h1、如seq id no:122所示的fr h2、如seq id no:123所示的fr h3和如seq id no:124所示的fr h4。在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:125所示的fr l1、如seq id no:126所示的fr l2、如seq id no:127所示的fr l3和如seq id no:128所示的fr l4。
[0151]
在一个实施例中，该抗体包括(i)重链可变域，其包括如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2；如seq id no:3所示的cdr h3；如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4；和(ii)轻链可变域，其包括如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2、如seq id no:6所示的cdr l3；如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体d1a4。
[0152]
在一个实施例中，该抗体包括(i)重链可变域，其包括如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2；如seq id no:9所示的cdr h3；如seq id no:89所示的fr h1、如seq id no:90所示的fr h2、如seq id no:91所示的fr h3和如seq id no:92所示的fr h4；和(ii)轻链可变域，其包括如seq id n:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2、如seq id no:12所示的cdr l3；如seq id no:93所示的fr l1、如seq id no:94所示的fr l2、如seq id no:95所示的fr l3和如seq id no:96所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1c7。
[0153]
在一个实施例中，该抗体包括(i)重链可变域，其包括如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2；如seq id no:21所示的cdr h3；如seq id no:105所示的fr h1、如seq id no:106所示的fr h2、如seq id no:107所示的fr h3和如seq id no:108所示的fr h4；和(ii)轻链可变域，其包括如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2、如seq id no:24所示的cdr l3；如seq id no:109所示的fr l1、如seq id no:110所示的fr l2、如seq id no:111所示的fr l3和如seq id no:112所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体2e12。
[0154]
在一个实施例中，该抗体包括(i)重链可变域，其包括如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2；如seq id no:27所示的cdr h3；如seq id no:113所示的fr h1、如seq id no:114所示的fr h2、如seq id no:115所示的fr h3和如seq id no:116所示的fr h4；和(ii)轻链可变域，其包括如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:
29所示的cdr l2、如seq id no:30所示的cdr l3；如seq id no:117所示的fr l1、如seq id no:118所示的fr l2、如seq id no:119所示的fr l3和如seq id no:120所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a7。
[0155]
在一个实施例中，该抗体包括(i)重链可变域，其包括如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2；如seq id no:33所示的cdr h3；如seq id no:121所示的fr h1、如seq id no:122所示的fr h2、如seq id no:123所示的fr h3和如seq id no:124所示的fr h4；和(ii)轻链可变域，其包括如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2、如seq id no:36所示的cdr l3；如seq id no:125所示的fr l1、如seq id no:126所示的fr l2、如seq id no:127所示的fr l3和如seq id no:128所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1b8。
[0156]
在实施例中，抗体是igg。在实施例中，抗体是人igg。在实施例中，抗体是igg1。在实施例中，抗体是人igg1。
[0157]
在实施例中，抗体是fab'片段。在实施例中，抗体形成fab'片段的一部分。在实施例中，抗体是单链抗体(scfv)。在实施例中，轻链可变域和重链可变域形成scfv的一部分。在实施例中，抗体是单域抗体。在实施例中，单域抗体包括轻链可变域。在实施例中，单域抗体包括重链可变域。
[0158]
在实施例中，scfv包括seq id no:61的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:63的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:67的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:69的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:71的序列。
[0159]
在实施例中，scfv包括seq id no:62的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:64的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:68的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:70的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:72的序列。
[0160]
在实施例中，scfv包括seq id no:61的序列和seq id no:62的序列。在实施例中，scfv是seq id no:61的序列和seq id no:62的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:63的序列和seq id no:64的序列。在实施例中，scfv是seq id no:63的序列和seq id no:64的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:67的序列和seq id no:68的序列。在实施例中，scfv是seq id no:67的序列和seq id no:68的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:69的序列和seq id no:70的序列。在实施例中，scfv是seq id no:69的序列和seq id no:70的序列。在实施例中，scfv包括seq id no:71的序列和seq id no:72的序列。在实施例中，scfv是seq id no:71的序列和seq id no:72的序列。
[0161]
本文提供的抗体可以是单域抗体。因此，在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3。
[0162]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
[0163]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3。
[0164]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
[0165]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
[0166]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
[0167]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3。
[0168]
在一个方面，提供了一种包括轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，其中轻链可变域包括：如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
[0169]
在实施例中，单域抗体包括轻链可变域。在实施例中，单域抗体包括seq id no:73的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:74的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:75的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:76的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:77的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:78的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:79的序列。在实施例中，单域抗体包括seq id no:80的序列。
[0170]
在实施例中，单域抗体是轻链可变域。在实施例中，单域抗体是seq id no:73的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:74的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:75的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:76的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:77的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:78的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:79的序列。在实施例中，单域抗体是seq id no:80的序列。
[0171]
在实施例中，轻链可变域包括seq id no:73的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:74的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:75的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:76的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:77的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:78的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:79的序列。在实施例中，轻链可变域包括seq id no:80的序列。
[0172]
在实施例中，轻链可变域是seq id no:73的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:74的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:75的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:76的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:77的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:78的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:79的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:80的序列。
[0173]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr h3和如seq id no:132所示的fr h4。
[0174]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:133所示的fr l1、如seq id no:134所示的fr l2、如seq id no:135所示的fr h3和如seq id no:136所示的fr h4。
[0175]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:137所示的fr l1、如seq id no:138所示的fr l2、如seq id no:139所示的fr h3和如seq id no:140所示的fr h4。
[0176]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:141所示的fr l1、如seq id no:142所示的fr l2、如seq id no:143所示的fr h3和如seq id no:144所示的fr h4。
[0177]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:145所示的fr l1、如seq id no:146所示的fr l2、如seq id no:147所示的fr h3和如seq id no:148所示的fr h4。
[0178]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:149所示的fr l1、如seq id no:150所示的fr l2、如seq id no:151所示的fr h3和如seq id no:152所示的fr h4。
[0179]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:153所示的fr l1、如seq id no:154所示的fr l2、如seq id no:155所示的fr h3和如seq id no:156所示的fr h4。
[0180]
在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:157所示的fr l1、如seq id no:158所示的fr l2、如seq id no:159所示的fr h3和如seq id no:160所示的fr h4。
[0181]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3；以及如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a12。
[0182]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3；以及如seq id no:133所示的fr l1、如seq id no:134所示的fr l2、如seq id no:135所示的fr l3和如seq id no:136所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a5。
[0183]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3；以及如seq id no:137所示的fr l1、如seq id no:138所示的fr l2、如seq id no:139所示的fr l3和如seq id no:140所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a6。
[0184]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3；以及如seq id no:141所示的fr l1、如seq id no:142所示的fr l2、如seq id no:143所示的fr l3和如seq id no:144所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a1。
[0185]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3；以及如seq id no:145所示的fr l1、如seq id no:146所示的fr l2、如seq id no:147所示的fr l3和如seq id no:148所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1a4。
[0186]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3；以及如seq id no:149所示的fr l1、如seq id no:150所示的fr l2、如seq id no:151所示的fr l3和如seq id no:152所示的fr l4。在另一实施例中，该抗体是抗体1a11。
[0187]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3；以及如seq id no:153所示的fr l1、如seq id no:154所示的fr l2、如seq id no:155所示的fr l3和如seq id no:
156所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体1e12。
[0188]
在一个实施例中，该抗体包括轻链可变域，其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3；以及如seq id no:157所示的fr l1、如seq id no:158所示的fr l2、如seq id no:159所示的fr l3和如seq id no:160所示的fr l4。在另一实施例中，抗体是抗体d1f6。
[0189]
抗体结合特定表位(例如，il1rap)的能力可通过平衡解离常数(kd)描述。如本文所定义，平衡解离常数(kd)是抗体与il1rap的解离速率(k-off)和缔合速率(k-on)的比率。它由以下公式来描述：kd＝k-off/k-on。在实施例中，抗体能够以约21nm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以21nm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约80.6nm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以80.6nm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0190]
在实施例中，抗体能够以约1至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap m。在实施例中，抗体能够以约2至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约2.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约3至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约3.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3.5至4m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0191]
在实施例中，抗体能够以约1至3.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至3m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至2.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至2m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至1.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至3.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至3m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至2.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至2m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至1.5m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约4m、约3.5m、约3m、约2.5m、约2m、约1.5m或约1m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以4m、3.5m、3m、2.5m、2m、1.5m或1m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0192]
在实施例中，抗体能够以约2.899m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.899m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1.402m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1.402m的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0193]
在实施例中，抗体能够以约1至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约2至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约2.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约3至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实
施例中，抗体能够以约3.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3.5至4mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0194]
在实施例中，抗体能够以约1至3.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至3mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至2.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至2mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至1.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至3.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至3mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至2.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至2mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至1.5mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约4mm、约3.5mm、约3mm、约2.5mm、约2mm、约1.5mm或约1mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以4mm、3.5mm、3mm、2.5mm、2mm、1.5mm或1mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0195]
在实施例中，抗体能够以约2.71mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.71mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0196]
在实施例中，抗体能够以约20至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约21至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约22至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约23至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约24至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约25至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约26至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约27至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约28至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约29至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0197]
在实施例中，抗体能够以20至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以21至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以22至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以23至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以24至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以25至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以26至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以27至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以28至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以29至30mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0198]
在实施例中，抗体能够以约20至29mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至28mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至27mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至26mm的平衡解离
常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至25mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至24mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至23mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至22mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约20至21mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0199]
在实施例中，抗体能够以20至29mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至28mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至27mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至26mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至25mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至24mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至23mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至22mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以20至21mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0200]
在实施例中，抗体能够以约30mm、约29mm、约28mm、约27mm、约26mm、约25mm、约24mm、约23mm、约22mm、约21mm或约20mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30mm、29mm、28mm、27mm、26mm、25mm、24mm、23mm、22mm、21mm或20mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0201]
在实施例中，抗体能够以约26.95mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以26.95mm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0202]
在实施例中，抗体能够以约240至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约242至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约244至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约246至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约248至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约250至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约252至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约254至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约256至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约258至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0203]
在实施例中，抗体能够以240至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以242至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以244至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以246至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以248至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以250至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以252至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以254至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以256至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以258至260μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0204]
在实施例中，抗体能够以约240至258μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至256μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至254μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至252μm的
平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至250μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至248μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至246μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约240至242μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0205]
在实施例中，抗体能够以240至258μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至256μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至254μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至252μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至250μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至248μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至246μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以240至242μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0206]
在实施例中，抗体能够以约260μm、约258μm、约256μm、约254μm、约252μm、约250μm、约248μm、约246μm、约244μm、约242μm或约240μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以260μm、258μm、256μm、254μm、252μm、250μm、248μm、246μm、244μm、242μm或240μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0207]
在实施例中，抗体能够以约249.8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以249.8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0208]
在实施例中，抗体能够以约30至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约31至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约32至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约33至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约34至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约35至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约36至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约37至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约38至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约39至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0209]
在实施例中，抗体能够以30至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以31至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以32至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以33至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以34至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以35至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以36至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以37至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以38至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以39至40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0210]
在实施例中，抗体能够以约30至39μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至38μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至37μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至36μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至35μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至34μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例
中，抗体能够以约30至33μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至32μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约30至31μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0211]
在实施例中，抗体能够以30至39μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至38μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至37μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至36μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至35μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至34μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至33μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至32μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30至31μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0212]
在实施例中，抗体能够以约30μm、约31μm、约32μm、约33μm、约34μm、约35μm、约36μm、约37μm、约38μm、约39μm或约40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以30μm、31μm、32μm、33μm、34μm、35μm、36μm、37μm、38μm、39μm或40μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0213]
在实施例中，抗体能够以约35.75μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以35.75μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0214]
在实施例中，抗体能够以约0.2至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.4至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.6至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.8至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约1.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约2至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约2.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约3至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约3.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约4至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约4.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约5.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约6至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约6.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约7至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约7.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0215]
在实施例中，抗体能够以0.2至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.4至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.6至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.8至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以4至8μm的平
衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以4.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以5.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以6至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以6.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以7至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以7.5至8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0216]
在实施例中，抗体能够以约0.2至7.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至7μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至6.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至6μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至5.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至4.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至3.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至3μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至2.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至2μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至1.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至1μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至0.8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至0.6μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以约0.2至0.4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0217]
在实施例中，抗体能够以0.2至7.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至7μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至6.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至6μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至5.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至4.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至3.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至3μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至2.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至2μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至1.5μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至1μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至0.8μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至0.6μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.2至0.4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0218]
在实施例中，抗体能够以约8μm、约7.5μm、约7μm、约6.5μm、约6μm、约5.5μm、约5μm、约4.5μm、约4μm、约3.5μm、约3μm、约2.5μm、约2μm、约1.5μm、约1μm、约0.8μm、约0.6μm、约0.4μm或约0.2μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以8μm、7.5μm、7μm、6.5μm、6μm、5.5μm、5μm、4.5μm、4μm、3.5μm、3μm、2.5μm、2μm、1.5μm、1μm、0.8μm、0.6μm、0.4μm或0.2μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0219]
在实施例中，抗体能够以约3.07μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以3.07μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0220]
在实施例中，抗体能够以约2.11μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以2.11μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0221]
在实施例中，抗体能够以约0.85μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以0.85μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0222]
在实施例中，抗体能够以约1.4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以1.4μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0223]
在实施例中，抗体能够以约6.63μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。在实施例中，抗体能够以6.63μm的平衡解离常数(kd)结合il1rap。
[0224]
如本文所用，术语“ec50”或“半最大有效浓度”是指能够诱导反应的分子(例如，抗体、嵌合抗原受体或双特异性抗体)的浓度，其在指定的曝光时间后处于基线反应和最大反应之间。在实施例中，ec50是产生该分子最大可能作用的50％的分子(例如，抗体、嵌合抗原受体或双特异性抗体)的浓度。在实施例中，抗体具有约21nm的ec
50
。在实施例中，抗体具有21nm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约80.6nm的ec
50
。在实施例中，抗体具有80.6nm的ec
50
。
[0225]
在实施例中，抗体具有约1至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1.5至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2.5至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3.5至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1.5至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有2至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.5至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有3至4m的ec
50
。在实施例中，抗体具有3.5至4m的ec
50
。
[0226]
在实施例中，抗体具有约1至3.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至3m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至2.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至2m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至1.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至3.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至3m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至2.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至2m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至1.5m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约4m、约3.5m、约3m、约2.5m、约2m、约1.5m或约1m的ec
50
。在实施例中，抗体具有4m、3.5m、3m、2.5m、2m、1.5m或1m的ec
50
。
[0227]
在实施例中，抗体具有约2.899m的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.899m的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1.402m的ec
50
。在实施例中，抗体具有1.402m的ec
50
。
[0228]
在实施例中，抗体具有约1至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1.5至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2.5至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3.5至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1.5至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.5至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有3至4mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有3.5至4mm的ec
50
。
[0229]
在实施例中，抗体具有约1至3.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至3mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至2.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至2mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1至1.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至3.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至3mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至2.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至2mm的
ec
50
。在实施例中，抗体具有1至1.5mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有4mm、约3.5mm、约3mm、约2.5mm、约2mm、约1.5mm或约1mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有4mm、3.5mm、3mm、2.5mm、2mm、1.5mm或1mm的ec
50
。
[0230]
在实施例中，抗体具有约2.71mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.71mm的ec
50
。
[0231]
在实施例中，抗体具有约20至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约21至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约22至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约23至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约24至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约25至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约26至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约27至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约28至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约29至30mm的ec
50
。
[0232]
在实施例中，抗体具有20至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有21至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有22至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有23至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有24至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有25至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有26至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有27至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有28至30mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有29至30mm的ec
50
。
[0233]
在实施例中，抗体具有约20至29mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至28mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至27mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至26mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至25mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至24mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至23mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至22mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约20至21mm的ec
50
。
[0234]
在实施例中，抗体具有20至29mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至28mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至27mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至26mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至25mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至24mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至23mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至22mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有20至21mm的ec
50
。
[0235]
在实施例中，抗体具有约30mm、约29mm、约28mm、约27mm、约26mm、约25mm、约24mm、约23mm、约22mm、约21mm或约20mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30mm、29mm、28mm、27mm、26mm、25mm、24mm、23mm、22mm、21mm或20mm的ec
50
。
[0236]
在实施例中，抗体具有约26.95mm的ec
50
。在实施例中，抗体具有26.95mm的ec
50
。
[0237]
在实施例中，抗体具有约240至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约242至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约244至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约246至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约248至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约250至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约252至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约254至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约256至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约258至260μm的ec
50
。
[0238]
在实施例中，抗体具有240至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有242至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有244至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有246至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有248至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有250至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有252至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有254至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有256至260μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有258至260μm的ec
50
。
[0239]
在实施例中，抗体具有约240至258μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至256μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至254μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至252μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至250μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至248μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至246μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约240至242μm的ec
50
。
[0240]
在实施例中，抗体具有240至258μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至256μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至254μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至252μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至250μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至248μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至246μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有240至242μm的ec
50
。
[0241]
在实施例中，抗体具有约260μm、约258μm、约256μm、约254μm、约252μm、约250μm、约248μm、约246μm、约244μm、约242μm或约240μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有260μm、258μm、256μm、254μm、252μm、250μm、248μm、246μm、244μm、242μm或240μm的ec
50
。
[0242]
在实施例中，抗体具有约249.8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有249.8μm的ec
50
。
[0243]
在实施例中，抗体具有约30至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约31至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约32至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约33至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约34至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约35至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约36至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约37至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约38至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约39至40μm的ec
50
。
[0244]
在实施例中，抗体具有30至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有31至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有32至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有33至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有34至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有35至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有36至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有37至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有38至40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有39至40μm的ec
50
。
[0245]
在实施例中，抗体具有约30至39μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至38μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至37μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至36μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至35μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至34μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至33μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至32μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约30至31μm的ec
50
。
[0246]
在实施例中，抗体具有30至39μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至38μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至37μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至36μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至35μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至34μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至33μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至32μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30至31μm的ec
50
。
[0247]
在实施例中，抗体具有约30μm、约31μm、约32μm、约33μm、约34μm、约35μm、约36μm、约37μm、约38μm、约39μm或约40μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有30μm、31μm、32μm、33μm、34μm、35μm、36μm、37μm、38μm、39μm或40μm的ec
50
。
[0248]
在实施例中，抗体具有约35.75μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有35.75μm的ec
50
。
[0249]
在实施例中，抗体具有约0.2-8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.4至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.6至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.8至8μm的ec
50
。在
实施例中，抗体具有约1至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约1.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约2.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约3.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约4至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约4.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约5.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约6至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约6.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约7至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约7.5至8μm的ec
50
。
[0250]
在实施例中，抗体具有0.2至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.4至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.6至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.8至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有3至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有3.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有4至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有4.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有5.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有6至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有6.5至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有7至8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有7.5至8μm的ec
50
。
[0251]
在实施例中，抗体具有约0.2至7.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至7μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至6.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至6μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至5.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至4.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至4μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至3.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至3μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至2.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至2μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至1.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至1μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至0.8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至0.6μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有约0.2至0.4μm的ec
50
。
[0252]
在实施例中，抗体具有0.2至7.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至7μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至6.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至6μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至5.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至4.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至4μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至3.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至3μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至2.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至2μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至1.5μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至1μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至0.8μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至0.6μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.2至0.4μm的ec
50
。
[0253]
在实施例中，抗体具有约8μm、约7.5μm、约7μm、约6.5μm、约6μm、约5.5μm、约5μm、约4.5μm、约4μm、约3.5μm、约3μm、约2.5μm、约2μm、约1.5μm、约1μm、约0.8μm、约0.6μm、约0.4μm或约0.2μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有8μm、7.5μm、7μm、6.5μm、6μm、5.5μm、5μm、4.5μm、4μm、3.5μm、3μm、2.5μm、2μm、1.5μm、1μm、0.8μm、0.6μm、0.4μm或0.2μm的ec
50
。
[0254]
在实施例中，抗体具有约3.07μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有3.07μm的ec
50
。
[0255]
在实施例中，抗体具有约2.11μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有2.11μm的ec
50
。
[0256]
在实施例中，抗体具有约0.85μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有0.85μm的ec
50
。
[0257]
在实施例中，抗体具有约1.4μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有1.4μm的ec
50
。
[0258]
在实施例中，抗体具有约6.63μm的ec
50
。在实施例中，抗体具有6.63μm的ec
50
。
[0259]
在实施例中，抗体具有表1之一的ec
50
。
[0260]
表1示出了本文提供的示范性抗il1rap抗体的ec
50
值。
[0261]
idec
50
(mg/ml)1a1～2898841a43.5751a5～1401881a624.981a11～271.31a12～26951b80.30721e120.21112e120.0854d1a40.1404d1f60.62981d50.005291
[0262]
在实施例中，抗体与il1rap结合。在实施例中，il1rap是人il1rap。在实施例中，il1rap形成细胞的一部分。在实施例中，il1rap在细胞表面上表达。在实施例中，细胞是癌细胞。在实施例中，癌细胞是白血病干细胞(lsc)。在实施例中，癌细胞是急性髓性白血病(aml)细胞。在实施例中，癌细胞是慢性髓性白血病(cml)细胞。在实施例中，癌细胞是肺癌细胞。在实施例中，癌细胞是非小细胞肺癌(nsclc)细胞。在实施例中，癌细胞是胰腺癌细胞。在实施例中，癌细胞是黑素瘤细胞。在实施例中，细胞是乳腺癌细胞。在实施例中，细胞是结肠癌细胞。
[0263]
重组蛋白组合物
[0264]
如上所述，本文提供的轻链可变(vl)域和重链可变(vh)域，包括其实施例，可以各自独立地形成抗体的一部分、抗体变体、抗体片段、抗体变体片段或重组蛋白(例如，嵌合抗原受体、双特异性抗体)。本文提供的尤其是重组蛋白(例如，嵌合抗原受体、双特异性抗体)，其包括如本文提供的轻链可变(vl)域和/或重链可变(vh)域并因此能够结合il1rap并将效应细胞募集到表达il1rap的细胞(例如，lsc)，从而消除表达il1rap的细胞。在实施例中，重组蛋白是嵌合抗原受体(car)。在实施例中，重组蛋白是双特异性抗体。
[0265]
嵌合抗原受体蛋白
[0266]
本文特别提供了重组蛋白，其中重组蛋白是嵌合抗原受体。重组蛋白的抗体区可以包括本文提供的任何轻链和重链可变域，包括其实施例。本文提供的轻链可变(vl)域和/或重链可变(vh)域可以形成嵌合抗原受体的一部分。因此，在一个方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0267]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0268]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0269]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0270]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0271]
本文提供的重组蛋白可以是包括抗体区的嵌合抗原受体，其中抗体区是单域抗体。因此，在一个方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0272]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0273]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0274]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0275]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0276]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0277]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0278]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，
其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0279]
本文提供的“抗体区”是指形成本文提供的重组蛋白(例如，car)的一部分的单价或多价蛋白部分，包括其实施例。因此，本领域普通技术人员会立即认识到抗体区是能够结合抗原(表位)的蛋白质部分。因此，本文提供的抗体区可以包括抗体的结构域(例如，轻链可变(vl)域、重链可变(vh)域)或抗体片段(例如，fab)。在实施例中，抗体区是蛋白质缀合物。本文所提供的“蛋白质缀合物”是指由多于一种多肽组成的构建体，其中多肽以共价或非共价方式结合在一起。在实施例中，蛋白质缀合物包括共价附接到scfv部分(单价scfv)的fab部分(单价fab)。在实施例中，蛋白质缀合物包括多个(至少两个)fab部分。在实施例中，蛋白质缀合物的多肽由一种核酸分子编码。在实施例中，蛋白质缀合物的多肽由不同的核酸分子编码。在实施例中，多肽通过接头连接。在实施例中，多肽通过化学接头连接。在实施例中，抗体区是scfv。抗体区可以包括轻链可变(vl)域和/或重链可变(vh)域。因此，在实施例中，抗体区包括单域抗体。在实施例中，本文提供的抗体区包括轻链可变(vl)域。在实施例中，抗体区包括重链可变(vh)域。在实施例中，抗体区是单域抗体。在实施例中，单域抗体包括重链可变(vh)域。在实施例中，单域抗体包括轻链可变(vl)域。在实施例中，单域抗体是重链可变(vh)域。在实施例中，单域抗体是轻链可变(vl)域。
[0280]
在一个方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0281]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0282]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0283]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0284]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0285]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0286]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0287]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所
示的cdr l3；和(ii)跨膜结构域。
[0288]
本文提供的“跨膜结构域”是指形成生物膜的一部分的多肽。本文提供的跨膜结构域能够从膜的一侧跨越生物膜(例如，细胞膜)到膜的另一侧。在实施例中，跨膜结构域从细胞膜的细胞内侧跨越到细胞外侧。跨膜结构域可以包括非极性疏水残基，其将本文提供的蛋白质(包括其实施例)锚定在生物膜(例如，t细胞的细胞膜)中。设想了能够锚定本文提供的蛋白质的任何跨膜结构域，包括其实施例。跨膜结构域的非限制性实例包括cd28、cd8、cd4或cd3-zeta的跨膜结构域。在优选的实施例中，跨膜结构域是cd4跨膜结构域。
[0289]
在优选的实施例中，跨膜结构域是cd28跨膜结构域。本文提供的术语“cd28跨膜结构域”包括cd28的跨膜结构域的任何重组或天然存在形式，或其维持cd28跨膜结构域活性的变体或同源物(例如，与cd28跨膜结构域相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％活性内)。在一些方面，与天然存在的cd28跨膜结构域多肽相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，cd28是由ncbi序列参考gi:340545506识别的蛋白质、其同源物或功能片段。
[0290]
在优选的实施例中，跨膜结构域是cd8跨膜结构域。本文提供的术语“cd8跨膜结构域”包括cd8的跨膜结构域的任何重组或天然存在形式，或其维持cd8跨膜结构域活性的变体或同源物(例如，与cd8跨膜结构域相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％活性内)。在一些方面，与天然存在的cd8跨膜结构域多肽相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，cd8是由ncbi序列参考gi:225007534识别的蛋白质、其同源物或功能片段。
[0291]
在实施例中，跨膜结构域是cd4跨膜结构域。本文提供的术语“cd4跨膜结构域”包括cd4的跨膜结构域的任何重组或天然存在形式，或其维持cd4跨膜结构域活性的变体或同源物(例如，与cd4跨膜结构域相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％活性内)。在一些方面，与天然存在的cd4跨膜结构域多肽相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，cd4是由ncbi序列参考gi:303522473识别的蛋白质、其同源物或功能片段。
[0292]
在实施例中，跨膜结构域是cd3-zeta(也称为cd247)跨膜结构域。本文提供的术语“cd3-zeta跨膜结构域”包括维持cd3-zeta跨膜结构域活性(例如，与cd3-zeta跨膜结构域相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的cd3-zeta的跨膜结构域的任何重组或天然存在形式，或其变体或同源物。在一些方面，与天然存在的cd3-zeta跨膜结构域多肽相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，cd3-zeta是由ncbi序列参考gi:166362721识别的蛋白质、其同源物或功能片段。
[0293]
本文提供的重组蛋白(例如，嵌合抗原受体)可已包括本文描述的任何il1rap抗体或其片段。因此，重组蛋白(例如，嵌合抗原受体)可以包括本文提供的任何cdr、fr、重链可变域或轻链可变域。例如，重链可变域可以包括seq id no:61、seq id no:63、seq id no:
65、seq id no:67、seq id no:69或seq id no:71的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:61、seq id no:63、seq id no:65、seq id no:67、seq id no:69或seq id no:71的序列。例如，轻链可变域可以包括seq id no:62、seq id no:64、seq id no:66、seq id no:68、seq id no:70、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74、seq id no:75、seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seq id no:80的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:62、seq id no:64、seq id no:66、seq id no:68、seq id no:70、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74、seq id no:75、seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seq id no:80的序列。
[0294]
因此，重链可变域可以包括例如如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。此外，轻链可变域可以包括例如如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。
[0295]
轻链可变域可以包括例如如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。
[0296]
本文提供的重组蛋白包括本文提供的任何抗体。因此，重组蛋白可以以2.9m、35.75μm、1.40m、249.8μm、2.71mm、26.95mm、3.07μm、2.11μm、0.85μm、1.40μm或6.63μm的解离常数(kd)结合il1rap。
[0297]
在实施例中，重组蛋白与il1rap结合。在实施例中，il1rap是人il1rap。在实施例中，il1rap形成细胞的一部分。在实施例中，il1rap在细胞表面上表达。在实施例中，细胞是癌细胞。在实施例中，癌细胞是白血病干细胞(lsc)。在实施例中，癌细胞是急性髓性白血病(aml)细胞。在实施例中，癌细胞是慢性髓性白血病(cml)细胞。在实施例中，癌细胞是肺癌细胞。在实施例中，癌细胞是非小细胞肺癌(nsclc)细胞。在实施例中，癌细胞是胰腺癌细胞。在实施例中，癌细胞是黑素瘤细胞。在实施例中，细胞是乳腺癌细胞。在实施例中，细胞是结肠癌细胞。
[0298]
在实施例中，抗体区包括fc结构域。在实施例中，fc结构域是igg4 fc结构域。在实施例中，抗体区包括fc铰链结构域。在实施例中，抗体区包括igg4 fc铰链结构域。在实施例中，抗体区包括间隔区。在实施例中，间隔区位于跨膜结构域和抗体区之间。本文提供的“间隔区”是连接抗体区与跨膜结构域的多肽。在实施例中，间隔区将重链恒定区与跨膜结构域连接起来。在实施例中，间隔区包括fc区。在实施例中，间隔区是fc区。设想用于本文提供的重组蛋白组合物的间隔区的实例包括但不限于免疫球蛋白分子或其片段(例如，igg1、igg2、igg3、igg4)和免疫球蛋白分子或其片段(例如，igg1、igg2、igg3、igg4)，包括影响fc受体结合的突变。在实施例中，间隔区是铰链区。在实施例中，间隔区是igg4铰链区。在实施例中，间隔区是修饰的igg4铰链区。
[0299]
在实施例中，本文提供的重组蛋白，包括其实施例，进一步包括细胞内共刺激信号转导结构域。本文提供的“细胞内共刺激信号转导结构域”包括能够响应抗原与本文提供的包括其实施例的抗体区的结合而提供共刺激信号转导的氨基酸序列。在实施例中，共刺激信号转导结构域的信号转导导致细胞因子的产生和表达该细胞因子的t细胞的增殖。在实施例中，细胞内共刺激信号转导结构域是cd28细胞内共刺激信号转导结构域、4-1bb细胞内共刺激信号转导结构域、icos细胞内共刺激信号转导结构域、ox-40细胞内共刺激信号转导
结构域。在实施例中，细胞内共刺激信号转导结构域是cd28细胞内共刺激信号转导结构域。在实施例中，细胞内共刺激信号转导结构域是4-1bb细胞内共刺激信号转导结构域。在实施例中，细胞内共刺激信号转导结构域是icos细胞内共刺激信号转导结构域。在实施例中，细胞内共刺激信号转导结构域是ox-40细胞内共刺激信号转导结构域。
[0300]
在实施例中，本文提供的重组蛋白(包括其实施例)进一步包括细胞内t细胞信号转导结构域。本文提供的“细胞内t细胞信号转导结构域”包括能够响应抗原与本文提供的包括其实施例的抗体区的结合而提供初级信号转导的氨基酸序列。在实施例中，细胞内t细胞信号转导结构域的信号转导导致表达其的t细胞的激活。在实施例中，细胞内t细胞信号转导结构域的信号转导导致表达其的t细胞的增殖(细胞分裂)。在实施例中，细胞内t细胞信号转导结构域的信号转导导致所述t细胞表达本领域已知的具有活化t细胞特征的蛋白质(例如，ctla-4、pd-1、cd28、cd69)。在实施例中，细胞内t细胞信号转导结构域包括人cd3复合物的zeta链的信号转导结构域。在实施例中，细胞内t细胞信号转导结构域是cd3ζ细胞内t细胞信号转导结构域。
[0301]
本文提及的“ctla-4”包括维持ctla-4活性(例如与ctla-4相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4蛋白(也称为cd152(分化簇152))，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的ctla-4蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，ctla-4蛋白与由uniprot参考编号p16410识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0302]
本文提及的“pd-1”包括维持pd-1活性(例如与pd-1相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的程序性细胞死亡蛋白1蛋白(也称为cd279(分化簇279))，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的pd-1蛋白质相比，变异体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％氨基酸序列一致性。在实施例中，pd-1蛋白质与由uniprot参考编号q15116鉴别的蛋白质或与其具有相当大的一致性的变异体或同源物实质上一致。
[0303]
本文提及的“cd28”包括维持cd28活性(例如与cd28相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的分化28蛋白簇，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的cd28蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，cd28蛋白与由uniprot参考编号p10747识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0304]
本文提及的“cd69”包括维持cd69活性(例如与cd69相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的分化69蛋白簇，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的cd69蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，cd69蛋白与由
uniprot参考编号q07108识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0305]
本文提及的“4-1bb”包括维持4-1bb活性(例如与4-1bb相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的4-1bb蛋白(也称为肿瘤坏死因子受体超家族成员9(tnfrsf9)，分化簇137(cd137)和由淋巴细胞激活(ila))，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的egfr蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，4-1bb蛋白与由uniprot参考编号q07011识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0306]
在实施例中，本文提供的重组蛋白(包括其实施例)进一步包括自切割肽基序列。在实施例中，自切割肽基接头序列是t2a序列或2a序列。在实施例中，自切割肽基接头序列是t2a序列。在实施例中，自切割肽基接头序列是2a序列。
[0307]
在实施例中，本文提供的重组蛋白，包括其实施例，进一步包括可检测结构域。本文提供的“可检测结构域”是可通过光谱、光化学、生物化学、免疫化学、化学或其它物理方法检测的肽部分。例如，本文提供的可检测结构域可以是蛋白质或其它实体，其可以例如通过掺入放射性标记或与抗体特异性反应而变得可检测。可以使用本领域已知的用于使抗体与标记缀合的任何适当方法，例如使用hermanson，《生物结合物技术(bioconjugate techniques)》1996，圣地亚哥学术出版社有限公司(academic press,inc.)中描述的方法。在实施例中，可检测结构域是截短的egfr(egfrt)结构域。术语“egfrt”是指缺乏细胞内信号转导能力的截短的表皮生长因子受体蛋白。如本文所用，egfrt是一种惰性细胞表面分子，其用作可检测结构域，允许识别转导的t细胞。在实施例中，重组蛋白形成细胞的一部分。在实施例中，重组蛋白形成t细胞的一部分。
[0308]
本文提及的“egfr”包括维持egfr活性(例如与egfr相比，在至少50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组体或天然存在形式的表皮生长因子受体蛋白(也称为erbb-1和her1)，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的egfr蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如，50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。在实施例中，egfr蛋白与由uniprot参考编号p00533识别的蛋白质或与其具有基本同一性的变体或同源物基本上相同。
[0309]
双特异性抗体
[0310]
本文提供的重组蛋白尤其可以是嵌合抗原受体。因此，第二抗体区可以包括本文提供的任何轻链和/或重链可变域，包括其实施例。本文提供的轻链可变(vl)域和/或重链可变(vh)域可以形成双特异性抗体的一部分。因此，在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
[0311]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞
配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
[0312]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
[0313]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
[0314]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)重链可变域，其包括如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；和(b)轻链可变域，其包括如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
[0315]
本文提供的术语“效应细胞配体”是指在免疫系统的效应细胞(例如，细胞毒性t细胞、辅助t细胞、b细胞、自然杀伤细胞)上表达的细胞表面分子。当第一抗体区与在效应细胞上表达的效应细胞配体结合时，效应细胞被激活并且能够发挥其功能(例如，选择性地杀死或根除恶性的、受感染的或不健康的细胞)。在实施例中，效应细胞配体是cd3蛋白。在实施例中，效应细胞配体是cd16蛋白。在实施例中，效应细胞配体是cd32蛋白。在实施例中，效应细胞配体是nkp46蛋白。如本文提供的第一抗体区可以是抗体、抗体变体、抗体片段或抗体变体片段。
[0316]
本文所提及的“cd3蛋白”包括重组或天然存在形式的分化簇3(cd3)蛋白或其变体或同源物中的任何一种，其包含介导信号转导并维持cd3复合物活性的cd3复合物(例如，与cd3复合物相比，至少具有50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性)。在一些方面，与cd3复合物中天然存在的cd3蛋白相比，变体或同源物在整个序列或序列的一部分(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列同一性。
[0317]
本文提及的“cd16蛋白”包括维持cd16活性(例如，与cd16相比，至少在50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组或天然存在形式的分化簇16(cd16)蛋白(也称为低亲和力免疫球蛋白γfc区受体iii-a)，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的cd16蛋白相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，cd16蛋白与由uniprot参考编号p08637识别的蛋白质或与其基本一致的变体或同源物基本上一致。
[0318]
如本文所提及的“cd32蛋白”包括维持cd32活性(例如，与cd32相比，至少在50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组或天然存在形式的分化簇32(cd32)蛋白(也称为低亲和力免疫球蛋白γfc区受体ii-a)，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的cd32蛋白相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，cd32蛋白与由uniprot参考编号p12318识别的蛋白质或与其基本一致的变体或同源物基本上一致。
[0319]
本文提及的“nkp46蛋白”包括维持nkp46活性(例如，与nkp46相比，至少在50％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的活性内)的重组或天然存在形式的nkp46蛋白(也称为天然细胞毒性触发受体1)，或其变体或同源物中的任一种。在一些方面，与天然存在的nkp46蛋白相比，变体或同源物在整个序列或一部分序列(例如50、100、150或200个连续氨基酸部分)上具有至少90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的氨基酸序列一致性。在实施例中，nkp46蛋白与由uniprot参考编号o76036识别的蛋白质或与其基本一致的变体或同源物基本上一致。
[0320]
本文提供的重组蛋白(例如，双特异性抗体)可以包括本文描述的任何il1rap抗体或其片段。因此，重组蛋白(例如，双特异性抗体)可以包括本文提供的任何cdr、fr、重链可变域或轻链可变域。例如，重链可变域可以包括seq id no:61、seq id no:63、seq id no:65、seq id no:67、seq id no:69或seq id no:71的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:61、seq id no:63、seq id no:65、seq id no:67、seq id no:69或seq id no:71的序列。例如，轻链可变域可以包括seq id no:62、seq id no:64、seq id no:66、seq id no:68、seq id no:70、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74、seq id no:75、seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seq id no:80的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:62、seq id no:64、seq id no:66、seq id no:68、seq id no:70、seq id no:72、seq id no:73、seq id no:74、seq id no:75、seq id no:76、seq id no:77、seq id no:78、seq id no:79或seq id no:80的序列。
[0321]
本文提供的重组蛋白(例如，双特异性抗体)的重链可变域可以包括本文提供的任何cdr或fr。因此，重链可变域可以包括例如如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。本文提供的重组蛋白(例如，双特异性抗体)的轻链可变域可以包括本文提供的任何cdr或fr。例如，轻链可变域可以包括例如如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。轻链可变域可以包括例如如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。
[0322]
在实施例中，重链可变域是seq id no:61的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:62的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:63的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:64的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:67的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:68的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:69的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:70的序列。在实施例中，重链可变域是seq id no:71的序列。在实施例中，轻链可变域是seq id no:72的序列。
[0323]
在实施例中，重链可变域包括如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。在实施例中，轻链可变域包括如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。
[0324]
在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置366的位置包括色氨酸。在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置366的位置包括丝氨酸。在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置368的位置包括丙氨酸。在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置407的位置包括缬氨酸。在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置234的位置包括丙氨酸。在实施例中，重组蛋白(双特异性抗体)在对应于kabat位置235的位置包括丙氨酸。
[0325]
在实施例中，第一抗体区是第一fab'片段，或者第二抗体区是第二fab'片段。在实施例中，第一抗体区是单链可变片段(scfv)，或者第二抗体区是第二单链可变片段(scfv)。
[0326]
本文提供的重组蛋白可以是包括第二抗体区的双特异性抗体，其中第二抗体区是单域抗体。第二抗体区可以包括轻链可变(vl)域或重链可变(vh)域。在实施例中，第二抗体区包括单域抗体。在实施例中，第二抗体区包括轻链可变(vl)域。在实施例中，第二抗体区包括重链可变(vh)域。在实施例中，第二抗体区是单域抗体。在实施例中，单域抗体包括重链可变(vh)域。在实施例中，单域抗体包括轻链可变(vl)域。在实施例中，单域抗体是重链可变(vh)域。在实施例中，单域抗体是轻链可变(vl)域。
[0327]
因此，在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3。
[0328]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
[0329]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3。
[0330]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
[0331]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
[0332]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
[0333]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3。
[0334]
在另一方面，提供了一种重组蛋白，其包括：(i)第一抗体区，其能够结合效应细胞配体；和(ii)第二抗体区，其包括：(a)轻链可变域，其包括如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
[0335]
在实施例中，第二抗体区与il1rap结合。在实施例中，il1rap是人il1rap。在实施例中，il1rap形成细胞的一部分。在实施例中，il1rap在细胞表面上表达。
[0336]
在实施例中，细胞是癌细胞。在实施例中，癌细胞是白血病干细胞(lsc)。在实施例中，癌细胞是急性髓性白血病(aml)细胞。
[0337]
核酸组合物
[0338]
本文提供的组合物包括编码本文提供的抗il1rap抗体和重组蛋白的核酸分子，包括其实施例。因此，在一个方面，提供了编码本文提供的抗体的分离的核酸，包括其实施例。
[0339]
在另一方面，提供了编码本文提供的重组蛋白的分离的核酸，包括其实施例。
[0340]
药物组合物
[0341]
本文提供的组合物包括药物组合物，其包括本文提供的抗il1rap抗体和重组蛋白，包括其实施例。因此，在一个方面，提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的本文提供的抗体(包括其实施例)和药学上可接受的赋形剂。
[0342]
在另一方面，提供了一种药物组合物，其包括治疗有效量的本文提供的重组蛋白(包括其实施例)和药学上可接受的赋形剂。
[0343]
治疗方法
[0344]
本文提供的组合物(例如，抗il1rap抗体和重组蛋白)，包括其实施例，被认为为如癌症(例如，白血病[例如，aml])的疾病提供有效治疗。因此，在一个方面，提供了一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文提供的抗体，包括其实施例，从而治疗受试者所患癌症。
[0345]
在另一方面，提供了一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文描述的重组蛋白，包括其实施例，从而治疗受试者所患癌症。在实施例中，癌症是白血病。在实施例中，所述癌症是急性髓细胞性白血病。在实施例中，癌症是慢性髓性白血病(cml)。在实施例中，所述癌症是肺癌。在实施例中，癌症是非小细胞肺癌(nsclc)。在实施例中，所述癌症是胰腺癌。在实施例中，所述癌症是黑色素瘤。在实施例中，癌症是乳癌。在实施例中，癌症是结肠癌。在实施例中，所述方法进一步包括向受试者施用第二治疗剂。
[0346]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约1nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约2nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约4nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约6nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约4nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约8nm至约10nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.01nm、0.05nm、0.1nm、0.5nm、1nm、2nm、2nm、4nm、5nm、6nm、7nm、8nm、9nm或10nm的量施用。
[0347]
在实施例中，抗体以0.01nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以0.1nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以1nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以2nm至10nm的量施用。在
实施例中，抗体以4nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以6nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以4nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以8nm至10nm的量施用。在实施例中，抗体以0.01nm、0.05nm、0.1nm、0.5nm、1nm、2nm、2nm、4nm、5nm、6nm、7nm、8nm、9nm或10nm的量施用。
[0348]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约1nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约2nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约4nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约6nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约4nm至约8nm的量施用。
[0349]
在实施例中，抗体以0.01nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以0.1nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以1nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以2nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以4nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以6nm至8nm的量施用。在实施例中，抗体以4nm至8nm的量施用。
[0350]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约6nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约6nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约6nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约8nm的量施用。在实施例中，抗体以约1nm至约6nm的量施用。在实施例中，抗体以约2nm至约6nm的量施用。在实施例中，抗体以约4nm至约6nm的量施用。
[0351]
在实施例中，抗体以0.01nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以0.1nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以1nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以2nm至6nm的量施用。在实施例中，抗体以4nm至6nm的量施用。
[0352]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约4nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约4nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约4nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约4nm的量施用。在实施例中，抗体以约1nm至约4nm的量施用。在实施例中，抗体以约2nm至约4nm的量施用。
[0353]
在实施例中，抗体以0.01nm至4nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至4nm的量施用。在实施例中，抗体以0.1nm至4nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至4nm的量施用。在实施例中，抗体以1nm至4nm的量施用。在实施例中，抗体以2nm至4nm的量施用。
[0354]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约2nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约2nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约2nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约2nm的量施用。在实施例中，抗体以约1nm至约2nm的量施用。
[0355]
在实施例中，抗体以0.01nm至2nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至2nm的量施用。在实施例中，抗体以0.1nm至2nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至2nm的量施用。在实施例中，抗体以1nm至2nm的量施用。
[0356]
在实施例中，抗体以约0.01nm至约1nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.05nm至约1nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.1nm至约1nm的量施用。在实施例中，抗体以约0.5nm至约1nm的量施用。
[0357]
在实施例中，抗体以0.01nm至1nm的量施用。在实施例中，抗体以0.05nm至1nm的量
施用。在实施例中，抗体以0.1nm至1nm的量施用。在实施例中，抗体以0.5nm至1nm的量施用。
[0358]
在实施例中，抗体以约3.15nm的量施用。在实施例中，抗体以3.15nm的量施用。在实施例中，抗体以约1.05nm的量施用。在实施例中，抗体以1.05nm的量施用。
[0359]
应当理解，本文提供的重组蛋白(即，双特异性抗体或嵌合抗原受体)，包括其实施例，可以以本文所述用于施用抗体的任何浓度(例如，0.01nm至10nm)施用。
[0360]
在实施例中，抗体以约10μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约20μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约30μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约40μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约50μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约60μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约70μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约80μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约90μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约100μg至约500μg的量施用。
[0361]
在实施例中，抗体以约110μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约120μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约130μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约140μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约150μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约160μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约170μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约180μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约190μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约200μg至约500μg的量施用。
[0362]
在实施例中，抗体以约210μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约220μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约230μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约240μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约250μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约260μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约270μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约280μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约290μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约300μg至约500μg的量施用。
[0363]
在实施例中，抗体以约310μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约320μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约330μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约340μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约350μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约360μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约370μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约380μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约390μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约400μg至约500μg的量施用。
[0364]
在实施例中，抗体以约410μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约420μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约430μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约440μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约450μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约460μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约470μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约480μg至约500μg的量施用。在实施例中，抗体以约490μg至约500μg的量施用。
[0365]
在实施例中，抗体以约10μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约20μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约30μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约40μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约50μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约60μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约70μg至约400μg的量施用。在实施例中，
抗体以约80μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约90μg至约400μg的量施用。在实施例中，抗体以约100μg至约400μg的量施用。
[0366]
在实施例中，抗体以约10μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约20μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约30μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约40μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约50μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约60μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约70μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约80μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约90μg至约300μg的量施用。在实施例中，抗体以约100μg至约300μg的量施用。
[0367]
在实施例中，抗体以约10μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约20μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约30μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约40μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约50μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约60μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约70μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约80μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约90μg至约200μg的量施用。在实施例中，抗体以约100μg至约200μg的量施用。
[0368]
在实施例中，抗体以约10μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约20μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约30μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约40μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约50μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约60μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约70μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约80μg至约100μg的量施用。在实施例中，抗体以约90μg至约100μg的量施用。
[0369]
在实施例中，抗体以约10μg、20μg、30μg、40μg、50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg、110μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、300μg、310μg、320μg、330μg、340μg、350μg、360μg、370μg、380μg、390μg、400μg、410μg、420μg、430μg、440μg、450μg、460μg、470μg、480μg、490μg或500μg的量施用。
[0370]
在实施例中，抗体以10μg、20μg、30μg、40μg、50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg、110μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、300μg、310μg、320μg、330μg、340μg、350μg、360μg、370μg、380μg、390μg、400μg、410μg、420μg、430μg、440μg、450μg、460μg、470μg、480μg、490μg或500μg的量施用。
[0371]
应当理解，本文提供的重组蛋白(即，双特异性抗体或嵌合抗原受体)，包括其实施例，可以以本文所述用于抗体施用的任何浓度(例如，10μg至500μg)施用。
[0372]
在实施例中，重组蛋白或抗体以约200μg的量施用。在实施例中，重组蛋白或抗体以200μg的量施用。
[0373]
抑制细胞增殖的方法
[0374]
本文提供的组合物，包括其实施例，被进一步设想用于抑制细胞增殖。因此，在一个方面，提供了一种抑制细胞增殖的方法，该方法包括：(i)使细胞与本文提供的包括其实施例的抗il1rap抗体，或本文提供的包括其实施例的重组蛋白接触，从而形成接触的细胞；和(ii)允许本文提供的包括其实施例的抗il1rap抗体、重组蛋白结合接触的细胞上的il1rap，从而抑制细胞增殖。在实施例中，细胞是癌细胞。在实施例中，细胞是白血病干细胞
(lsc)。在实施例中，癌细胞是急性髓性白血病(aml)细胞。在实施例中，癌细胞是慢性髓性白血病(cml)细胞。在实施例中，癌细胞是肺癌细胞。在实施例中，癌细胞是非小细胞肺癌(nsclc)细胞。在实施例中，癌细胞是胰腺癌细胞。在实施例中，癌细胞是黑素瘤细胞。在实施例中，细胞是乳腺癌细胞。在实施例中，细胞是结肠癌细胞。
[0375]
应当理解，本文所述的实例和实施例仅是出于说明性目的，且根据其的各种修改或变化将由本领域技术人员想到且包括在本技术的精神和范围以及所附权利要求书的范围内。本文所引用的所有出版物、专利和专利申请均出于所有目的以其整体通过并入。
[0376]
实例
[0377]
实例1
[0378]
申请人表明，白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)仅在人aml原始细胞上表达，包括富含白血病干细胞(lsc)的亚群，但不在包括造血干细胞(hsc)在内的正常造血细胞上表达，因此与目前临床试验中使用的免疫治疗靶点(即cd33和cd123)相比，为aml提供了更好的靶点，这些靶点也在正常hsc上表达。因此，申请人设计了一种抗il1rap/cd3 t细胞依赖性双特异性抗体以靶向白血病细胞和lsc，同时保留正常hsc。体外功能分析表明，il1rap/cd3双特异性抗体与t细胞联合使用不仅可以消除aml细胞系，还可以有效消除来自不同亚型aml患者样本的白血病细胞，包括lsc。与仅用igg或t细胞治疗相比，用il1rap/cd3双特异性抗体加t细胞进行体内治疗可明显减少白血病负担，延长移植aml mv4-11细胞的nsg-sgm3小鼠的生存期，还可使移植人aml原始细胞的原发性和继发性受体nsg-sgm3小鼠的生存期延长。总之，这些结果确定了il1rap/cd3双特异性抗体加t细胞是治疗aml的一种新型有效的免疫治疗方法。
[0379]
实例2：抗体的生成和选择
[0380]
如前所述，使用来自十名健康供体的纯化外周血单核细胞(pbmc)构建了人类噬菌体展示文库。十二个独特的克隆被鉴定为il1rap结合克隆。这些克隆的单链片段变量(scfv)的基因序列分别连接到scfv-fc表达载体(tegx-scblue，抗体设计)。抗体在瞬时expi293细胞中表达，并通过蛋白a亲和层析纯化。这些抗体的il1rap ec50(表2)通过elisa和抗体依赖性t细胞介导的细胞毒性(adcc)确定。选择具有最高结合亲和力(即，最低ec
50
)的抗体用于构建双特异性抗体。
[0381]
表2.本文提供的示范性il1rap抗体及其片段的半数最大有效浓度(ec
50
)研究。
[0382]
il1rap抗体克隆idec
50
1a12.89884m1a435.75um1a51.40188m1a6249.8um1a112.71mm1a1226.95mm1b83.072um1e122.111um2e120.854umd1a41.404um
d1f66.6298um1d552.91pm
[0383]
实例3：t细胞依赖性细胞毒性(tdcc)长期杀伤试验
[0384]
为了确定t细胞介导的aml细胞系和aml原代细胞的杀伤，将不同浓度的抗il1rap抗体与来自健康供体或aml患者样品的纯化t细胞相结合，与每孔1x104靶细胞在不同的效应子-靶点(e:t)比率温育。温育48小时后，细胞用抗体染色，cd34
+
cd45
dim
或cd33
+
cd45
dim
cd14-细胞称为白血病细胞，cd45
+
cd4
+
或cd45
+
cd8
+
为t细胞，cd25
+
或cd69
+
为活化的t细胞。计数白血病细胞和t细胞的数量并计算细胞毒性：细胞毒性(％)＝100x(1
–
处理的靶细胞/对照靶细胞)。
[0385]
表3.使用本文提供的重组蛋白(igg抗体)的tdcc研究。
[0386][0387][0388]
实例4：抗il1rap抗体克隆的重链可变域和轻链可变域的cdr序列
[0389]
表4.本文提供的抗il1rap抗体的重链可变域和轻链可变域的cdr序列。
[0390]
[0391][0392]
实例5：用于抗il1rap抗体克隆的重链可变域和轻链可变域的序列
[0393]
表5.本文提供的il1rap抗体的重链可变域和轻链可变域的序列。
[0394]
[0395][0396]
实例6：抗il1rap抗体克隆的重链可变域和轻链可变域的框架序列
[0397]
表6.本文提供的il1rap抗体的重链可变域和轻链可变域的框架序列
[0398]
[0399]
[0400][0401]
实例7：编码用于抗il1rap抗体克隆的重链可变域和轻链可变域的核酸序列
[0402]
表7.编码本文提供的il1rap抗体的重链可变域和轻链可变域的核酸序列。
[0403]
[0404]
[0405]
[0406]
[0407]
[0408][0409]
实施例
[0410]
实施例1.一种包含重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0411]
其中所述重链可变域包含：
[0412]
如seq id no:1所示的cdr h1、如seq id no:2所示的cdr h2和如seq id no:3所示的cdr h3；以及
[0413]
其中所述轻链可变域包含：
[0414]
如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
[0415]
实施例2.根据实施例1所述的抗体，其中所述重链可变域包含seq id no:61的序列。
[0416]
实施例3.根据实施例1或2所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:62的序列。
[0417]
实施例4.根据实施例1至3中任一项所述的抗体，其中所述重链可变域包含如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。
[0418]
实施例5.根据实施例1至4中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如
h2和如seq id no:3所示的cdr h3；以及
[0441]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:4所示的cdr l1、如seq id no:5所示的cdr l2和如seq id no:6所示的cdr l3。
[0442]
实施例21.根据实施例20所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:61的序列。
[0443]
实施例22.根据实施例20或21所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:62的序列。
[0444]
实施例23.根据实施例20至22中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:81所示的fr h1、如seq id no:82所示的fr h2、如seq id no:83所示的fr h3和如seq id no:84所示的fr h4。
[0445]
实施例24.根据实施例20至23中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:85所示的fr l1、如seq id no:86所示的fr l2、如seq id no:87所示的fr l3和如seq id no:88所示的fr l4。
[0446]
实施例25.根据实施例20至24中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0447]
实施例26.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例20至25中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0448]
实施例27.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例20至25中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0449]
实施例28.一种包含重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0450]
其中所述重链可变域包含：
[0451]
如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；以及
[0452]
其中所述轻链可变域包含：
[0453]
如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
[0454]
实施例29.根据实施例28所述的抗体，其中所述重链可变域包含seq id no:63的序列。
[0455]
实施例30.根据实施例28或29所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:64的序列。
[0456]
实施例31.根据实施例28至30中任一项所述的抗体，其中所述重链可变域包含如seq id no:89所示的fr h1、如seq id no:90所示的fr h2、如seq id no:91所示的fr h3和如seq id no:92所示的fr h4。
[0457]
实施例32.根据实施例28至31中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:93所示的fr l1、如seq id no:94所示的fr l2、如seq id no:95所示的fr l3和如seq id no:96所示的fr l4。
[0458]
实施例33.一种分离的核酸，其编码根据实施例28至32中任一项所述的抗体。
[0459]
实施例34.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例28至32中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0460]
实施例35.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据权利要求28至32中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0461]
实施例36.一种重组蛋白，其包含：
[0462]
(i)抗体区，其包含：
[0463]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；以及
[0464]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3；以及
[0465]
(ii)跨膜结构域。
[0466]
实施例37.根据实施例36所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:63的序列。
[0467]
实施例38.根据实施例36或37所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:64的序列。
[0468]
实施例39.根据实施例36至38中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:89所示的fr h1、如seq id no:90所示的fr h2、如seq id no:91所示的fr h3和如seq id no:92所示的fr h4。
[0469]
实施例40.根据实施例36至39中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:93所示的fr l1、如seq id no:94所示的fr l2、如seq id no:95所示的fr l3和如seq id no:96所示的fr l4。
[0470]
实施例41.根据实施例36至40中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0471]
实施例42.根据实施例36至41中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0472]
实施例43.根据实施例36至42中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0473]
实施例44.一种分离的核酸，其编码根据实施例36至43中任一项所述的重组蛋白。
[0474]
实施例45.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例36至43中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0475]
实施例46.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例36至43中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0476]
实施例47.一种重组蛋白，其包含：
[0477]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0478]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0479]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:7所示的cdr h1、如seq id no:8所示的cdr h2和如seq id no:9所示的cdr h3；以及
[0480]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:10所示的cdr l1、如seq id no:11所示的cdr l2和如seq id no:12所示的cdr l3。
[0481]
实施例48.根据实施例47所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:63的序列。
[0482]
实施例49.根据实施例47或48所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:64的序列。
[0483]
实施例50.根据实施例47至49中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:89所示的fr h1、如seq id no:90所示的fr h2、如seq id no:91所示的fr h3和如seq id no:92所示的fr h4。
[0484]
实施例51.根据实施例47至50中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:93所示的fr l1、如seq id no:94所示的fr l2、如seq id no:95所示的fr l3和如seq id no:96所示的fr l4。
[0485]
实施例52.根据实施例47至51中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0486]
实施例53.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例47至52中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0487]
实施例54.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例47至52中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0488]
实施例55.一种包含重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0489]
其中所述重链可变域包含：
[0490]
如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；以及
[0491]
其中所述轻链可变域包含：
[0492]
如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
[0493]
实施例56.根据实施例55所述的抗体，其中所述重链可变域包含seq id no:67的序列。
[0494]
实施例57.根据实施例55或56所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:68的序列。
[0495]
实施例58.根据实施例55至57中任一项所述的抗体，其中所述重链可变域包含如seq id no:105所示的fr h1、如seq id no:106所示的fr h2、如seq id no:107所示的fr h3和如seq id no:108所示的fr h4。
[0496]
实施例59.根据实施例55至58中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:109所示的fr l1、如seq id no:110所示的fr l2、如seq id no:111所示的fr l3和如seq id no:112所示的fr l4。
[0497]
实施例60.一种分离的核酸，其编码根据实施例55至59中任一项所述的抗体。
[0498]
实施例61.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例55至59中任一项所
述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0499]
实施例62.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例55至59中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0500]
实施例63.一种重组蛋白，其包含：
[0501]
(i)抗体区，其包含：
[0502]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；以及
[0503]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3；以及
[0504]
(ii)跨膜结构域。
[0505]
实施例64.根据实施例63所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:67的序列。
[0506]
实施例65.根据实施例63或64所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:68的序列。
[0507]
实施例66.根据实施例63至65中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:105所示的fr h1、如seq id no:106所示的fr h2、如seq id no:107所示的fr h3和如seq id no:108所示的fr h4。
[0508]
实施例67.根据实施例63至66中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:109所示的fr l1、如seq id no:110所示的fr l2、如seq id no:111所示的fr l3和如seq id no:112所示的fr l4。
[0509]
实施例68.根据实施例63至67中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0510]
实施例69.根据实施例63至68中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0511]
实施例70.根据实施例63至69中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0512]
实施例71.一种分离的核酸，其编码根据实施例63至70中任一项所述的重组蛋白。
[0513]
实施例72.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例63至70中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0514]
实施例73.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例63至70中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0515]
实施例74.一种重组蛋白，其包含：
[0516]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0517]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0518]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:19所示的cdr h1、如seq id no:20所示的cdr h2和如seq id no:21所示的cdr h3；以及
[0519]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:22所示的cdr l1、如seq id no:23所示的
cdr l2和如seq id no:24所示的cdr l3。
[0520]
实施例75.根据实施例74所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:67的序列。
[0521]
实施例76.根据实施例74或75所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:68的序列。
[0522]
实施例77.根据实施例74至76中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:105所示的fr h1、如seq id no:106所示的fr h2、如seq id no:107所示的fr h3和如seq id no:108所示的fr h4。
[0523]
实施例78.根据实施例74至77中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:109所示的fr l1、如seq id no:110所示的fr l2、如seq id no:111所示的fr l3和如seq id no:112所示的fr l4。
[0524]
实施例79.根据实施例74至78中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0525]
实施例80.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例74至79中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0526]
实施例81.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例74至79中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0527]
实施例82.一种包含重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0528]
其中所述重链可变域包含：
[0529]
如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；以及
[0530]
其中所述轻链可变域包含：
[0531]
如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
[0532]
实施例83.根据实施例82所述的抗体，其中所述重链可变域包含seq id no:69的序列。
[0533]
实施例84.根据实施例82或83所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:70的序列。
[0534]
实施例85.根据实施例82至84中任一项所述的抗体，其中所述重链可变域包含如seq id no:113所示的fr h1、如seq id no:114所示的fr h2、如seq id no:115所示的fr h3和如seq id no:116所示的fr h4。
[0535]
实施例86.根据实施例82至85中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:117所示的fr l1、如seq id no:118所示的fr l2、如seq id no:119所示的fr l3和如seq id no:120所示的fr l4。
[0536]
实施例87.一种分离的核酸，其编码根据实施例82至86中任一项所述的抗体。
[0537]
实施例88.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例82至86中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0538]
实施例89.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例82至86中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0539]
实施例90.一种重组蛋白，其包含：
[0540]
(i)抗体区，其包含：
[0541]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；以及
[0542]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3；以及
[0543]
(ii)跨膜结构域。
[0544]
实施例91.根据实施例90所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:69的序列。
[0545]
实施例92.根据实施例90或91所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:70的序列。
[0546]
实施例93.根据实施例90至92中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:113所示的fr h1、如seq id no:114所示的fr h2、如seq id no:115所示的fr h3和如seq id no:116所示的fr h4。
[0547]
实施例94.根据实施例90至93中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:117所示的fr l1、如seq id no:118所示的fr l2、如seq id no:119所示的fr l3和如seq id no:120所示的fr l4。
[0548]
实施例95.根据实施例90至94中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0549]
实施例96.根据实施例90至95中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0550]
实施例97.根据实施例90至96中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0551]
实施例98.一种分离的核酸，其编码根据实施例90至97中任一项所述的重组蛋白。
[0552]
实施例99.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例90至97中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0553]
实施例100.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例90至97中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0554]
实施例101.一种重组蛋白，其包含：
[0555]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0556]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0557]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:25所示的cdr h1、如seq id no:26所示的cdr h2和如seq id no:27所示的cdr h3；以及
[0558]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:28所示的cdr l1、如seq id no:29所示的cdr l2和如seq id no:30所示的cdr l3。
[0559]
实施例102.根据实施例101所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:69的序列。
[0560]
实施例103.根据实施例101或102所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:70的序列。
[0561]
实施例104.根据实施例101至103中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:113所示的fr h1、如seq id no:114所示的fr h2、如seq id no:115所示的fr h3和如seq id no:116所示的fr h4。
[0562]
实施例105.根据实施例101至204中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:117所示的fr l1、如seq id no:118所示的fr l2、如seq id no:119所示的fr l3和如seq id no:120所示的fr l4。
[0563]
实施例106.根据实施例101至105中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0564]
实施例107.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例101至106中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0565]
实施例108.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例101至106中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0566]
实施例109.一种包含重链可变域和轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0567]
其中所述重链可变域包含：
[0568]
如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；以及
[0569]
其中所述轻链可变域包含：
[0570]
如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
[0571]
实施例110.根据实施例109所述的抗体，其中所述重链可变域包含seq id no:71的序列。
[0572]
实施例111.根据实施例109或110所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:72的序列。
[0573]
实施例112.根据实施例109至111中任一项所述的抗体，其中所述重链可变域包含如seq id no:121所示的fr h1、如seq id no:122所示的fr h2、如seq id no:123所示的fr h3和如seq id no:124所示的fr h4。
[0574]
实施例113.根据实施例109至111中任一项所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:125所示的fr l1、如seq id no:126所示的fr l2、如seq id no:127所示的fr l3和如seq id no:128所示的fr l4。
[0575]
实施例114.一种分离的核酸，其编码根据实施例109至113中任一项所述的抗体。
[0576]
实施例115.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例109至113中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0577]
实施例116.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者
施用治疗有效量的根据实施例109至113中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0578]
实施例117.一种重组蛋白，其包含：
[0579]
(i)抗体区，其包含：
[0580]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；以及
[0581]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3；以及
[0582]
(ii)跨膜结构域。
[0583]
实施例118.根据实施例117所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:71的序列。
[0584]
实施例119.根据实施例117或118所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:72的序列。
[0585]
实施例120.根据实施例117至119中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:121所示的fr h1、如seq id no:122所示的fr h2、如seq id no:123所示的fr h3和如seq id no:124所示的fr h4。
[0586]
实施例121.根据实施例117至120中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:125所示的fr l1、如seq id no:126所示的fr l2、如seq id no:127所示的fr l3和如seq id no:128所示的fr l4。
[0587]
实施例122.根据实施例117至121中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0588]
实施例123.根据实施例117至122中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0589]
实施例124.根据实施例117至123中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0590]
实施例125.一种分离的核酸，其编码根据实施例117至124中任一项所述的重组蛋白。
[0591]
实施例126.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例117至124中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0592]
实施例127.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例117至124中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0593]
实施例128.一种重组蛋白，其包含：
[0594]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0595]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0596]
(a)重链可变域，其包含如seq id no:31所示的cdr h1、如seq id no:32所示的cdr h2和如seq id no:33所示的cdr h3；以及
[0597]
(b)轻链可变域，其包含如seq id no:34所示的cdr l1、如seq id no:35所示的cdr l2和如seq id no:36所示的cdr l3。
[0598]
实施例129.根据实施例128所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含seq id no:71的序列。
[0599]
实施例130.根据实施例128或129所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:72的序列。
[0600]
实施例131.根据实施例128至130中任一项所述的重组蛋白，其中所述重链可变域包含如seq id no:121所示的fr h1、如seq id no:122所示的fr h2、如seq id no:123所示的fr h3和如seq id no:124所示的fr h4。
[0601]
实施例132.根据实施例128至131中任一项所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:125所示的fr l1、如seq id no:126所示的fr l2、如seq id no:127所示的fr l3和如seq id no:128所示的fr l4。
[0602]
实施例133.根据实施例128至132中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0603]
实施例134.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例128至133中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0604]
实施例135.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例128至133中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0605]
实施例136.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0606]
其中所述轻链可变域包含：
[0607]
如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3
[0608]
实施例137.根据实施例136所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:73的序列。
[0609]
实施例138.根据实施例136或137所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。
[0610]
实施例139.一种分离的核酸，其编码根据实施例136至138中任一项所述的抗体。
[0611]
实施例140.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例136至138中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0612]
实施例141.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例136至138中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0613]
实施例142.一种重组蛋白，其包含：
[0614]
(i)抗体区，其包含：
[0615]
轻链可变域，其包含如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3；以及
[0616]
(ii)跨膜结构域。
[0617]
实施例143.根据实施例142所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:73的序列。
[0618]
实施例144.根据实施例142或143所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。
[0619]
实施例145.根据实施例142至144中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0620]
实施例146.根据实施例142至145中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0621]
实施例147.根据实施例142至146中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0622]
实施例148.一种分离的核酸，其编码根据实施例142至147中任一项所述的重组蛋白。
[0623]
实施例149.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例142至147中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0624]
实施例150.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例142至147中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0625]
实施例151.一种重组蛋白，其包含：
[0626]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0627]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0628]
轻链可变域，其包含如seq id no:37所示的cdr l1、如seq id no:38所示的cdr l2和如seq id no:39所示的cdr l3。
[0629]
实施例152.根据实施例151所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:73的序列。
[0630]
实施例153.根据实施例151或152所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:129所示的fr l1、如seq id no:130所示的fr l2、如seq id no:131所示的fr l3和如seq id no:132所示的fr l4。
[0631]
实施例154.根据实施例151至153中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0632]
实施例155.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例151至154中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0633]
实施例156.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例151至154中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0634]
实施例157.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0635]
其中所述轻链可变域包含：
[0636]
如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
[0637]
实施例158.根据实施例157所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:74的序列。
[0638]
实施例159.根据实施例157或158所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:133所示的fr l1、如seq id no:134所示的fr l2、如seq id no:135所示的fr l3和如seq id no:136所示的fr l4。
[0639]
实施例160.一种分离的核酸，其编码根据实施例157至159中任一项所述的抗体。
[0640]
实施例161.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例157至159中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0641]
实施例162.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例157至159中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0642]
实施例163.一种重组蛋白，其包含：
[0643]
(i)抗体区，其包含：
[0644]
轻链可变域，其包含如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3；以及
[0645]
(ii)跨膜结构域。
[0646]
实施例164.根据实施例163所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:74的序列。
[0647]
实施例165.根据实施例163或164所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:133所示的fr l1、如seq id no:134所示的fr l2、如seq id no:135所示的fr l3和如seq id no:136所示的fr l4。
[0648]
实施例166.根据实施例163至165中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0649]
实施例167.根据实施例163至166中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0650]
实施例168.根据实施例163至167中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0651]
实施例169.一种分离的核酸，其编码根据实施例163至168中任一项所述的重组蛋白。
[0652]
实施例170.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例163至168中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0653]
实施例171.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例163至168中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0654]
实施例172.一种重组蛋白，其包含：
[0655]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0656]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0657]
轻链可变域，其包含如seq id no:40所示的cdr l1、如seq id no:41所示的cdr l2和如seq id no:42所示的cdr l3。
[0658]
实施例173.根据实施例172所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:74的序列。
[0659]
实施例174.根据实施例172或173所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:133所示的fr l1、如seq id no:134所示的fr l2、如seq id no:135所示的fr l3和如seq id no:136所示的fr l4。
[0660]
实施例175.根据实施例172至174中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0661]
实施例176.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例172至175中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0662]
实施例177.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例172至175中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0663]
实施例178.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0664]
其中所述轻链可变域包含：
[0665]
如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3
[0666]
实施例179.根据实施例178所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:75的序列。
[0667]
实施例180.根据实施例178或179所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:137所示的fr l1、如seq id no:138所示的fr l2、如seq id no:139所示的fr l3和如seq id no:140所示的fr l4。
[0668]
实施例181.一种分离的核酸，其编码根据实施例178至180中任一项所述的抗体。
[0669]
实施例182.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例178至180中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0670]
实施例183.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例178至180中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0671]
实施例184.一种重组蛋白，其包含：
[0672]
(i)抗体区，其包含：
[0673]
(a)轻链可变域，其包含如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3；以及
[0674]
(ii)跨膜结构域。
[0675]
实施例185.根据实施例184所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:75的序列。
[0676]
实施例186.根据实施例184或185所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:137所示的fr l1、如seq id no:138所示的fr l2、如seq id no:139所示的fr l3和如seq id no:140所示的fr l4。
[0677]
实施例187.根据实施例184至186中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0678]
实施例188.根据实施例184至187中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0679]
实施例189.根据实施例184至188中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0680]
实施例190.一种分离的核酸，其编码根据实施例184至189中任一项所述的重组蛋白。
[0681]
实施例191.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例184至189中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0682]
实施例192.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例184至189中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0683]
实施例193.一种重组蛋白，其包含：
[0684]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0685]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0686]
轻链可变域，其包含如seq id no:43所示的cdr l1、如seq id no:44所示的cdr l2和如seq id no:45所示的cdr l3。
[0687]
实施例194.根据实施例193所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:75的序列。
[0688]
实施例195.根据实施例193或194所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:137所示的fr l1、如seq id no:138所示的fr l2、如seq id no:139所示的fr l3和如seq id no:140所示的fr l4。
[0689]
实施例196.根据实施例193至195中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0690]
实施例197.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例193至196中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0691]
实施例198.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例193至196中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0692]
实施例199.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0693]
其中所述轻链可变域包含：
[0694]
如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
[0695]
实施例200.根据实施例199所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:76的序列。
[0696]
实施例201.根据实施例199或200所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:141所示的fr l1、如seq id no:142所示的fr l2、如seq id no:143所示的fr l3和如seq id no:144所示的fr l4。
[0697]
实施例202.一种分离的核酸，其编码根据权利要求199至201中任一项所述的抗体。
[0698]
实施例203.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例199至201中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0699]
实施例204.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例199至201中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0700]
实施例205.一种重组蛋白，其包含：
[0701]
(i)抗体区，其包含：
[0702]
轻链可变域，其包含如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3；以及
[0703]
(ii)跨膜结构域。
[0704]
实施例206.根据实施例205所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:76的序列。
[0705]
实施例207.根据实施例205或206所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:141所示的fr l1、如seq id no:142所示的fr l2、如seq id no:143所示的fr l3和如seq id no:144所示的fr l4。
[0706]
实施例208.根据实施例205至207中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0707]
实施例209.根据实施例205至208中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0708]
实施例210.根据实施例205至209中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0709]
实施例211.一种分离的核酸，其编码根据实施例205至210中任一项所述的重组蛋白。
[0710]
实施例212.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例205至210中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0711]
实施例213.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例205至210中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0712]
实施例214.一种重组蛋白，其包含：
[0713]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0714]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0715]
轻链可变域，其包含如seq id no:46所示的cdr l1、如seq id no:47所示的cdr l2和如seq id no:48所示的cdr l3。
[0716]
实施例215.根据实施例214所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:76的序列。
[0717]
实施例216.根据实施例214或215所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:141所示的fr l1、如seq id no:142所示的fr l2、如seq id no:143所示的fr l3和如seq id no:144所示的fr l4。
[0718]
实施例217.根据实施例214至216中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0719]
实施例218.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例214至217中任一项
所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0720]
实施例219.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例214至217中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0721]
实施例220.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0722]
其中所述轻链可变域包含：
[0723]
如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
[0724]
实施例221.根据实施例220所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:77的序列。
[0725]
实施例222.根据实施例220或221所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:145所示的fr l1、如seq id no:146所示的fr l2、如seq id no:147所示的fr l3和如seq id no:148所示的fr l4。
[0726]
实施例223.一种分离的核酸，其编码根据实施例220至222中任一项所述的抗体。
[0727]
实施例224.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例220至222中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0728]
实施例225.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例220至222中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0729]
实施例226.一种重组蛋白，其包含：
[0730]
(i)抗体区，其包含：
[0731]
轻链可变域，其包含如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3；以及
[0732]
(ii)跨膜结构域。
[0733]
实施例227.根据实施例226所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:77的序列。
[0734]
实施例228.根据实施例226或227所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:145所示的fr l1、如seq id no:146所示的fr l2、如seq id no:147所示的fr l3和如seq id no:148所示的fr l4。
[0735]
实施例229.根据实施例226至228中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0736]
实施例230.根据实施例226至229中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0737]
实施例231.根据实施例226至230中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0738]
实施例232.一种分离的核酸，其编码根据实施例226至231中任一项所述的重组蛋白。
[0739]
实施例233.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例226至231中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0740]
实施例234.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例226至231中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0741]
实施例235.一种重组蛋白，其包含：
[0742]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0743]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0744]
(a)轻链可变域，其包含如seq id no:49所示的cdr l1、如seq id no:50所示的cdr l2和如seq id no:51所示的cdr l3。
[0745]
实施例236.根据实施例235所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:77的序列。
[0746]
实施例237.根据实施例235或236所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:145所示的fr l1、如seq id no:146所示的fr l2、如seq id no:147所示的fr l3和如seq id no:148所示的fr l4。
[0747]
实施例238.根据实施例235至237中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0748]
实施例239.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例235至238中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0749]
实施例240.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例235至238中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0750]
实施例241.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0751]
其中所述轻链可变域包含：
[0752]
如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
[0753]
实施例242.根据实施例241所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:78的序列。
[0754]
实施例243.根据实施例241或242所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:149所示的fr l1、如seq id no:150所示的fr l2、如seq id no:151所示的fr l3和如seq id no:152所示的fr l4。
[0755]
实施例244.一种分离的核酸，其编码根据实施例241至243中任一项所述的抗体。
[0756]
实施例245.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例241至243中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0757]
实施例246.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例241至243中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0758]
实施例247.一种重组蛋白，其包含：
[0759]
(i)抗体区，其包含：
[0760]
轻链可变域，其包含如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3；以及
[0761]
(ii)跨膜结构域。
[0762]
实施例248.根据实施例247所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:78的序列。
[0763]
实施例249.根据实施例247或248所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:149所示的fr l1、如seq id no:150所示的fr l2、如seq id no:151所示的fr l3和如seq id no:152所示的fr l4。
[0764]
实施例250.根据实施例247至249中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0765]
实施例251.根据实施例247至250中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0766]
实施例252.根据实施例247至251中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0767]
实施例253.一种分离的核酸，其编码根据实施例247至252中任一项所述的重组蛋白。
[0768]
实施例254.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例247至252中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0769]
实施例255.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例247至252中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0770]
实施例256.一种重组蛋白，其包含：
[0771]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0772]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0773]
轻链可变域，其包含如seq id no:52所示的cdr l1、如seq id no:53所示的cdr l2和如seq id no:54所示的cdr l3。
[0774]
实施例257.根据实施例256所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:78的序列。
[0775]
实施例258.根据实施例256或257所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:149所示的fr l1、如seq id no:150所示的fr l2、如seq id no:151所示的fr l3和如seq id no:152所示的fr l4。
[0776]
实施例259.根据实施例256至258中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0777]
实施例260.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例256至259中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0778]
实施例261.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例256至259中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0779]
实施例262.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0780]
其中所述轻链可变域包含：
[0781]
如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57
所示的cdr l3。
[0782]
实施例263.根据实施例262所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:79的序列。
[0783]
实施例264.根据实施例262或263所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:153所示的fr l1、如seq id no:154所示的fr l2、如seq id no:155所示的fr l3和如seq id no:156所示的fr l4。
[0784]
实施例265.一种分离的核酸，其编码根据实施例262至264中任一项所述的抗体。
[0785]
实施例266.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例262至264中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0786]
实施例267.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例262至264中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0787]
实施例268.一种重组蛋白，其包含：
[0788]
(i)抗体区，其包含：
[0789]
轻链可变域，其包含如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3；以及
[0790]
(ii)跨膜结构域。
[0791]
实施例269.根据实施例268所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:79的序列。
[0792]
实施例270.根据实施例268或269所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:153所示的fr l1、如seq id no:154所示的fr l2、如seq id no:155所示的fr l3和如seq id no:156所示的fr l4。
[0793]
实施例271.根据实施例268至270中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内共刺激信号转导结构域。
[0794]
实施例272.根据实施例268至271中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0795]
实施例273.根据实施例268至272中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0796]
实施例274.一种分离的核酸，其编码根据实施例268至273中任一项所述的重组蛋白。
[0797]
实施例275.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例268至273中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0798]
实施例276.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例268至273中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0799]
实施例277.一种重组蛋白，其包含：
[0800]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0801]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0802]
(a)轻链可变域，其包含如seq id no:55所示的cdr l1、如seq id no:56所示的
cdr l2和如seq id no:57所示的cdr l3。
[0803]
实施例278.根据实施例277所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:79的序列。
[0804]
实施例279.根据实施例277或278所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:153所示的fr l1、如seq id no:154所示的fr l2、如seq id no:155所示的fr l3和如seq id no:156所示的fr l4。
[0805]
实施例280.根据实施例277至279中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0806]
实施例281.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例277至280中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0807]
实施例282.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例277至280中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0808]
实施例283.一种包含轻链可变域的抗白介素-1受体辅助蛋白(il1rap)抗体，
[0809]
其中所述轻链可变域包含：
[0810]
如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
[0811]
实施例284.根据实施例283所述的抗体，其中所述轻链可变域包含seq id no:80的序列。
[0812]
实施例285.根据实施例283或284所述的抗体，其中所述轻链可变域包含如seq id no:157所示的fr l1、如seq id no:158所示的fr l2、如seq id no:159所示的fr l3和如seq id no:160所示的fr l4。
[0813]
实施例286.一种分离的核酸，其编码根据实施例283至285中任一项所述的抗体。
[0814]
实施例287.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例283至285中任一项所述的抗体和药学上可接受的赋形剂。
[0815]
实施例288.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例283至285中任一项所述的抗体，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0816]
实施例289.一种重组蛋白，其包含：
[0817]
(i)抗体区，其包含：
[0818]
轻链可变域，其包含如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3；以及
[0819]
(ii)跨膜结构域。
[0820]
实施例290.根据实施例289所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:80的序列。
[0821]
实施例291.根据实施例289或290所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:157所示的fr l1、如seq id no:158所示的fr l2、如seq id no:159所示的fr l3和如seq id no:160所示的fr l4。
[0822]
实施例292.根据实施例289至291中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内
共刺激信号转导结构域。
[0823]
实施例293.根据实施例289至292中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含细胞内t细胞信号转导结构域。
[0824]
实施例294.根据实施例289至293中任一项所述的重组蛋白，其进一步包含自切割肽基序列。
[0825]
实施例295.一种分离的核酸，其编码根据实施例289至294中任一项所述的重组蛋白。
[0826]
实施例296.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例289至294中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。
[0827]
实施例297.一种治疗有此需要的受试者所患癌症的方法，所述方法包含向受试者施用治疗有效量的根据实施例289至294中任一项所述的重组蛋白，从而治疗所述受试者所患癌症。
[0828]
实施例298.一种重组蛋白，其包含：
[0829]
(i)能够结合效应细胞配体的第一抗体区；和
[0830]
(ii)第二抗体区，其包括：
[0831]
轻链可变域，其包含如seq id no:58所示的cdr l1、如seq id no:59所示的cdr l2和如seq id no:60所示的cdr l3。
[0832]
实施例299.根据实施例298所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含seq id no:80的序列。
[0833]
实施例300.根据实施例298或299所述的重组蛋白，其中所述轻链可变域包含如seq id no:157所示的fr l1、如seq id no:158所示的fr l2、如seq id no:159所示的fr l3和如seq id no:160所示的fr l4。
[0834]
实施例301.根据实施例298至300中任一项所述的重组蛋白，其中所述效应细胞配体是cd3蛋白。
[0835]
实施例302.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据实施例298至301中任一项所述的重组蛋白和药学上可接受的赋形剂。